AGT基因M235T多态与原发性高血压相关研究

目的:探讨血管紧张素原(AGT)基因的M235T位点与原发性高血压的关系.方法收集洛阳地区汉族原发性高血压203例,健康对照个体237例;测定他们的体重指数,Na+,K+,Cl-等离子的浓度,采用MS-PCR法检测AGT基因M235T位点的多态性.结果M235T的多态性在该病例对照人群中符合Hardy-Weinberg平衡;TT,MT,MM基因型的频率在病例组及对照组分别为90.1%,9.4%,0.5%和84.4%,14.3%,1.3%;M235T的基因型频率及等位基因频率在病例组及对照组的分布均无显著性差异;各基因型之间的收缩压、舒张压、体重指数,Na+浓度,K+浓度,Cl-浓度等均无显著性差异.结论AGT基因M235T多态性可能与原发性高血压以及Na+,K+,Cl-离子浓度无关.

蒙古族原发性高血压人群与血管紧张素转换酶ACE I/D基因及血管紧张素原AGT M235T基因多态性的关系

目的研究血管紧张素转换酶（ACE）基因及血管紧张素原（AGT）基因多态性与蒙古族原发性高血压病的关系。方法应用PCR-RFLP技术检测96例原发性高血压患者与正常对照组108名健康受试者血管紧张素转换酶基因第16内含子I／D多态性及血管紧张素原基因第二外显子M235T多态性。结果①蒙古族人群ACE基因I／D位点II、ID、DD基因型频率在高血压组和正常血压组分别为0.44、0．38、0．18和0．42、0．32、0．26，差异无显著性（χ^2=1.693，P=0．192，OR=0．643，95％可信区间0．330-1．254）；②I、D等位基因的频率分别为0．63、0．37和0．58、0．42，差异无显著性（χ^2=0．808，P=0.363，OR=0．834，95％可信区间0．560-1．240）；③AGT M235T位点MM、MT、TT基因型的频率在高血压组和正常血压组分别为0．21、0.73、0．06和0．55、0．34、0．11，两组之间差异无显著性（χ^2=0．495，P=0．482，OR=0．681，95％可信区间0．233-1．993）。④M、T等位基因频率分别为0．58、0．42和0．72、0．28，差异无显著性（χ^2=0．051，P=0．821，OR=1．047，95％可信区间0．702-1．562）；⑤同时分析AGT基因M235T基因型与ACE基因I／D基因型时结果为它们在蒙古族人群患高血压方面无协同作用。各亚组比较高血压组与对照组均无统计学差异，P〉0．05。结论血管紧张素转换酶基因I／D基因型和血管紧张素原基因M235T基因型与蒙古族人群发生原发性高血压无关。

离子对-超高效液相色谱串联质谱多反应监测快速测定肉制品中的酸性橙Ⅱ、酸性橙Ⅲ、酸性橙AGT

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定肉制品中酸性橙Ⅱ、酸性橙Ⅲ、酸性橙AGT的快速分析方法。用含5%氨水的乙腈溶液对样品进行提取,采用弱阴离子交换柱富集净化,在ESI负离子源模式下采用多反应监测(MRM)模式进行检测。通过在流动相中加入离子对试剂乙酸二己基铵(DHAA),使目标物在C18色谱柱上实现了分离,并有效改善了目标组分的离子化效率,使监测离子对更加稳定,确保了检测结果的稳定性和灵敏度。该方法分析时间小于6 min,线性范围为5.0～300μg/L,相关系数(r)大于0.999,检出限(LOD,S/N=3)为20.0～50.0μg/kg,定量下限(LOQ,S/N=10)为70.0～170.0μg/kg,方法回收率为83%～89%,精密度RSD≤7.5%。该方法快速、灵敏,适用于肉制品中3种酸性橙污染物的检测与确证。

