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光固化水凝胶负载骨髓间充质干细胞修复大鼠颅骨缺损
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作者 丁梦 李强 +4 位作者 李筱叶 贺敖 戴卓 董衡 牟永斌 《口腔疾病防治》 2024年第5期330-340,共11页
目的探讨新型甲基丙烯酸酐化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)/骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复合水凝胶应用于大鼠颅骨缺损区的成骨性能,为骨再生生物材料的应用提供实验依据。方法本研究经南京大学动... 目的探讨新型甲基丙烯酸酐化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)/骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复合水凝胶应用于大鼠颅骨缺损区的成骨性能,为骨再生生物材料的应用提供实验依据。方法本研究经南京大学动物伦理委员会批准。通过组合光引发剂苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂[lthium phenyl(2,4,6-trimethylbenzoyl)phosphinate,LAP]、GelMA、BMSCs构建光固化复合生物水凝胶GelMA/BMSCs,扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)和能量色散X射线光谱仪(energy disper-sive X-ray spectroscopy,EDX)检测GelMA凝胶表面微观形态及元素构成,电子万能试验机测试凝胶压缩强度。将GelMA/BMSCs水凝胶在体外培养1、2、5 d后,通过CCK-8检测水凝胶包封的BMSCs细胞增殖活性,利用共聚焦显微成像技术观察其存活情况和细胞形态;在大鼠颅骨制备5 mm临界骨缺模型,经复合水凝胶治疗的为GelMA/BMSCs组,不做任何处理的为对照组。分别于术后第4、8周拍摄Micro-CT测算骨缺损面积和新生骨指标,第8周处死大鼠取缺损区颅骨样本进行H&E染色、Van Gieson染色和Goldner染色评价新生骨的质量。结果SEM观察到固化的GelMA内部呈现3D海绵状大孔凝胶网络,大孔形貌均匀,孔隙率为73.41%,孔径为(28.75±7.13)μm;EDX结果显示C和O均匀分布在水凝胶的网状大孔结构上;水凝胶压缩强度为152 kPa,GelMA/BMSCs培养第5天,镜下细胞形态铺展,从卵圆形变为梭形,CCK-8检测结果显示细胞增殖159.4%。术后第4周,Micro-CT三维重建图像显示对照组的骨缺损范围未见明显缩小,GelMA/BMSCs组骨缺损内部可见大量新骨生成;术后第8周,对照组骨缺损仍无明显变化,仅可见少量新生骨,GelMA/BMSCs组颅骨缺损基本愈合;第4周与第8周的定量分析发现,GelMA/BMSCs组大鼠颅骨缺损处新生骨量(new bone vol-ume,BV)、骨体积分数(new bone volume/total bone volume,BV/TV)、骨表面积(bone surface,BS)、骨表面积组织体积比(bone surface/total bone volume,BS/TV)均优于对照组(P<0.05)。第8周组织学染色结果显示GelMA/BMSCs组骨缺损处形成连续且致密的骨组织,而对照组仅在缺损边缘可见少量不连续新骨生成,缺损处主要为纤维结缔组织。结论光固化水凝胶的干细胞疗法具有良好生物安全性,在诱导大鼠颅骨缺损区新骨形成的同时促进骨成熟,具有潜在的临床转化前景。 展开更多
关键词 骨缺损 骨组织工程 支架 水凝胶 gelma水凝胶 骨髓间充质干细胞 干细胞疗法 光固化 骨再生 骨修复
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负载褪黑素的甲基丙烯酰明胶微球延缓髓核退变
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作者 李洋锋 田鑫 +1 位作者 何帆 杨惠林 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第5期676-681,共6页
背景:髓核退变是椎间盘退变的重要病理环节,褪黑素可通过抗炎抗氧化等途径对细胞产生保护作用,然而褪黑素对髓核作用的研究较少,目前各种生物支架的出现为药物与材料结合的研究提供了新思路。目的:探究褪黑素是否可以通过减轻氧化应激... 背景:髓核退变是椎间盘退变的重要病理环节,褪黑素可通过抗炎抗氧化等途径对细胞产生保护作用,然而褪黑素对髓核作用的研究较少,目前各种生物支架的出现为药物与材料结合的研究提供了新思路。目的:探究褪黑素是否可以通过减轻氧化应激损伤来改善髓核的代谢状态,以及负载褪黑素的甲基丙烯酰明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)微球在体内对椎间盘退变的影响。方法:在体外,将褪黑素与成胶前的GelMA微球溶液结合,通过微流控技术将GelMA水凝胶制成微球,与髓核细胞共培养,利用CCK-8法检测细胞增殖活力,扫描电镜下观察微球的表面形态,用紫外分光光度计检测药物释放的速率,随后用白细胞介素1β诱导髓核退变,给予治疗后采用qRT-PCR检测基质合成基因聚集蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白α1及基质降解基因基质金属蛋白酶13、ADAMTS5的表达水平。在大鼠体内采用针刺方法诱导髓核退变,随后分别注入GelMA和GelMA@MT微球,6周后取标本进行组织染色,显微镜下观察组织形态的变化,对其进行组织学分析及评分。结果与结论:①电子扫描显微镜下观察制得的GelMA和GelMA@MT微球,褪黑素的结合并没有改变微球的形态与外貌;药物释放实验显示40 d后药物释放达到80%左右;②CCK-8结果显示,GelMA与GelMA@MT微球均无明显细胞毒性,且对髓核细胞增殖起促进作用;③qRTPCR结果揭示,GelMA@MT微球可使白细胞介素1β环境下聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白α1的表达分别提高42.1%和27.1%,使基质金属蛋白酶13和ADAMTS5的表达分别降低70.7%和109.3%;④白细胞介素1β+GelMA@MT组活性氧水平显著低于白细胞介素1β组和白细胞介素1β+GelMA组;⑤切片组织学染色可见,负载了褪黑素的GelMA微球在体内可显著延缓椎间盘退变;⑥提示将褪黑素与GelMA水凝胶结合制成的GelMA@MT微球在体外显示出良好的细胞相容性,在体内外显著延缓髓核退变。 展开更多
