CYP2R1基因多态性与维生素D水平和肺结核病易感性的相关性研究

目的探讨CYP2R1基因rs10741657、rs10766197、rs1993116位点的多态性与维生素D水平和结核病之间的关系。方法选取青海省某医院174例结核病患者为病例组,202例同期体检健康者为对照组,通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增rs10741657、rs10766197、rs1993116位点并测定基因型,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定维生素D浓度。结果rs10741657基因多态性与结核病相关(χ^(2)=6.884,P=0.032),未发现rs10766197、rs1993116多态性与结核病相关。结核病患者中,rs10741657位点GG基因型携带者体内维生素D水平低于AA基因型(P=0.033)和AG基因型(P=0.034),未发现rs10766197、rs1993116位点基因型与维生素D水平相关。结论rs10741657基因多态性与维生素D水平和结核病的发病相关。

CYP2R1的遗传多态性及其个体化治疗应用

CYP2R1是细胞色素P450家族2亚家族的成员,作为维生素D的25-羟化酶,负责将维生素D羟基化为25-羟基维生素D(25-OH-D),影响活性激素1,25(OH)2D的生成。CYP2R1突变会引发维生素D依赖型佝偻病1B型,且CYP2R1的多态性与25-OH-D水平显著相关,尤其是rs10741657。CYP2R1基因多态性会影响其蛋白表达水平和酶活性,对其催化的代谢过程产生显著影响。CYP2R1通过调节基因功能,从而调节免疫反应,影响1型糖尿病的发病风险。其多态性与多种癌症的风险相关,包括乳腺癌,前列腺癌和结肠直肠癌。研究CYP2R1基因多态性有利于深入了解代谢途径的改变在相关疾病发生发展中的作用,加深对癌症、佝偻病、1型糖尿病等疾病的认识,促进从基因层面检测和评估相关疾病的发生风险。本文拟就近五年CYP2R1参与的代谢途径和基因多态性对其影响的研究进展作一综述。

低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制

目的探讨低氧对妊娠SD大鼠维生素D代谢的影响及可能机制。方法选择成年SD雌性大鼠20只,将其分为常氧组(Normoxia组,8只)和低氧组(Hypoxia组,12只),按雌雄比例2∶1将10只成年SD雄性大鼠分配到以上两组,与雌鼠合笼饲养建立妊娠动物模型。应用ELISA法检测雌鼠血清维生素D水平;采用Real-time qPCR技术分析与肝、肾、胎盘维生素D代谢相关基因的表达情况;通过常规染色和免疫组织化学技术对胎盘进行形态学观察、分析。结果Normoxia组血清维生素D代谢活性物25(OH)2D3含量低于Hypoxia组,差异有统计学意义(P<0.05),即Hypoxia组代谢水平加快;Real-time qPCR结果显示,在低氧条件下,肝的CYP2R1基因表达量上调(P<0.05),肾的CYP27B1基因表达量上调(P<0.05),肾的CYP24A1基因表达量下调(P<0.05),胎盘的CYP2R1、CYP27B1基因表达量在两组无明显差异(P>0.05);胎盘的免疫组织化学结果显示,与Normoxia组相比,Hypoxia组CYP2R1、CYP27B1蛋白在胎盘的表达增加(P<0.05),而CYP24A1蛋白表达下降(P<0.05),且三种蛋白主要在胎盘滋养层细胞中表达;从胎盘染色切片的结果可知,Normoxia组和Hypoxia组在胎盘的形态上无明显改变。结论低氧可加快妊娠母体维生素D的代谢,其机制可能是由于低氧增加肝、肾、胎盘维生素D的代谢,同时破坏CYP24A1介导的维生素D负反馈机制;胎盘滋养层细胞中存在维生素D代谢系统和自分泌调节系统,且滋养层细胞可能是妊娠母体1,25(OH)2D3的来源。

血清CYP2R1含量对慢性乙肝患者病毒载量及抗病毒的疗效研究

目的探讨维生素D3代谢酶CYP2R1含量对慢性乙型肝炎患者HBVDNA载量及抗病毒疗效的影响。方法收集我院慢性乙型肝炎患者100例。根据患者中位血清CYP2R1含量(26.5 ng/L)分为CYP2R1高浓度组50例和CYP2R1低浓度组50例。2组患者给予恩替卡韦抗病毒治疗12个月,于治疗前、治疗期间第6个月和第12个月时检测患者血清肝功能、乙肝病毒学等相关指标。采用常规生化仪测定血清肝功能,ELISA法测定血清CYP2R1含量,荧光定量聚合酶链反应技术检测HBV DNA含量。结果 2组患者治疗前、治疗6个月、治疗12个月谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TBiL)水平依次降低(P<0.05);病毒载量HBV DNA依次降低。治疗前各指标差异均无统计学意义;治疗12个月时,CYP2R1高浓度组患者的病毒载量HBV DNA均低于CYP2R1低浓度组(P<0.05)。结论血清CYP2R1可能通过调节维生素D合成参与机体调控乙型肝炎病毒的复制;高水平CYP2R1提示抗病毒疗效较好。