海南汉族人群AGT基因多态性与冠心病的相关性

目的:探讨AGT基因T174M和M235T多态性与海南汉族冠状动脉性心脏病(CHD)的关系。方法:应用等位基因特异性PCR技术,对334例海南地区汉族CHD患者和193例海南汉族正常对照组中AGT基因T174M、M235T多态位点进行了检测,分析两组基因型频率及等位基因频率。结果:M235T多态位点的等位基因在海南汉族正常对照组和CHD患者组之间存在差异(χ2=4.314,P=0.038);T174M多态位点的基因型在汉族正常对照组和CHD患者组之间也存在差异(P=0.047,Fisher确切概率法)。结论:AGT基因T174M、M235T多态性与海南汉族人群CHD均相关,M235T多态位点235M等位基因是海南汉族人群CHD的易感基因,T174M多态位点174TT和174MM基因型可使海南汉族人群CHD的患病危险性增加。

AGT、ApoB、ApoE、MTHFR、eNOS基因多态性与昆明地区冠心病的关系

目的探讨昆明地区冠心病与基因多态性的关系及基因—基因交互作用。方法选择冠心病患者89例(冠心病组)、无冠脉病变患者78例(对照组),采用基因芯片技术检测两组血管紧张素原(AGT)M235T、载脂蛋白B(ApoB)XbaI、载脂蛋白E(ApoE)112/158、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C667T及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)D298E 5个冠心病基因多态性,分析单个基因多态性与冠心病的关系,以及5个基因之间的基因—基因交互作用。结果①冠心病组eNOS D298E位点的基因型分布、等位基因频率及MTHFR C667T位点的等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05);AGT M235T、ApoB XbaI、ApoE 112/158及MTHFR C667T等位点的基因型分布与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05);AGT M235T、ApoB XbaI、ApoE 112/158等位点的等位基因频率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②冠心病组5个基因位点共有3种交互作用模型出现,分别是两位点AGT M235T-ApoE 112/158、三位点AGT M235T-ApoE 112/158-ApoB XbaI和四位点AGT M235T-ApoE112/158-ApoB XbaI-eNOS D298E。其中四位点AGT M235T-ApoE 112/158-ApoB XbaI-eNOS D298E模型的交叉验证一致性系数最大(10/10),为最佳模型。结论①AGT M235T、ApoB XbaI、ApoE 112/158和MTHFR C667T等位点的基因多态性与冠心病的发生密切相关,eNOS D298E基因多态性与冠心病发病的相关性尚待进一步确定。②不排除冠心病易感基因间存在基因—基因交互作用的可能性。

复方灵芝健肾汤对糖尿病大鼠肾脏及尿AGT和IGF-1表达的影响

目的观察复方灵芝健肾汤对糖尿病大鼠肾脏及尿血管紧张素原(AGT)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达的影响,探讨其肾脏保护作用及机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导制作糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型组、给药组,另设空白组。给药组予以复方灵芝健肾汤灌胃,余大鼠给予等量蒸馏水。8周后,观察大鼠一般情况、生化指标,免疫组化及病理切片观察肾脏组织改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿AGT和IGF-1的变化。结果 1与空白组比较,模型组和给药组大鼠体质量均显著下降(P<0.01),肾/体重指数、生化指标及尿AGT和IGF-1水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。镜下可见大鼠肾小球肥大、系膜基质增生、基底膜增厚,肾小管可见蛋白管型及上皮细胞变性,肾脏AGT和IGF-1表达增加。2与模型组比较,给药组大鼠体质量增加(P<0.01),24 h尿蛋白、血肌酐、尿素氮及尿AGT和IGF-1水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);病理改变较模型组明显减轻。结论复方灵芝健肾汤对早期糖尿病肾病大鼠有肾脏保护作用,其机制可能与降低肾脏及尿AGT和IGF-1表达,抑制肾脏RAS系统活性有关。

