BATF2在胃癌组织中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系

目的 探讨碱性亮氨酸拉链转录因子2(basic leucine zipper ATF-like transcription factor 2,BATF2)在胃癌组织中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系。方法 收集我院2016年6月至2017年11月134例胃癌患者手术切除的胃癌组织及癌旁组织标本,采用qRT-PCR法测定BATF2的mRNA表达,免疫组化法检测BATF2蛋白表达。分析胃癌患者BATF2表达与临床病理特征间的关系。采用Cox回归分析胃癌患者预后影响因素,Kaplan-Meier法分析BATF2表达与患者预后的关系。结果 胃癌组织中BATF2 mRNA和蛋白表达均显著低于癌旁组织(P<0.05),淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、细胞浸润程度为T_(3)~T_(4)、细胞分化程度为低分化的胃癌患者BATF2蛋白阳性表达比例显著低于淋巴结未转移、TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、细胞浸润程度为T_(0)~T_(2)、细胞分化程度为中/高分化的患者(P<0.05)。多因素Cox分析结果表明,淋巴结转移、TNM分期、细胞分化程度、BATF2是胃癌患者预后、复发或死亡的影响因素(P<0.05);Kaplan-Meier法分析结果表明,胃癌患者5年内预后良好率为74.63%(100/134),BATF2高表达患者5年预后良好率(93.33%)显著高于BATF2低表达患者(69.23%)(χ~2=6.445,P<0.05)。结论 BATF2表达与胃癌患者临床病理特征具有密切关系,是胃癌患者复发或死亡的影响因素,BATF2表达上调可能提高胃癌患者生存率。

内质网应激通路相关蛋白IRE1、PERK、ATF6在舌鳞癌中的表达及其功能的生物信息学分析

目的:本研究旨在通过生物信息学方法系统分析肌醇需求酶1(Inositol-Requiring Enzyme 1,IRE1)、蛋白激酶R样内质网激酶(Protein Kinase R-like Endoplasmic Reticulum Kinase,PERK)、激活转录因子6(Activating Transcription Factor 6,ATF6)在舌鳞癌中的表达及意义。方法:使用GEO、Kaplan-Meier Plotter、GeneMANIA、DAVID等多个数据库对IRE1、PERK、ATF6在舌鳞癌中的表达与预后价值、相互蛋白作用网络及功能富集进行综合分析。结果:ATF6在舌鳞癌组织中表达高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P <0.05)。IRE1及PERK高表达组患者总生存率(OS)高于低表达组,ATF6高表达组患者OS低于低表达组,差异均具有统计学意义(P <0.05)。本研究筛选出与IRE1、PERK、ATF6相互作用的蛋白质各20个并进行GO富集分析。IRE1及相关蛋白富集于内质网、线粒体等细胞组分中,具有蛋白质结合、蛋白磷酸酶结合等分子功能,参与内质网应激反应、泛素依赖性ERAD途径等生物学过程。PERK及相关蛋白富集于胞液、细胞膜等细胞组分中,具有翻译起始因子活性、RNA结合等分子功能,参与内质网未折叠蛋白反应、细胞对葡萄糖饥饿的反应等生物学过程。ATF6及其相关蛋白富集于内质网、细胞核等细胞组分中,具有转录调控区序列特异性DNA结合、蛋白质异二聚化活性等分子功能,参与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、内质网未折叠蛋白反应等生物学过程。结论:ATF6在舌鳞癌组织中呈现高表达,同IRE1、PERK与舌鳞癌患者不良预后相关。在未来抗肿瘤治疗中,IRE1、PERK、ATF6可能成为舌鳞癌的诊断和治疗的新选择。

