DEPDC1B结合p65在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及机制研究

目的 研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及相关机制。方法 分别将过表达DEPDC1B的质粒(oe-flagDEPDC1B)与对照质粒(oe-NC)转染至H22肝癌细胞系中,采用蛋白质印迹法检测flag和DEPDC1B蛋白表达水平,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。通过flag抗体富集flag-DEPDC1B结合蛋白,通过质谱进行鉴定,并对免疫共沉淀物进行关键蛋白验证。在oe-flag-DEPDC1B转染细胞中加入p65抑制剂Helenalin,采用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。分别将oe-flag-DEPDC1B和oe-NC转染细胞注射至C57/B6小鼠皮下,注射后2周开始监测小鼠肿瘤体积,注射后5周处死小鼠。分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白质印迹法和ELISA法检测肿瘤组织中DEPDC1B、p65、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果 与oe-NC组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B组细胞中DEPDC1B蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显著增强(P均<0.05)。flagDEPDC1B可结合关键蛋白p65,免疫沉淀物中可以检测到p65蛋白。与oe-NC组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B组细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平均显著升高(P均<0.05)。与oe-flag-DEPDC1B组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B+Helenalin组细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平均显著降低,细胞增殖能力均显著减弱(P均<0.05)。在荷瘤小鼠中,与oe-NC组小鼠比较,oe-flag-DEPDC1B组小鼠的肿瘤体积增长更快,肿瘤组织中DEPDC1B、p65、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平均显著升高(P均<0.05)。结论 DEPDC1B可通过结合NF-κB信号通路中关键蛋白p65激活NF-κB信号通路,促进肝癌生长。

肝细胞癌组织中DEPDC1B和KIF23的表达及其预后预测价值

目的探究肝细胞癌(HCC)组织中DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)和驱动蛋白家族成员23(KIF23)的表达及其预后预测价值。方法选择2018年3月至2019年3月湖南中医药高等专科学校附属第一医院诊治的126例HCC患者作为研究对象,收集其HCC组织、癌旁组织及临床资料。采用免疫组织化学法检测组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达情况。分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中HCC组织和癌旁组织中DEPDC1B和KIF23的mRNA表达水平差异。分析HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达与患者临床病理特征的相关性。采用Kaplan-Meier曲线(Log-rank检验)分析DEPDC1B和KIF23的蛋白表达与患者预后的关系。采用单因素及多因素COX比例风险模型分析HCC患者预后的危险因素。结果TCGA数据分析结果显示,HCC组织中DEPDC1B和KIF23的mRNA相对表达量均显著高于癌旁正常肝组织(1.861±1.271比0.314±0.116,1.652±1.089比0.218±0.157,P均<0.0001)。HCC组织中DEPDC1B阳性表达主要位于细胞质和细胞膜,KIF23阳性表达主要位于细胞质和细胞核。HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达阳性率均显著高于癌旁组织[71.43%(90/126)比10.32%(13/126),χ^(2)=97.355,P=0.000;75.40%(95/126)比11.90%(15/126),χ^(2)=103.252;P=0.000]。HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达均与肿瘤分期、组织学分级及有无血管侵犯有关(P均<0.05)。HCC组织中DEPDC1B与KIF23的mRNA表达呈显著正相关(r=0.913,P=0.000),DEPDC1B与KIF23的蛋白表达亦呈显著正相关(Rs=0.811,P=0.000)。DEPDC1B阳性表达组的3年累积生存率显著低于DEPDC1B阴性表达组(χ^(2)=4.433,P=0.035)。KIF23阳性表达组的3年累积生存率显著低于KIF23阴性表达组(χ^(2)=6.125,P=0.013)。肿瘤分期Ⅱ~Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级、血管侵犯、DEPDC1B阳性表达及KIF23阳性表达均是HCC患者预后的独立危险因素。结论HCC组织中DEPDC1B和KIF23的表达上调,两者均与肿瘤分期、组织学分级及有无血管侵犯有关,DEPDC1B、KIF23阳性表达均是HCC患者预后的独立危险因素。