AGT基因表观调控在原发性高血压不同中医证型中的作用研究

目的从表观遗传学水平阐述AGT基因与原发性高血压发生及中医各证型的相关性。方法提取各中医证型原发性高血压患者血液的总RNA,采用实时荧光定量PCR半定量法研究各对象AGT基因m RNA的表达量,同时提取所采血液的DNA,采用焦磷酸测序技术检测AGT基因启动子区部分序列的甲基化状态,比较各组甲基化情况。结果 AGT基因启动子区5个被检Cp G位点中,有2个Cp G位点甲基化指数存在差异,在正常对照组中呈高甲基化状态,而肝火亢盛证呈低甲基化状态。结论原发性高血压患者AGT基因m RNA表达量高于正常人群,且呈肝火亢盛证>阴虚阳亢证>痰湿壅盛证>阴阳两虚证排列。AGT基因甲基化修饰与原发性高血压发生有关,并与原发性高血压中医证型相关联。

AGT基因多态性与出血性脑卒中的相关性研究

目的探讨中国汉族人群中AGT基因上的rs2067853和rs4762单核苷酸多态性与出血性脑卒中的相关性。方法研究采用病例-对照研究方式,收集出血性脑卒中患者共255例(ICH组),健康体检者共321例(NC组)。基因分型采用Sequenom飞行时间质谱平台进行检测,χ~2检验分析两组间等位基因和基因型的分布频率是否存在差异,并且按照性别进一步进行分层分析。多因素交互作用的影响采用Logistic多元回归分析。结果 ICH组和对照组rs4762等位基因和基因型分布频率比较差异无统计学意义(均P>0.05)。男性中,rs2067853在两组间的基因型分布频率差异有统计学意义,TT基因型是出血性脑卒中的危险因素(P=0.014,OR=9.053);而女性中两组间差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析表明携带rs2067853 TT基因型的男性、高血压、血糖、糖化血红蛋白、体质量指数是出血性脑卒中的风险因素。结论rs4762位点多态性与出血性脑卒中易感无关。而rs2067853位点多态性与出血型脑卒中易感的相关性存在性别特异性:与男性出血性脑卒中易感相关,TT是风险因素;与女性出血性脑卒中易感无关。

AGT基因rs5049位点与饮食饮酒的交互作用对原发性高血压的影响

目的:研究血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)rs5049位点的多态性分布与饮食饮酒的交互作用对原发性高血压(essential hypertension,EH)的影响。方法:纳入EH患者400例,正常对照组100例,采用调查表的方式收集饮酒、饮食习惯及相关病史等资料,采用多重高温连接酶技术(Improved Multiple Ligase Detection Reaction,im LDR)检测AGT基因rs5049多态性。运用logistic回归模型分析交互作用对EH发病的影响。结果:AGT基因rs5049位点基因型多态性在EH组与对照组间比较差异具有统计学意义,P<0.05。Logistic回归分析示,AGT基因rs5049位点、饮食、饮酒作为独立影响因素,OR值为1.58、1.92、2.81,P<0.05。三者之间交互作用引起的EH发病OR值为1.46(95%CI:1.08,1.96)。结论 :AGT基因r s5049位点、饮食、饮酒是EH发病的独立影响因素;AGT基因rs5049位点与饮食、饮酒之间存在交互作用,对EH发病有影响。

视频引伸计在螺纹钢力学性能检测中的应用

针对某公司生产的螺纹钢筋,采用视频引伸计自动测量规定的塑性延伸强度RP0.2、最大力总延伸率Agt、断后伸长率A这三个力学性能指标。结果表明:视频引伸计采用非接触式测试,可时刻跟踪标距的变化,测试结果与人工测试结果接近。

血管紧张素原基因AGT^(174)在佳木斯地区100例正常人群中的分布

本文采用聚合酶链式反应(PCR)、限制性酶切和电泳分型方法,检测了血管紧张素原基因多态位点AGT^(174)在佳木斯地区正常人群中的分布情况。结果表明佳木斯地区正常人群中T^(174)的基因频率为0.925,M^(174)的基因频率为0.075,三种基因型的分布符合Hardy-weinberg遗传平衡定律。

