ecp基因簇在路德维希肠杆菌AA4定殖松材线虫中的功能研究

松材线虫病生防细菌路德维希肠杆菌EnterobacterludwigiiAA4能够有效地定殖并杀死松材线虫。大肠杆菌共有型菌毛(Escherichia coli common pilus,ECP)在动植物共生与病原细菌中普遍存在,能够通过增强细菌与宿主细胞之间及生物膜群落中细菌之间的相互作用,提高共生与病原细菌的定殖能力。大肠杆菌共有型菌毛由ecp基因簇编码。为了探究ecp基因簇在菌株AA4定殖松材线虫中的功能,本研究通过BLAST比对分析,鉴定了菌株AA4中的ecp基因簇;利用Red重组技术构建了菌株AA4的ecp基因簇缺失突变体,并对上述突变体定殖松材线虫的能力与定殖相关表型进行了分析。研究结果表明,ecp基因簇缺失突变体菌毛装配能力显著减弱,运动性、生物膜形成能力以及在松材线虫上的定殖能力显著降低。因此,AA4的ecp基因簇可能通过调节菌毛装配,影响其运动性与生物膜形成能力,进而实现对菌株AA4定殖松材线虫的调控。上述研究结果将为揭示松材线虫病生防路德维希肠杆菌AA4定殖松材线虫的分子机制奠定理论基础,为松材线虫病生防微生物制剂的研发与高效应用提供科学依据。

支气管哮喘血清IgE和ECP的水平及相关性分析

目的 探讨支气管哮喘血清IgE和ECP的水平 ,并分析IgE和ECP的相关性。方法 对象为 5 4例支气管哮喘患者和 2 0例健康正常人 ,采用酶联免疫法测定其血清IgE和ECP的水平。结果 支气管哮喘血清TIgE和ECP水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;血清中TIgE含量与屋尘螨SIgE水平存在直线相关 (r =0 .2 96 ,P <0 .0 5 ) ;血清中的TIgE与ECP和屋尘螨SIgE与ECP之间并无明显相关性。结论 屋尘螨是引起支气管哮喘的重要变应原 ;血清TIgE和SIgE与ECP均无相关 ,初步解释为IgE表示患者变应体质的水平 ,但不能反映气道炎症的病理过程 ;而ECP水平可以客观地反映变应性哮喘患者体内炎性细胞激活的程度 ,可作为哮喘气道炎症监测的指标。

支气管哮喘患者血清IL-10、IL-5和ECP的变化及其意义

目的通过对支气管哮喘患者和正常对照组的血清IL-10,IL-5和ECP水平的测定以及相互关系的研究,探讨它们在支气管发病中的作用。方法应用Pharmacia UniCAP系统和ELISA方法分别测定支气管哮喘患者和正常对照组的血清ECP和IL-10、IL-5水平。结果正常对照组和发作期的支气管哮喘患者的ECP水平分别为(3.97±2.13)μg/L和(21.76±12.08)μg/L。正常对照组,支气管哮喘ECP升高组和支气管哮喘ECP正常组的血清IL-5水平分别为(10.90±4.41)pg/mL,(20.62±15.74)pg/mL和(9.24±7.16)pg/mL。正常对照组和支气管哮喘ECP升高组之间IL-5水平有显著差异(P<0.01),正常对照组和支气管哮喘ECP正常组之间IL-5水平无差异(P>0.05),支气管哮喘ECP正常组和ECP升高组之间IL-5水平有显著差异(P<0.01),ECP与IL-5明显相关,两者之间的相关系数r=0.465(P<0.01)。正常对照组,支气管哮喘ECP升高组和支气管哮喘ECP正常组的血清IL-10水平分别为(38.28±15.17)pg/mL,(22.76±15.25)pg/mL和(42.32±14.61)pg/mL,支气管哮喘ECP正常组和ECP升高组之间IL-10水平有显著差异(P<0.01)。结论支气管哮喘的发生与嗜酸粒细胞有密切的关系,ECP和IL-5可反映嗜酸粒细胞的活化程度,在支气管哮喘发作时嗜酸粒细胞处于激活状态,易于释放蛋白颗粒;IL-5对嗜酸粒细胞有调控作用。支气管哮喘组的血清IL-10水平较正常对照组低,提示支气管哮喘患者IL-10分泌减少,不能有效抑制炎症或促炎症细胞因子的合成及释放,亦即不能有效抑制炎症反应,可能是导致或加重气道炎症的原因之一。

