春兰GLO基因的克隆和实时定量表达分析

采用RT-PCR结合RACE技术从春兰(Cymbidium goeringii)中分离到一个GLO基因。该基因含有一个630 bp的开放阅读框(ORF),共编码210个氨基酸。系统进化树分析显示,该基因属于B类MADS-box基因的PI/GLO家族,其编码的蛋白与其他植物PI/GLO类蛋白具有很高的同源性,命名为CgGLO(登录号HM106984)。实时荧光定量表达分析表明,CgGLO主要在第二轮花器官唇瓣和花瓣中表达,在萼片、子房和叶片中表达较少,在蕊柱和根中表达量最少,这种表达模式支持了van Tunen对ABC模型的修正,也显示了CgGLO基因可能在春兰花器官以及子房的形成过程中起着重要作用。

Celltiter-Glo ATP荧光活性检测在登革病毒1型中和试验中的应用

目的利用Celltiter-Glo ATP荧光活性检测方法(CTG法)在登革病毒1型(DENV1)中和试验中的实验研究,探索出新的组织培养中和试验结果判断方法。方法 DENV1病毒与抗DENV1多克隆抗体进行中和试验感染Vero细胞,选择CTG法和传统的显微镜观察法判断CPE的程度,比较两种方法对细胞半数致死量(TCID50)和中和指数的判定,确定CTG法的准确性。结果显微镜观测TCID50=5.5,CTG法TCID50=5.31;显微镜观测、CTG检测法均为10-2.1为中和终点,两种方法获得的中和指数较一致。结论 CTG法可作为DENV1细胞组织培养中和试验的结果判断,并能减少实验结果评定中的人为误差。

使用Glo Germ开展生物安全教育初探

为提高生物技术专业本科学员生物安全基本技能,在教学过程中引入Glo Germ作为可视化教学工具,直观生动地让学员在设定的实验场景中了解模拟"病菌"的传播过程,学习污染控制技术。该举措通过师生的互动,提高了本科生的生物安全意识。

乙型肝炎肝硬化中医证型与血清GLO的相关性

目的:观察乙型病毒性肝炎所致的肝硬化各中医证型与血清GLO的相关性。方法:将150例患者进行中医辨证分型并进行GLO检测。结果:常见的证型依次为湿热内蕴型、肝气郁结型、脾虚湿盛型、肝肾阴虚型、脾肾阳虚型,GLO水平在肝肾阴虚型中最低,与其他四型比较差异显著(P<0.01)。结论:血清GLO对于判断乙肝肝硬化中医证型、病情、疾病所处阶段,具有重要意义。

寻常型银屑病、全身性红斑狼疮、胰岛素依赖性糖尿病患者GLO遗传多态性检测

用琼脂糖-淀粉混合凝胶电泳技术及碘染色法对70份寻常型银屑病、74份全身性红斑狼疮、31份胰岛素依赖性糖尿病患者红细胞标本的乙二醛酶1(GLO)遗传多态性进行了检测,结果表明,上述3种疾病忠者GLO^1的频率分别为0.1214、0.0811、0.0484,与我们所测203例正常人红细胞GLO基因频率(GLO^1为0.1429)比较,差异均无显著意义。

藏医对“罗囧”病的诊断探析

“罗囧”病属于藏医学后续中阐述的七种肺病之一,是肺部疾病长期未治愈而发病的疾病,发病的机制是血液紊乱而导致血液和痰肺静脉中阻塞,患者逐渐有身体消瘦、呼吸困难、呼吸时发出尖历的声音且偶尔发热的疾病症状。虽然藏医学理论中详细阐述了“罗囧”病的病因与治疗方法,但当今的临床治疗中部分藏医生将藏医学中的“罗囧”与现代医学中的肺结核视为同一个疾病而进行对症治疗。对这两种疾病的症状与发病机制进行详细的对比发现两者的部分疾病症状有相似之处,但是两者的发病机制与轻重存在不同之处,是属于两种不同的疾病。为了明确对藏医学理论中的“罗囧”疾病的认识无误及其治疗原则,文章不仅对“囧”与“罗囧”病的疾病命名、病因、分类、症状等内容作了详细叙述,而且特别是从藏医学的思路探讨藏医中的“罗囧”疾病,及其与现代医学的肺结核疾病的性质、症状等的相似之处。通过此研究的分析我们明确发现,藏医书籍与藏医文献中提到的结核病是指旧病或迁延性疾病的总称。资料中“罗囧”疾病也是肺部疾病的缓慢而逐渐的蔓延,这个疾病的发病机制是血液紊乱,所以我们可以通过此病因来辨认和治疗它。现代医学资料中的肺结核主要是由结核杆菌紊乱所引起的,属于高度传染性的肺类疾病,故与藏医中的“罗囧”疾病不能混为一谈。

