Apelin-13通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制脑缺血再灌注损伤小鼠细胞焦亡

目的:探究Apelin-13调节肽对脑缺血再灌注(I/R)损伤模型小鼠神经细胞焦亡的影响。方法:利用大脑中动脉栓塞再灌注法(MCAO/R)制备小鼠I/R损伤模型,氧糖剥夺/复氧(OGD/R)法制备HT22细胞损伤模型,同时给予Apelin-13处理。神经功能缺损评分评估小鼠神经功能;苏木精-伊红染色法(HE)和尼氏染色观察小鼠脑梗死区组织形态变化;2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积;Western Blot检测梗死区脑组织或者HT22细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)等分子的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清及培养上清中IL-1β和IL-18的水平;用CCK-8试剂盒和乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒分别检测HT22细胞活性和细胞损伤;caspase-1活性检测试剂盒检测HT22细胞中caspase-1的活性;免疫荧光染色观察HT22细胞中caspase-1和GSDMD表达。结果:Apelin-13可显著改善I/R小鼠神经功能和脑梗死体积,减轻梗死区病理损伤。同时降低血清中IL-1β和IL-18的水平。此外,Apelin-13可降低小鼠脑梗死区NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的表达。体外实验表明Apelin-13可显著增加OGD/R处理的HT22细胞活力,降低caspase-1活性,并减少LDH含量,同时降低OGD/R处理的HT22细胞中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的表达。结论:Apelin-13可通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制脑缺血再灌注损伤小鼠细胞焦亡,进而发挥神经保护作用。

P-I-R分型和Laennec分级与乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗后组织学和预后的关系

目的研究P-I-R分型和Laennec分级评价乙型肝炎肝硬化患者接受抗病毒治疗后的组织学改变,及两种评价系统与临床预后的关系。方法连续筛选2013年10月—2014年10月来自14个中心的218例患者,病理(Ishak评分≥5分)诊断肝硬化接受抗病毒治疗72周完成2次肝组织活检,并符合P-I-R分型标准。218例患者分为无肝细胞癌(HCC)组(n=186)和HCC组(n=32)。计数资料组间比较采用χ^(2)检验和Fisher精确检验。比较抗病毒治疗后HCC发生情况时,连续变量采用非参数检验Mann-Whitney U检验;比较P-I-R分型与Laennec分级不同组间差异时,连续变量采用非参数检验Kruskal-Wallis H检验。采用单因素和多因素Cox比例风险回归分析并计算风险比(HR)和95%CI。采用Kaplan-Meier法计算HCC的累积发生率。结果抗病毒治疗72周后无HCC组和HCC组间P-I-R分型情况比较差异有统计学意义(P<0.001)。抗病毒治疗前后Laennec分级和P-I-R分型的分布均有统计学差异(P值均<0.001)。抗病毒治疗后,按照Laennec分级分为4A组(n=33)、4B组(n=71)、4C组(n=114),3组间PLT(H=36.429,P<0.001)、LSM(H=13.983,P=0.004)、Ishak评分(χ^(2)=23.060,P<0.001)、HAI评分(P<0.001)比较差异均有统计学意义。抗病毒治疗72周后,按照P-I-R分型分为R组(n=70)、I组(n=52)和P组(n=96),3组间PLT(H=7.193,P=0.028)、LSM(H=6.238,P=0.045)、Ishak评分(χ^(2)=7.986,P<0.001)、HAI评分(P=0.002)、HCC发生情况(P<0.001)比较,差异均有统计学意义。P-I-R分型P组和R组HCC发生率有显著差异(HR=24.21;95%CI:0.46~177.99,P=0.002)。经过调整其他混杂因素后,P-I-R分型是预测HCC发生的独立指标(HR=12.69;95%CI:4.63~34.80,P=0.002)。结论P-I-R分型和Laennec分级均能反应患者抗病毒治疗前后纤维化的特征及改变情况,其中P-I-R分型对抗病毒治疗后纤维化的改变更敏感。P-I-R分型(治疗后)可用于预测抗病毒治疗后患者HCC发生的风险。

基于I/R/D协议的光命名数据网络性能分析

光命名数据网络(ONDN)是近年来提出的一种架构于光传输网上的命名数据网络(NDN)架构方案,是NDN面向未来高速宽带互联网发展的重要举措.基于I/R/D协议的ONDN数据交互思想未从实验量化分析角度给出性能结果,针对此问题,给出了基于光电转换(O/E)的I/R/D协议包转发过程.以I/R/D协议为基础,充分考虑基于光波分复用(WDM)技术的光传输技术,对波长数量、偏置时间、Interest包请求速率及Data包大小等因素入手,综合分析了在可能发生信道竞争而冲突的情况下ONDN的性能,为ONDN的未来具体架构提供一定参考.

