遵义地区多发性硬化患者血清BDV-CIC及抗体的检测

目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染与遵义地区多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者的相关性。方法运用新型的三联ELISA测循环免疫复合物、抗体的方法,检测7例MS患者及93例健康对照组血清中BDV特异性循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC)及抗体。结果 7例MS中有2例CIC及抗体均为阳性,阳性率为28.57%(2/7);93例对照组中CIC阳性7人,阳性率为7.53%(7/93),抗体阳性5例,阳性率为5.38%(5/93);多发性硬化组检出率高于健康对照对照组,但2组比较无统计学意义。结论遵义地区存在着BDV的感染,BDV感染与多发性硬化不一定相关。

BDV冷态泄放工况下火炬系统低温动态模拟

高压气田的火炬系统设计低温通常由BDV冷态泄放工况决定,常规设计以BDV泄放时出口流体最低温度作为火炬系统最低操作温度,由于忽略了火炬系统钢材和环境换热等因素的影响,以此确定的火炬系统的设计低温比较保守,对火炬系统的选材要求较高。文章通过动态模拟的方法,分析BDV冷态泄放过程中火炬系统的钢材和流体温度变化,探究火炬系统设计低温的优化方案。

CVB对OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN信号转导途径的影响

探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(interferon regulatory factor, IRF)7细胞定位的影响。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞0、2、4、6、12和24 h,qPCR检测I型IFN mRNA和miR-155表达水平。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,CVB感染4 h,观察IRF7细胞定位情况。CVB感染OL细胞2、4、12和24 h,IFN-αmRNA和miR-155表达水平显著增加,IFN-βmRNA表达水平在4、12和24 h显著增加;CVB感染OL/BDV细胞IFN-α和IFN-βmRNA表达水平除0 h均显著增加,但miR-155表达仅在12和24 h显著增加。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白由细胞浆转移至细胞核内。综上所述,CVB可诱导OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN、miR-155的表达,促进IRF7入核,从而激活I型IFN信号转导途径。

博尔纳病病毒(BDV)与人类精神障碍

BDV是Borna病的病原体,可自然感染几乎所有的恒温动物,并能引起类似于人类某些精神障碍的症状。大量证据提示BDV可能与人类精神障碍相关,但由于缺乏统一的检测标准及有效的检测方法,使得有关BDV的研究陷入瓶颈。

PCR检测贵州遵义地区蝙蝠BDV-P40基因片段及同源性分析

目的探讨贵州遵义地区蝙蝠是否存在博尔纳病毒(BDV)自然感染,分析比较其与国外标准株的同源性。方法采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测82只蝙蝠额颞叶脑组织中BDV-P40基因片段,将阳性扩增产物测序,与国外标准株比较同源性。结果蝙蝠额颞叶脑组织中BDV-P40基因片段阳性率为12.2%(10/82)。贵州遵义地区蝙蝠自然感染的BDV-P40核苷酸序列与标准株Strain V和H1766同源性均为96.2%,与He/80比对同源性为94.9%,所编码的氨基酸无改变。结论贵州遵义地区蝙蝠存在BDV自然感染,该地区BDV-P40核苷酸序列与Strain V和H1766存在高度同源性,人感染BDV可能为动物源性。

BDV DataHider隐藏特征分析

该文探讨了特征检测在隐藏检测中的应用。BMP图像隐藏信息后会留下隐藏软件对图像处理的痕迹,根据这些特征可以准确地判断是否存在隐藏信息。以BDV DataHider隐藏软件为例,分析并提取了其隐藏特征。实验表明针对特征的隐藏检测可以达到100%的捡出率。

博尔纳病病毒自然感染状况及其核苷酸序列

目的 探讨中国黑龙江地区正常人和马博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus ,BDV)自然感染状况 ,进而比较分析中国自然感染的BDV与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株及标准株He/80在种系发生中的关系。方法 用巢式RT -PCR方法检测中国黑龙江地区正常人和马匹单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBM Cs)中BDV - p2 4基因片段 ,分别随机选取每种样本部分阳性扩增产物进行克隆测序 ,测序结果与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株以及标准株He/80进行序列比较。结果 76例正常人、34匹马的标本中BDV - p2 4基因的阳性检出率分别为 9 2 % (7/76 )和 2 3 5 % (8/34)。序列分析结果表明 ,中国黑龙江地区正常人和马感染的BDV的核苷酸序列除与一个新亚型株No/98差别较大 (大于 15 % )外 ,与其他国外精神分裂症患者和马源BDV分离株同源性均大于 94 % ,与标准株He/80同源性达到 98%以上。结论 证实黑龙江地区正常人和马中存在BDV的自然感染。该地区感染的BDV与标准株He/80存在高度的同源性。

