大鼠纹状体Mor和Calb对祛多巴胺能神经支配反应的实验探察

目的为了探察证实黑质-纹状体DA能神经通路阻断对大鼠纹状体Mor和Calb阳性神经元及其蛋白质表达的影响。方法借助6-OHDA注射阻断前脑内侧束建立PD模型;应用APO诱导旋转、握力测试、Morris水迷宫方法检测模型大鼠的行为学改变;应用免疫组化染色和蛋白印迹技术检测PD模型大鼠纹状体Mor和Calb神经元形态结构和蛋白水平的变化。结果①阿扑吗啡诱导模型大鼠出现健侧方向的旋转。模型大鼠抓握悬吊时间明显较正常组长(P<0.05),其寻找和发现平台的时间也明显较正常组长(P<0.05)。②模型大鼠纹状体Mor阳性区域的面积明显小于正常组(P<0.05),Calb阳性区域面积的变化不明显(P>0.05)。③模型大鼠纹状体Calb蛋白的表达水平明显低于正常组(P<0.05)。结论黑质-纹状体DA能神经通路阻断可能通过突触传递机制影响其突触后神经元的形态结构、蛋白表达、生理机能。

Lipozyme~CALB L固定化及催化合成EPA/DHA甘油酯的研究

研究利用树脂对脂肪酶LipozymeCALB L进行固定化,然后将固定化酶用于催化富含二十二碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的脂肪酸乙酯与甘油进行酯交换反应合成甘油酯。在17种常用树脂中,环氧树脂(ECR8285)在缓冲液p H 5、缓冲液离子浓度1 mol/L、酶加量120mg/g(以载体质量计)时,通过共价结合固定化的LipozymeCALB L酶活力最高,可以达到22 967U/g,蛋白质吸附率为91.88%。以ECR8285固定化的LipozymeCALB L催化富含EPA和DHA的脂肪酸乙酯与甘油反应合成甘油酯,在叔丁醇体系中催化PUFA乙酯与甘油反应8 h后,PUFA乙酯的转化率可以达到51.1%;将叔丁醇回收后,在真空状态下继续反应24 h,PUFA乙酯的转化率可以达到91.7%,产物中甘油三酯的含量可以达到70%以上。

南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在乳酸乳球菌MG1363中的整合及表达

根据南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)的基因序列将CALB基因进行TA克隆、酶切鉴定及测序后,亚克隆至大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭表达载体pMG36e-NisI中,构建重组表达载体pMG36e-NisI-CALB。设计特异性引物P3和P4,对重组质粒pMG36e-NisI-CALB进行红霉素抗性基因的敲除,以构建食品级表达载体pMG36N-CALB,后再将两种重组质粒分别电转化入乳酸乳球菌MG1363,以Nisin为选择压力,考察CALB在MG1363中的表达情况。结果显示,成功构建了表达载体pMG36e-NisI-CALB及pMG36N-CALB,两株重组菌在含有20 IU Nisin/mL的培养基中均生长情况良好,遗传性能稳定,且经水解圈鉴定,CALB能够进行活性表达。进一步研究发现,CALB基因整合到乳酸乳球菌MG1363染色体中。

利用a凝集素在酿酒酵母表面展示CALB及工业化培养基发酵条件优化

[目的]探索南极假丝酵母脂肪酶B更加经济、简便的固定化方法。[方法]根据南极假丝酵母脂肪酶B的成熟多肽序列,人工合成calb基因。将其克隆到质粒pYD1中的AGA2基因下游,获得的重组质粒pYD1-CALB,转化S.cerevisiaeEBY100菌株,并利用酿酒酵母工业化培养基发酵。[结果]成功构建表面展示CALB的酵母工程菌株;重组菌株连续传代10次表达酶活力基本保持不变,具有良好的遗传学稳定性;经工业化培养基发酵优化后,25℃发酵48 h,CALB水解活力可达4.25 U/ml,冻干粉活力可达147.82 U/g干细胞。[结论]利用酿酒酵母表面展示系统固定化南极假丝酵母脂肪酶B具有可行性,且工业化培养基的使用降低了发酵成本。