银杏叶提取物通过ERK1/2信号通路降低OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

目的:探究银杏叶提取物(EGb761)经细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞随机分为control、OGD/R和EGb761(25、50、100和200μg/ml)组,OGD/R组细胞置于无糖无氧环境中探究最佳氧糖剥夺(OGD)时间,OGD/R组和EGb761组细胞在氧糖剥夺后迅速复糖复氧培养24 h, EGb761组于复糖复氧后给予不同浓度的EGb761培养24 h,并加入ERK1/2通路抑制剂PD98059进行干预,利用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞活力;流式细胞术检测SH-SY5Y细胞凋亡情况;Western Blot检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平变化以及p-ERK1/2/ERK1/2比值的变化。结果:SH-SY5Y细胞随着缺氧时间的延长形态逐渐变圆,活力逐渐下降,最佳OGD时间为4 h(P<0.05)。与OGD/R组相比,EGb761组细胞活力显著提高,p-ERK1/2/ERK1/2比值升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平降低,细胞凋亡率降低,EGb761发挥作用的最有效浓度为50μg/ml(P<0.05)。加入PD98059后,p-ERK1/2/ERK1/2比值降低,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平升高,细胞活力降低(P<0.05)。结论:EGb761可经ERK1/2信号通路抑制OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥神经保护作用。

雷公藤甲素通过促进小胶质细胞M2极化减轻脑缺血再灌注大鼠神经元损伤

目的研究雷公藤甲素(TP)对大鼠脑缺血再灌注(I/R)后小胶质细胞M1/M2极化的影响及分子机制。方法采用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备大脑中动脉栓塞再灌注模型,给予(0.1、0.2)mg/kg TP处理,假手术组大鼠作为对照。Longa评分法进行大鼠神经功能缺损进行评分,HE染色观察缺血侧脑组织神经元形态,神经元特异性核蛋白(NeuN)免疫荧光染色观察神经元数量;Western blot法检测缺血侧脑组织钙离子结合接头蛋白分子1(Iba1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、NeuN和胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达;ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)和IL-10的水平;免疫荧光双标记法检测小胶质细胞内Arg1和TLR4的表达。结果与模型组比较,TP处理组神经学评分明显降低,神经元损伤明显改善;IL-1β水平降低,IL-10水平增加;iNOS、TLR4、NF-κB、和caspase-3表达降低,Arg1和NeuN表达增加。结论TP处理逆转大鼠脑I/R损伤,可能与促进小胶质细胞M2极化、减少炎症因子释放与抑制凋亡有关。

羔羊肝脏IGF-I和IGF-I R基因表达的发育性变化研究

目的通过对羔羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因表达的发育性变化的研究,为羔羊生长发育规律提供理论依据。方法选择2、30、60、90和120日龄的雄性哈萨克羊和新疆细毛羊各6只(共54只,120日龄只有新疆细毛羊),测体重后屠宰,采取肝脏,用荧光实时定量PCR法,以GAPDH基因为内标,检测IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的发育性变化,并进行品种之间比较。结果(1)肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量都呈先升后降的趋势,其中雄性哈萨克羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到60日龄持续上升,60日龄后开始下降,90日龄的表达量显著低于前三个时期(P<0.05);雄性新疆细毛羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到90日龄持续上升,90日龄后开始下降,120日龄的表达量显著低于60日龄(P<0.05)。雄性哈萨克羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量在2日龄时与新疆细毛羊差异不显著(P>0.05),在30～60日龄期间都显著高于新疆细毛羊(P<0.05),在90日龄时极显著高于新疆细毛羊(P<0.01);(2)肝脏IGF-ⅠR基因的表达量都呈现持续下降的趋势,其中哈萨克羊肝脏IGF-ⅠR基因在2日龄的表达量最高,然后就持续下降,2日龄时的表达量与其他各时期差异显著(P<0.05);新疆细毛羊肝脏IGF-ⅠR基因在2日龄的表达量最高,然后就持续下降,2日龄时的表达量与其他各时期差异显著(P<0.05)。哈萨克羊肝脏IGF-ⅠR基因的表达量在2和90日龄时都极显著低于新疆细毛羊(P<0.01)。结论羔羊肝脏组织中IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的基因表达量有特定的发育模式,IGF-ⅠR的基因表达水平的变化不依赖IGF-Ⅰ的基因表达水平。

