105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂对烟草青枯病的防治效果

烟草青枯病是一种毁灭性的细菌性土传病害,其病原菌是青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum),生物防治是行之有效的烟草青枯病绿色防控技术措施。本研究选用新农药105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂,开展了其对烟草青枯病的室内抑菌试验和田间药效试验。结果表明,105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂防治烟草青枯病效果显著,能减轻该病害的发生程度,药剂用量为900 g/hm^(2)时田间防效可达76.08%;同时,施用105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂还能改善烟草的株高、茎围、叶片数、最大叶面积、产量、上等烟比例和中上等烟比例等农艺性状和经济性状。105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂推荐用量为600~900 g/hm^(2)。

7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂对烟草靶斑病和野火病的防效研究

为研究新生防制剂7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂对烟草靶斑病和野火病的防效,开展了不同药剂室内抑菌试验和田间药效试验。结果表明,7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂300倍液对烟草靶斑病病原菌和野火病病原菌的室内抑菌率均在60%以上;第3次药后,7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂300倍液对烟草靶斑病和野火病的田间防效均在65%以上,持效期长。7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂可作为兼防烟草靶斑病和野火病的推荐生防药剂。

生孢梭菌CFU计数培养基的研制

目的:研制一种适宜生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)菌落形成单位(Colony Forming Units,CFU)计数的微生物培养基(简称培养基),使其CFU计数能够接近最大活菌数。方法:将生孢梭菌接种于硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂),置35℃培养24-48h;将生孢梭菌的新鲜培养物置无菌离心管中,500r·min^(-1)离心5min。取上层菌液,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至与标准比浊管相同浓度,并作10倍系列稀释至1×10^(-6)备用。将上述菌液分别浇注混匀于琼脂浓度为0.5%,0.6%和0.7%的3个生孢梭菌CFU计数研究培养基(简称3个生孢梭菌CFU计数研究培养基),置厌氧条件下35℃培养。优选18h进行CFU/mL计数并观察菌落形态,优选琼脂浓度为0.5%的上述培养基作为生孢梭菌CFU计数培养基并与其他5个培养基进行生孢梭菌CFU计数的比较试验。将上述菌液采用浇注法和L棒涂抹法接种于上述6个不同的培养基,置不同培养条件及培养时间进行生孢梭菌的CFU计数。结果:生孢梭菌CFU计数培养基,浇注法接种,在厌氧条件下35℃培养18h,CFU计数最多,且菌落形态良好,可能最接近最大活菌数。结论:新研制的生孢梭菌CFU计数培养基是目前最适于生孢梭菌CFU计数的培养基。

当归补血汤及其组成药味的含药血清对造血祖细胞(CFUGM)的影响

当归补血汤水煎剂（归∶芪＝１∶５）６．６、１３．２、１９．８ｇ生药／ｋｇｉｇ小鼠１次，１小时后采集腹主动脉的血清０．４ｍｌ，加入小鼠造血祖细胞体外培养体系中培养６天，观察对ＣＦＵＧＭ的影响。结果随给药剂量的增加ＣＦＵＧＭ集落数增多，其量效方程为ｙ＝－９８．９３＋１５９．６６ｌｏｇｘ，最低起效量为４．１７ｇ饮片／ｋｇ。拆方研究表明促进ＣＦＵＧＭ增生功效的顺序是当归１．３２ｇ／ｍｌ＞当归０．２２ｇ／ｍｌ≥当归补血汤１．３２ｇ／ｍｌ＞对照≈黄芪１．１０ｇ／ｍｌ＞黄芪１．３２ｇ／ｍｌ。

分枝杆菌多糖对小鼠骨髓造血祖细胞GMCFU的影响

对分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）促进小鼠骨髓造血祖细胞形成ＧＭＣＦＵ的量效关系进行了实验研究。结果表明，给予不同剂量的ＭＰＳ使ＧＭＣＦＵ提高的水平在一定剂量范围内（０．６～１．０ｍｇ／ｋｇ）随剂量增加而升高，剂量大于１．２ｍｇ／ｋｇ时不再继续升高。共进行３批试验，重复性好（Ｐ＞０．０５）。