关键词 褪黑素 髓核 椎间盘 微球 gelma
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Three-dimensional bioprinting of gelatin methacryloyl (GelMA) 被引量:8
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作者 Guoliang Ying Nan Jiang +1 位作者 Cunjiang Yu Yu Shrike Zhang 《Bio-Design and Manufacturing》 SCIE 2018年第4期215-224,共10页
The three-dimensional (3D)bioprinting technology has progressed tremendously over the past decade.By controlling the size, shape,and architecture of the bioprinted constructs,3D bioprinting allows for the fabrication ... The three-dimensional (3D)bioprinting technology has progressed tremendously over the past decade.By controlling the size, shape,and architecture of the bioprinted constructs,3D bioprinting allows for the fabrication of tissue/organ-like constructs with strong structural-functional similarity with their in vivo counterparts at high fidelity.The bioink,a blend of biomaterials and living cells possessing both high biocompatibility and printability,is a critical component of bioprinting.In particular, gelatin methacryloyl (GelMA)has shown its potential as a viable bioink material due to its suitable biocompatibility and readily tunable physicochemical properties.Current GelMA-based bioinks and relevant bioprinting strategies for GelMA bioprinting are briefly reviewed. 展开更多
关键词 BIOPRINTING Bioink GELATIN methacryloyl (gelma) BIOFABRICATION -Tissue ENGINEERING TISSUE model
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GelMA水凝胶在骨组织工程中的研究进展 被引量:6
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作者 张孝利(综述) 余优成(审校) +1 位作者 吴兴文 孙健 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期847-851,共5页
种植修复目前是牙列缺损、牙列缺失首选的修复方法。患者因牙周炎、长期牙缺失、全身疾病、外伤及肿瘤手术后的重度牙槽骨缺损是种植修复术的难点。充足的骨量是种植体完成骨结合并维持其长期稳定的必要条件,因此临床上需要可有效填补... 种植修复目前是牙列缺损、牙列缺失首选的修复方法。患者因牙周炎、长期牙缺失、全身疾病、外伤及肿瘤手术后的重度牙槽骨缺损是种植修复术的难点。充足的骨量是种植体完成骨结合并维持其长期稳定的必要条件,因此临床上需要可有效填补骨缺损的材料。明胶甲基丙烯酰基(gelatin methylacryloyl,GelMA)水凝胶因其独特的光交联特性,可以加工成不同形貌的水凝胶支架材料。同时,因其降解性能可控,力学性能可控,生物相容性好,在骨缺损修复材料领域具有广阔应用前景。本文将对GelMA水凝胶在骨组织工程中促进成骨生成和血管化的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 明胶甲基丙烯酰基(gelma) 成骨生成 血管化 骨组织工程
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GelMA复合水凝胶的制备与性能 被引量:4
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作者 李媛媛 温瑜 +4 位作者 李俊 李鹏飞 白天宇 张庆涛 王颖 《太原理工大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期842-848,共7页