肺炎支原体肺炎患儿外周血及小鼠模型miRNAs差异表达

目的研究miRNAs在肺炎支原体肺炎患儿血中淋巴细胞以及在小鼠感染模型肺组织中的表达差异。方法通过miRNA芯片技术筛选24例肺炎支原体肺炎患儿和24例健康儿童血液淋巴细胞中差异表达的miRNAs,通过实时定量PCR法验证芯片检测结果的准确性,并构建支原体呼吸道感染小鼠模型,通过实时定量PCR法验证小鼠肺组织中相关miRNA的表达差异。结果在支原体肺炎患儿血液淋巴细胞中筛选出表达上调的miRNA 105个,下调的133个(P<0.05),通过PCR进一步证实患儿外周血及小鼠模型肺组织中miR-126、miR-181、miR-146a相对表达升高,miR-155相对表达降低,与芯片结果一致。结论 miR-126、miR-181、2017-12-18接收miR-146a、miR-155在肺炎支原体患儿外周血淋巴细胞及小鼠模型肺组织中存在差异表达,它们可能通过调控炎症因子的释放,参与肺炎支原体导致的免疫炎症反应。

胸腺瘤中EGFR和IGF-1R的表达及其意义

目的探讨胸腺瘤组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)的表达及其临床意义。方法应用免疫组化En Vision两步法检测63例胸腺瘤和15例胸腺滤泡性增生组织中EGFR和IGF-1R的表达。结果 EGFR和IGF-1R在胸腺瘤中的阳性率分别为50.8%(32/63)和55.6%(35/63),在胸腺滤泡性增生组织中的阳性率为0(0/15)和20%(3/15)。胸腺瘤组与胸腺滤泡性增生组相比,EGFR和IGF-1R蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.03),EGFR和IGF-1R高表达与胸腺瘤患者年龄、性别、肿瘤大小、是否合并重症肌无力、WHO分型均无关,但与Masaoka分期有关(P<0.01)。EGFR和IGF-1R在胸腺瘤中表达呈正相关(r=0.270,P=0.032)。结论 EGFR和IGF-1R高表达可能与胸腺瘤的发生、发展及侵袭有较密切的关系。联合检测EGFR和IGF-1R表达有助于更好地评估胸腺瘤的临床分期,为临床制定合理的治疗方案、改善患者预后提供帮助。

人参皂甙-Rd预先给药对大鼠脑的保护作用

目的探讨人参皂甙-Rd（Rd）预先给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠70只,随机分为7组（n=10）,即缺血再灌注组（CON组）、Rd 5 mg组、Rd 10 mg组、Rd 20 mg组、Rd 40 mg组、Rd 80 mg组和丙二醇溶剂组（VEC组）。所有大鼠均采用右侧颈内动脉尼龙线栓法制作大脑中动脉阻塞（MCAO）模型,并于脑缺血前1 h分别经腹腔注射相应剂量Rd及丙二醇。于再灌注后24 h、48 h和72 h进行神经行为学评分（NBS）,并于72 h行2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测量脑梗死容积百分比。结果与CON组和VEC组比较,Rd 5 mg组、Rd 10 mg组、Rd 20 mg组、Rd 40 mg组和Rd 80 mg组脑缺血再灌注后24 h、48 h、72 h神经行为学评分均较高,再灌注后72 h梗死容积均较低（P〈0.05）。Rd剂量小于40 mg/kg时,其保护效果随剂量的增加而增加。Rd 80 mg组与Rd 20 mg和Rd 40 mg组相比,NBS显著减小,脑梗死容积百分比明显升高（P〈0.05）;与Rd 5 mg组和Rd 10 mg组相比,NBS和脑梗死容积百分比均无明显差异（P〉0.05）。结论人参皂甙-Rd预先给药对大鼠短暂局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,并在5-40 mg/kg之间存在剂量依赖性的保护作用。