对生孢梭菌CFU计数培养基的验证试验

目的:对新研制的生孢梭菌 CFU 计数培养基的 CFU 计数效果的可重复性进行验证。方法:将生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)复苏、增菌培养,培养物与标准比浊管比浊至相同浊度,然后10倍系列稀释至1×10^(-6),作为工作菌液。将工作菌液采用浇注法接种生孢梭菌 CFU 计数培养基,分别置厌氧条件及有氧条件35℃培养;将工作菌液采用涂抹法接种于营养琼脂培养基和厌氧菌琼脂培养基,置厌氧条件35℃培养,用未接种的培养基做空白对照。分别于18,24,48,72 h 进行 CFU·mL^(-1)计数、观察菌落形态。用同一工作菌液重复上述实验5次,分别计算不同培养基 CFU·mL^(-1)的平均值。将以上试验重复2次。结果:生孢梭菌 CFU 计数培养基的 CFU 计数结果明显优于营养琼脂培养基和厌氧琼脂培养基(P<0.01);厌氧条件培养明显优于有氧条件培养(P<0.01)。生孢梭菌以浇注法接种于 CFU 计数培养基,置厌氧条件35℃培养18 h,CFU·mL^(-1)计数最多,可能最接近最大活菌数,且菌落形态良好。结论:新研制的生孢梭菌 CFU 计数培养基可以认为是目前最适于生孢梭菌 CFU 计数的培养基,可以推荐作为生孢梭菌 CFU 计数培养基使用。

粒单系造血祖细胞CFU-GM琼脂半固体培养的原位固定及鉴定染色

用粒单系造血祖细胞 (CFU- GM)体外琼脂半固体培养法 ,琼脂块原位固定 ,Wright染色与细胞化学和免疫细胞化学技术 ,对培养人的骨髓 CFU- GM进行集落性质鉴定。结果表明 :Wright染色能区别集落的性质及细胞的分化程度 :CFU-GM的细胞中 PAS、POX呈阳性反应 ;CD14、CD15分别在单核细胞和粒细胞的胞浆或胞膜上表达。该方法对鉴定细胞集落类型、集落中细胞的分化与成熟程度是简便可靠的手段。

健脾养阴泄毒法对髓细胞白血病患者CFU-L的影响

为探讨健脾养阴泄毒法治疗髓细胞白血病的机理。采用血清药理学方法观察健脾养阴泄毒法对髓细胞白血病患者CFU -L及正常人骨髓CFU -GM集落的影响。结果 :健脾养阴泄毒法能明显抑制白血病患者CFU -L ,而对正常人骨髓CFU -GM无明显抑制作用。提示健脾养阴泄毒法治疗髓系白血病的机理 ,可能与其抑制白血病细胞增殖有关。

二羧乙基锗三氧化物体外对正常人CFU-GM产率的影响

利用CFU-GM培养技术,探讨了Ge-132在体外对正常人CFU-GM产率的影响.结果表明,Ge-132在体外能显著增加CFU-GM产率,而且有效剂量范围大;去除贴壁细胞对Ge-132的造血刺激作用无明显影响,但除去T淋巴细胞,这种促进作用消失.把Ce-132直接加入无集落刺激活性(CSA)的培养体系中,未见集落生长.这些结果表明,Ge-132并非直接作用于粒-单祖细胞.

放射损伤小鼠骨髓VEGF、CFU-GM、CFU-F的变化及川芎嗪对其影响的研究

目的:探讨放射损伤小鼠骨髓血管内皮细胞生长因子(VEGF)、骨髓粒巨噬细胞集落形成单位(GFU-GM)数和骨髓成纤维细胞集落成单位(CFU-F)的变化意义及川芎嗪对其的影响。方法:健康昆明小鼠经6.0Gy60Coγ照射后,立即喂饲川芎嗪并设对照组和正常组,分别于第3、7、14、21天检测其骨髓VEGF、CFU-GM和CFU-F的变化。结果:照射后第3、7、14 d骨髓VEGF表达水平显著降低,但川芎嗪组高于对照组;随着时间推移骨髓VEGF表达水平逐渐恢复,照射后第21 d川芎嗪组已恢复正常(P>0.05),而照射组仍低于正常组。照射后骨髓CFU-GM和CFU-F明显受到抑制,但川芎嗪组显示了良好的保护作用。结论:放射损伤后小鼠骨髓VEGF的表达变化在造血功能的恢复过程中起重要作用;川芎嗪具有改善骨髓造血功能的作用。