小鼠CYP2R1的异源表达及其对癌细胞增殖的差异性作用

细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一类血红素氧化酶。细胞色素P450家族2亚家族R成员1(cytochrome P450 family 2 subfamily R member 1,CYP2R1)是一种主要在肝组织中表达的维生素D羟化酶。目前,对于小鼠CYP2R1蛋白质的结构、物化特性和病理机制的理了解仍十分有限。本研究结合基因克隆和生物信息学分析,获得小鼠CYP2R1基因CDS序列及其生物学特征。随后,利用pcDNA3.1-CYP2R1真核表达载体,通过细胞划痕、MTT分析、real-time qPCR方法检测异源表达CYP2R1对肺癌细胞A549、胃癌细胞7901、肝癌细胞HepG2以及正常细胞HEK293T细胞的迁移、增殖和细胞周期基因表达的影响,探明其对癌细胞增殖的作用。结果显示,由C57BL/6小鼠肝组织的CYP2R1基因,序列长度1506 bp,其中,CDS 468 bp。其编码的155个氨基酸,与其他11个物种间的同源性均较高,其三级结构与人CYP2R1略有不同。构建的pcDNA3.1-CYP2R1真核表达载体,可在体外培养细胞中提高CYP2R1基因mRNA表达105倍以上,蛋白质水平提高约30倍。值得注意的是,异源表达CYP2R1在癌细胞增殖中的作用具有差异性,其中,CYP2R1通过显著降低细胞周期蛋白基因CyclinD1(P<0.05)和Caspase3(P<0.01),而抑制7901细胞的增殖。该研究结果为进一步探索CYP2R1的生物学作用,特别是在分析其对癌细胞增殖方面提供了基础研究数据,并为进一步明确CYP2R1在癌症相关治疗中的重要意义奠定了理论基础。

血清CYP2R1对核苷类似物/IFN-α治疗CHB疗效的预测价值

目的 探讨血清细胞色素P450家族2亚家族R成员1(CYP2R1)水平对核苷类似物(NAs)/干扰素-α(IFN-α)治疗慢性乙型肝炎(CHB)疗效的预测价值。方法 选取78例既往接受NAs治疗的CHB患者为CHB组,均给予聚乙二醇干扰素(Peg-IFN-α-2a)治疗48周(前8周联用恩替卡韦),根据抗病毒疗效分为应答组和非应答组;另选取40例健康志愿者为对照组。比较CHB组与对照组、应答组与非应答组CYP2R1水平,ROC评估CYP2R1预测抗病毒疗效的价值。结果 CHB组治疗前血清CYP2R1低于对照组,治疗12、24周应答组CYP2R1高于非应答组(P<0.05)。Logistic回归分析显示治疗前HBV DNA载量、25(OH)D3及治疗12、24周CYP2R1水平是影响抗病毒疗效的独立危险因素(P<0.05)。治疗12周CYP2R1预测抗病毒疗效的ROC曲线下面积(AUC)为0.673,灵敏度为60.42%,特异度为70.00%,治疗24周分别为0.774、72.92%、83.33%,治疗24周较12周血清CYP2R1预测抗病毒疗效效能高(P<0.05)。结论 NAs/IFN-α治疗过程中CHB患者CYP2R1水平变化与IFN-α抗病毒疗效有关,治疗24周的CYP2R1水平可作为预测IFN-α抗病毒疗效敏感指标。

慢性乙型肝炎患者肝组织中维生素D受体表达与肝损伤的相关性

目的:研究慢性乙型肝炎患者肝组织维生素D受体(VDR)的表达及其下调机制。方法:选取60例慢性乙型肝炎患者作为研究组,按肝组织学结果分成3组,每组均20例。F1组:肝纤维化分级为1级;F2组:肝纤维化分级为2级;F3组:肝纤维化分级为3级。对照组选取20例因其他疾病行肝脏手术切除的标本。所有病例均检测HBVDNA和生化学指标,免疫组化染色检测VDR、CYP2R1、CYP27A1的表达。结果:对照组与慢性乙肝组比较,VDR在胆管上皮细胞的表达差异无统计学意义(P>0.05)。VDR、CYP2R1和CYP27A1在肝细胞的表达慢性乙肝组比对照组显著减弱(P<0.05)。在慢性乙肝组CYP2R1和CYP27A1相比VDR的表达显著减弱(P<0.05)。在F1、F2、F3组间3种受体的表达无统计学差异(P>0.05)。在慢性乙肝组VDR的表达与CYP2R1的表达呈显著正相关(P<0.05),与HBVDNA水平呈负相关(P<0.05)。结论:VDR在慢性乙肝患者肝细胞的表达与对照组相比显著下降,表达强弱与CYP2R1呈明显的正相关,与HBVDNA呈负相关。