大鼠纹状体Patch和Matrix间区及其神经元形态学特征的观察

【目的】纹状体Patch和Matrix间区被证实与神经精神活动和躯体运动有关。本实验旨在探测Patch和Matrix间区及其神经元的形态学特征,为研究纹状体-Patch和-Matrix神经元的通路联系提供资料。【方法】成年雄性SD大鼠分别按照常规和电镜要求灌注固定、取脑和后固定;半导体或振动切片之后进行免疫组化PAP方法单标记和双标记;光镜下分别用Photoshop软件测量Patch和Matrix间区的面积并计算百分比;光镜和电镜下观察阳性神经元的结构;实验数据用SPSS软件统计处理。【结果】①Mor阳性的Patch间区呈不规则形的斑块状散在分布于纹状体,在胼胝体深方存在一条恒定的阳性带状区。Patch间区占纹状体面积的9%,其面积在纹状体的头侧明显大于尾侧(P<0.05)。阳性结构呈细丝或絮状,阳性胞体不明显。②Calb阳性的Matrix间区在纹状体内侧区染色较深,可见明显不规则的淡染色区,其形状与相邻片的Patch间区一致。Matrix间区的面积明显大于Patch间区(P<0.05)。可见阳性树突和树突棘,但阳性胞体不明显。③电镜下分别可见Mor和Calb阳性树突和树突棘,其大多数接受兴奋性突触连接,而与阳性树突形成的突触多为穿孔型。抑制性突触少见,阳性胞体不明显。【结论】头侧纹状体密集分布的Patch间区、内侧纹状体Calb强烈反应,和阳性标记的树突、树突棘以及兴奋性突触为主的形态学特征,提示Mor和Calb阳性神经元分别具有特异性的神经通路连接和生理机能。

斜拉桥索导管的施工监控

斜拉索是斜拉桥的重要组成部分 ,是弹性连续主梁的弹性支座 .其到位精度直接影响主梁的受力 ,所以它的施工监控就十分重要 .结合仙桃汉江公路大桥索导管的施工监控过程 ,对索导管的场内加工、安装就位、成品验收等一系列监控流程作了详细介绍 ,并提出一些积极建议 。

米糠毛油酶法脱酸的工艺优化

米糠毛油普遍酸价较高,采用常规的脱酸方式存在炼耗高、预处理要求高、营养成分损失大、油品品质差等问题。酶法脱酸可以有效避免上述问题。采用固定化脂肪酶CALB对米糠毛油进行酶法脱酸研究,得到优化工艺条件为甘油与游离脂肪酸摩尔比1∶3、剪切速度25 m/s、剪切时间20min、加酶量50 g/kg、反应温度70℃、反应时间6 h、甘油中水分含量25%、真空度小于1 000 Pa、通氮气,在此条件下酯化率可达92. 5%。

脉冲回波法通信电缆断点测试系统

研究ＡＴ８９Ｃ５２单片机控制的通信电缆断点测试方法，给出了硬、软件的实现方法。

高温超导电缆发展的概况

首先讨论了超导体的基本概念、性能和种类，介绍了超导材料研究的进展情况、超导电缆的设计方案、结构和特性参数，并与普通电缆做了比较；最后报道了高温超导线材和导体的结构和特性参数。

垃圾渗滤液脱氮研究

垃圾渗滤液中氮的浓度很高 ,任意排放会给环境带来很大危害 ,必须加以处理 .但垃圾渗滤液氮的处理受到很多因素的制约 ,根据中山市垃圾渗滤液处理厂调试期间 NH3 -N,NO-2 -N,NO-3 -N和 TN的浓度沿处理流程的变化趋势 。

电缆火灾致因因素分析

随着用电量的增加,电缆火灾呈上升趋势。引起电缆火灾的主要原因有:导线短路、电缆过载、电缆漏电、电缆接头处接触电阻过大。在导线短路原因中分析了三相、两相和单相三种短路情况;在电缆过载原因中研究了过载引起火灾的一般规律;在电缆漏电原因中分析了漏电的常见原因;在接触电阻过大原因中,研究了接触电阻增大的恶性循环规律。

电缆包装盘的计算机辅助设计

介绍了电缆包装盒ＣＡＤ系统的设计方法及功能的实现。使用该系统，只需输入电缆的线径和装盒长度等有关数据，计算机即可自动显示和输出制造该电缆包装盒的全套零件图或装配图。