慢性乙型重型肝炎黄疸中医证型与血清γ-GLO、AFP、CHE相关性研究

目的:观察慢性乙型重型肝炎黄疸中医证型与血清γ-GLO、AFP、CHE的相关性。方法:将160例黄疸患者行中医辨证分型并进行血清γ-GLO、AFP、CHE检测。结果:常见的证型依次为湿热发黄证、瘀热发黄证、气虚瘀黄证、复合证型,γ-GLO水平与4证型组关系依次为:湿热发黄证组<瘀热发黄证组<复合证型<气虚瘀黄证组,AFP:湿热发黄证组>瘀热发黄证组>复合证型组>气虚瘀黄证组,CHE:湿热发黄证组>瘀热发黄证组>气虚瘀黄证组>复合证型组。湿热组与瘀热组比较γ-GLO、AFP、CHE水平差异有统计学意义(P<0.05),湿热组、瘀热组分别与其余2组两两比较差异有统计学意义(P<0.01),气虚组与复合组比较无差异(P>0.05)。结论:血清γ-GLO、AFP、CHE对于判断慢性乙型重型黄疸中医证型、病情、辨别疾病所处阶段具有重要意义。

两种国兰MADS-box家族B类基因PI/GLO的克隆与时空表达特性分析

为了挖掘国兰PISTILLATA/GLOBOSA(PI/GLO)基因的功能,利用生物信息学方法对两种国兰PI/GLO进行鉴定分析,并利用实时荧光定量的方法对其表达模式进行分析。结果表明,所克隆的两个PI/GLO均为MIKC型MADS-box基因,均有保守的MADS区和相对保守的K区,且与春兰(AD158461.1)同源性较高,分别为98%、99%。两个基因的登录号为:MW654194,MW654193。RT-qPCR试验分析得出,CfPI1在蕙兰各组织器官中的相对表达丰度顺次为:花萼>花瓣>唇瓣>花蕾>子房>盛花期花葶>合蕊柱,CsPI1在墨兰中的相对表达丰度顺次为:花瓣>唇瓣>花蕾>花萼>合蕊柱>子房。两个基因均在盛花期的表达远远高于花蕾期和营养生长期,且主要参与花器官的生长发育。

全球反税基侵蚀规则与税收竞争

文章研究了支柱二全球反税基侵蚀(GloBE)规则的广泛实施对于国家间以吸引投资为目的的税收竞争可能产生的影响,讨论了那些希望运用税收制度吸引外国直接投资的国家所持的观点。事实上,二十国集团/经济合作与发展组织包容性框架的成员对于通过最低税遏制国际税收竞争的目标存在分歧。一些成员的保留意见体现在GloBE制度的折中设计中,从基于经济实质的所得排除(SBIE)规则可以看出,包容性框架放弃了以商定的最低税率为企业税竞争设定底线的想法。相反,SBIE建立了一个仅适用于超额利润征税的有效底线(15%)。同时,由于来源国可能通过合格国内最低补足税自行征收最低税,理论上,基于该底线的税收竞争可能会持续不减,这意味着传统企业税将被模仿GloBE补足税的国内最低税所取代。然而,考虑到财政、法律和政治方面的限制,这种极端情况不太可能实现。因此,随着GloBE的广泛实施,使用低于15%的有效税率吸引高利润率投资的激励措施将减少。尽管如此,《GloBE示范规则》的某些要素意味着一些形式的企业税竞争将继续存在,甚至会相对更具吸引力。由于GloBE对企业税竞争的缓和作用相对温和,GloBE还可能导致通过其他渠道吸引投资的竞争加剧。

