山羊肌肉生长抑制素(MSTN)基因HphI酶切多态性分析

采用限制性内切核酸酶Hph对山羊肌肉生长抑制素(MSTN)基因的379bp扩增产物进行了PCR-RFLP多态性分析,检测到3种基因型,其酶切位点分别由2种共显性基因控制;对该片段的纯合型分别克隆、测序发现,BB型在第1661位由T→C。上述结果为首次试验证实山羊MSTN内含子2(379bp)区域存在多态性。

宝钢HPH全氢罩式退火炉钢卷加热时间的研究

控制全氢罩式退火炉钢卷的加热时间,对提高生产效率,改善产品质量有重大意义。本文在宝钢生产条件下建立并验证了钢卷传热模型,然后以此为基础分析了钢卷的径向等效导热系数,钢卷外径、高度,炉内循环气体的流量、温度对钢卷加热时间的影响。研究表明,钢卷径向等效导热系数增加8W/(m℃)时,退火加热时间缩短3.3h;钢卷外径增加0.8m时,退火加热时间延长3.9h;钢卷高度增加0.6m时,退火加热时间延长5.9h;循环气体流量增加6000m3/h时,退火加热时间缩短了0.50h;循环气体温度提高40℃,退火加热时间缩短了2.8h。

基于靶向代谢组学技术对新疆高原肺动脉高压人群特征的初步研究

目的通过代谢组学技术筛选出与低氧肺动脉高压(Hypoxic pulmonary hypertension,HPH)相关的潜在生物标志物和代谢通路。方法采用液相色谱-串联质谱联用技术(LCMS/MS)对新疆帕米尔高原20例HPH患者及14例健康对照者的血清样本进行分析。结果共鉴定出325种代谢物,其中78种存在显著差异。这些差异代谢物包括5-羟基色胺、尿囊素和二甲基鸟苷等,它们可能作为潜在的生物标志物。并通过京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析,筛选出4条与HPH发病机制相关的关键代谢通路,包括丁酸代谢(Butanoate metabolism)、咖啡因代谢(Caffeine metabolism)、胰高血糖素信号通路(Glucagon signaling pathway)和柠檬酸循环(Citrate cycle/TCA cycle)。这些通路主要涉及生物合成、能量代谢、氧化应激和炎症,可能在HPH的发生和发展中发挥重要作用。结论本研究揭示了HPH的代谢特征,发现了一系列潜在的生物标志物和代谢通路,这些发现为进一步研究HPH的发病机制提供了重要线索,并为HPH的诊断和治疗提供了新的靶点和思路.

hPH-20 DNA疫苗对雌性小鼠生育的影响

目的:观察pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种后在小鼠体内的表达及对小鼠受孕率的影响。方法:以小鼠为实验材料,将实验组经后腿股内侧肌以基因枪多点注射重组质粒pcDNA3.1(+)-hPH-205μg,空载体对照组注射pcDNA3.1(+)5μg,空白对照组注射生理盐水200μl,于接种后取股内侧肌检测hPH-20 mRNA和蛋白的表达。采集抗血清做人精子穿去透明带仓鼠卵细胞实验,动物合笼观察受孕情况,持续4个月后进行基因疫苗的安全性检测。结果:注射部位肌肉检测到目的条带;原位杂交在肌细胞膜、胞质和部分肌细胞核可见到蓝紫色颗粒;免疫组织化学显色在肌细胞膜和胞质可见到棕褐色颗粒;实验组小鼠受孕率和对照组相比下降77.78%,同时用鼠抗hPH-20血清能明显降低精子穿卵率;外源性基因没有整合至宿主染色体。结论:hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种有一定的免疫避孕效果。

PLC在HPH罩式退火炉控制系统中的应用

叙述了PLC在HPH罩式退火炉控制系统中的应用，对其组成和控制策略作了比较详尽的介绍。

HPH罩式退火炉控制系统的改进

概述了HPH罩式退火炉应用情况,介绍了全氢罩式炉的生产工艺过程及其控制系统功能、特点,同时对LO I公司的HPH罩式炉控制系统在实际中出现的问题进行了阐述,并介绍了其改进方法及改造后的控制系统和效果。