硫酸铵-丙酮协同沉淀法纯化南极假丝酵母产脂肪酶

采用硫酸铵-丙酮协同沉淀法,对南极假丝酵母产脂肪酶(CALB)进行了分离纯化研究。经正交实验确定纯化工艺为:向酶液中加入硫酸铵至饱和度45%的同时加入0.3倍酶液体积的丙酮;离心后再向上清液中加入硫酸铵至饱和度75%,分相后,相界面处沉淀即为脂肪酶粗品。经分离纯化后,酶活回收率为54%、纯化倍数为2.72。

病毒性脑炎患儿脑脊液IL-6、脑脊液白蛋白/血清白蛋白比值的变化及意义

目的:探讨脑脊液IL-6、脑脊液白蛋白/血清白蛋白(CALB/SALB)比值在病毒性脑炎患儿体内的变化及临床意义。方法:用放射免疫法检测IL-6、溴甲酚绿法检测血清白蛋白、免疫比浊法检测脑脊液白蛋白。检测42例病毒性脑炎患儿急性期和恢复期脑脊液和血清标本,以25例非颅内感染患儿作为对照组。结果:(1)病毒性脑炎患儿脑脊液IL-6、CALB/SALB比值与对照组比较差异有显著性(P<0.01),(2)脑脊液IL-6浓度和CALB/SALB比值呈明显正相关(r=0.667,P<0.01)。结论:病毒性脑炎患儿脑脊液IL-6、CALB/SALB比值均明显升高,其水平与病情的发生、发展和病情严重程度有关。脑脊液IL-6、CALB/SALB比值的检测对脑损害程度的估计、治疗方案的选取以及预后的判断都有一定的指导价值。

ADSS光缆若干问题探讨

本文讨论了ＡＤＳＳ光缆技术，包括ＩＥＥＥＰ１２２２ 草案，ＡＤＳＳ光缆结构、工艺及性能，并简介了ＡＤＳＳ光缆的一些实验结果。

随机激励作用下拉索内力的测量

给出了随机干抗激励力作用下拉索内力测量的基本原理，同时介绍了拉索固有频率识别的频域法、时域法及相关问题。试验和实践结果表明，拉索内力的动态测试方法简便易行，结果可靠。

新型8字形自承式电(光)缆护套挤出模具的设计

在 8字形自承式电 (光 )缆护套挤出过程中 ,常会出现包覆不紧密、护套偏心和厚度不均匀等问题 ,为了提高护套挤出质量 ,本文介绍了一种新型 8字形护套挤出模具。

采用铜包钢复合线的对称电缆邻近效应

考虑了对称电缆中电磁场的集肤效应、反射效应和邻近效应 ,计算出铜包钢对称电缆的传输参数 ,并证明当铜包钢复合线的铜层厚度与传输频率满足一定关系时 。

荷麻溪特大桥长期健康监测系统的构思和实现

基于结构分析结果,遵循监测系统的投资额度和目的、功能两个原则,介绍荷麻溪特大桥长期健康监测系统的构思和实现。着重分析了几何监测子系统的精度。提出扣除应变计读数漂移影响的方法。并根据结构分析结果优化了传感器的布设,从而保证了系统能够以较小的代价采集到准确反映大桥结构工况的参数信息和数据,为今后系统准确和有效的工作奠定了坚实的基础。为部分斜拉桥健康监测系统的设计与实施提供了示范系统、积累了工程实践经验。

南极假丝酵母脂肪酶B在黑曲霉中的分泌表达及其硅藻土固定化应用

为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)表达量,根据黑曲霉(Aspergillus niger)密码子偏好性设计合成CALB基因,以PnaII/tpi为启动子构建CALB表达载体并转化到黑曲霉HL-1中表达,摇瓶发酵120 h后上清液中重组CALB活力为171 U/mL。研究重组CALB的酶学性质,最适反应温度和pH值分别为50℃和8.0,在pH 6.0~9.0和45℃以下具有较高的稳定性,10 mmol/L Cu2+、Zn2+和0.1 g/100 mL十二烷基硫酸钠强烈抑制酶活力,而1 mmol/L Ca2+、0.1 g/100 mL山梨醇对酶活力具有非常明显的激活作用。此外,以硅藻土为载体固定CALB,固定化酶活力为187 U/g。将制备的硅藻土-CALB固定化酶用于生物合成己酸乙酯,经反应条件优化后在无溶剂体系中己酸乙酯产率达91%。