土地利用和气候变化对区域净初级生产力的影响

应用以遥感观测数据驱动的GLO-PEM模式模拟估计的中国北方20年的NPP数据同其20年气候数据结合,同时利用通过遥感宏观调查所得的两期土地利用数据,分析20年气候和土地利用变化对区域净初级生产力(Net Primary Productivity,NPP) 的影响的时空特征。分析结果表明,20年来研究区域年均温度显著增加(年均增温0.064 oC),年降水量明显减少(年降水减少率为1.49 mm/年),NPP以减少趋势为主(年减少率6.9 TgC)。研究区域NPP的变化受旬(月) 均温和旬(月) 降水量和季节温度和季节降水的变化影响显著。季节NPP同季节降水和温度的相关性在空间上同植被覆盖表现出高度的一致性,其相关系数大小随着不同植被覆盖类型变化而变化。通过分析可见,就整个研究区来说,发生土地利用变化的区域仅占整个研究区域的5.45%, 气候对整个研究区域NPP的影响占主导地位(占了总影响量的90%);土地利用发生区域土地利用的作用占了绝对地位,土地利用的影响占了约97%。整个研究区域近20年来因为降水明显减少,温度显著升高,导致NPP明显下降,在两期土地利用间隔时间段内(约10年) 因气候影响NPP减少了78 (±0.6) TgC。因为土地利用的变化导致NPP减少9 (±0.2) TgC。气候和土地利用共同作用是研究区域的NPP减少87 (±0.8) TgC。

1981—2000年广东省净初级生产力的时空格局

采用Globalproduction efficiencymodel（GLO．PEM）结果，分析了1981—2000年期间广东省NPP的时空动态，从全省、地区以及地级市3个空间尺度分别讨论了广东省NPP分布格局及动态。并对广东省3种典型森林类型：阔叶林、针叶林和混交林20aNPP的动态进行了分析。结果表明，1981—2000年，广东省平均NPP为（1480±407）g／（m^2·a），NPP的年间变化较大。20世纪80年代早期（1980—1985），广东省NPP相对较低，为（1443±57）g／（m^2·a），80年代后期（1986—1990）NPP达到最大，为（1534±121）g／（m^2·a），90年代前期（1991—1995）有所降低，降至（1460±89）g／（m^2·a），90年代后期（1996—2000年）又有一定回升，达到（1484±74）g／（m^2·a）。全省NPP分布呈现明显的地域性差异，表现为西南沿海地区〉东南沿海地区〉内陆地区的趋势，这主要是由3个地区的植被组成、水热条件以及农田的分布状况决定的。根据1981—1985年、1986—1990年、1991—1995年、1996—2000年4个阶段NPP的动态把全省21个地级市划分为3种类型：NPP稳定型，包括韶关、清远、河源等12个市；NPP增长型，包括潮州、揭阳、汕尾、和湛江4个市，分别以59、39、45、46g／m^2·5a的速率增加；以及NPP下降型，包括佛山、中山、深圳、东莞、珠海5个市，NPP分别以114、113、87、75、75g／m^2·5a的速率下降，这种下降和土地覆盖／利用方式的改变有密切关系。3种主要森林类型阔叶林、针叶林、混交林20a平均NPP分别为（1391±372）g／（m^2·a）、（1364±390）g／（m^2·a）和（1704±450）g／（m^2·a），其中混交林NPP与阔叶林NPP、针叶林NPP差异显著（P〈0．05）。

中国陆地净初级生产力的季节变化研究

了解不同季节陆地净初级生产力(NPP)的变化及与气候的相互关系以及在不同地类的差异对深刻理解我国陆地生态系统对全球气候变化的响应和陆地碳循环研究具有重要意义。本文使用1981～2000年间GLO～PEM模型模拟的我国陆地NPP数据和同期气温、降水以及土地利用数据.研究不同季节我国陆地植被NPP的变化。结果表明,在1981～2000年期间,四个季节的NPP都呈显著增加趋势,春季是NPP增加速率最快的季节,夏季是NPP增加量最大的季节。耕地在春、夏和秋季NPP增长和增长率最高,林地冬季NPP增长最多而水域冬季NPP增长率最高。夏季NPP增长最高的区域分布于我国东部的多数地区、内蒙古东部、四川盆地、贵州东部、藏南和新疆西部:夏季NPP降低最多的区域分布于在呼伦贝尔高原、鄂尔多斯高原、黄土高原、青藏高原东部和新疆西北部。