为实现组织工程的各种三维构建,需要寻找一种合适的生物墨水来进行活体组织的打印。甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)已被用于各种组织工程的三维构建,其力学性能的设计需要在满足生物打印和细胞生长的要求中寻求平衡。为了改善GelMA水凝胶力... 为实现组织工程的各种三维构建,需要寻找一种合适的生物墨水来进行活体组织的打印。甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)已被用于各种组织工程的三维构建,其力学性能的设计需要在满足生物打印和细胞生长的要求中寻求平衡。为了改善GelMA水凝胶力学性能和物理性质,使其满足不同组织器官的机械性能,采用丙烯酰化的方法将甲基丙烯酸酐(MA)与明胶反应,在明胶分子链上引入双键结构,并通过制备GelMA水凝胶、GelMA-ChelMA(甲基丙烯酸酐化壳聚糖)水凝胶、GelMA-PEG(200)DA水凝胶,进行力学和物理性能分析。结果表明,GelMA中加入ChelMA、PEG(200)DA可以增大弹性模量,其物理性质受到一定程度影响。 展开更多
关键词 生物医学工程 生物医用材料 gelma 复合水凝胶 制备 性能
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GelMA/PBS复合水凝胶的制备及性能研究 被引量:2
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作者 强娜 刘珠 +4 位作者 冯颖 冯裕发 卢明 赖钰芳 梁检初 《化工新型材料》 CAS CSCD 北大核心 2022年第S01期341-345,350,共6页
天然水凝胶具有良好的生物相容性和生物降解性,在组织工程软骨修复手术中具有巨大的应用潜力。但是,天然水凝胶与人体组织在力学性能方面存在一定差异性,从而限制了天然水凝胶在组织工程中的应用。选择具有优异生物性能的甲基丙烯酸酐... 天然水凝胶具有良好的生物相容性和生物降解性,在组织工程软骨修复手术中具有巨大的应用潜力。但是,天然水凝胶与人体组织在力学性能方面存在一定差异性,从而限制了天然水凝胶在组织工程中的应用。选择具有优异生物性能的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)代替天然水凝胶,以聚丁二酸丁二醇酯(PBS)和GelMA水凝胶为原料,采用紫外光交联的方法共混,制备了具有优良力学性能和生物性能的GelMA/PBS复合水凝胶。通过扫描电子显微镜、X射线衍射仪、热重分析仪、差示扫描量热仪对GelMA/PBS复合水凝胶的结构和性能进行研究。结果表明,当GelMA与PBS质量比为1∶4时,复合水凝胶的结晶度最高,生物相容性最好,有效增强了复合水凝胶的机械性能。 展开更多
关键词 甲基丙烯酸酐化明胶 聚丁二酸丁二醇酯 复合水凝胶 热稳定性
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基于GelMA复合水凝胶的制备及性能研究
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作者 强娜 廖芳丽 +3 位作者 解芳 冯颖 李佳佳 冯裕发 《惠州学院学报》 2020年第6期50-55,共6页
水凝胶是一种非常重要的材料,可直接用于组织工程中.但由于其机械性能较差,该研究选择了左旋聚乳酸(PLLA)和功能化明胶作为复合材料.首先将明胶与甲基丙烯酸酐(Methacrylic Anhydride,MA)通过化学反应合成具有光敏性的甲基丙烯酰胺基明... 水凝胶是一种非常重要的材料,可直接用于组织工程中.但由于其机械性能较差,该研究选择了左旋聚乳酸(PLLA)和功能化明胶作为复合材料.首先将明胶与甲基丙烯酸酐(Methacrylic Anhydride,MA)通过化学反应合成具有光敏性的甲基丙烯酰胺基明胶(Gelatin Methacrylate,GelMA),并将其与左旋聚乳酸(PLLA)按不同比例共混,通过紫外光照成形的方法制备复合型水凝胶.对复合水凝胶进行相关表征,如热重分析(TG)、差示扫描热分析(DSC)、X射线衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)等,检测了解其热力学性质、结晶态、形貌等特征,根据结果选择最适合的配比方案. 展开更多
关键词 左旋聚乳酸(PLLA) 甲基丙烯酰胺基明胶(gelma) 复合水凝胶
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GelMA的合成、表征及在3D生物打印领域的研究进展
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作者 夏培斌 余刘洋 +5 位作者 王超威 闫立论 刘志远 张镭 程杰 崔景强 《化工技术与开发》 CAS 2022年第3期65-68,共4页
甲基丙烯酰明胶(GelMA)是一种基于明胶的工程材料,已被证明可用于组织工程、药物输送、细胞培养和3D打印等领域,多种基于GelMA的生物墨水已得到了开发和应用。本文综述了GelMA的合成和性能表征,以及在3D生物打印组织工程领域的研究及应... 甲基丙烯酰明胶(GelMA)是一种基于明胶的工程材料,已被证明可用于组织工程、药物输送、细胞培养和3D打印等领域,多种基于GelMA的生物墨水已得到了开发和应用。本文综述了GelMA的合成和性能表征,以及在3D生物打印组织工程领域的研究及应用进展,以期为GelMA更进一步的利用提供参考。 展开更多
关键词 甲基丙烯酰明胶 3D生物打印 水凝胶 组织工程
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多材料3D打印微管阵列神经支架研究
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作者 张晖 张黎明 +1 位作者 王赫然 郑雄飞 《机械设计与制造》 北大核心 2023年第11期117-121,共5页
