模拟高原训练对大鼠促红细胞生成素(EPO)表达的影响

为了进一步研究高原训练对大鼠红细胞生成的影响，本研究以大鼠１８Ｓ－ｒＲＮＡ为内参照，用定量反转录聚合酶链式反应（ＱＲＴ－ＰＣＲ），测定了６０只ＳＤ雄性大鼠在模拟不同海拔游泳训练后ＥＰＯ ｍＲＮＡ的变化。结果表明，所有高原对照组中ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平均高于平原对照组，其中高原３０００米组和４０００米组较平原对照组有显著性增加Ｐ＜０．０５。在高原训练组中，除了高原２０００米训练后１周组及２周组较高原２０００米对照组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平有较大幅度增加外，其余各高原训练组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平较该组对照均有不同程度的下降。其中高原３０００米训练后１周组及２周组较高原３０００米对照组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平有显著水平的下降Ｐ＜０．０５，而高原４０００米训练后１周组及２周组较高原４０００米对照组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平有非显著水平的下降Ｐ＞０．０５。

重组人促红细胞生成素(rhEPO)在老年慢性病贫血(AcD)中治疗效果的评价及疗效的预测

目的在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血（anemia of chronic disease,AcD）患者中，应用重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）治疗8周后测观察贫血改善情况，并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法32名AcD老年患者应用rhEPO治疗8周，8周内血红蛋白（hemoglobin，Hb）上升20g／L设为治疗有效。选用血清EPO水平、Hb、网状红细胞计数（reticulocyte count, Ret）、总铁结合力（total iron binding capacity,TIBC） 、血清铁（serum iron，SI）、血清铁蛋白（serum ferritin serum，SF）、可溶性转铁蛋白受体（serum transferrin receptor, sTfR）作为观测指标，观察患者8周时血红球蛋白的改变并进一步统计分析其与各观测指标变化之间的关系。结果32例老年AcD患者应用rhEPO治疗8周后Hb升高，SI、LgSF下降，sTfR升高（P〈0．05）。20例患者8周时获得预期疗效，多元回归分析提示rhEPO治疗8周后Hb改变与LgEPO及基线sTfR水平呈负相关（P〈0．05）。根据设定的评价方法将32例患者分为rhEPO治疗有效组及治疗无效组，绘制sTfR及LgEPO的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC曲线）并计算曲线下面积（area under the curve,AUC），后者具有统计学意义并且AUC更大（AUC为0．81，P〈0．05，95％CI：0．627～0．993），并通过最大Youden指数寻找到最佳诊断点为EPO≤58mIU／mL。如患者EPO≤58mIU／mL，可预测其能获得较好的治疗效果。结论rhEPO在老年慢性病贫血中可取得较好的治疗效果，患者的EPO水平是具有较高临床意义的预测参数。

肾衰养真胶囊对肾衰贫血大鼠及EPO基因表达的影响

目的:探讨肾衰养真胶囊治疗肾衰贫血大鼠的机理。方法:5/6肾切除制造肾衰贫血模型,给药四周后检测大鼠血红蛋白、全血谷胱甘肽,测定红细胞脆性;应用ELISA法检测肾衰大鼠血清EPO含量,RT-PCR半定量检测大鼠肾脏髓质EPOmRNA表达。结果:肾衰养真胶囊显著提高肾衰贫血大鼠的血红蛋白量、全血谷胱甘肽含量、血清EPO水平,能改善红细胞脆性,促进了EPOmRNA的表达。结论:肾衰养真胶囊可以纠正贫血促进大鼠肾髓质EPOmRNA的表达、提高血清EPO含量的作用,增加大鼠全血谷胱甘肽含量、提高红细胞膜稳定性,延长红细胞寿命的作用。