支气管哮喘患儿血清ECP及IgE水平的测定及其临床意义

目的:探讨血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)和免疫球蛋白E(IgE)水平在儿童哮喘发病过程中的相关性及意义。方法:实验共对80名哮喘患儿及20名健康儿童血清ECP及IgE进行测定,将实验结果进行统计比较从而得出结论。结果:哮喘患儿发作期血清ECP水平明显高于稳定期、缓解期及健康儿童,三者间比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);哮喘患儿发作期IgE水平高于缓解期和健康儿童,差异均具有统计学意义(P<0.01);但与稳定期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ECP和IgE都可体现哮喘患儿的发病情况,但相比于IgE,ECP能更好地反映嗜酸性粒细胞的活化状态和气道炎症的发病情况。因此哮喘患儿血清ECP水平可作为诊断哮喘、判断病情发展状况及指导炎症治疗的可靠指标。

哮喘患儿血清IL-5、ECP的测定及相关性研究

为了探讨白介素_5(IL_5)、嗜酸粒细胞阳离子蛋白 (ECP)在儿童支气管哮喘发病机制中的作用 ,并评价其反映哮喘气道炎症的临床价值 ,收集23例哮喘急性发作患儿、22例哮喘缓解期患儿及17例正常儿童的外周血标本 ,用ELISA法测定血清IL_5的水平 ;以PharmaciaCAP系统检测血清中ECP的含量。结果 :哮喘急性发作组血清中IL_5、ECP水平明显高于缓解期组和正常组 ;且IL_5、ECP水平的升高程度与病情严重程度相关 ,两者之间呈正相关 ;而3组EOS计数差异无显著性。提示 :监测血清IL_5、ECP的动态变化 ,可以较好地反映气道嗜酸粒细胞炎症的反应过程 。

ECP在完井固井工艺中的应用与分析

为保证固井质量,胜利油田在高压井、漏失井、复杂井、多套压力层系井的完井固井工艺中采用了套管外封隔器。在使用中,不断改进结构,并研制开发新型管外封隔器,改善了密封效果,满足了复杂油藏的开发和特殊工艺完井的需要。文中综述了应用情况,分析了存在的问题,针对更加复杂的油藏和多样的完井方式,提出了研究新型结构和特殊功能的封隔器的必要性,以满足老油田深层次开发完井固井的需要。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期治疗前后诱导痰细胞分类、血ECP变化的临床分析

目的比较慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)及治疗后诱导痰细胞分类、血嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)的变化,探讨其在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用。方法收集2011年6月至2012年8月住院的95例AECOPD患者,在入院当天和治疗7天后分别通过改良的诱导痰技术诱导痰标本进行细胞分类计数和抽血留取血标本通过荧光酶免疫法测定血ECP。结果在慢性阻塞性肺疾病急性加重期,中性粒细胞和嗜酸性粒细胞比例明显高于健康人群。经治疗后中性粒细胞比例下降、巨噬细胞比例上升(P=0.00<0.05),而嗜酸性粒细胞比例、血ECP略有下降,但差异无显著性(P>0.05)。结论中性粒细胞在慢性阻塞性肺疾病急性加重期明显升高,随病情缓解而降低,嗜酸性粒细胞和血ECP并不随病情缓解而降低。提示嗜酸性粒细胞主要参与慢性阻塞性肺疾病慢性炎症过程,可能与急性加重无明显相关;中性粒细胞除参与慢性阻塞性肺疾病慢性炎症外,还与急性加重期感染有关。