针对外周神经修复中使用的多通道神经支架加工困难的问题,提出了多材料3D打印技术制备微管阵列甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)神经支架的方法。通过多喷头3D打印技术实现了GelMA材料和明胶材料的多材料精密挤出成型,基于成型过程中明胶材料... 针对外周神经修复中使用的多通道神经支架加工困难的问题,提出了多材料3D打印技术制备微管阵列甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)神经支架的方法。通过多喷头3D打印技术实现了GelMA材料和明胶材料的多材料精密挤出成型,基于成型过程中明胶材料低温凝胶和升温溶芯工艺获得了高密度微管阵列结构,对最终成型的GelMA神经支架的微管直径、微管间距、孔隙率和力学性能等关键参数进行了评价。研究结果表明:微管直径和间距尺寸的制造误差分别为2.4%和0.3%。随GelMA浓度的增加支架力学性能呈增强的趋势,支架孔隙率呈逐渐降低的趋势。当GelMA浓度为5%和7%时,支架孔隙率在90%以上。综合支架的营养物质扩散、制造误差和力学性能,浓度为7%的GelMA微管阵列神经支架有望满足外周神经再生的需求。 展开更多
关键词 生物3D打印 牺牲材料 gelma 微管阵列 神经支架
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一种基于光交联明胶-聚丙烯酰胺的神经组织工程构建物
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作者 安玉川 成荣 +1 位作者 孙蕾 桑胜波 《太原理工大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期170-177,共8页
从改善神经组织再生材料的理化性能角度出发,选择生物相容好的光交联明胶(GelMA)和亲水聚合物聚丙烯酰胺(PAM)构建复合水凝胶支架,用于支持雪旺细胞生长。以纯GelMA作为对照,分别测试不同浓度的光交联明胶-聚丙烯酰胺复合水凝胶(GelMA-P... 从改善神经组织再生材料的理化性能角度出发,选择生物相容好的光交联明胶(GelMA)和亲水聚合物聚丙烯酰胺(PAM)构建复合水凝胶支架,用于支持雪旺细胞生长。以纯GelMA作为对照,分别测试不同浓度的光交联明胶-聚丙烯酰胺复合水凝胶(GelMA-PAM)的形貌、理化性能和机械性能;观察雪旺细胞在支架上的生物相容性、增长情况以及分化程度。实验结果表明,PAM可以改善GelMA支架的机械性能,当GelMA与PAM的质量分数分别为10%和2.5%时,该支架具有良好的生物相容性,可促进雪旺神经细胞分化。因此,开发基于GelMA-PAM复合水凝胶支架可作为一种理想的神经组织工程构建物。 展开更多
关键词 光交联明胶 聚丙烯酰胺 雪旺细胞 神经组织工程
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应用于3D生物打印的甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶相关理化性能的研究进展
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作者 吴海媚 丁能 +1 位作者 朱鴷 汤顺清(审校) 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第5期680-685,共6页
甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶由明胶和甲基丙烯酸(MA)聚合反应合成。GelMA水凝胶的制备方法简单,并具有良好的生物相容性及机械性能可调节性,受到众多研究者的关注。其在伤口敷料、药物释放支架及组织工程等生物医学工程领域具有巨... 甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶由明胶和甲基丙烯酸(MA)聚合反应合成。GelMA水凝胶的制备方法简单,并具有良好的生物相容性及机械性能可调节性,受到众多研究者的关注。其在伤口敷料、药物释放支架及组织工程等生物医学工程领域具有巨大的应用潜力。文章对GelMA水凝胶的制备及其性能进行概括,对近年来利用纳米材料、天然聚合物和合成聚合物与GelMA水凝胶结合对材料改性进行综述,并对应用于3D生物打印的多功能GelMA水凝胶未来发展方向进行总结与展望。GelMA水凝胶属于多肽类水凝胶,脆弱易碎裂的特征极大限制了其应用,经过后期的改性提高力学性能的同时,可能将造成其生物相容性的降低,使材料的最终临床转换面临重大挑战。未来将通过不断探索复合天然/合成聚合物的混合水凝胶,提升支架的机械性能,同时保留GelMA优越的生物相容性。特别是纳米材料与GelMA水凝胶结合,将支架实现智能功能,尤其是在敷料支架领域的研究。 展开更多
关键词 甲基丙烯酸酐化明胶(gelma)水凝胶 复合材料 3D生物打印 力学性能 生物相容性
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可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型的构建研究
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作者 王飞燕 李志凌 +8 位作者 尹博丰 李佩霖 郝瑞聪 韩梦月 李晓彤 田家仪 丁丽 武文卿 朱恒 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期985-992,共8页
