目的观察苦参碱对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾小管间质基质金属蛋白酶-3(MM P-3)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(T IM P-1)和纤维联结蛋白(FN)表达水平的影响,初步探讨其对小管间质纤维化的作用机制。方法实验采用UUO肾间质纤维化模...目的观察苦参碱对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾小管间质基质金属蛋白酶-3(MM P-3)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(T IM P-1)和纤维联结蛋白(FN)表达水平的影响,初步探讨其对小管间质纤维化的作用机制。方法实验采用UUO肾间质纤维化模型作为研究模型,分为正常组、假UUO组、UUO组、福辛普利治疗组(F组)、苦参碱大剂量治疗组(E组)和苦参碱小剂量治疗组(D组)。运用免疫组化技术半定量分析实验第7、14 d各组的MM P-3、T IM P-1和FN表达水平。结果UUO组和治疗组的MM P-3表达水平第7、14 d均低于正常组和假UUO组(P<0.05),但三个治疗组的表达水平高于UUO组(P<0.05);T IM P-1和FN在正常组和假UUO组中的表达最低,而三个治疗组的表达均低于UUO组(P<0.05);MM P-3、T IM P-1和FN在E组与F组间的表达差异均无统计学意义(P>0.05);在UUO组中,MM P-3与FN、MM P-3与T IM P-1的免疫组化半定量分析均呈负相关(P<0.01)。结论苦参碱可以部分恢复小管间质MM P-3的表达水平,降低T IM P-1和FN的表达水平,从而延缓肾小管间质纤维化的进程。展开更多
目的:观察高糖高脂刺激下人肾小球系膜细胞增殖分化及FN、TGF-β mRNA和蛋白活性表达变化,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的分子机制,讨论正交配伍中最优药物组合。方法:体外培养人肾小球系膜细胞株,传代3~5代后接种于96...目的:观察高糖高脂刺激下人肾小球系膜细胞增殖分化及FN、TGF-β mRNA和蛋白活性表达变化,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的分子机制,讨论正交配伍中最优药物组合。方法:体外培养人肾小球系膜细胞株,传代3~5代后接种于96孔培养板,采用4因素3水平正交设计方案分为正常对照组,高糖高脂模型组、中药1、2、3、4、5、6、7、8、9组,以相应药物对HMCs干预24、48、72h。MTT法检测24、48、72 h各时间点HMCs增殖分化情况;以qRT-PCR法检测48 h FN、TGF-βmRNA表达;以ELISA法检测48 h FN、TGF-β蛋白活性表达。结果与结论:(1)高糖高脂环境刺激作用下HMCs及胞外基质均能够显著增殖,且在48h达到顶峰;(2)益气解毒活络中药有效成分防治DN作用机制与通过下调高糖高脂作用下HMCs TGF-β、FN mRNA及蛋白活性表达,进而抑制高糖高脂刺激HMCs增殖相关;(3)益气解毒活络中药有效成分最佳配伍为黄芪甲苷中剂量、盐酸小檗碱低剂量、水蛭素低剂量、木犀草苷低剂量。展开更多
目的探讨纤连蛋白(FN)基因和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在原发性肝癌患者肝组织中的表达及联合检测的价值。方法选取2013年1月-2015年10月衡水市人民医院肝胆外科手术切除的256例肝癌组织及癌旁组织,50例正常肝...目的探讨纤连蛋白(FN)基因和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在原发性肝癌患者肝组织中的表达及联合检测的价值。方法选取2013年1月-2015年10月衡水市人民医院肝胆外科手术切除的256例肝癌组织及癌旁组织,50例正常肝组织标本为同期非癌症患者。分别采用RT-PCR检测FN和PTEN mRNA的表达,采用Western blotting检测FN和PTEN蛋白的表达,比较肝癌组织和正常肝组织中FN和PTEN的表达差异。以FN mRNA表达、FN蛋白表达中任一为阳性,且同时PTEN mRNA表达、PTEN蛋白表达中任一为阴性,判定为联合检测肝癌阳性。采用ROC曲线评价单项检测和联合检测的诊断肝癌价值,分析联合检测与术后24个月预后的关系。结果肝癌组织FN mRNA和FN蛋白表达高于正常组织(P<0.05),肝癌组织的PTEN m RNA和PTEN蛋白表达低于癌旁组织和正常组织(P<0.05)。FN m RNA诊断肝癌的敏感性为74.22%、特异性为86.00%,FN蛋白检测的敏感性为76.92%、特异性为88.00%,PTEN m RNA检测的敏感性为72.65%、特异性为90.00%,PTEN蛋白检测的敏感性为75.00%、特异性为100.00%。联合检测的敏感性为86.72%,高于单项检测(P<0.05),特异性为82.00%,ROC曲线下面积为0.912,具有极高的诊断价值。联合检测诊断为阴性的肝癌患者术后24个月的复发率、转移率低于阳性患者(P<0.05),生存率高于阳性患者(P<0.05)。结论 FN与PTEN联合检测可用于原发性肝癌的诊断,具有极高的诊断价值,FN的高表达和PTEN的低表达可以作为评估肝癌患者预后的潜在指标。展开更多