蝴蝶兰PhalPI基因的克隆及在花器官突变体中的表达分析

为深入研究兰科植物花器官发育的调控机理,从蝴蝶兰花瓣中克隆了一个B类MADS-box转录因子PhalPI(GenBank登录号为KY020416)。序列分析表明,该基因的cDNA全长为944 bp,含完整的开放阅读框,可编码210个氨基酸,属于BGLO/PI蛋白家族,与蝴蝶兰属的PhPI10和PeMADS6基因关系最近;表达模式分析表明,PhalPI基因在生殖器官中表达,在营养器官中不表达,在授粉后的子房中,该基因的表达水平降低。在5种花器官突变体中,PhalPI基因在萼片唇瓣化突变体的萼片和蕊柱中表达水平明显升高;在雄蕊花瓣化突变体的萼片和侧瓣中表达水平降低,在其唇瓣和蕊柱中显著升高;在侧瓣合柱化突变体的蕊柱中,PhalPI基因的表达也发生了显著升高;PhalPI基因表达的改变与花器官形态的突变相关;而在侧瓣唇瓣化和侧瓣花药化突变体中,PhalPI基因的表达水平没有变化。推测该基因在决定蝴蝶兰侧瓣和唇瓣的发育中起重要的调控作用。

黄淮海平原耕地转移对植被碳储量的影响

应用GLO-PEM模型和1988年NOAA/AVHRR遥感数据,估算了黄淮海平原植被净初级生产力(NPP),并根据NPP和植被凋落物产生量计算了不同土地利用类型的植被碳密度。通过对1988年与2000年土地利用图的叠置分析,统计了耕地与其他土地利用类型之间的转移量,并估算了耕地转移对植被碳储量的影响。研究发现,耕地转移对植被碳储量变化的影响在不同区域与不同土地利用类型上存在显著差异。1988～2000年间,耕地转移导致全区植被碳储量下降了0.24%,其中耕地转为建设用地是植被碳储量减少的主要原因。这一研究结论为正确把握耕地转移对区域植被碳储量的影响,并据此制订碳汇管理措施具有重要的参考价值。

贵州省陆地净初级生产力的季节变化研究

了解不同季节陆地净初级生产力(NPP)的变化及与气候的相互关系以及其空间分布对深刻理解贵州陆地生态系统对全国气候变化的响应和陆地碳循环研究具有重要意义.本文使用1981-2000年间GLO-PEM模型模拟的贵州陆地NPP数据和同期气温、降水等数据,研究不同季节贵州陆地植被NPP的变化.结果表明,在1981-2000年期间,春季和秋季NPP都呈显著增加趋势,夏季和冬季NPP都呈减少趋势,春季是NPP增加速率最快的季节,夏季是NPP减少速率最快的季节.夏季NPP增加最高的区域分布于贵州南部的多数地区;夏季NPP降低最多的区域分布于贵州西北部.

珠江流域植被净初级生产力及其时空格局

为阐明珠江流域植被净初级生产力（NPP）变化的整体状况，应用以遥感观测数据驱动的GLO—PEM模式模拟估计的NPP数据，对珠江流域1981～2000年间的地表植被净初级生产力的空间分布及时间序列变化进行了综合分析。研究结果表明：①20年来，珠江流域年均NPP总量为0.60PgC，占中国总量的19．42％，单位面积的年平均NPP为1328．61g／（m^2·a）．是中国平均水平的4．12倍；②从NPP的空间分布看，单位面积的NPP以右江上游山区及珠江了角洲两南部地区等地最高，北盘江上游山区最低；③从各种植被类型来看，以热带常绿阔叶林的平均NPP最大，山地稀树灌木草原的平均NPP最小；④受气候和土地利用变化的影响，20年来珠江流域植被NPP整体上呈现了不显著减少的趋势，单位面积NPP减少了约0.6％。