目的建立小鼠股骨缺损模型并探索甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)对缺损后骨再生的影响。方法将40只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分成4组:骨缺损组(n=10),5%GelMA组(n=10),10%GelMA组(n=10),15%GelMA组(n=10)。造模2周后... 目的建立小鼠股骨缺损模型并探索甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)对缺损后骨再生的影响。方法将40只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分成4组:骨缺损组(n=10),5%GelMA组(n=10),10%GelMA组(n=10),15%GelMA组(n=10)。造模2周后,使用HE染色观察股骨组织结构;使用Masson染色观察股骨胶原纤维形态;使用OCN免疫组化染色分析骨特异性蛋白表达水平。结果GelMA具有良好的可注射性,可经PCR Pipettes移液器注入骨缺损区。HE染色结果表明10%GelMA组相较于骨缺损组、5%GelMA组和15%GelMA组具有更好的骨修复效果,缺损部位组织结构更加完整;Masson染色结果表明10%GelMA组有更多成骨相关的胶原纤维形成;RT-qPCR分析显示,10%GelMA组小鼠骨缺损部位OCN表达显著高于骨缺损组(P<0.001)、5%GelMA组(P<0.01)和15%GelMA组(P<0.01)。10%GelMA组小鼠骨缺损部位Osterix表达显著高于骨缺损组(P<0.001)、5%GelMA组(P<0.001)和15%GelMA组(P<0.01);OCN免疫组化染色结果表明10%GelMA组的修复区骨特异性蛋白表达显著高于骨缺损组(P<0.01)、5%GelMA组(P<0.01)和15%GelMA组(P<0.05)。结论构建了可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型,并应用于基于GelMA的可注射再生支架筛选和治疗效果评价,为开展相关领域工作提供实验基础。 展开更多
关键词 可注射式再生支架 骨缺损模型 甲基丙烯酰化明胶 骨再生 小鼠
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力学增强型水凝胶纤维的制备及其生物相容性评价 被引量:5
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作者 汤德锭 师念园 +3 位作者 常乐 史强 李昱辉 徐峰 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期150-155,共6页
针对天然水凝胶纤维力学性能及成形性能差的问题,结合微流控和光交联的方法,高通量制备了一种力学增强型海藻酸钠/明胶甲基丙烯酸酯复合水凝胶材料。研究了微流控喷头尺寸、水凝胶单体浓度对水凝胶纤维成形性能、水凝胶力学特性及结构... 针对天然水凝胶纤维力学性能及成形性能差的问题,结合微流控和光交联的方法,高通量制备了一种力学增强型海藻酸钠/明胶甲基丙烯酸酯复合水凝胶材料。研究了微流控喷头尺寸、水凝胶单体浓度对水凝胶纤维成形性能、水凝胶力学特性及结构特征的影响。结果表明:制备的水凝胶纤维边缘光滑,直径(390±50μm)较为均一,具有良好的操作性及可控性;随着海藻酸钠和明胶甲基丙烯酸酯单体浓度的增高,水凝胶弹性模量升高,SEM结果显示其片层微结构更为致密。进一步测试了水凝胶纤维的生物相容性,细胞实验结果表明,培养至第5天时,水凝胶中细胞的存活率稳定维持在80%以上,证明所制备的水凝胶具有良好的生物相容性,适宜细胞生长。动物实验结果表明,当凝胶植入动物体内1周后,周围的皮下组织很正常;在第3周时,凝胶周围的炎症反应明显减轻,材料也出现一定程度的降解。研究力学增强型海藻酸钠/明胶甲基丙烯酸酯复合水凝胶,有望于实现三维肌肉微组织模型的高通量构建。 展开更多
关键词 力学增强型水凝胶纤维 高通量制备 海藻酸钠%月胶甲基丙晞酸酯 光交联 微流控
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明胶-甲基丙烯酰基水凝胶作为生物材料在组织修复方面的应用进展 被引量:1
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作者 林欢欢 刘肇兴 +2 位作者 吴兴 刘沙 陈向军 《中国美容医学》 CAS 2017年第8期130-134,共5页
最近十年对细胞生物材料的研究已经转向三维研究。通过3D细胞培养模拟天然细胞外环境,水凝胶提供了良好的3D生物材料组织支架。因此,明胶甲基丙烯酰(Gelatin methacryloyl,Gel MA)水凝胶最近受到越来越多的关注。这主要由明胶的固有生... 最近十年对细胞生物材料的研究已经转向三维研究。通过3D细胞培养模拟天然细胞外环境,水凝胶提供了良好的3D生物材料组织支架。因此,明胶甲基丙烯酰(Gelatin methacryloyl,Gel MA)水凝胶最近受到越来越多的关注。这主要由明胶的固有生物活性和可光交联水凝胶的优点。各种研究表明Gel MA是一种多功能基质,可用于从血管系统到软骨和骨工程组织的类似物。生物支架和生物培养方法的结合对于证明细胞功能或构建形状保持至再生组织的发展是很必要的。Gel MA在该过程中具有关键的指导作用,并且有利于加快临床相关应用的发展。 展开更多
关键词 明胶甲基丙烯酰 细胞培养 生物材料 组织工程
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3D生物打印构建复层尿道组织的初步研究 被引量:1
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作者 皮庆猛 张志亮 +6 位作者 周碧玉 任晓芸 陆毅 黄一雄 傅敏刚 范志宏 王晓磊 《组织工程与重建外科杂志》 2018年第5期241-244,共4页