转录因子BATF3通过调控波形蛋白促进肾透明细胞癌细胞的恶性生物学行为

目的:探讨碱性亮氨酸拉链转录因子ATF样蛋白3(BATF3)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达及其调控ccRCC细胞恶性生物学行为的分子机制。方法:收集2019年3月至2022年1月间在中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院手术切除的64例ccRCC组织和相应癌旁组织,qPCR法检测ccRCC组织、癌旁组织和肾癌ACHN、786-O细胞中BATF3 mRNA的表达,免疫组化检测ccRCC组织、癌旁组织中BATF3蛋白的表达,并分析其与临床病理特征的关系。构建BATF3敲减及过表达质粒,分别转染786-O、ACHN细胞,通过MTS法、Transwell实验检测BATF3对786-O或ACHN细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响,qPCR法检测敲减或过表达BATF3对786-O或ACHN细胞EMT相关基因表达的影响,CHIP、双荧光素酶报告基因实验检测BATF3是否与波形蛋白(VIM)启动子区结合并调控其转录,MTS法、Transwell实验检测同时过表达BATF3及敲减VIM对786-O细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果:与癌旁组织比较,ccRCC组织中BATF3的mRNA和蛋白均呈高表达(均P<0.01),并且BATF3 mRNA与ccRCC的分化程度和TNM分期密切关联(均P<0.01);与正常肾上皮细胞293T相比,BATF3在ACHN及786-O细胞中均呈高表达(均P<0.01)。敲减BATF3表达均能明显抑制786-O细胞的增殖、迁移、侵袭能力(均P<0.01),过表达BATF3则均能促进ACHN细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01),敲减或过表达BATF3能抑制786-O细胞或促进ACHN细胞的EMT相关基因的表达(均P<0.01)。BATF3可与VIM启动子区的位点结合,直接调控VIM的转录表达。同时过表达BATF3及敲减VIM可逆转过表达BATF3对786-O细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结论:BATF3在ccRCC组织中呈高表达,并与其分化程度和TNM分期密切关联;BATF3通过调控VIM的表达影响ACHN、786-O细胞的恶性生物学行为,其可作为临床治疗ccRCC的潜在靶点。

血清BATF、C3AR1在肺炎继发脓毒血症患者的病情严重程度及预后评价中的价值

目的探讨肺炎继发脓毒症患者血清碱性亮氨酸拉链ATF样转录因子(BATF),补体C3A受体1(C3AR1)水平与病情严重程度的关系及预后评估价值。方法选取2019年3月至2021年3月诊治的112例肺炎继发脓毒症患者为脓毒症组,根据28 d预后情况分为生存组(77例)和死亡组(35例),以同期诊治的60例无脓毒症肺炎患者为肺炎对照组,60例健康体检的健康人为健康对照组。应用酶联免疫吸附试验检测血清BATF、C3AR1水平。比较不同预后肺炎继发脓毒症患者临床资料及血清BATF、C3AR1水平。Spearman秩相关分析血清BATF、C3AR1水平与序贯器官衰竭评分(SOFA)的相关性。多因素Logistic回归分析影响肺炎继发脓毒症患者28 d死亡预后的因素。受试者工作特征曲线分析各指标对肺炎继发脓毒症患者28 d死亡预后的预测价值。结果脓毒症组患者血清BATF[(2.26±0.41)μg/L],C3AR1[(40.41±7.08)mg/L,]水平高于肺炎对照组[(1.02±0.29)μg/L,(31.84±6.12)mg/L]和健康对照组[(0.53±0.12)μg/L,(23.79±6.39)mg/L],差异有统计学意义(t=10.199~57.009,均P<0.05)。死亡组患者血清BATF[(2.96±0.48)μg/L vs.(1.94±0.36)μg/L],C3AR1[(44.26±7.35)mg/L vs.(38.66±6.78)mg/L],PCT,SOFA评分高于生存组,差异有统计学意义(t=3.946~35.388,均P<0.05)。PCT、BATF、C3AR1和SOFA评分升高是影响肺炎继发脓毒症患者28 d死亡预后的独立危险因素。血清PCT、BATF、C3AR1和SOFA评分联合对肺炎继发脓毒症患者28日死亡预后预测的曲线下面积为0.945,大于血清PCT、BATF、C3AR1和SOFA单项指标0.836、0.830、0.772、0.896,差异有统计学意义(Z=8.417,8.366,9.050,2.384,均P<0.05)。结论肺炎继发脓毒症患者血清BATF、C3AR1水平升高,两者疾病严重程度有关,血清PCT、BATF、C3AR1和SOFA评分联合对肺炎继发脓毒症患者预后具有较高的预测效能。