莱钢冷轧薄板HPH罩式退火炉过程控制系统

随着强对流技术的引进和HPH(高效氢气)技术发展,罩式全氢退火炉已在一些冶金行业的现代化冷轧生产线中得到普遍采用,罩式退火炉的工艺过程较复杂,控制的设备和介质数量较多,本文主要针对过程控制系统做简要介绍。

绿色荧光蛋白和潮霉素抗性双标记载体转化草酸青霉菌P8的研究

草酸青霉菌P8(Penicillium oxalicum)溶磷菌株具有较强的溶解多种无机难溶磷的能力和促进作物生长的作用。为研究P8在作物根际的定殖状况,用携带加强型绿色荧光蛋白和潮霉素抗性的双标记载体转化溶磷青霉菌P8的原生质体,筛选出稳定、高效表达GFP并对潮霉素产生抗性的转化菌株,Southern杂交分析结果显示,外源质粒DNA是以非同源重组方式整合到转化菌株基因组染色体上。试验证明转化菌株的形态学特征和溶磷能力与野生型菌株无明显差别。

全氢罩式退火炉退火热过程的研究(Ⅱ)——对流换热系数和钢卷径向等效导热系数的分析

介绍影响全氢罩式退火炉内换热的两个重要参数——对流换热系数和钢卷径向等效导热系数,详尽分析了两个参数的影响因素,并对比了氮气和氢气气氛下两参数的不同,从而在机理上阐明了全氢罩式炉相对传统混氢罩式炉的优越性,为优化炉内换热提供了理论的依据.

全氢罩式退火炉退火热过程的研究(Ⅰ)——数学模型及其实测验证

分析了全氢罩式退火炉退火工艺过程的传热特点,建立了以板卷温度计算为核心 的退火热过程数学模型,通过模拟计算得到了钢卷退火曲线,并与实测值进行了对比验证. 结果表明,该数学模型合理、可靠.

高效银耳芽孢遗传转化体系的建立

【目的】建立PEG介导的高效银耳(Tremella fuciformis)芽孢遗传转化体系。【方法】采用PEG介导的原生质体法把表达质粒pAN7-1(含有构巢曲霉gpd-An启动子和潮霉素抗性基因hph)和pLg-hph(含香菇gpd-Le启动子和hph基因)转化进银耳芽孢的细胞中;采用夹层法在含50μg·ml-1潮霉素的筛选培养基中初筛银耳芽孢假定转化子,之后转接于潮霉素含量为100μg·ml-1的PDA平板上进行第2次筛选。【结果】PEG4000浓度为25%时介导的银耳芽孢原生质体初转化率最高;pLg-hph假定转化子经过PCR鉴定及Southern杂交验证,结果表明hph基因能有效整合进银耳芽孢的基因组中,其转化率为110个/μgDNA。而pAN7-1转化子经过PCR鉴定及Southern杂交验证,结果表明只有部分转化子基因组中整合了hph基因,其转化率只有9个/μgDNA。银耳芽孢转化子在PDSA培养基中继代5次后仍检测到hph基因的存在,表明外源基因hph能在银耳芽孢继代中稳定遗传。【结论】25%的PEG4000能高效介导银耳原生质体的转化;香菇gpd-Le启动子是银耳芽孢表达外源hph基因的强启动子;外源hph基因能够在银耳芽孢继代培养中稳定遗传。

胸交感神经阻滞对低氧性肺动脉高压大鼠的影响

目的研究胸交感神经阻滞（TSB）对低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠平均肺动脉压（mPAP）及病理形态学的影响。方法选择健康雄性Wistar大鼠48只，随机分为正常对照组、模型组、罗哌卡因组及生理盐水组，每组各12只。正常对照组在常氧常压下饲养3周，其余三组大鼠在自制常压低氧（10．0±0．5）％舱内饲养3周，同时罗哌卡因组和生理盐水组给与胸段硬膜外腔置管分别注入0．2％罗哌卡因和0．9％生理盐水各50止行胸段（胸1—5）交感神经阻滞术（TSB）。分别测定各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、右心室肥厚指数（RV／LV＋S）；观察HE染色的肺组织小动脉变化，利用图像分析技术测定大鼠肺小动脉管壁厚度指标[管壁厚度与血管外周径的百分比（WT％）和管壁面积与血管总面积的百分比（WA％）]。结果①模型组大鼠mPAP、RV／LV＋S、WA％和WT％明显高于正常对照组，肺组织切片HE染色显示，肺小动脉管壁明显增厚，管腔明显狭窄；②罗哌卡因组mPAP明显降低，Rv／LV＋S比值减小，肺小动脉管壁厚度降低。结论TSB能够降低HPH大鼠的mPAP，改善肺血管和右心室的重构。