目的探讨利用生物打印体外构建具有复层结构的尿道空腔组织的可行性。方法将7%GelMA和2%Alginate制备复合水凝胶,分别同绿色和红色的microbeads或2×106 cells/mL尿道上皮细胞和尿道平滑肌细胞混匀,通过本实验室改进的同轴多通道打... 目的探讨利用生物打印体外构建具有复层结构的尿道空腔组织的可行性。方法将7%GelMA和2%Alginate制备复合水凝胶,分别同绿色和红色的microbeads或2×106 cells/mL尿道上皮细胞和尿道平滑肌细胞混匀,通过本实验室改进的同轴多通道打印系统,以10~20μL/min的速度推进内、外层,以80~200μL/min的速度推进CaCl2,边打印边交联;打印后不含细胞的空腔结构,置于荧光显微镜下观察;打印后含有细胞的组织,以尿道上皮细胞和尿道平滑肌细胞混合培养液于六孔板内体外培养,分别于第0~7天live/dead染色检测细胞活力,F-actin染色检测细胞铺展情况;将培养24 h的打印后组织,予以红色颜料灌注。结果复合水凝胶混合microbeads后,荧光显微镜下可以清楚看到内、外双层结构,复层管腔的内、外径分别为(663.66±51.74)μm和(976.84±63.43)μm,内外亚层壁厚分别为(62.06±10.45)μm和(93.78±10.25)μm。尿道细胞在第0天和第7天的细胞活力分别为84.52%和86.26%,免疫荧光染色第7天F-actin染色铺展均匀,提示细胞铺展生长。灌注过程中,打印后空腔组织内红色灌注液可以顺利通过管腔结构,颜料并无外溢,管壁无破损。结论利用复合水凝胶和同轴多通道生物打印系统可以初步构建尿道空腔结构,打印后尿道细胞可在空腔结构内长期存活。 展开更多
关键词 3D生物打印 尿道空腔组织 水凝胶 海藻酸盐 甲基丙烯酸酐化明胶
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Bioprinting of novel 3D tumor array chip for drug screening 被引量:5
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作者 Mingjun Xie Qing Gao +2 位作者 Jianzhong Fu Zichen Chen Yong He 《Bio-Design and Manufacturing》 SCIE CSCD 2020年第3期175-188,共14页
Biomedical field has been seeking a feasible standard drug screening system consisting of 3D tumor model array for drug researching due to providing sufficient samples and simulating actual in vivo tumor growth situat... Biomedical field has been seeking a feasible standard drug screening system consisting of 3D tumor model array for drug researching due to providing sufficient samples and simulating actual in vivo tumor growth situation,which is still a challenge to rapidly and uniformly establish though.Here,we propose a novel drug screening system,namely 3D tumor array chip with“layer cake”structure,for drug screening.Accurate gelatin methacryloyl hydrogel droplets(~0.1μL)containing tumor cells can be automatically deposited on demand with electrohydrodynamic 3D printing.Transparent conductive membrane is introduced as a chip basement for preventing charges accumulation during fabricating and convenient observing during screening.Culturing chambers formed by stainless steel and silicon interlayer is convenient to be assembled and recycled.As this chip is compatible with the existing 96-well culturing plate,the drug screening protocols could keep the same as convention.Important properties of this chip,namely printing stability,customizability,accuracy,microenvironment,tumor functionalization,are detailly examined.As a demonstration,it is applied for screening of epirubicin and paclitaxel with breast tumor cells to confirm the compatibility of the proposed screening system with the traditional screening methods.We believe this chip will potentially play a significant role in drug evaluation in the future. 展开更多
关键词 3D tumor array chip(3D-TAC) Gelatin methacryloyl(gelma) Drug screening In vitro model BIOPRINTING