基于连接酶检测反应的并行分型系统检测AGT M235T和ACE I/D基因多态性

基因多态性蕴藏着大量遗传信息,分型技术是研究多态性的主要研究手段。本文建立了一个基于连接酶检测反应的基因多态性并行检测系统,该系统应用连接酶检测反应与基因芯片技术。对AGT M 235T 3种基因型和ACE I/D 3种基因型分型,同直接测序分型结果一致。将该系统应用于168份临床样本,经过统计学分析,用卡方检验发现高血压组和正常组AGT M 235T多态性存在显著差异(2χ=6.191,P<0.05),但ACE I/D多态性没有显著差异(χ2=5.241,P>0.05)。

血管紧张素原多态位点AGT174与原发性高血压关系

本文采用PCR,限制性酶切和电泳分型的方法,分别检测了血管紧张素原基因多态位点AGT174在实验组和对照组中的分布,证明AGT174变异与原发性高血压的发生有关。

低氧激活偶氮苯类AGT抑制剂的合成及还原性研究

O^6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(AGT)是一种重要的DNA修复酶,AGT在保护正常细胞DNA不受烷化剂损伤的同时,也能够修复抗癌烷化剂对肿瘤细胞DNA的损伤,进而导致抗肿瘤药物的耐药性。设计合成了一类具有肿瘤低氧靶向性的AGT抑制剂,合成化合物能够特异性地在肿瘤低氧环境中被还原,释放AGT抑制剂——O^6-3-氨基苄基鸟嘌呤(ABG);而在常氧条件下不能被激活,不能发挥AGT抑制作用。因此,合成化合物可与氯乙基亚硝基脲等烷化剂联合用药,通过靶向性地抑制肿瘤低氧区域中AGT的活性,提高肿瘤细胞对抗癌烷化剂的敏感性。设计合成了4种以偶氮甲苯衍生物为低氧激活基团的O^6-烷基鸟嘌呤衍生物。经过体外实验模拟实体瘤中的低氧环境,确证了4种化合物均能够选择性地在低氧条件下被还原为AGT抑制剂——ABG;4种目标化合物的还原活性为:(E)-6-((3-((4-(二丙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺>(E)-6-((3-((4-(乙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺>(E)-6-((3-((4-(二乙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺>(E)-6-((3-((4-(甲基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺,为开发新型靶向性抗肿瘤药物以及设计高效低毒的联合用药策略提供了新的思路。

缺血性脑卒中中医证型与AGT基因M235T多态性的相关性

目的:探讨缺血性脑卒中风痰瘀血、痹阻脉络证及肝阳暴亢、风火上扰证与血管紧张素原(AGT)基因M235T多态性的相关性。方法:运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)对104例脑梗死患者进行AGT M235T多态性的基因型及等位基因频率分布研究。结果:两组基因型频率χ2=1.04,P>0.05,等位基因频率χ2=1.14,P>0.05。结论:基因型频率及等位基因频率分布在风痰瘀血、痹阻脉络证及肝阳暴亢、风火上扰证之间的差别无明显统计学意义。

DNA-烷基转移酶(AGT)抑制剂及其在抗肿瘤耐药作用方面的研究进展

烷化剂类抗癌药物可攻击细胞DNA分子众多部位,产生一系列DNA加合物,影响DNA复制和转录等过程,从而诱导细胞变异或凋亡。O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase,AGT）是哺乳动物体内普遍存在的一种DNA修复蛋白酶,可使受损DNA得以修复,导致肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性,降低肿瘤化疗的效果。就近年来有关DNA烷化损伤、AGT介导的肿瘤细胞的耐药性以及AGT抑制剂的应用研究进展进行综述。