EPO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤NSE表达的影响

目的:观察促红细胞生成素(EPO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经元特异性烯醇化酶表达的影响。方法:7日龄SD大鼠随机分成假手术对照组、EPO治疗组、缺氧缺血(HIBD)组。造模后在不同时间点检测脑质量损伤百分比、皮层脑组织HE染色、免疫组化观察皮层神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果:与假手术对照组相比较,HIBD组大鼠脑组织病理变化明显,EPO治疗组能明显改善大鼠脑组织形态变化和脑质量损伤百分比(P<0.05);HIBD组大鼠造模48 h后可见部分NSE阳性表达出现在神经元外,造模后第4天NSE的阳性表达达到高峰;在相同时间点EPO治疗组可明显减少NSE阳性表达颗粒在神经元间隙的出现;HIBD组大鼠在造模后48h和8 d NSE阳性细胞数目均少于同日龄对照组和EPO组(P<0.05)。结论:EPO在HIBD发生早期起到神经保护的作用,减少神经元的坏死,减轻缺氧缺血导致的脑功能损伤。

长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态和EPO水平的影响

目的 :观察长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态、EPO水平的影响 ,为探讨运动性贫血发生的机理和防治方法提供依据。方法 :雄性Wistar大鼠 30只 ,随机均分为 3组 :对照组、运动组、运动 +营养补充组。运动方式为 11周递增负荷跑台训练 ,营养补剂为铁复合剂。应用组织学光镜、酶联免疫吸附法 (ELISA)观察 3组大鼠肝脏组织形态、EPO水平。结果 :运动组大鼠肝脏组织肝细胞结构模糊、多数肝细胞表现出浑浊肿胀或一定程度的水样变性 ,而运动+营养组肝脏形态基本正常。运动 +营养组肝脏组织匀浆液EPO活性水平分别高于对照组、运动组。

熟地黄水提物含药血清对HUVECs-1细胞增殖及EPO表达的影响

目的:探讨熟地黄水提物含药血清对人脐静脉内皮细胞-1(HUVECs-1)增殖的影响及其机制。方法:熟地黄水提物3,6,10 g·kg^(-1)分别给SD大鼠灌胃1周,取血制备含药血清,加入血管内皮细胞培养液。采用MTT法观察血清对HUVECs-1增殖的影响,免疫细胞化学染色和Western blot检测血清对HUVECs-1表达红细胞生成素(EPO)的影响。结果:与相同浓度的NS血清组比较,3,6 g·kg^(-1)地黄水提液含药血清组HUVEC-1吸光度显著升高(P<0.05)。免疫组化结果显示,3,6 g·kg^(-1)熟地黄水提物5%含药血清组与相同浓度NS血清组比较,3,6,10g·kg^(-1)熟地黄水提物10%,20%含药血清组与相同浓度NS血清组比较,EPO免疫反应阳性细胞平均吸光度均显著增加(P<0.05)。Western blot分析显示:与NS血清组比较,6 g·kg^(-1)熟地黄水提物相同浓度含药血清各组EPO相对条带吸光度值(IOD)均显著增高(P<0.05)。结论:中药熟地黄水提物含药血清可上调血管内皮细胞EPO表达,对血管内皮细胞有显著的促增殖作用。

模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和EPO基因表达的影响

目的 :研究模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和肾脏EPO基因表达的影响。方法 :4 8只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 :低住低练组 (LoLo) ,模拟高住低练组 (HiLo) ,高住对照组 (Hi) ,对照组 (Con) ,每组 12只。模拟高住低练组和低住低练组进行相同的训练 ,但模拟高住低练组和高住对照组每晚在相当于 2 5 0 0米海拔高度的低压舱内居留 12～ 13小时 ,对照组和低住低练组仅在正常条件下居住 ,4周后测定大鼠红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积和肾脏EPO基因表达。结果 :模拟高住低练组大鼠红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容明显高于低住低练组、高住组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,高住组红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容与对照组相比无明显差异。模拟高住低练组肾脏EPO基因表达明显高于低住低练组、高住组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,高住组、低住低练组与对照组之间无显著差异。结论 :模拟高住低练可提高大鼠血红蛋白浓度 ,促进肾脏EPO基因表达 ,EPO基因表达的增加可能是长期低氧和运动应激累积效应的结果。