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3D生物打印复层空腔组织的初步研究
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作者 皮庆猛 王晓磊 +6 位作者 张志亮 周碧玉 任晓芸 陆毅 黄一雄 傅敏刚 范志宏 《组织工程与重建外科杂志》 2018年第4期203-207,共5页
目的探讨利用生物打印系统一次性同步快速构建复层管状结构的可行性。方法将不同浓度的海藻酸盐和GelMA配比,进行生物力学检测,确定复合水凝胶打印的可行性;将水凝胶分别混合示踪剂及标记细胞,打印具有双层结构空腔管状结构,进行细胞活... 目的探讨利用生物打印系统一次性同步快速构建复层管状结构的可行性。方法将不同浓度的海藻酸盐和GelMA配比,进行生物力学检测,确定复合水凝胶打印的可行性;将水凝胶分别混合示踪剂及标记细胞,打印具有双层结构空腔管状结构,进行细胞活力检测并验证可灌注性。结果复合水凝胶杨氏模量为(8.78±1.73)×10-3 MPa,较单纯Gel MA的(2.38±0.69)×10-3 MPa和单纯海藻酸盐的(0.83±0.24)×10-3 MPa有明显统计学差异;同轴打印内外复层结构的壁厚分别为(62.06±0.45)μm和(93.78±10.25)μm;内、外管的管径分别为(663.66±51.74)μm和(976.84±63.44)μm;外管(红色微珠颗粒标识)和内管(绿色微珠颗粒标识)具有明显的分层差异;3T3细胞分别在内、外层同时打印后,体外培养1周,第1、3、7天细胞活力可以维持在(88.50%±5.8%)、(85.57%±6.22%)和(96.29%±2.64%);复层管状结构橙色溶液灌注,复层管壁完整性良好,未见明显液体渗出。结论本实验利用复合水凝胶构建复层空腔组织,打印后空腔组织内细胞能够长期存活,并具有一定的灌注功能。 展开更多
关键词 生物打印 空腔组织 水凝胶 海藻酸盐 甲基丙烯酸酐化明胶
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Sacrificial microgel‑laden bioink‑enabled 3D bioprinting of mesoscale pore networks 被引量:3
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作者 Lei Shao Qing Gao +5 位作者 Chaoqi Xie Jianzhong Fu Meixiang Xiang Zhenjie Liu Liulin Xiang Yong He 《Bio-Design and Manufacturing》 CSCD 2020年第1期30-39,共10页
Three-dimensional(3D)bioprinting is a powerful approach that enables the fabrication of 3D tissue constructs that retain complex biological functions.However,the dense hydrogel networks that form after the gelation of... Three-dimensional(3D)bioprinting is a powerful approach that enables the fabrication of 3D tissue constructs that retain complex biological functions.However,the dense hydrogel networks that form after the gelation of bioinks often restrict the migration and proliferation of encapsulated cells.Herein,a sacrificial microgel-laden bioink strategy was designed for directly bioprinting constructs with mesoscale pore networks(MPNs)for enhancing nutrient delivery and cell growth.The sacrificial microgel-laden bioink,which contains cell/gelatin methacryloyl(GelMA)mixture and gelled gelatin microgel,is first thermo-crosslinked to fabricate temporary predesigned cell-laden constructs by extrusion bioprinting onto a cold platform.Then,the construct is permanently stabilized through photo-crosslinking of GelMA.The MPNs inside the printed constructs are formed after subsequent dissolution of the gelatin microgel.These MPNs allowed for effective oxygen/nutrient diffusion,facilitating the generation of bioactive tissues.Specifically,osteoblast and human umbilical vein endothelial cells encapsulated in the bioprinted large-scale constructs(≥1 cm)with MPNs showed enhanced bioactivity during culture.The 3D bioprinting strategy based on the sacrificial microgel-laden bioink provided a facile method to facilitate formation of complex tissue constructs with MPNs and set a foundation for future optimization of MPN-based tissue constructs with applications in diverse areas of tissue engineering. 展开更多