七龙天对实验性肺动脉高压大鼠ET-1、NOS的影响

目的:观察七龙天对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠内皮素-1(ET-1)、血管内皮细胞一氧化氮合成酶(NOS)的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为6组:空白对照组(A)、模型组(B)、波生坦组(C)、七龙天低剂量组(D)、七龙天中剂量组(E)、七龙天高剂量组(F)。A组大鼠置于正常环境中饲养,B、C、D、E、F组均造模。采用常压低氧法制模,从制模第1天始给药,连续3周,A、B两组均给予蒸馏水3 m L/(只·d)。在直视下行右心导管术测定肺血流动力学参数,及RT-PCR法检测肺组织中NOS、ET-1 mRNA表达。结果:七龙天及波生坦均可明显降低大鼠肺动脉高压,且以七龙天高剂量组效果为佳,疗效呈药物剂量依赖表现。各组NOS、ET-1表达量与肺动脉压具有相关性,但二者在高剂量七龙天调节至正常范围时,肺动脉压仍未恢复正常水平。结论:不同剂量七龙天均可降低肺动脉高压,且高剂量七龙天疗效优于波生坦。其降压机制与降低NOS及ET-1表达量有关,但仍可能受其他炎症因子及血管新生因子影响。

人质子感知受体G2A和OGR1在低氧性肺动脉高压患者外周血细胞中的表达

目的:检测人质子感知受体G蛋白偶联受体2A(G2A)和卵巢癌G蛋白偶联受体1(OGR1)在低氧性肺动脉高压(HPH)患者外周血细胞中的变化。方法:研究对象选取31例HPH患者为低氧性肺动脉高压组(HPH组),男性16例,女性15例,年龄(65.19±5.86)岁。同时符合中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组诊断标准和呼吸衰竭诊断标准,选取30例健康体检者为正常组(NC组),男15例,女15例,年龄(63.47±6.16)岁。心脏彩超计算HPH组肺动脉压力、进行血气分析和肺功能检测,采集外周血检测G2A、OGR1基因mRNA表达水平、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:HPH组Pa CO2较NC组明显增高(P<0.05),1 s用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1pro%)和1 s用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)明显低于NC组(P<0.05)。HPH组外周血中G2A mRNA及TNF-α含量明显高于NC组(P<0.05)。OGR1 mRNA与NC组无差别。HPH组G2A mRNA及TNF-α表达与肺动脉压力呈显著正相关。结论:肺动脉高压患者外周血细胞中质子感知受体G2A表达增加,TNF-α水平增加,G2A的表达和TNF-α水平与肺动脉压力呈明显正相关。

缺氧对体外培养的早孕期细胞滋养细胞中缺氧适应相关部分基因表达及细胞浸润能力的调控

目的:探讨缺氧对细胞滋养细胞表达缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及氧感受器缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶1、2(HPH/PHD1、2)和抑制缺氧诱导因子-1(FIH-1)的调控,以及缺氧对体外培养的细胞滋养细胞浸润能力的调节。方法:用RT-PCR和Western blot法检测在常氧、缺氧再复氧及持续缺氧等条件下,细胞滋养细胞中HIF-1α、HPH/PHD1、2和FIH-1 mRNA和蛋白表达的变化;并用体外侵袭实验检测缺氧再复氧、持续低氧对细胞滋养细胞浸润能力的影响。结果:(1)持续缺氧条件下培养的细胞滋养细胞HIF-1α和HPH/PHD2 mRNA和蛋白表达显著高于常氧组(P<0.01);HPH/PHD1和FIH-1 mRNA和蛋白表达显著低于常氧组(P<0.01)。缺氧再复氧后培养的细胞滋养细胞HIF-1α和HPH/PHD2 mRNA和蛋白表达显著高于常氧组(P<0.05),但显著低于持续缺氧组(P<0.05);HPH/PHD1和FIH-1 mRNA和蛋白表达均显著低于常氧组(P<0.05),但显著高于持续缺氧组(P<0.05)。(2)持续缺氧显著抑制细胞滋养细胞的浸润能力,与常氧组比较明显降低(P<0.01);缺氧后再复氧细胞滋养细胞的浸润能力居中,与常氧组比较明显降低(P<0.05);与持续缺氧组比较明显升高(P<0.05)。结论:滋养细胞可感受氧分压变化,HIF-1α、HPH/PHD1、HPH/PHD2和FIH-1相互作用与滋养细胞浸润能力调节有关。