藏猪促红细胞生成素(EPO)基因多态性分析

选取高海拔低氧环境饲养的藏猪、长白猪为研究对象,利用直接测序法和PCR-RFLP分子标记技术对促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)基因进行多态性分析,结果表明,藏猪EPO基因相对于长白猪存在16个转换,1个15bp片段的缺失。

加味当归补血汤对血虚小鼠EPO和GM-CSF表达的影响

目的研究加味当归补血汤对环磷酰胺诱发的血虚小鼠促红细胞生成素(EPO)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响。方法采用环磷酰胺诱导小鼠血虚,不同剂量的加味当归补血汤分别对NIH小鼠进行连续灌胃,给药10 d后收集小鼠血液、肾脏以及骨髓。测定各组小鼠血红细胞和血红蛋白数量、肾脏EPO mRNA和骨髓GM-CSF mRNA表达水平及血清EPO和GM-CSF含量。结果与模型组比较,加味当归补血汤组小鼠血红细胞和血红蛋白数量明显增加,肾脏EPO和骨髓GM-CSF的基因表达明显升高,血清EPO和GM-CSF的含量显著提高。结论加味当归补血汤能显著改善小鼠贫血,其机制可能与其明显提高EPO和GM-CSF的表达有关。

“抗运动性贫血复合剂”营养补充对运动性贫血大鼠红细胞血象和血清EPO水平的影响

为了探讨防治运动性贫血的有效方法 ,本实验通过对 Wistar大鼠实施递增负荷跑台运动 ,建立运动性贫血模型 ,观察了“抗运动性贫血复合剂”对运动性贫血大鼠红细胞血象和血清EPO水平的影响。结果表明 ,补充复合剂后贫血大鼠的血红蛋白 (Hb)、红细胞数目 (RBC)和红细胞压积 (Hct)水平显著升高 (P<0 .0 5 ) ,而血清 EPO水平无显著性变化 (P>0 .0 5 )。结果提示 ,“抗运动性贫血复合剂”可以有效地防治大鼠的运动性贫血 ,其作用机制并非提高血清

ARB和ACEI维持性血液透析患者EPO疗效比较

目的:观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗药(ARB)对维持性血液透析患者重组人红细胞生成素(EPO)疗效的影响,并与血管紧张素转换酶抑制药(ACEI)进行比较。方法:患者41例,根据所用降压药(钙离子拮抗药、ACEI 、ARB)将患者分为对照组、观察组A和观察组B,比较用药0,1,2,3及>3个月时的红细胞计数(RBC)及血红蛋白 (Hb)。结果:对照组患者在用药0,1,2,3及>3个月时的RBC及Hb逐渐增加(P<0．05);观察组A和观察组B 患者在用药0,1,2,3及>3个月时的RBC及Hb无明显变化(P>0．05)。结论:ARB和ACEI都可影响,EPO纠正贫血的疗效,但ARB在疗效是否略优于ACEI类药物,尚无确定结论。

葛根素对大鼠缺血脑组织EPO表达的影响

目的探讨葛根素对大鼠脑缺血后脑促红细胞生成素(EPO)表达的影响。方法应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注48h损伤模型;分别于缺血2h再灌注即刻、再灌注24h给予腹腔注射葛根素400mg/kg(体重),对照组腹腔注射等剂量生理盐水,每组12只大鼠。大鼠苏醒后30min及处死前分别进行神经功能评分。48h处死大鼠,每组6只石蜡切片用HE染色检测腔梗死体积,免疫组织化学检测葛根素对缺血脑组织EPO表达的影响;每组6只ELISA法检测EPO活性。结果葛根素400mg/kg(体重)腹腔注射组的脑梗死体积明显小于对照组,葛根素治疗也可减少神经功能损伤,神经功能评分均明显好于对照组。免疫组织化学结果显示:葛根素组大鼠脑缺血侧皮层区及基底区EPO阳性细胞数明显高于对照组。结论葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用。其保护作用可能与提高EPO的表达有关。