贵州遵义地区山羊Borna病毒P24基因片段的检测

目的探讨贵州遵义及周边地区山羊博尔纳病病毒(BDV)感染状况。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测了300只山羊外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序,及同源性分析。结果300只山羊PBMC中2只检出BDVP24基因阳性片段。山羊BDVP24基因片段阳性率为0.67(。BDVP24基因片段测序结果与GenBank提供的strainV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与BDV/MDCK毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,但所编码的氨基酸没有改变。结论贵州遵义及周边部分地区山羊存在BDV自然感染。

1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析

对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。

贵州部分地区精神分裂症患者血清PBMC博尔纳病病毒CIC及抗体的检测

目的对贵州省部分地区精神分裂症患者血清外周血单个核细胞(PBMC)进行检测,探讨博尔纳病病毒(BDV)感染与精神分裂症的相关性;方法运用新型的三联ELISA测循环免疫复合物(CIC)的方法,检测97例精神分裂症患者组及48例健康对照组PBMC中BDV特异性CIC;结果 97例精神分裂症组中有24例CIC为阳性,阳性率为24.7%(24/97);抗体检出率为14.4%(14/97),48例对照组中CIC及抗体阳性1例,阳性率为2.1%(1/48);精神分裂症组检出率高于健康对照对照组,具有统计学意义(P<0.05);结论贵州省部分地区存在着BDV的感染,BDV感染与精神分裂症可能相关。

博尔纳病病毒磷蛋白在PC-12细胞内的稳定表达及对其增殖的影响

【目的】建立博尔纳病病毒磷蛋白在神经源性PC-12细胞内的稳定表达体系,初步探讨博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长是否有影响。【方法】培养PC-12细胞,用阳离子脂质体的方法将带有博尔纳病病毒磷蛋白基因的表达质粒转染到细胞内进行稳定表达,用荧光显微镜和RT-PCR的方法检测细胞内磷蛋白的表达,用MTT方法检测磷蛋白对细胞生长的影响。【结果】转染细胞经培养10代后仍然表达目的蛋白,成功建立稳定表达体系。MTT检测显示博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长具有明显的抑制作用,其生长明显滞后,但粘附能力增加。【结论】通过本文建立的体系能在PC-12细胞内稳定表达博尔纳病病毒磷蛋白,该体系可用于进一步深入研究博尔纳病病毒磷蛋白的作用机制,进而为研究博尔纳病病毒持续感染中枢神经系统的机制提供基础。此外本文通过检测细胞的增殖活性发现博尔纳病病毒磷蛋白对PC-12细胞的生长具有明显的抑制作用,可能是博尔纳病病毒持续感染中枢神经系统的重要机制之一。

博尔纳病病毒p24重组蛋白的表达与初步鉴定

博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus,BDV)是一种嗜神经病毒。研究表明 ,BDV不仅可以引起马、羊等家畜的自然感染 ,从啮齿类动物到人以外的灵长类动物均易受到BDV的实验性感染 ,而且BDV感染还可能与人类的某些精神神经疾病的发生相关。本研究对含有BDV p2 4重组质粒PGEX 3X的大肠杆菌表达系统进行了优化表达BDV p2 4蛋白 ,在IPTG 2mmol/L、3h表达量最大 ,同时用BDV p2 4单克隆抗体证实了其特异性。从而为建立检测待检血清中BDV p2