水牛ATF3基因的克隆、组织差异表达和功能初步分析

为了揭示水牛激活转录因子3(ATF3)基因的结构与功能,试验克隆了水牛ATF3基因的完整编码区(CDS)序列,采用生物信息学方法初步分析其编码产物的理化特性、结构及功能,再通过实时荧光定量PCR方法检测该基因的组织差异表达情况。结果表明:水牛ATF3基因的完整CDS序列长为546 bp,编码181个氨基酸。水牛ATF3基因的氨基酸序列与普通牛、瘤牛、牦牛、山羊和绵羊的同源性在98.3%以上。在基于核苷酸和氨基酸序列构建的系统发育树中,水牛与牛科的其他物种普通牛、瘤牛、牦牛聚集在一起。水牛ATF3蛋白属于亲水性蛋白质,没有信号肽和跨膜结构,含有亮氨基拉链(bZIP)保守结构域,定位于细胞核中。ATF3蛋白的二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲占比分别为51.93%、8.84%、6.08%和33.15%,三级结构与人的ATF3蛋白(5vpe.2.A)有45%的相似度。ATF3蛋白具有转录调控因子活性,通过选择性和非共价结合到顺式调控区域内特定的双链基因组DNA序列中来调节基因组的转录。水牛ATF3基因在肌肉、乳腺、心脏和肾脏中的相对表达量较高,在其余组织中低表达或几乎不表达,且该基因在泌乳期水牛乳腺中的相对表达量显著高于非泌乳期水牛(P<0.05)。说明ATF3基因可能与水牛泌乳性状有关。

6种抗肿瘤中药注射液对卵巢癌细胞中ATF3 mRNA表达的影响

目的考察消癌平注射液、艾迪注射液、华蟾素注射液、复方苦参注射液、斑蝥酸钠维生素B_6注射液、参芪扶正注射液对卵巢癌细胞A2780、SK-OV-3中转录激活因子3(ATF3)mRNA表达的影响。方法 6种不同浓度中药注射液作用于卵巢癌细胞24 h后,MTT法、RT-PCR法分别检测细胞增殖率、ATF3 mRNA表达。结果各中药注射液均有抑制卵巢癌细胞增殖的作用,并呈浓度依赖性。其中,华蟾素注射液可在抑制细胞增殖的同时抑制ATF3 mRNA表达,斑蝥酸钠维生素B_6注射液显著上调该因子mRNA表达,一定浓度消癌平注射液、艾迪注射液、复方苦参注射液、参芪扶正注射液对其mRNA表达也呈下调作用。结论 6种抗肿瘤中药注射液对卵巢癌细胞中ATF3 mRNA表达有抑制或诱导作用,其机制可能与中药活性成分影响肿瘤发展和转移有关。

油冷电机用绝缘材料耐油可靠性研究

本文通过对油冷电机用浸渍树脂、漆包扁线、芳纶纸开展耐油可靠性研究,探索绝缘材料在高温条件下与自动变速箱油(ATF)长时间接触后的性能变化情况。结果表明:绝缘材料在耐油试验中受ATF中水分影响较大,水和空气促进ATF热氧老化产生的酸性物质会加速材料水解。在2000 h高温耐油试验后,两款浸渍树脂、漆包扁线D和两款芳纶纸耐油性优异,表现出良好的可靠性。