MDS患者祛铁治疗与缓解EPO抵抗的初步研究

本研究旨在探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者袪铁治疗后红细胞生成素(EPO)、血红蛋白(Hb)、重组EPO(rEPO)的变化及EPO与血清铁蛋白(SF)的相关性。检测172例MDS患者及30例健康对照者SF、EPO浓度、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、C反应蛋白(CRP)、Hb;根据CRP值对SF进行调整。对34例低危组、SF>1 000 mg/L的患者给予袪铁胺治疗,比较治疗前后SF、EPO、SI、TIBC、Hb的变化。对58例低危组、EPO<1 000 U/L的患者给予rEPO治疗,比较铁过载组与非铁过载组袪铁治疗前后EPO抵抗的发生率。结果表明:非铁过载组EPO浓度高于正常对照组(997.44±473.48 vs 467.27±238.49)(P<0.05);铁过载组EPO浓度高于无铁过载组及正常对照组(3257.59±697.19 vs 997.44±473.48;3257.59±697.19 vs 467.27±238.49)(P均<0.05);铁过载组EPO抵抗发生率高于非铁过载组(18/35 vs 2/23)(P=0.001),铁过载组MDS患者EPO与SF呈显著正相关(r=0.310)(P=0.036)。袪铁治疗后SF、SI、TIBC及EPO浓度均较治疗前明显下降(3942.38±641.82 vs 2266.35±367.31;48.61±10.65 vs 28.52±12.61;59.84±12.62 vs 33.76±15.43;3808.01±750.22 vs 1954.78±473.18)(P均<0.05),Hb升高(35±18 vs 57±21)(P=0.046),部分EPO抵抗患者恢复疗效。结论:袪铁治疗能增强贫血MDS患者对EPO反应,缓解EPO抵抗,降低EPO病理性升高,提升Hb水平,减少输血依赖。

EPO检测技术的研究进展

促红细胞生成素 ( EPO)是一种临床上广泛应用的重要药物 ,也是近年来兴奋剂检测的热点。本文主要从 EPO的产生和应用出发 ,对 EPO的结构、特性及其检测方法进行了介绍及评价 ,重点探讨了竞技体育中 EPO的检测技术 。

应用MTT比色法测定EPO体外生物学活性

EPO依赖细胞珠在EPO浓度梯度中培养72小时，再加入MTT培养5小时，离心弃上清后，加入有机溶剂溶解MTT代谢产物，以OD值对EPO浓度梯度作量效曲线，定量地测定EPO生物学活性。本法重复性好，与其它体外生物学活性测定方法所测定结果相符。

SGLT2i对2型糖尿病及肾脏保护的影响机制研究进展

钠葡萄糖转运蛋白2抑制剂(sodium glucose transporter 2 inhibitors, SGLT2i)是一类新型的肾脏靶向药物,通过抑制SGLT2受体,减少原尿中葡萄糖的吸收,增加尿糖排泄,以非胰岛素依赖的方式降低血糖。大量证据表明SGLT2i在降糖作用之外还通过调节局部和全身的肾素系统(renin-angiotensin system, RAS),胰高血糖素分泌、血管升压素分泌、促红细胞生成素生成、线粒体裂变和溶解平衡等多种方式对肾脏提供保护作用。本文作者从以上细胞分子层面以血液代谢为基础围绕SGLT2i治疗2型糖尿病及提供肾脏保护的作用进行详细论述。