孕前超重/肥胖对人体胎盘和小鼠相关组织维生素D代谢酶的影响

目的本研究旨在探讨孕前超重/肥胖是否会影响人胎盘和小鼠相关组织中维生素D代谢酶的表达。方法(1)99名正常体重女性(18.5 kg/m^(2)≤BMI<23.9 kg/m^(2))和48名孕前超重/肥胖妇女(BMI≥24.0 kg/m^(2))参与本横断面研究,产妇和新生儿信息通过问卷获得。孕妇自然分娩,分娩后采集胎盘样本。(2)将4w龄雌性C57BL/6J小鼠采用对照饮食(Ctrl)或高脂饮食(HFD)喂养10w。根据其体重比Ctrl组平均值大的百分比,将HFD喂养的小鼠分为肥胖抵抗(DIR,<10%)、超重(DIW,10%~20%)和肥胖(DIO,>20%)组,于PND21处死。检测人鼠血浆总25羟基维生素D[25(OH)D],人胎盘和小鼠胎盘和肝脏维生素D代谢酶基因和蛋白质表达水平。结果与正常体重相比,孕前超重/肥胖的孕妇血浆中总25(OH)D和1,25(OH)_(2)D_(3)的浓度显著降低。此外,孕前超重/肥胖与脐带血浆中1,25(OH)_(2)D_(3)浓度有相关性。孕前超重/肥胖胎盘中1a羟化酶(CYP27B1)、转运受体(LRP2-CUBN)和维生素D受体(VDR)的表达降低,而24羟化酶蛋白(CYP24A1)的表达呈相反趋势。在小鼠中,DIR、DIW、DIO的母体血浆中总25(OH)D和1,25(OH)_(2)D_(3)的浓度明显低于Ctrl;DIO组胎鼠血浆总25(OH)D浓度明显低于Ctrl组;HFD母体肝脏25羟化酶(CYP2R1)、VDR以及肾脏和胎盘中的CYP27B1、LRP2、CUBN、VDR的表达显著降低,CYP24A1的表达显著增加。胎鼠的结果与母鼠的结果相似。结论孕前超重/肥胖对人体胎盘和小鼠相关组织的维生素D代谢酶(CYP2R1、CYP27B1、CYP24A1、LRP2-CUBN、VDR)表达有影响,这可能是超重/肥胖孕妇和胎儿维生素D水平较低的原因。

抗坏血酸联合维生素D_3对豚鼠体内1,25-(OH)_2D_3水平和溃疡性结肠炎影响

目的探讨抗坏血酸(AA)联合维生素D_3(VD_3)对豚鼠体内1,25-(OH)_2D_3水平和溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法随机将32只豚鼠按体重分为4组,每组8只,对照组(120 mg AA+2.8μg VD_3/kg)、模型组(120 mg AA+2.8μg VD_3/kg)、高、低剂量AA组(240 mg AA+2.8μg VD_3/kg、8 mg AA+2.8μg VD_3/kg);每组豚鼠均进食不含AA和VD的特殊饲料,7W后,对照组豚鼠继续饮用蒸馏水,其他3组豚鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,3 d后处死豚鼠,检测相关指标。结果与对照组比较,模型组豚鼠结肠DAI评分、大体形态评分和组织病理学评分升高,血清25-(OH)D_3、1,25-(OH)_2D_3水平降低,肝脏CYP2R1和肾脏CYP27B1表达下降,血清IL-6和TNF-α水平[分别为(80.21±6.22)、(174.08±11.04)ng/m L]升高;与模型组比较,低剂量AA组结肠DAI评分和大体形态评分升高,血清25-(OH)D_3水平降低,血清IL-6和TNF-α水平[分别为(93.23±4.76)、(208.46±14.15)ng/m L]升高;与低剂量AA组比较,高剂量AA组结肠DAI评分和大体形态评分下降,血清25-(OH)D_3、1,25-(OH)_2D_3水平升高,肝脏CYP2R1和肾脏CYP27B1表达升高,血清IL-6和TNF-α水平[分别为(75.20±3.85)、(167.83±11.85)ng/m L]降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AA在适宜范围内能够促进VD_3更充分地羟化为活性形式1,25-(OH)_2D_3,AA联合VD_3对DSS诱导的豚鼠UC具有一定干预作用。