针罐结合对中重度变应性鼻炎血清Eotaxin、ICAM-1及ECP表达的影响

目的:通过观察针罐结合对中重度变应性鼻炎患者血清Eotaxin、ICAM-1及ECP表达的影响,探讨针罐结合治疗变应性鼻炎的作用机制。方法:中重度变应性鼻炎患者70例,分为针罐结合组(36例)和药物组(34例),针罐结合组选取风池、迎香、曲池、血海、肺俞、脾俞等穴,针后背俞穴拔罐治疗;药物组采用布地奈德鼻喷雾剂联合西替利嗪片进行治疗,两组均治疗8周。分别于治疗前、治疗4周、治疗8周后采用ELISA法测定血清中Eotaxin、ICAM-1、ECP的含量。结果:针罐组治疗4周、8周后Eotaxin、ECP升高,ICAM-1降低(P<0.05或P<0.001),且ICAM-1下降较药物组明显(P<0.05)。结论:针罐结合治疗中重度变应性鼻炎可能与对Eotaxin、ICAM-1、ECP的调节作用有关。

中药咳喘落对实验性哮喘豚鼠ECP和sICAM-1的影响

目的 探讨中药咳喘落对哮喘豚鼠可溶性细胞间粘附分子 -1(sICAM -1)、嗜酸性粒细胞及其脱颗粒产物嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)等的影响 ,阐明咳喘落治疗哮喘抗气道变应性炎症的作用机制。方法 采用荧光酶标记法、双抗体夹心ELISA法和密度梯度细胞分离法分别测定了哮喘豚鼠血浆中ECP ,sICAM -1的含量和肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞分类计数。结果 哮喘豚鼠血浆中ECP ,sICAM -1的含量以及肺泡灌洗液中细胞总数和低密度嗜酸性粒细胞数均显著高于正常组 (P <0 .0 1) ,经咳喘落和地塞米松治疗后显著下降 (P <0 .0 1) ,接近正常水平 (P >0 .0 5 )。结论 咳喘落通过调节白细胞介素 -5的水平 ,抑制嗜酸性粒细胞在气道内募集及其毒性颗粒蛋白的释放 ,从而发挥它抗气道变应性炎症的作用。

灭活卡介苗经皮接种治疗婴幼儿哮喘对IgE ECP IFN-γ IL-4水平的影响

目的 为进一步探讨灭活卡介苗治疗婴幼儿哮喘的免疫学作用机制 ,应用灭活卡介苗经皮接种 ,观察患儿机体IgE、嗜酸性细胞阳离子蛋白 (ECP)、IFN γ、IL 4的水平变化及改变程度。方法 将哮喘患儿随机分为常规治疗组 (常规组 )与灭活卡介苗治疗组 (卡介苗组 ) ,进行 6个月的治疗后 ,观察患儿在治疗前后的IgE ,ECP ,IL 4 ,IFN γ的变化 ,另设 2 0例正常儿童作为对照组。结果 ①治疗前卡介苗组和常规组IgE ,ECP与IL 4均高于对照组 ,IFN γ低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;卡介苗组与常规组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;②卡介苗组治疗后ECP与IL 4低于治疗前 ,IFN γ较治疗前有升高 ,其差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,IL 4和IFN γ呈明显负相关 ,且IFN γ与IL 4的变化各自均有明显的线性关系。IgE在治疗前后无显著性差异 (P >0 .0 5 )。常规组治疗前后IgE ,ECP与IL 4水平差异无显著性 ,但IFN γ水平治疗后增加 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 灭活卡介苗治疗能刺激婴幼儿哮喘患儿IFN γ生成增多 ,下调IL 4水平 ,可能与干预治疗能诱导TH1细胞的优势分化 ,调节TH1 TH2平衡有关 ;同时 ,能降低ECP水平 ,减轻气道慢性炎症反应 ;但短期内对IgE水平未发现有显著影响。