宫颈癌及宫颈癌前病变组织中DEPDC1、miR-216a-5p的表达及其与高危型HPV感染的相关性

目的探究DEP结构域蛋白1(DEPDC1)、miR-216a-5p在宫颈癌及宫颈癌前病变组织中的表达及其与高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的相关性。方法选取2020年12月至2022年4月汉中市中心医院妇科收治的94例宫颈病变患者为研究对象,其中62例宫颈癌前病变患者的宫颈病变组织作为癌前病变组,32例宫颈癌患者的癌组织作为宫颈癌组。同期选择因患子宫肌瘤行子宫全切患者的30例正常宫颈组织作为对照组。采用q RT-PCR检测DEPDC1、miR-216a-5p的表达水平;采用免疫组化法测定DEPDC1蛋白的表达水平;采用Pearson法分析宫颈组织中DEPDC1与miR-216a-5p表达水平的相关性,以及DEPDC1、miR-216a-5p表达水平与癌前病变组和宫颈癌组HR-HPV感染的相关性。结果与对照组比较,癌前病变组、宫颈癌组DEPDC1的阳性表达率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。其阳性表达率分别为36.67%、40.32%、100.00%。随着宫颈病变程度的增加,DEPDC1的水平显著升高(1.02±0.21、1.42±0.23、1.78±0.25),miR-216a-5p水平显著降低(1.01±0.11、0.85±0.12、0.68±0.13),HR-HPV感染率显著增加(6.67%、91.94%、100.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析结果显示,癌前病变组、宫颈癌组患者宫颈组织中DEPDC1与miR-216a-5p表达水平呈负相关(r=-0.442,P<0.001)。宫颈组织中DEPDC1表达水平与癌前病变组、宫颈癌组患者HR-HPV感染呈正相关(r=0.296,P=0.004),miR-216a-5p表达水平与癌前病变组、宫颈癌组患者HR-HPV感染呈负相关(r=-0.252,P=0.014)。结论癌前病变和宫颈癌患者宫颈组织中DEPDC的表达水平显著升高,miR-216a-5p水平显著降低,两者与HR-HPV感染有关。

DEPDC1B在肝癌增殖、迁移和上皮间质转化中的作用及其临床相关性研究

目的:研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)对肝癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化的作用以及在临床中的相关性。方法:收集39例肝癌肿瘤组织及其癌旁组织,qRT-PCR检测DEPDC1B表达水平并分析与临床病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier数据库分析DEPDC1B表达水平与临床预后的相关性。采用qRT-PCR检测L-02正常肝上皮细胞和HepG2肝癌细胞DEPDC1B表达水平,Western Blot检测DEPDC1B、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。将si-DEPDC1B和si-NC转染至HepG2细胞,采用qRT-PCR检测DEPDC1B表达水平,Western Blot检测DEPDC1B、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平,采用CCK8和集落形成实验检测细胞增殖水平,Transwell和细胞划痕实验检测细胞迁移水平。结果:与癌旁组织相比,肿瘤组织中DEPDC1B表达水平升高,DEPDC1B高表达与肿瘤分期和淋巴结转移相关,与治疗后的不良预后相关。与L-02细胞相比,HepG2细胞DEPDC1B表达升高,N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低。与si-NC组比较,si-DEPDC1B组DEPDC1B表达降低,细胞增殖、迁移水平降低,N-cadherin蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高。结论:DEPDC1B可以促进肝癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化,临床上DEPDC1B高表达与肿瘤晚期、淋巴结发生转移以及不良预后相关。

DEPDC1B与CDK1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理意义

目的探讨含DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)与周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)、甲状腺良性病变及癌旁正常组织中的表达,分析DEPDC1B和CDK1表达在PTC中的相关性及临床病理意义。方法收集66例PTC、40例良性病变及56例癌旁正常组织,采用免疫组化检测DEPDC1B与CDK1在PTC、良性病变及癌旁正常组织中的蛋白表达情况,分析DEPDC1B和CDK1的表达水平与PTC临床病理特征及DEPDC1B和CDK1之间表达的相关性。结果DEPDC1B和CDK1在PTC中呈高表达,在良性病变和癌旁组织中呈低表达,差异有统计学意义(P<0.05);DEPDC1B高表达率在肿瘤多灶发生病例中明显高于单灶发生病例,在肿瘤直径较大者中明显高于较小者(P均=0.027);CDK1的高表达率在肿瘤直径较大者中明显高于较小者(P均=0.030);在PTC中DEPDC1B与CDK1的表达呈现正相关(P=0.000)。结论DEPDC1B和CDK1在PTC组织中高表达,对区分甲状腺良性病变与PTC具有一定意义;DEPDC1B与CDK1可能协同促进PTC的发展。

癌蛋白DEPDC1B的研究进展

含有DEP结构域的蛋白质1B(DEPDC1B)高表达于多种恶性肿瘤组织及细胞,其作为癌蛋白参与了多种癌症的发生发展进程,调控了不同的恶性生物学行为,包括促进肿瘤细胞的侵袭、迁移和增殖以及抑制细胞凋亡等,这与其含有的DEP、Rho GAP等结构域的功能密切相关。本文主要结合癌蛋白DEPDC1B的结构域组成,探讨其与癌症发生发展及治疗的关系,旨在为深入研究DEPDC1B在癌症中的作用机制及潜在的抗癌疗法提供参考依据。