男性高尿酸血症与MTHFR基因C677T、β_3-AR基因T190C、ACE基因I/D和AGT基因T704C多态性关系的研究

目的研究MTHFR基因C677T、β3-AR基因T190C、ACE基因I/D和AGT基因T704C多态性与高尿酸血症的关系。方法91例男性高尿酸血症患者和正常男性对照81人,分别检测生化指标,测量一般身体指标,用基因芯片法检测MTHFR、β3-AR、ACE和AGT基因的基因型。结果MTHFR基因的T等位基因的分布频率明显高于对照组(χ2>3.84,P<0.05),ACE、AGT及β3-AR基因各基因型总体频率分布无差异(χ2<3.84,P>0.05),MTHFR基因型中,T/T型较C/C型BM I、尿酸和甘油三酯水平明显升高,其差异有统计学意义(t<1.96,P>0.05)。结论男性MTHFR基因C677T突变可能与高尿酸血症有关。

PON2基因和AGT基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨2型对氧磷脂酶(PON2)基因311Cys/Ser多态性、血管紧张素原(AGT)基因-20A/C多态性与山西汉族人群2型糖尿病肾病之间的关系。方法通过聚合酶链反应-长度片段多态性(PCR-RFLP)技术检测山西汉族人群2型糖尿病患者、2型糖尿病肾病患者以及健康人群中的PON2基因311Cys/Ser多态性和AGT基因-20A/C多态性,并分析这两种基因之间的交互作用。结果糖尿病肾病组AGT基因-20A/C位点CC基因型频率和C等位基因频率高于糖尿病无肾病组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);糖尿病肾病组PON2基因311位Cys/Ser位点SS基因型频率和S等位基因频率高于糖尿病无肾病组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);糖尿病肾病组中有5例样本同时具有PON2基因311位点SS基因型和AGT基因-20A/C位点的CC基因型,糖尿病无肾病组中未发现这种情况,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论PON2基因311Cys/Ser突变的S等位基因,AGT基因-20A/C突变的C等位基因均是山西汉族人群2型糖尿病肾病的易感基因,而且PON2基因311位点和AGT基因-20A/C位点可能在2型糖尿病肾病的发病机制中具有协同作用。

热轧带肋钢筋断后伸长率A与最大力总伸长率Agt的研究

随机抽取了昆钢本部轧钢厂一、二作业区、桥钢、红钢、玉钢生产的公称直径为12mm至32mm的HRB335和HRB400近660支试样测量下屈服强度R小抗拉强度Rm、A、Agt，并进行了回归分析。结果表明A与Agt线性关系不明显，Lg50mm与Lg100mm的数值没有显著差异。

海洋杆菌糖基转移酶Agt突变体的制备及其在单葡萄糖甘油二酯催化合成中的应用

甘油糖脂由糖与甘油脂通过糖苷键连接而成,具有抗肿瘤、抗病毒和抗炎等多种生物活性,已成为当前研究的热点。目前获得甘油糖脂的方法包括植物提取法及化学合成法。植物提取法提取率及纯度较低;化学合成法对反应条件和分离设备要求高,产品不易分离,产生的废液污染环境。该研究采用基因工程方法构建海洋杆菌Candidatus pelagibacter sp.HTCC7211中的糖基转移酶Agt高活性突变体重组质粒,实现在大肠杆菌E.coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中的表达,进一步研究其酶活性,优化催化合成单葡萄糖甘油二酯的最佳反应条件及其提取方法。结果表明:构建的突变体T257S可将二磷酸尿苷-葡萄糖(uridine diphosphate gluscose,UDP-Glu)和甘油二酯高效地转化为单葡萄糖甘油二酯,其催化效率是野生型合成酶Agt的1.56倍;采用环己烷/乙酸乙酯法提取单葡萄糖甘油二酯,最高提取率达84.7%;在最佳反应条件酶浓度8 U/mL、UDP-Glu质量浓度500 mg/L、温度35℃和pH 8.5条件下,转化率和纯度分别达68.5%和93.8%。因此利用突变体T257S制备单葡萄糖甘油二酯具有转化率高、产物纯度高和合成步骤较少等优势,具有良好的工业应用前景。