抗博尔纳病病毒磷蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的以重组的博尔纳病病毒(BDV)磷蛋白(p24)为免疫原制备单克隆抗体,并鉴定其特异性。方法以纯化后的重组BDVp24免疫小鼠,将骨髓瘤细胞与其脾细胞进行融合,经ELISA法筛选出分泌抗p24单抗的细胞株,并对其进行克隆与亚克隆培养,将最终获得的其中2株细胞株分别注入小鼠腹腔制备单抗,经亲和纯化法纯化后,采用ELISA法测定效价,利用蛋白免疫印迹和免疫荧光鉴定其特异性。结果建立了2株稳定分泌抗p24单抗的杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgG1型。纯化后的腹水抗p24单抗纯度为98%和93%,ELISA效价在1∶81 000以上,该抗体均能识别重组p24蛋白和BDV感染人类少突胶质细胞(Oligodendroglia cell,OL细胞)所表达的p24蛋白。结论成功制备了灵敏性高、特异性好的抗BDVp24单抗,为博尔纳病病毒诊断方法的研制及感染机理的研讨提供依据。

边界病

本文依据众多资料，对羊边界病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理学、免疫学、诊断及控制作了全面概述。

博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组质粒的构建及鉴定

构建博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组表达质粒。通过PCR方法扩增获得博尔纳病痛毒p24基因的完整序列,将此片段定向克隆到pEGFP-N1载体多克隆位点区,筛选重组阳性菌株,提取重组质粒,利用PCR方法和核酸序列测定验证重组质粒构建的正确性。PCR及核酸序列测定证明博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组表达质粒构建成功。构建的重组质粒将为研究博尔纳病病毒p24基因在真核细胞中的功能和作用提供实验依据。

Borna病病毒与淋巴瘤关系的初步研究

[目的]探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类淋巴瘤的关系。[方法]采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链式反应(FQ-nRT-PCR),检测了经病理学诊断的非霍奇金淋巴瘤(NHL)14例、霍奇金淋巴瘤(HD)6例及健康人20例的外周血单个核细胞(PBMC)中BDV p24基因片段。[结果]20例淋巴瘤患者与20例健康对照者的BDV p24基因片段检测均为阴性。[结论]淋巴瘤与BDV感染无明显相关性。

帕金森病患者血清博尔纳病病毒循环免疫复合物及抗体的检测

目的对帕金森病患者血清外周血单核细胞进行检测,探讨博尔纳病病毒感染与帕金森病的相关性。方法运用新型的三联ELISA测循环免疫复合物、抗体的方法,检测7例帕金森病患者及93例健康对照组血清外周血单核细胞中博尔纳病病毒特异性循环免疫复合物及抗体。结果 7例帕金森病中循环免疫复合物及抗体均为阴性,阳性率为0%;93例对照组中循环免疫复合物阳性7人,阳性率为7.53%(7/93),抗体阳性5例,阳性率为5.38%(5/93);帕金森病组检出率低于健康对照组,两组比较无统计学意义(P>0.05)。结论贵州省体检人群存在着博尔纳病病毒的感染,帕金森病患者未检测出博尔纳病病毒感染。

泄压系统在油气加工行业的应用研究

当油气加工和储存过程发生物料泄漏、中毒、火灾或爆炸事故时,安全阀仅能将系统的压力控制在起跳压力和最大允许工作压力范围内,既不能主动泄压,降低承压设备/管道应力,防止非润湿表面因局部过热(超过材料应力极限)而破裂,又无法减少物料向火源的"投放"。泄压系统的应用填补了这一空白,一般由泄放阀(BDV)、孔板(组)等设施组成,能在15 min内将系统压力降至设计压力的50或690 k Pa。在相关标准和工程实践基础上,结合自身设计经验,对泄压系统各组成部分的功能、设计要点、计算方法等进行了研究和探讨,为更广泛的应用奠定了技术基础。

牛病毒性腹泻/粘膜病病毒在不同细胞上生长增殖的比较

牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏｒｅｇｏｎ Ｃ２４Ｖ弱毒株抗原的制备一直以在犊牛仔细胞上生长为主，为了使该病毒有更广泛的宿主细胞，对该病毒株在犊牛仔细胞上和睾丸细胞上生长增殖情况作了对比，结果证明，该病毒在两种细胞上的增殖情况无差异。

贵州遵义地区蝙蝠脑组织博尔纳病病毒磷蛋白的检测

研究贵州省遵义地区野生蝙蝠脑组织中BDV自然感染情况。方法:采用蛋白免疫印迹检测贵州省遵义地区82只野生蝙蝠脑组织中BDV磷蛋白表达情况。结果:82只蝙蝠脑组织中BDV磷蛋白阳性9例(11%)。结论:贵州省遵义地区蝙蝠存在BDV自然感染。