DEPDC1在子宫内膜癌中表达上调

目的观察DEP结构域蛋白1(DEPDC1)在子宫内膜癌(UCEC)中的表达及作用。方法利用GEO和TCGA等公共数据库分析DEPDC1 mRNA在UCEC中的表达情况,以及其与临床病理参数及预后的相关性;利用组织芯片、免疫印迹和实时定量PCR检测DEPDC1在UCEC组织和细胞系中的表达;利用平板集落、CCK8法和裸鼠成瘤等实验检测DEPDC1对UCEC细胞系增殖的影响。结果DEPDC1 mRNA在UCEC中表达上调(P<0.001),其表达与UCEC临床分期(P<0.001)、组织分化程度(P<0.05)及病理类型(P<0.001)等临床病理参数显著相关;相较于DEPDC1 mRNA低表达的患者,高表达的患者疾病特异生存期(DSS)和无进展期(PFI)显著降低(P<0.01);DEPDC1在UCEC组织和细胞系中高表达,敲降DEPDC1后,UCEC细胞系的集落形成减少、细胞率降低(P<0.01)和体内成瘤能力下降(P<0.05)。结论DEPDC1在UCEC中表达上调,参与UCEC的恶性进展及影响患者预后,并在UCEC细胞系增殖中发挥重要调控作用。

DEPDC1B、NOB1水平变化与三阴性乳腺癌患者相关病理学参数的关系

目的 探讨DEP结构域蛋白质1B(DEPDC1B)、Nin-one结合蛋白(NOB1)水平变化与三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)患者相关病理学参数的关系及临床意义。方法 选取行乳腺癌根治术的81例TNBC患者设为观察组,选取同期因乳腺良性疾病行手术治疗的21例患者设为对照组。随访1年后(失访6例)根据预后情况分为预后良好者57例(生存)、预后不良者18例(病死、病情恶化或复发)。比较TNBC组织、癌旁组织、良性病变组织中DEPDC1B、NOB1表达量。分别比较不同病理学参数、不同预后患者癌组织中DEPDC1B、NOB1表达量。分析DEPDC1B、NOB1表达量与病理学参数、预后相关性。结果 TNBC组织、良性病变组织中DEPDC1B、NOB1表达量高于癌旁组织,且TNBC组织高于良性病变组织(P<0.05);预后不良者中DEPDC1B、NOB1表达量高于预后良好者(P<0.05);DEPDC1B、NOB1表达量与淋巴结转移、临床分期、脉管瘤栓呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05);DEPDC1B、NOB1高表达者总生存率(66.67%、65.79%)分别低于其相应低表达者86.11%、86.49%(P<0.05)。结论 DEPDC1B、NOB1在TNBC组织中呈高表达,且与临床病理学参数相关,可能用于预后评估。

邻苯二甲酸二乙酯(DEP)在罗非鱼(Oreochromisniloticus×O．aureus)体内代谢动力学和残留研究

采用反相高效液相色谱-紫外检测法,测定了罗非鱼血浆、皮肤、肌肉、心肌和大脑中邻苯二甲酸二乙酯(DEP)含量,并研究了DEP在罗非鱼体内代谢动力学和残留特征。将DEP以20mg/kg灌服罗非鱼后,取样测定不同时间点血浆和组织中的DEP浓度,并利用3p97药物动力学软件并结合Excel2003软件对实验数据进行处理和分析。结果表明,罗非鱼灌服DEP后体内吸收较快,吸收半衰期为0.12h,分布半衰期为0.27h,消除半衰期为28.09h,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)为52.05μg·h/ml,达峰时间为0.28h,达峰浓度为7.47μg/ml;同时在1、2、8、24、48、72、120、360h各点皮肤、肌肉、心肌和大脑中DEP浓度均比血浆中高,DEP在肌肉、皮肤、脑和心肌中的消除半衰期分别为111.77h、108.28h、99.00h和73.72h。代谢动力学和残留研究显示,DEP在罗非鱼体内吸收和分布较快,消除相对较缓慢。