左归丸对骨质疏松症大鼠GPR48、ATF4、BSP表达影响的实验研究

目的:通过研究摘除卵巢致肾虚骨质疏松症大鼠血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达,探讨摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究左归丸防治疗效及其作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾作用的左归丸对实验大鼠治疗12周,以盖天力片作为阳性对照组,正常大鼠、假手术组作为标准对照组,模型大鼠作为空白对照组,用ELISA法检测肾虚骨质疏松症大鼠血清GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达。结果:ELISA方法检测表明:正常大鼠血清中存在GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达。模空组大鼠血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达水平有明显的下降。左归丸组、盖天力组用药12周后,与模空组相比较,左归丸组可显著上调血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达水平。结论:1正常大鼠血清中存在GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达;2血清中GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达异常变化可能是导致骨质疏松症发生的机理之一;3左归丸能够调控GPR48、ATF4、BSP的蛋白表达,表明左归丸对骨质疏松症有一定的防治作用。

p38/ATF-2通路参与C反应蛋白诱导的内皮细胞活化

目的：考察p38 MAPK／ATF-2通路在C反应蛋白（ CRP）诱导的内皮细胞活化中的作用。方法：采用培养的人冠状动脉内皮细胞（ HCAEC）第3～7代用于实验。 CRP刺激诱导内皮细胞活化，给予p38抑制剂SB203580和SB202190干预。免疫印迹法检测p-eNOS、p-p38和p-ATF2的水平；ELISA法测定HCAEC分泌的黏附分子ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的变化。结果： CRP呈浓度依赖性地抑制p-eNOS水平， CRP诱导HCAEC分泌ICAM-1、VCAM-1和MCP-1；CRP激活p38／ATF-2通路；SB203580和SB202190部分恢复p-eNOS水平和抑制CRP诱导的ICAM-1、VCAM-1和MCP-1分泌。结论：p38 MAPK／ATF-2通路参与CRP诱导的HCAEC活化。

活化转录调控因子2(ATF-2)在下颌骨髁突软骨细胞中调控bcl-2机制的研究

目的:研究ATF-2通过bcl-2影响髁突软骨生长发育的机制。方法:应用体外培养原代小鼠髁突软骨细胞,原代细胞基因转染,蛋白印迹杂交等技术,阐明ATF-2调控bcl-2表达的机制。结果:外源性的ATF-2在髁突软骨细胞中,与bcl-2的调控子中CRE结合,增强bcl-2调控子的活性;当CRE位点的序列改变,ATF-2不能在髁突软骨细胞中对bcl-2调控子的活性产生影响。结论:ATF-2在软骨细胞中,通过影响有凋亡抑制作用的bcl-2的活性和表达,参与下颌骨髁突软骨的生长发育。

内质网应激介导巨噬细胞极化分子机制研究进展

内质网(ER)是维持细胞内Ca 2+稳态、折叠新合成的分泌蛋白和膜蛋白以及蛋白质翻译后修饰的重要细胞器。ER腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集,可激活内质网应激(ERS),进而激活蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、需肌醇酶1α(IRE-1α)和活化转录因子6(ATF6)三个不同的下游信号通路影响细胞的存活、分化和表型转换。近年来研究表明ERS下游信号级联反应与诱导巨噬细胞向促炎性M1型极化(IFN-γ和LPS)和抗炎性M2型极化(IL-4和IL-10)的信号通路之间存在密切相互作用,但两者之间的具体分子机制错综复杂。文中总结了ERS介导巨噬细胞极化的主要机制,重点讨论了ERS的三个不同下游信号影响巨噬细胞极化的分子机制。

ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定

为了克隆尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)的氨基末端片段与纤溶酶原激活剂抑制物 2型(PAI 2 )突变体所构成的融合蛋白基因 ,并在Pichiapastoris中表达 ,应用PCR获得了人ATF PAI2CD融合蛋白基因cDNA(简称ATF PAI2CD) ,将其克隆到酵母表达载体pPIC9K ,获得融合基因表达质粒pZWY ATF PAI2CD .该质粒转化毕赤酵母菌GS115 ,用G4 18 YPD平板筛选高拷贝转化子 ,然后用甲醇诱导表达 .工程菌用摇瓶发酵 ,表达产物ATF PAI2CD占培养液中总蛋白 5 0 %以上 .经硫酸铵沉淀、分子筛和离子交换层析纯化得到的目标表达产物纯度达 95 % .Western印迹检测具有PAI 2与uPA的免疫原性 ,经牛奶板法检测具有纤溶抑制活性 .经流式细胞仪 (FCM )检测 ,能与肿瘤细胞特异性结合 .结果表明 ,ATF PAI2CD融合蛋白成功地在毕赤酵母中表达 ,且具有抑制uPA及与肿瘤细胞表面uPAR特异性结合的双重功能 .提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景 .

N-乙酰半胱氨酸对氟诱导雄性大鼠海马细胞凋亡及ATF-6蛋白表达的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对氟诱导雄性大鼠海马细胞凋亡及ATF-6蛋白表达的影响。方法:选用4~5周龄雄性健康SD大鼠48只,随机分为对照组、Na F组、Na F+NAC组和NAC组,每组12只,灌胃染毒7周后处死动物,进行海马体质量和海马组织氟含量的测定,采用TUNEL法检测大鼠海马细胞凋亡情况,采用免疫组化法检测大鼠海马组织中ATF-6蛋白的表达情况。结果:Na F可减少海马体质量;NAC可增加海马体质量(P<0.001)。Na F可升高海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和ATF-6蛋白相对表达量(P<0.001);NAC可降低海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和ATF-6蛋白相对表达量(P<0.001)。Na F和NAC对海马体质量、海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和海马组织中ATF-6蛋白相对表达量的交互作用差异有统计学意义(P<0.001)。结论:NAC能够保护海马细胞避免Na F引起的凋亡,也能拮抗Na F诱导的ATF-6蛋白表达上调。

ATF-3在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨激活转录因子-3(ATF-3)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化法检测ATF-3在乳腺浸润性导管癌、导管原位癌和癌旁乳腺组织中的表达情况及其与乳腺癌临床病理特征间的关系。结果:ATF-3在乳腺浸润性导管癌、导管原位癌及癌旁乳腺组织中的阳性表达率分别为80.95%(85/105)、48.98%(24/49)和11.43%(12/105),乳腺浸润性导管癌组ATF-3的阳性表达率显著高于导管原位癌组和癌旁乳腺组织,导管原位癌组ATF-3的阳性表达率显著高于癌旁乳腺组织,差异均具有统计学意义(P<0.016 7)。ATF-3的表达与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期相关,而与患者年龄及肿瘤大小无关。结论:ATF-3与乳腺癌的发生、发展、侵袭和转移有关,可能作为预测乳腺癌恶性程度和评估乳腺癌患者预后的重要指标。

肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织JNK/ATF-2信号通路表达及意义

目的探讨JNK/ATF-2信号通路在肾脏缺血再灌注损伤(IR)中的作用。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(对照组)和缺血再灌注组(IR组),每组30只。IR组制备IR模型。各组分别于再灌注0、10、30 min及1、24 h各处死6只大鼠,取其肾组织,采用免疫组化及RT-PCR法检测不同时间点肾小管上皮细胞JNK、ATF-2磷酸化蛋白及mRNA表达水平。结果 IR组JNK、ATF-2 mRNA及蛋白表达早期即有增加,再灌注30min出现高峰,再灌注1 h表达略减弱,24 h仍有高表达,与假手术组比较,差异均有统计学意义。结论肾脏缺血再灌注后JNK/ATF-2信号通路在肾小管上皮细胞表达明显上调,抑制其表达可减轻肾脏损伤。