关键词 Sacrificial microgel Gelatin methacryloyl(gelma) 3D bioprinting Mesoscale pore networks(MPNs) Tissue engineering
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可注射性甲基丙烯酸酐改性明胶/软骨源性基质微粒复合水凝胶支架的制备及生物相容性 被引量:3
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作者 黄波 陈明学 +7 位作者 彭礼庆 罗旭江 李获 王皓 田沁玉 鲁晓波 刘舒云 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第16期2480-2486,共7页
背景:关节软骨的再生修复目前仍是充满挑战的医学难题,构建可仿生细胞生长微环境的可注射水凝胶支架对关节软骨的再生具有重要意义。目的:制备可注射甲基丙烯酸酐改性明胶/软骨源性基质微粒(gelatin-methacryloyl/cartilage-derived mat... 背景:关节软骨的再生修复目前仍是充满挑战的医学难题,构建可仿生细胞生长微环境的可注射水凝胶支架对关节软骨的再生具有重要意义。目的:制备可注射甲基丙烯酸酐改性明胶/软骨源性基质微粒(gelatin-methacryloyl/cartilage-derived matrix particles,Gel MA/CDMPs)复合水凝胶支架,并评价其生物相容性。方法:(1)通过物理粉碎和化学酶法制备软骨源性基质微粒,通过甲基丙烯酸酐接枝明胶制备甲基丙烯酸酐改性明胶,并以两者为原料,制备5种不同质量浓度的Gel MA/CDMPs复合水凝胶支架(其中软骨源性基质微粒的质量浓度分别为0,5,10,20,30 g/L),通过力学测试确定力学性能最佳的软骨源性基质微粒质量浓度用于细胞实验;(2)将兔骨髓间充质干细胞接种至Gel MA/CDMPs复合水凝胶支架中,置于成软骨培养基中共培养(实验组);将兔骨髓间充质干细胞接种至甲基丙烯酸酐改性明胶水凝胶支架中,置于成软骨培养基共培养(对照组),通过细胞死活染色和CCK-8细胞增殖实验评估两组支架内的细胞活性及细胞增殖能力;通过细胞骨架荧光染色观察支架内细胞的形态和伸展扩散能力;通过组织学染色和糖胺多糖定量评估支架促进细胞分泌软骨基质的能力。结果与结论:(1)力学测试表明,Gel MA/CDMPs 10 g/L复合水凝胶支架的压缩模量高于其他组(P<0.05),后续实验选择该质量浓度;(2)活死染色显示,两组支架内培养1,5 d的细胞活性均在90%以上;CCK-8细胞增殖实验显示,实验组培养3,5 d的细胞增殖快于对照组(P<0.05);(3)培养7 d的细胞骨架荧光染色显示,对照组的细胞为球形形态,只有少部分细胞形成丝状伪足,实验组的细胞呈伸展的不规则多边形;(4)培养21 d的组织学与免疫组化染色显示,两组支架内的细胞形态与软骨细胞相似,实验组可见更多的软骨基质分泌;(5)实验组培养7,21 d的糖胺多糖含量高于对照组(P<0.05);(6)结果表明,Gel MA/CDMPs复合水凝胶支架可更好地模拟软骨细胞生长微环境,进而促进骨髓间充质干细胞的生长、增殖和成软骨分化。 展开更多
关键词 软骨 材料 组织工程 软骨源性基质 水凝胶 甲基丙烯酸酐改性明胶 可注射性 间充质干细胞 生物相容性
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基于甲基丙烯酸酯明胶的神经干细胞三维微环境的构建调控
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作者 胡焱 洪源 +2 位作者 师念园 黄国友 赵昕 《中国科技论文》 北大核心 2017年第24期2770-2776,共7页
神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植疗法是治疗创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)的一种具有潜力的解决方法。但NSCs移植后存活率低且难以定向分化为功能性的神经元,因而无法高效地促进创伤脑组织的再生。研究采用甲基丙... 神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植疗法是治疗创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)的一种具有潜力的解决方法。但NSCs移植后存活率低且难以定向分化为功能性的神经元,因而无法高效地促进创伤脑组织的再生。研究采用甲基丙烯酸酯明胶(gelatin methacryloyl,GelMA),通过调控GelMA的取代度和浓度,制备了具有不同力学性能的GelMA水凝胶,用于NSCs的三维包埋和培养。研究结果表明,GelMA具有良好的生物相容性,可促进NSCs的生长和分化;并且,通过对载细胞GelMA水凝胶施加拉伸载荷,可有效促进NSCs在GelMA中的定向铺展。研究结果对体外神经组织构建、三维细胞微环境调控及神经组织再生等具有参考价值。 展开更多
关键词 生物材料与组织工程 甲基丙烯酸酯明胶 神经干细胞 细胞力学微环境
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