支气管激发试验、FeNO及诱导痰ECP在哮喘中的相关性及FeNO、诱导痰ECP诊断价值

目的 探讨哮喘患者中支气管激发试验、FeNO、诱导痰中的ECP相关性及FeNO、ECP诊断哮喘的临床价值。方法 收集2014年2月至2016年2月我院疑似支气管哮喘患者160例（最终诊断哮喘92例,非哮喘68例）,测定诱导痰嗜酸性粒细胞阳离子蛋白、呼出气一氧化氮水平,行肺通气功能、支气管激发试验检查。结果 FeNO水平与诱导痰ECP呈正相关（r=0.669,P=0.000）;FeNO水平与支气管激发定量试验呈负相关（r=-0.759,P=0.000）;诱导痰ECP与支气管激发定量试验呈负相关（r=-0.909,P=0.000）。通过ROC曲线分别评价FeNO、诱导痰ECP诊断支气管哮喘的价值,其约登指数的最大值分别为：59.1%、76.0%,最佳截断值分别为：42.2ppb、98.05μg/l,灵敏度分别为82.6%、84.8%,特异度分别为76.5%、91.2%,阳性预测值分别为82.6%（95%CI73.3%-89.7%）、92.9%（95%CI85.1%-97.3%）,阴性预测值分别为：76.5%（95%CI64.6%-85.9%）、81.6%（95%CI71.0%-89.5%）,曲线下面积分别为0.850、0.956（P〈0.05）。结论 哮喘患者中,支气管激发试验、FeNO、诱导痰ECP水平有显著相关性。支气管激发试验是公认的哮喘诊断的客观依据,FeNO、诱导痰ECP两者对哮喘的诊断均有较高价值,且诱导痰ECP诊断哮喘的价值优于FeNO,可作为哮喘诊断的重要辅助工具,但需要注意两者尚有临床局限性。

过渡金属体系非线性光学性质计算的ECP基组研究

有效核势(ECP)方法是计算含有过渡金属体系的电子结构及物理性质的有效方法.本文比较了一系列典型的ECP基组对计算含过渡金属体系非线性光学性质精度的影响.分别在HF,MP2和DFT理论水平上对过渡金属元素使用不同的ECP基组,计算了几个过渡金属有机化合物的静态一阶超极化率β0.研究结果表明使用有效核势计算含过渡金属体系时,核电子的选取是提高计算精度的前提,ns和np电子应该和nd电子一同作为价电子处理;对于重原子,必须考虑自旋-轨道耦合相对论效应.经过综合评估,认为使用Stuttgart/Dresden赝势的ECP基组,MHF,在计算含有过渡金属体系非线性光学性质方面是比较好的基组;StuttgartRSC1997和SBKJCVDZ相对而言是较好的基组;基组Lanl2dz,Hay-WadtMB(n+1)和Hay-WadtVDZ(n+1)由于没有考虑自旋-轨道耦合,计算精确度次之;而基组CRENBL和CRENBS计算的偏差要大一些,尤其是CRENBS基组由于价电子选择得太少而导致与实验值的偏差最大.

变应原特异性IgE抗体和ECP测定在哮喘中的意义

目的 通过对支气管哮喘患者变应原特异性IgE抗体和血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白（eosinophilcationic protein,ECP）水平的测定,探讨其在哮喘发病中的作用。方法 应用 Pharmacia UniCAP系统测定48例支气管哮喘患者血清吸入性变应原特异性IgE抗体和ECP水平。结果 48例患者中变应原阳性者26例,占54.17％,阴性者22例,占45.83％;哮喘患者变应原阳性组ECP高于正常者的百分比明显高于阴性组。结论 支气管哮喘的发生中有相当一部分与吸入变应原有密切的关系;外源性哮喘患者血液中嗜酸粒细胞处于激活状态,易于释放蛋白颗粒。