沉默DEPDC1抑制鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移

DEPDC1(DEP domain containing 1)是一个新的肿瘤相关基因,在多种恶性肿瘤的发生发展进程中起着重要作用。我们前期工作中在鼻咽癌细胞内沉默了DEPDC1的表达,发现抑制细胞增殖并诱发细胞凋亡。本研究旨在探讨沉默DEPDC1表达后,对鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移能力的影响及其分子机制。结果显示,siRNA介导DEPDC1表达沉默后,细胞侧向运动能力、侵袭及迁移能力显著降低。qRT-PCR及Western印迹检测发现DEPDC1沉默导致EMT上游关键转录因子Twist1及间质细胞标志分子Vimentin表达显著下调。这些研究表明,鼻咽癌细胞中DEPDC1通过调节Twist1等EMT关键分子的表达在细胞侵袭转移过程中起关键作用。推测DEPDC1在鼻咽癌中高表达可能对于促进其侵袭转移具有重要作用,进而促进肿瘤发生发展,但具体分子机制仍有待更深入研究。

利用DEP和流体驱动的碳纳米管组装研究

碳纳米管在微结构上的组装是实现纳器件的关键.本论文分别采用电泳和流体驱动方法对两种不同的多壁碳纳米管进行了排布组装研究.电泳过程中频率一定时,增加电压或电泳时间,碳管沉积的密度增加;流体排布组装过程中,适当的流体速度得到较好的排布效果;较直的碳管取得更好的排布组装效果.同时根据实验结果对电泳和流体驱动两种组装方法的优势和问题进行了比较,结果表明,介电电泳组装能实现在电极间的定位组装,流体排布组装可实现较大面积的均匀排布.

中间体DEP对镀镍层性能的影响

炔胺类光亮剂与糖精的协同作用能优化镀镍效果 ,但目前对光亮剂协同作用优化镀镍工艺的研究不多。采用赫尔槽实验及正交试验讨论了次级光亮剂DEP及初级光亮剂糖精对镀镍层光泽度、整平性能及镀镍液分散能力的影响 ,并确定了合适的镀镍工艺。结果表明 ,DEP与糖精的协同作用会使镀镍层的光泽度与整平性能得到大幅提高 ,但对镀液分散能力影响较复杂。随着镀液中DEP含量与糖精含量的增加 ,镀液分散能力都是先减小后增加 ;升高温度有利于从既含有糖精又含有DEP的镀液中得到分散良好的镀层。得到DEP光亮镀镍的合适工艺条件为 :0 2～1g/L糖精、9 6～ 1 9 1mg/LDEP、温度 5 5℃。

DEP结构域的功能研究进展

DEP结构域首先是在三种蛋白(鼠蓬乱蛋白、产卵缺陷10蛋白、血小板-白细胞C激酶底物2蛋白)中发现的,是一个由接近100个氨基酸组成的蛋白模序。人类基因组中至少有67种基因编码含DEP同源结构域蛋白。目前所了解的DEP结构域具有细胞膜定位、信号转导等多种功能。因此,它在细胞的生物学功能方面发挥着重要作用。可通过发掘DEP结构域与复杂的生物系统中多种分子和基因的相互作用,进一步研究DEP结构域的功能。

离子液体[Emim]DEP对纤维素酶的影响研究

研究了[Emim]DEP、[Emim]Ac和[Bmim]Cl对3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测还原糖的影响,结果表明当离子液体浓度为0~20%（w/v,质量体积比,下同）,3种离子液体对测量结果几乎无影响。在此基础上,比较了这3种离子液体对纤维素酶活力的影响。在3种离子液体中,[Emim]DEP对纤维素酶的抑制作用最小,但其浓度不宜超过10%以获得较高的相对酶活力。随后考察了纤维素酶在[Emim]DEP中的稳定性,相对酶活力总体上随着温度的升高和保存时间的延长而下降,但当[Emim]DEP浓度为5%时,在4℃保存24h后纤维素酶的相对活力却有所提高。纤维素酶在[Emim]DEP溶液中的紫外吸收光谱表明,[Emim]DEP使纤维素酶肽链的结构发生改变,并改变了酶分子构象,导致酶分子对底物的亲和力下降,影响了纤维素酶活力。

麦草浆DEP漂白过程中污染物产生规律研究

研究了麦草化学浆DEP漂白过程中麦草浆性能变化情况,以及漂白废水中污染物生成规律,并建立了二氧化氯用量、纸浆得率等因素与漂白废水中污染物发生量的相关关系式。结果表明:随着二氧化氯用量的增加,漂白废水中CODCr、BOD5、AOX发生量都逐渐增加,并且这些污染物发生量与二氧化氯、得率和白度等有密切的关系。

烧碱-蒽醌麦草浆DEP中浓漂白研究

研究了烧碱-蒽醌麦草浆DEP中浓漂白过程中相关因素对漂白浆质量性能的影响,重点对D段和P段漂白过程的主要工艺参数进行了优化。结果表明,麦草浆进行D段漂白的适宜工艺参数为:ClO2用量1.2%,反应时间120min,反应温度85℃,初始pH值2.5;P段漂白适宜工艺参数为:H2O2用量2.5%,反应时间120min,反应温度85℃,初始pH值10.4。通过对比麦草浆DEP与CEH漂白效果得出,DEP漂白浆在白度及其稳定性、物理强度方面都具有一定的优势。