Cr涂层包壳管开裂行为的研究进展

耐事故燃料相比于核电站传统的(UO_(2)/Zr)体系,可以有效地在核反应堆的正常工况中提升反应堆安全性,同时也能抵御更长时间的极限事故,由于其制造工艺成熟,经济效益较高,Cr涂层锆合金包壳在近期被认为是ATF在包壳管上部署的主流方案。但Cr涂层包壳管在服役工况下的开裂行为与失效机制却还未被深入地研究和分析,本文将以正常服役工况和典型事故工况为目标导向,收集总结国内外Cr涂层堆外性能试验的相关数据,就Cr涂层包壳的失效机制预防提出一些建议,以期为后续国内Cr涂层包壳性能优化设计提供一定的数据和理论支持。

基于小型盘盘型摩擦试验机的ATF油摩擦性能评定

提出采用小型盘盘型摩擦试验机(WAZAU)评价自动传动液(ATF)的抗颤性。采用WAZAU对2种ATF的抗颤性进行评价,并与传统的低速摩擦磨损试验机(LVFA)评价结果进行比较。结果表明:WAZAU与LVFA 2种摩擦试验机测得的摩擦特性曲线(摩擦因数-速度曲线)具有高拟合度,且试验后钢片表面发生摩擦化学反应成膜的主要成分也基本一致,从而证实2种摩擦试验机的试验结果具有很高的正相关性。WAZAU试验机是LVFA试验机的微型版,相比LVFA具有用油量小、操作简单的优点,且在检测噪声、震动、舒适性上比LVFA更具直观性,可作为快速模拟评价手段用于ATF的摩擦特性研究。

基于复杂网络表征ATF时间序列动力学特性

针对空中交通流仿真、预测与控制工作中普遍需要空中交通流时空动态基本特征的问题,应用复杂网络方法从实测监视数据中挖掘空中交通流的内在特性。探索了运用复杂网络对空中交通流时间序列的非线性特性进行分析,通过网络度分布的分析验证了航路交通流具有混沌和分形特性。此外还发现交通流HVG转换算法网络度分布近似符合指数函数p(k)~exp(-γk)且混沌的强弱程度与参数值γ大小存在正相关关系,验证了交通流VG转换算法网络度分布幂指数λ与Hurst指数的线性关系。基于复杂网络理论的研究工作从全新的视角审视了空中交通流,丰富了刻画时间序列非线性动力特性的手段。

事故容错燃料包壳材料在水化学环境中的动水腐蚀试验

为了掌握事故容错燃料(ATF)包壳材料的耐动水腐蚀性能,搭建了专设台架以模拟堆芯部位的热工水力环境和水化学环境。针对普通Zr合金及涂覆Cr金属涂层的Zr合金、FeCrAl合金等ATF包壳候选材料在空管条件和内置电加热棒条件下分别开展动水腐蚀试验。结果表明:这三种材料在水化学环境中经动水腐蚀28 d后表面均未产生明显的氧化膜,表明各材料均有较好的短期耐蚀性;与空管条件相比,在内置电加热棒条件下,Zr合金和涂覆Cr金属涂层的Zr合金表面的颗粒状氧化产物更密集,抗氧化性能更优;在空管条件和内置电加热棒条件下,涂覆Cr金属涂层的Zr合金相较于普通Zr合金具有更好的耐蚀性,但在内置电加热棒条件下,两种材料表面均检测到其他相,有待进一步研究。

人重组pEGFPC1-uPA ATF质粒的构建及表达的研究

目的构建含人uPA ATF基因的真核表达质粒,并研究其对小鼠细胞株Pam212细胞的影响。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人uPA ATF基因片断,并导入真核表达载体的绿色荧光蛋白pEGFPC1中,利用电泳和测序检测构建状况,荧光显微镜观察和免疫细胞化学检测转染情况,通过MTT、体外迁移实验检测对小鼠Pam212细胞株的影响。结果电泳和测序表明构建的质粒准确,uPA ATF cDNA阅读框完整,连接部位序列正确;质粒转染Pam212细胞株成功,并且能抑制细胞的增殖和迁移。结论成功构建了真核表达载体pEGFPC1-uPA ATF质粒,明确了人uPA ATF基因片断能降低小鼠细胞的增殖和迁移,为进一步在体实验研究打下了基础。