基于“肺与大肠相表里”理论观察针刺对支气管哮喘患者外周血EOS、ECP的影响

目的基于"肺与大肠相表里"理论,通过针刺肺经和大肠经经穴,观察针刺对支气管哮喘患者外周血EOS、ECP的影响。方法采取随机数字表方法,将符合纳入标准的52例支气管哮喘慢性持续期中度患者按1:1:1:1的比例分入肺经穴组、大肠经穴组、肺大肠经穴组、对照组。对照组按需吸入硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂(万托林),每次1喷。肺经穴组、大肠经穴组和肺大肠经穴组在对照组的基础上针刺相应腧穴。观察治疗前后各组患者外周血EOS和ECP的变化。结果肺经穴组和肺大肠经穴组治疗后外周血EOS计数与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。肺经穴组和肺大肠经穴组治疗后外周血EOS计数与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。肺经穴组治疗后外周血EOS计数与大肠经穴组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。4组患者治疗后血清ECP与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。肺经穴组、大肠经穴组、肺大肠经穴组治疗后血清ECP与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论针刺肺经经穴、肺大肠经经穴均能降低外周血EOS计数和血清ECP水平,针刺大肠经经穴能降低血清ECP水平。

全橡胶ECP在阶梯式水平井完井固井中的应用

为了开采复杂油藏,采用了阶梯式水平井完井方式。阶梯式水平井完井工艺要求阶梯注水泥封固油、水层和阶梯筛管完井,而普通管外封隔器(ECP)不能应用于水平井的选择性完井。通过改进封隔器结构、选用压差式分级箍和自动灌浆单向阀,调整不同压力级别,选择和改进套管工具附件,完善筛管顶部注水泥工艺,取得了特殊完井固井成功,满足了选择性完井和多方式开采的需要,也解决了阶梯式水平井完井底部低压易漏油层水泥浆污染和水泥浆固死筛管问题。可以进一步推广应用到其他油田复杂油藏的开发中。

PPD反应与发作期哮喘患儿ECP IgE及细胞因子表达的关系

目的 探讨PPD反应与发作期哮喘患儿ECP,IgE及细胞因子表达的关系。方法 实验分健康对照组和哮喘发作组,均进行结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验。观察PPD反应与哮喘临床症状、肺通气功能测定。血清ECP、IgE等的关系以及PPD试验后哮喘患儿外周血IFN-γ,IL-4,IL-12P40 mRNA的表达。结果 哮喘患儿PPD阴性者(24/32例)明显多于阳性者(8/32例),且PPD反应阴性患儿哮喘中/重度发作(16/24例)较PPD阳性患儿(2/8例)多,P<0.05。PPD阴性的哮喘患儿血嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)及IgE较PPD阳性的哮喘患儿明显增高(P<0.05)。哮喘患儿PPD试验后IL-12 P40 mRNA,IFN-γ mRNA无明显变化,而IL-4 mRNA升高较对照组明显(P<0.05),致IFN-γ/IL-4 mRNA比值下降。结论 PPD反应阴性的哮喘患儿可能存在着细胞免疫功能低下。PPD正向免疫刺激作用在哮喘患儿中受到抑制。 [中国当代儿科杂志,2003,5(1):20—22]

中医分期辨治对咳嗽变异性哮喘患儿血清IgE及ECP的影响

目的观察中医分期辨治对咳嗽变异性哮喘(CVA)患儿血清免疫球蛋白E(IgE)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平的影响,并探讨IgE和ECP检测的临床意义。方法将符合本研究标准的CVA患儿60例,随机分为治疗组和对照组各30例。治疗组(中药组)发作期给予温肺化痰饮,缓解期给予补肺健脾饮;对照组(西药组)服用孟鲁司特钠,发作期加服氨茶碱治疗。疗程3个月。观察治疗前后IgE和ECP的变化。结果治疗组血清IgE较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),且优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);两组血清ECP水平较治疗前均有明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论中医分期治疗CVA患儿有较好的疗效,其作用机制可能与降低血清IgE与ECP有关。