牦牛EPO基因的PCR-SSCP多态性研究

以巴州牦牛、大通牦牛和九龙牦牛为对象,对促红细胞生成素(EPO)基因用PCR-SSCP方法进行了多态性检测。结果表明:大通牦牛、巴州牦牛、九龙牦牛具有较丰富的遗传多样性,表现为AA,AB和BB3种基因型,AB为优势基因型,A为优势等位基因;经χ2适合性检验,3个牦牛品种在该基因位点上均处于Hardy-Weinberg平衡状态。同时发现随着海拔高度的增加,A等位基因频率逐渐升高,BB型的频率则降低,群体杂合度和多态信息含量也逐渐降低,这种变化可能与牦牛对低氧的适应能力有一定的关系。

EPO/NGF对大鼠背根节压迫性损伤的治疗作用

目的:外源EPO/NGF通过其抗痛敏作用,抗凋亡作用及对钠离子通道的影响来探索和研究其在背根神经节(DRG)慢性压迫中的治疗作用。方法:制作多节段DRG慢性压迫大鼠模型,并给予外源EPO或NGF,进行行为学检测,测量大鼠的机械痛阈值和热痛阈值,Tunnel方法原位检测组织中细胞凋亡情况,通过免疫荧光技术,RT-PCR和Western Blot技术检测c-jun,c-fos,NGF,Nav1.8的表达情况。结果:与对照组相比,模型组的大鼠从建模第1 d起痛阈就开始下降,并持续到13 d;与模型组相比,EPO/NGF治疗组的机械痛阈值和热痛阈值得以升高,DRG神经细胞的损伤和凋亡现象减轻或者恢复。NGF的表达由于受到压迫损伤而降低,在给予外源NGF或EPO治疗后表达升高,Nav1.8的表达与NGF相一致。结论:EPO和NGF在神经系统中具有一定的抗凋亡作用,镇痛作用及促进钠离子通道Nav1.8的表达,并且痛阈的降低与Nav1.8表达下降具有一定相关性。

长期慢性低氧对牦牛和黄牛血液中HIF-2α、EPO水平及红细胞相关指标的影响

为探讨牦牛和迁饲黄牛血液中红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)、低氧诱导因子-2α(HIF-2α)、促红细胞生成素(EPO)等因子对高原适应和习服的不同特征及调控机理,按照海拔低于3 500m和高于3 500m两组采集青海地区的牦牛血样,同时采集高山迁饲黄牛(海拔2 500m)及低海拔黄牛(海拔1 300m)血液,采用全自动血液分析仪测定血液中红细胞、血红蛋白、红细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)等;采用双抗夹心酶标法测血液中EPO、HIF-2α含量。通过t检验及单因素方差分析法分析指标间的差异性,并分析各指标与HIF-2α、EPO的相关性。结果表明,海拔高于3 500m牦牛组的RBC、HB、HCT显著升高,而HIF-2α和EPO水平却未发生显著变化。与迁饲黄牛和低海拔黄牛相比,牦牛血液中的RBC明显降低,而MCH、HIF-2α和EPO显著升高。牦牛血液中EPO、RBC、HB、HCT、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关;迁饲黄牛血液中红细胞分布宽度(RDW-SD)与EPO水平呈显著相关;低海拔黄牛血液EPO、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关。推测:海拔升高引起的低氧是影响牦牛血液RBC、HB、HCT改变的主要因素;与黄牛相比,低RBC、低MCH、高HIF-2α、高EPO水平是牦牛适应低氧的主要特征,且牦牛血细胞各指标对血液中HIF-2α水平的改变更敏感。提示牦牛通过遗传进化成功适应高原环境。

检测EPO体内生物学活性的网织红细胞法的建立

介绍一种简便、有效的红细胞生成素（EPO）体内生物学活性检测方法──网织红细胞法（简称网织红法）。该法是用剂量－反应平行线法（3．3法）连续3天给小鼠皮下注射EPO，第4天原血涂片，染色后计数网织红细胞数。根据网织红细胞数来计算出EPO的效价。该法重复性好，准确性高，省时、简便、经济，是切实可行的有效方法。