四物汤及各单味药的含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落(CFU-GM)的影响

目的 :研究四物汤及各单味药对粒系 -巨系造血祖细胞集落 (CFU - GM)的影响 ,更近于真实地反映药物在体内作用的实际情况 ,以进一步探讨四物汤补血作用的配伍机制。方法 :采用血清药理学体外实验法。结果 :四物汤能明显促进造血祖细胞的增殖 ,单味药当归的作用最强 ,单味药熟地黄、川芎的作用也较正常对照组有增强趋势 ,而单味药白芍对 CFU - GM的增殖似无作用。几种受试药的作用强弱顺序可排列如下 :当归 >四物汤 >川芎 >熟地黄 >白芍。结论 :上述结果提示在促进 CFU - GM的增殖方面 ,四物汤的生血补血作用源于当归 ,川芎与熟地黄似有一定的协同作用 ,而白芍不表现协同作用。

骨髓内皮细胞分泌的抑制CFU-F生长的因子(英文)

为探讨骨髓微环境中内皮细胞调节造血的可能机制 ,本实验研究了骨髓内皮细胞无血清条件培养液(BMEC CM )及其不同分子量组分对骨髓成纤维祖细胞 (CFU F)生长的作用。在体外培养条件下 ,收集人和小鼠纯骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ,应用连续超滤技术从其中制备出分子量 >10kD ,3- 10kD和 <3kD三种组分 ,进行骨髓CFU F集落形成实验 ,检测这些条件培养液及其超滤组分的作用。结果显示 ,人和小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液和分子量 <3kD超滤组分都抑制CFU F的生长 ,但是分子量 >10kD和 3- 10kD组分却不产生这种效应。两种条件培养液及其 <3kD组分不仅减少CFU F集落形成数 ,同时也使集落变小 ,而且 ,<3kD组分与CFU F集落数之间有明显的负相关浓度依赖性关系。这些结果提示 ,骨髓内皮细胞至少能分泌一种分子量小于 3kD的对骨髓CFU F生长有抑制作用的细胞因子。

抗急非淋M_2和M_5型白血病单抗对骨髓粒-单核细胞集落形成(CFU-GM)的影响

为了使单抗用于骨髓净化和导向药物的研究,应用分泌抗急非淋M_2和M_5型单抗1D_1和1A_1,观察对正常骨髓粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响。结果实验组与对照组比较无显著性差异,说明单抗对CFU-GM没有影响,不损伤正常骨髓造血干细胞,为M_2和M_5型单抗用于骨髓净化和导向药物的研究提供实验依据。

重组人红细胞生成素对骨髓增生异常综合征患者CFU-E的作用

应用CFU-E培养技术观察28例骨髓增生异常综合征(MDS)患者对EPO的反应,表明MDS患者CFU-E的形成能力明显低于正常人,其中反应好者,加入EPO后CFU-E可达正常水平,占观察组17.3％;反应差者,即使加入足量EPO后,CFU-E增殖仅为对照组的20％以下;CFU-E对EPO还有剂量依赖性。通过EPO对MDS患者CFU-E不同反应,可能与MDS病因、发病机理有关,或部分患者病变发生在BFU-E或其以上水平,故对EPO无反应。

小鼠胎肝造血基质细胞系对CFU-GM生长的调控作用

利用本实验室建立的小鼠胎肝造血基质细胞系(MFLSC)研究了造血基质细胞对粒-巨噬系造血祖细胞(CFU-GM)生长的影响。实验结果表明,MFLSC对CFUGM集落的生成有双向调控作用,即既有刺激性作用,又有抑制性影响。这种调控有体液因子之中介,亦有细胞与细胞间近距离的效应。文中讨论了MFLSC双向调控CFUGM生长的意义及其机理。