温阳平喘颗粒对支气管哮喘患者血清、诱导痰嗜酸性粒细胞、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、ACT评分的影响研究

目的观察温阳平喘颗粒对慢性持续期哮喘患者血清、诱导痰嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、ACT评分的影响。方法 75例患者随机分为3组,各25例。中药组给予温阳平喘颗粒,联合组加用舒利迭,西药组吸入舒利迭治疗,3组疗程均为4周。结果联合组总有效率92.00%、中药组总有效率88.00%、西药组总有效率88.00%,3组总有效率差别不大(P>0.05)。治疗后联合组、中药组、西药组血清EOS均较治疗前下降(均P<0.01);联合组血清ECP水平较治疗前下降(P<0.01),而中药组、西药组血清ECP较治疗前差别不大(均P>0.05);治疗后各组血清EOS、ECP指标水平差别不大(均P>0.05)。治疗后3组痰液EOS、ECP指标较治疗前降低(P<0.01);治疗后联合组EOS、ECP降低程度优于西药组(P<0.05),联合组ECP指标高于中药组(P<0.05);中药组EOS指标改善优于西药组(P<0.05),ECP指标中药组与西药组比较无明显改善(P>0.05)。各组ACT评分较治疗前均改善(P<0.01),治疗后各组组间ACT评分比较,差别不大(P>0.05)。结论温阳平喘颗粒能减轻哮喘患者气道炎症和降低气道高反应性,其机制可能与抑制嗜酸性粒细胞、阳离子蛋白分泌有关。

儿童哮喘患者血清Eotaxin、ECP的测定及其临床意义

目的探讨嗜酸粒细胞趋化酞(Eotaxin)、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)在儿童支气管哮喘发病机制中的作用,并评价其反映哮喘气道炎症的临床价值。方法收集23例哮喘急性发作患者、22例哮喘缓解期患者及17名健康儿童的外周血标本,用ELISA法测定血清Eotaxin的水平。以PharmaciaCAP系统检测血清中ECP的含量。结果哮喘急性发作患儿血清中Eotaxin、ECP水平明显高于缓解期患儿和健康对照组,Eotaxin、ECP水平的升高程度与病情严重程度相关,且两者相互之间呈正相关。结论Eotaxin在哮喘的发病过程中对气道的嗜酸粒细胞炎症有影响作用。ECP可作为支气管哮喘气道炎症发生发展的重要指标之一。动态监测血清Eotaxin、ECP的变化,可以较好地反映气道嗜酸粒细胞炎症的反应过程。

LTE4和鼻咽分泌物ECP对毛细支气管炎治疗和预后的影响

目的探讨尿白三烯E4(LTE4)和鼻咽分泌物嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿治疗和预后的影响。方法选取2014年1月至2015年3月保定市第二中心医院儿科住院RSV毛细支气管炎患儿79例作为研究对象,设为RSV毛细支气管炎组,均采用常规西医治疗,选取同期涿州市健康小儿75例作为健康对照组,均检测LTE4和ECP水平,观察治疗前、后和两组之间以上指标变化情况。结果治疗前,治疗后3、7、14、21dRSV毛细支气管炎患儿LTE4水平分别为(176.35±78.24)、(164.35±71.45)、(112.45±54.62)、(67.55±25.24)、(41.35±10.57)pg/mL;ECP水平分别为(98.56±61.57)、(88.34±43.64)、(61.46±24.66)、(50.41±17.84)、(34.68±12.54)μg/L,治疗后明显低于治疗前,治疗前、后比较差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前健康对照组受试者LTE4、ECP水平均明显低于RSV毛细支气管炎患儿,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);RSV患儿治疗末LTE4、ECP水平与健康对照组受试者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LTE4和鼻咽分泌物ECP能反映出RSV毛细支气管炎患儿的治疗进展和预后情况,在临床上有一定指导意义。