1981～2000年陕西省植被净初级生产力时空变化

为阐明陕西省植被净初级生产力（NPP）变化的整体状况,应用以遥感观测数据驱动的GLO-PEM模式模拟估计的NPP数据,对陕西省1981-2000年间的地表植被净初级生产力的空间分布及时间序列变化进行了综合分析.研究结果表明：（1）20年来,陕西省年NPP变化范围为687-858 g/（m^2·a）,平均值为749 g/（m^2·a）;（2）陕西省年平均NPP在波动中缓慢上升,NPP年增长幅度为3.248 2 g/（m^2·a）;（3）陕西省年平均NPP分布总体呈现从南到北递减的趋势,长城沿线风沙区NPP在200-400 g/（m^2·a）之间,是陕西省NPP最低的地区;关中中东部NPP较高,大部在800 g/（m^2·a）以上,NPP在1 200 g/（m^2·a）以上的面积约占1/3,是全省NPP的高值区;（4）陕西省NPP基本不变（NPP变化百分率在-10%-10%之间）的面积占54.7%,NPP变化百分率增加10%以上的面积占40.5%,NPP变化百分率降低10%以下的面积仅占4.8%;（5）占陕西省总面积的77.3%的区域NPP变化不显著（P〉0.05）,NPP增加极显著（P〈0.01）的区域占8.3%,增加显著（P〈0.05）的区域占13.8%,NPP降低显著（P〈0.05）和降低极显著（P〈0.01）占0.7%.

尿胱抑素C检测方法的建立及临床应用

目的 建立尿胱抑素C的检测方法，初步探讨其临床应用价值。方法 采用胶体金免疫比浊法检测尿中胱抑素C，并作方法学评价。同时对40例正常人和135例相关疾病患者检测尿中胱抑素C、α1-微球蛋白（α1-MG）和β2-微球蛋白（β2-MG），比较3种蛋白在对照组和各疾病组的阳性率。结果 尿胱抑素C检测有较好的检测范围和良好的线性范围，总CV为5．01％，其他蛋白质对试验基本不存在影响。相对于α1-MG和β2-MG而言，尿胱抑素C有较高的灵敏度和特异性，没有明显昼夜节律。结论 尿胱抑素C是肾脏疾病时肾小管功能障碍的敏感指标。

肾康注射液对肾小球内皮细胞增殖及自分泌FN效应的影响

目的：探讨肾康注射液阻抑肾小球硬化、防治慢性肾功能衰竭的部分作用机理，为其临床应用提供依据。方法：采用血清药理学方法，观察肾康注射液对体外培养人肾小球内皮细胞增殖及其自分泌ＦＮ水平的影响。结果：肾康注射液及其含药血清对肾小球内皮细胞增殖及其自分泌 ＦＮ有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１），且呈量效依赖关系，肾康注射液与肝素合用，协同抑制肾小球内皮细胞增殖、自分泌 ＦＮ水平（ Ｐ＜ ０． ０５）。结论：肾康注射液对肾小球内皮细胞的抑制效应，显示其新的药理作用位点。对肾小球内皮细胞增殖的抑制效应是肾康注射液活血功效的具体形式之一，对肾小球内皮细胞自分泌ＴＮ的抑制效应是其泄浊功效的具体形式之一。

重组人红细胞生成素影响系膜细胞生长与纤维连接蛋白表达的实验研究

目的通过观察重组人红细胞生成素(rhEPO)影响肾小球系膜细胞生长,以及表达纤维连接蛋白(FN)的作用,探讨应用rhEPO后对肾组织可能产生的生物学效应。方法培养的大鼠肾小球系膜细胞在不同剂量(1、10、100和1000U.ml-1)rhEPO的作用下,细胞计数和蛋白浓度测定评价细胞是否肥大;蛋白免疫印迹法检测FN蛋白表达的变化。♂CD-1小鼠接受单次(n=8)腹腔注射rhEPO(1000 U.kg-1体重),注射后24 h处死并分离肾小球以检测其FN表达量的变化。结果①rhEPO能够增加系膜细胞蛋白质的含量,以100 U.ml-1工作浓度rhEPO的作用效果最为明显[(1.269±0.382)μg.10-3cellsvs(0.247±0.058)μg.10-3cells;P<0.01)];②rhEPO能够刺激系膜细胞上调FN蛋白的表达,与对照组相比,100 U.ml-1的rhEPO明显增加系膜细胞FN蛋白的表达,随着rhEPO浓度的增加,系膜细胞FN的表达进一步增多,呈剂量依赖性;③间接免疫荧光检测可见rhEPO作用系膜细胞24 h后,可见大量呈网状、条索状,甚至板块状FN蛋白分布于细胞间隙;④单次腹腔注射rhEPO后24 h的肾小球FN增加。结论rhEPO可以造成系膜细胞的肥大,同时诱导系膜细胞增加FN合成,提示rhEPO可以通过影响系膜细胞的功能造成肾小球功能的异常。