尼可地尔对大鼠低氧性肺高压的影响

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂(mitoKATPCO)尼可地尔(nicorandil)对大鼠低氧性肺动脉高压的影响。方法:将40只大鼠随机分成对照组(C组)、低氧组(H组)、低氧+尼可地尔组(N组)与低氧+尼可地尔+5-羟基葵酸盐组(HD组),后3组置于常压低氧仓内,每周6 d,每天8 h,持续4周后测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP),右心肥厚指数RV/(V+S),HE染色观察肺小动脉血管壁的病理变化并检测增殖相关抗原(PCNA)。结果:慢性缺氧可诱导大鼠mPAP及RV/(LV+S)升高,大鼠肺小血管增厚重构,PCNA表达增加,尼可地尔可显著抑制上述变化,且该效应可被线粒体KATP(mitoKATP)通道特异性阻断剂5-羟基葵酸盐阻断。结论:尼可地尔通过开放mitoKATP通道降低肺动脉压,拮抗右心肥厚,并抑制肺血管增殖重构,治疗低氧性肺高压。

通腑法治疗慢性阻塞性肺疾病继发缺氧性肺动脉高压疗效观察

目的观察中药通腑煎剂对缺氧性肺动脉高压的影响。方法将患者60例随机分为两组,在西医常规治疗的基础上,治疗组30例服用通腑煎剂,对照组30例服用合心爽。结果治疗组在咳嗽、咯痰、紫绀、大便困难、缺氧及血流变指标改善方面优于对照组;两组治疗后PAPs均显著下降。结论通腑煎剂能够降低缺氧性肺动脉高压,纠正缺氧,改善症状和血液流变学状态。

高渗处理对根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的影响

采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,EHA105菌株)介导法,对平菇(Pleurotus ostreatus)菌丝体遗传转化的最佳试验条件进行研究,结果表明:当平菇菌丝体与甘露醇和山梨醇的混合液预处理20min,且与农杆菌共培养60min时,转化效率高且用时较少。经PCR和Southern Blotting检测表明,转移DNA(transferred DNA,T-DNA)中的潮霉素抗性基因hph已整合到转化子基因组中。

高效液相色谱法同时测定血清中苯妥英、卡马西平的浓度

目的 :建立HPLC法同时测定血清苯妥英 (PHT)与卡马西平 (CBZ)浓度。方法 :以C18反相柱为色谱柱 ,甲醇 水 (5 5∶45 )为流动相 ,检测波长 2 40nm ;用乙酸乙酯作为提取剂。结果 :PHT、CBZ平均回收率各为 99.5 %和 10 0 .5 % ,日内和日间RSD均低于 6 .6 % (n =5 ) ;分析方法的定量测定下限 :PHT为 1.2 μ犂·ml-1,CBZ为 0 .2 μ犂·ml-1。分析方法的检测下限 :PHT为 0 .4μ犂·ml-1;CBZ为 0 .1μ犂·ml-1。PHT在 5～ 40 μ犂·ml-1浓度范围线性关系良好 ,r=0 .998;CBZ在 2 .5～ 2 5 μ犂·ml-1浓度范围线性关系良好 ,r=0 .998。结论 :方法灵敏、准确 ,可用于PHT和CBZ临床血药浓度监测。

Burkholderia cepecia JS-02酶法制备对羟基-D-苯甘氨酸的研究

对BurkholderiacepeciaJS 02"一菌双酶法"制备对羟基 D 苯甘氨酸过程的调控进行了研究,探讨了反应液pH值对于酶反应各个进程的影响,实施了调节反应液pH恒定为7 2的调控策略,使得D 海因酶与D N 氨甲酰基氨基酸水解酶同时具有较高的活力,并且较未调控前更有利于L 对羟基苯海因的消旋及DL 对羟基苯海因的溶解,底物转化率与产品收率分别由未调控时的92%与85%提高至99 5%与94%,反应时间由40h缩短至30h,生产速率由0 462g/(L·h)提高至0 681g/(L·h)