不同冷冻条件对骨髓造血细胞的CFU－GM形成能力及DNA活性的影响

本文对不同冷冻条件下人骨髓造血细胞的粒单系集落（ＣＦＵ－ＧＭ）形成能力及ＤＮＡ活性变化进行测定。结果证明：室温下低温保护剂二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）使骨髓造血细胞形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力下降；程序降温至－８０℃与降至－８０℃后与在液氮内冻存７天骨髓造血细胞相比较，二者形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力以及ＤＮＡ活性均无明显变化；在程序降温过程中，消除融合热释放组骨髓造血细胞形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力明显高于来消除融合热释放组。

人参蜂王浆对正常和照射豚鼠造血免疫器官CFU-F影响的实验研究

骨髓及脾细胞体外培养中加不同浓度人参蜂王浆后培养8～12天,计数基质祖细胞集落(CFU-F)数。发现实验组形成的CFU-F小型集落明显高于对照组。培养1Gy照射的骨髓细胞,加入3.10^(-1)～3.10^(-3)g/ml人参蜂王浆后,细胞呈融合生长,认为人参蜂王浆对骨髓和脾细胞体外培养形成的小型CFU-F有成集落刺激作用,而对大型集落则相反。

人类脐血与正常骨髓CFU-F特性的比较研究

用液体培养法对１４份人类脐血和１０份正常骨髓ＣＦＵ－Ｆ的生长特性、形态学、细胞化学及超微结构等进行了比较研究，结果除生长特性及集落数不同外，两者无明显差异。说明脐血含有基质细胞。在脐血ＣＦＵ－Ｆ培养中，还发现一种来源、性质不明的细胞。

G-CSF和GM-CSF体外对骨髓增生异常综合征患者CFU-GM和CFU-E的作用

用造血祖细胞体外培养方法观察G－CSF和GM－CSF对36例MDS患者造血相细胞的作用，结果发现：①MDS患者CFU－E、CFU－GM明显低于非血液病对照患者；②RA型患者CFU－GM数量明显低于RAEB、RAEB－T型；③G－CSF和GM－CSF体外可明显刺激非血液病对照患者和MDS患者CFU－GM数量增加，在一定范围内作用与剂量呈正相关；④患者自身的CFU－GM增殖能力愈差，对小剂量G－CSF或GM－CSF的反应愈差，但大剂量时这种差异不明显。以上结果提示G－CSF和GM－CSF可成为治疗MDS伴粒细胞减少的有效药物。

小鼠粒一单系祖细胞(CFU-GM)培养中几个影响因素的观察分析

目的 :观察分析影响小鼠粒单系祖细胞 (ColonyFormUnit GranulocyteandMonocyte ,CFU GM )在体外生长的因素 ,建立本实验室常规 ,稳定的CFU—GM培养方法。方法 :在含血清、刺激因子、培养液、琼脂和骨髓有核细胞 (BoneMarrowCell,BMC)的培养体系中 ,分别变换血清种类、刺激因子来源、琼脂配制方法和BMC浓度 ,计数、比较祖细胞集落。结果 :在其它条件相同时 ,马血清和新生小牛血清组的集落产率分别为 72± 12 9和 34± 4 78,P <0 0 1;第一次培养的鼠肌条件培养液和第二次培养的鼠肌条件培养液作为刺激因子组的集落产率分别为 5 8 2 5± 11 6 8和 44 5± 7 46 ,P <0 0 1,经冻存并自然融化后去除上清液的鼠肌条件液和未去除上清液的鼠肌条件液作为刺激因子组的集落产率分别为 42± 2 13和 6 0± 12 6 49;P <0 0 1,以三蒸水配制的琼脂和D -Hank’s液配制的琼脂作为支撑物 ,集落产率分别为 18 5 7±3 33和 42 5± 1 93 ,P <0 0 1;在含马血清、第一次培养的鼠肌条件液和D Hank’s液配制的琼脂的体系中 ,集落产率与所种入BMC的浓度的相关系数r =0 .91。结论 :在BMC浓度和培养液不变的条件下 ,以马血清为血清 ,第一次培养的肌条件液为刺激因子 ,D Hank’s液配制的琼脂为支撑物 ,集落产率最高 ,且方法稳?