文摘目的观察苦参碱对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾小管间质基质金属蛋白酶-3(MM P-3)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(T IM P-1)和纤维联结蛋白(FN)表达水平的影响,初步探讨其对小管间质纤维化的作用机制。方法实验采用UUO肾间质纤维化模型作为研究模型,分为正常组、假UUO组、UUO组、福辛普利治疗组(F组)、苦参碱大剂量治疗组(E组)和苦参碱小剂量治疗组(D组)。运用免疫组化技术半定量分析实验第7、14 d各组的MM P-3、T IM P-1和FN表达水平。结果UUO组和治疗组的MM P-3表达水平第7、14 d均低于正常组和假UUO组(P<0.05),但三个治疗组的表达水平高于UUO组(P<0.05);T IM P-1和FN在正常组和假UUO组中的表达最低,而三个治疗组的表达均低于UUO组(P<0.05);MM P-3、T IM P-1和FN在E组与F组间的表达差异均无统计学意义(P>0.05);在UUO组中,MM P-3与FN、MM P-3与T IM P-1的免疫组化半定量分析均呈负相关(P<0.01)。结论苦参碱可以部分恢复小管间质MM P-3的表达水平,降低T IM P-1和FN的表达水平,从而延缓肾小管间质纤维化的进程。
文摘目的:观察高糖高脂刺激下人肾小球系膜细胞增殖分化及FN、TGF-β mRNA和蛋白活性表达变化,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的分子机制,讨论正交配伍中最优药物组合。方法:体外培养人肾小球系膜细胞株,传代3~5代后接种于96孔培养板,采用4因素3水平正交设计方案分为正常对照组,高糖高脂模型组、中药1、2、3、4、5、6、7、8、9组,以相应药物对HMCs干预24、48、72h。MTT法检测24、48、72 h各时间点HMCs增殖分化情况;以qRT-PCR法检测48 h FN、TGF-βmRNA表达;以ELISA法检测48 h FN、TGF-β蛋白活性表达。结果与结论:(1)高糖高脂环境刺激作用下HMCs及胞外基质均能够显著增殖,且在48h达到顶峰;(2)益气解毒活络中药有效成分防治DN作用机制与通过下调高糖高脂作用下HMCs TGF-β、FN mRNA及蛋白活性表达,进而抑制高糖高脂刺激HMCs增殖相关;(3)益气解毒活络中药有效成分最佳配伍为黄芪甲苷中剂量、盐酸小檗碱低剂量、水蛭素低剂量、木犀草苷低剂量。
文摘目的探讨纤连蛋白(FN)基因和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在原发性肝癌患者肝组织中的表达及联合检测的价值。方法选取2013年1月-2015年10月衡水市人民医院肝胆外科手术切除的256例肝癌组织及癌旁组织,50例正常肝组织标本为同期非癌症患者。分别采用RT-PCR检测FN和PTEN mRNA的表达,采用Western blotting检测FN和PTEN蛋白的表达,比较肝癌组织和正常肝组织中FN和PTEN的表达差异。以FN mRNA表达、FN蛋白表达中任一为阳性,且同时PTEN mRNA表达、PTEN蛋白表达中任一为阴性,判定为联合检测肝癌阳性。采用ROC曲线评价单项检测和联合检测的诊断肝癌价值,分析联合检测与术后24个月预后的关系。结果肝癌组织FN mRNA和FN蛋白表达高于正常组织(P<0.05),肝癌组织的PTEN m RNA和PTEN蛋白表达低于癌旁组织和正常组织(P<0.05)。FN m RNA诊断肝癌的敏感性为74.22%、特异性为86.00%,FN蛋白检测的敏感性为76.92%、特异性为88.00%,PTEN m RNA检测的敏感性为72.65%、特异性为90.00%,PTEN蛋白检测的敏感性为75.00%、特异性为100.00%。联合检测的敏感性为86.72%,高于单项检测(P<0.05),特异性为82.00%,ROC曲线下面积为0.912,具有极高的诊断价值。联合检测诊断为阴性的肝癌患者术后24个月的复发率、转移率低于阳性患者(P<0.05),生存率高于阳性患者(P<0.05)。结论 FN与PTEN联合检测可用于原发性肝癌的诊断,具有极高的诊断价值,FN的高表达和PTEN的低表达可以作为评估肝癌患者预后的潜在指标。