“DeP结构”的λ提取与可追踪性原则

汉语“de”字结构一直是语言学家探讨的焦点。他们主要就“de”或“de”字结构的性质、“de”的分合、“de”字短语的内部结构等进行探讨、分析,颇有争议。本文以最简方案理论框架下“DeP结构”和英语关系从句的特征核查为基本理据,指出汉语“DeP结构”和英语关系从句具有相似性,从而用形式语义学中关于英语关系从句的λ提取及其函数特征的分析来对“DeP结构”进行语义推导、演算,将“DeP结构”定性为名词性成分,并总结出可解决种种争议的最经济、最简练的“可追踪性原则”。

鱼体内环境激素DMP和DEP的检测方法

建立同时检测鲫(Carassuys auratus Linnaeus)血浆和肌肉中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二乙酯(DEP)的高效液相色谱方法,进行初步的代谢动力学研究。血浆样品经液-液萃取,肌肉样品经液-液萃取和固相小柱处理后,以乙腈∶水=40∶60(V/V)为流动相,流速1.0mL/min,采用SHIMADZU ODS柱(150mm×4.6mm;i.d.,5μm)色谱柱分离。测定鲫经口染毒后血浆和肌肉中DMP和DEP的浓度。结果表明,标准曲线线性范围为0.05~10.0μg/mL,线性关系良好(r>0.99),定量限为0.05μg/mL,回收率95%以上,日内变异系数和日间变异系数均低于15%。经口染毒48h内,鲫血浆和肌肉中均能检测到DMP和DEP的残留。该法操作简便、快速、灵敏、准确,已经初步用于鲫血浆和肌肉中DMP和DEP的代谢动力学和残留研究。

DEP暴露对鲤鱼鳃、肾生化指标及组织结构的影响

为了探讨邻苯二甲酸二乙酯(DEP)对鱼类的毒性影响,寻找生物标志物,以水和吐温80为对照,用浓度为0.125(T1)、0.5(T2)、2.0(T3)、8.0(T4)mg·L-1的DEP分别对鲤鱼暴露2 d和20 d,研究DEP对鲤鱼肾脏抗氧化防御系统、肾损伤指标和鳃能量代谢酶的影响,并利用常规组织切片和HE染色技术观察鳃、肾组织的结构变化。结果表明,与水和吐温80组相比,暴露2 d时,各DEP组的抗羟自由基能力,丙二醛(MDA)含量均无显著变化,但抗超氧阴离子自由基能力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活力及T3、T4的超氧化物歧化酶(SOD)活力,T1的过氧化氢酶(CAT)活力均显著升高,T3、T4的CAT活力却显著降低;各DEP组的肾单胺氧化酶(MAO)活力无显著变化,而鳃腺苷三磷酸酶(ATPase)及T2、T3、T4的鳃乳酸脱氢酶(LDH)活力,T3、T4的血清肌酐(CRE)含量均显著升高。暴露20 d时,T2、T3的抗超氧阴离子自由基能力,T1的SOD、GSH-PX活力及T2、T3、T4的MDA含量均显著升高,各DEP组CAT活力,T3、T4的抗羟自由基能力,T4的抗超氧阴离子自由基能力及GSH-PX、SOD活力均明显受到抑制;各DEP组鳃ATPase活力无显著变化,但鳃LDH活力及T2、T3、T4的血清CRE含量显著升高,T3、T4的肾MAO活力显著降低;组织学观察表明,此时T4的鳃,T3、T4的肾均发生了组织结构损伤。本研究为科学评价DEP的水环境生态风险、寻找生物标志物提供了科学依据。

DEP方案联合鞘注治疗儿童噬血细胞综合征中枢神经系统重症受累一例

目的提高对噬血细胞综合征合并中枢神经系统受累(CNS-HLH)临床表现的认识,做到及时诊断、积极治疗以期改善患者预后。方法分析1例重症噬血细胞综合征合并中枢神经系统受累患儿的临床资料,包括临床特点、诊疗经过及随访结果。结果及时作出CNS-HLH明确诊断,尽早给予积极治疗,减少神经系统后遗症风险,改善患者预后。结论CNS-HLH临床表现具有多样化,及时诊断需借助MRI等检测手段,一旦诊断明确,DEP方案联合鞘内注射甲氨蝶呤、地塞米松可明显改善预后。