山西省SARS康复者创伤后应激障碍分析

目的对山西省SARS康复者创伤后应激障碍(PTSD)的发生率及相关影响因素进行分析。方法采用自编的应激源-认知问卷、经修订的事件影响量表(IES-R)、领悟社会支持量表(PSSS)、简易应对方式问卷(SC-SQ)、自尊量表(SES)、艾森克个性问卷(EPQ)对117例SARS康复者进行测试,并作相关统计分析。结果PTSD发生率为55.1%;高反应者多为隔离受限、社会歧视明显以及习惯于采用消极应对方式者。结论山西省SARS康复者PTSD的发生率高,产生PTSD的主要影响因素是隔离受限、社会歧视和消极应对方式。

MiR-126在大鼠心肌缺血再灌注早期的表达及抗凋亡作用

目的 探讨miR-126在大鼠心肌缺血再灌注（I/R）早期的表达及抗凋亡作用.方法 48只SD大鼠随机分为假手术（Sham）、I/R 2 h、I/R 4 h、I/R 6 h组,每组12只大鼠,比较各组缺血区心肌细胞凋亡蛋白水平及miR-126表达水平.构建重组腺病毒rAAV9-ZsGreen-pre-miR-126载体,24只SD大鼠随机分为：①I/R组：大鼠转染空白病毒后I/R 2 h;②I/R＋miR-126组：大鼠转染rAAV9-ZsGreen-premiR-126后I/R 2 h,再次比较各组缺血区心肌细胞凋亡蛋白水平.结果 与Sham组相比,I/R 2 h、4h、6h组大鼠心肌缺血区miR-126表达进行性降低（P＜0.05）,非缺血区miR-126表达进行性升高（P＜0.05）;心肌凋亡蛋白BAX及CASPASE-3表达水平升高（P＜0.05）,抗凋亡蛋白BCL-2表达水平降低（P＜0.05）.与I/R组相比,I/R＋miR-126干预组心肌凋亡蛋白BAX及CASPASE-3表达水平明显减少,抗凋亡蛋白BCL-2表达水平增加（P＜0.05）.结论 在I/R早期大鼠心肌缺血区miR-126表达随再灌注时间延长进行性下降,并伴随心肌细胞凋亡进展;过表达miR-126可减少I/R导致的心肌细胞凋亡,发挥保护心功能的作用.

首乌丹参方预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤PKC与iNOS mRNA表达的影响

目的观察首乌丹参方(GTSMP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)保护作用。方法将实验大鼠分为假手术组、模型组、首乌丹参方高剂量组(9g生药/kg)、首乌丹参方中剂量组(4.5g生药/kg)、首乌丹参方低剂量组(2.25g生药/kg)、阳性对照药复方丹参滴丸组(4.5g生药/kg)、工具对照药消心痛组(1.67mg/kg),共7组。采用结扎大鼠冠状动脉前降支30min/开放120min建立心肌I/R模型。通过RT-PCR分子生物学方法,观察蛋白激酶C(PKC) mRNA和iNOS mRNA的表达情况以及首乌丹参方预处理对其的影响。结果与假手术组相比,模型组和首乌丹参方各组PKC mRNA表达均有所下降;与模型组相比,首乌丹参方中剂量组、复方丹参滴丸组和消心痛组表达上调,均表现出显著性差异,首乌丹参方高剂量组及低剂量组也能促进PKC mRNA的表达,但没有显著性差异;假手术组心肌iNOS mRNA弱表达,模型组呈现高表达,首乌丹参方可下调iNOS mRNA基因表达。结论首乌丹参方预处理可促进I/R的大鼠心肌的PKC表达,下调I/R大鼠心肌iNOS mRNA的表达;其通过激动PKC,使心肌组织iNOS mRNA弱表达,可能是首乌丹参方对缺血再灌注损伤的心肌的保护效应机制之一。

一种用于基因预测的FIR数字滤波器

数字信号处理技术已经用于DNA(Deoxyribo Nucleic Acid)序列中的基因分析与识别.本文利用数字滤波器对基因序列进行分析和预测,根据基因序列周期3bp(base pair),设计了一种具有窄带选通特性的FIR(Finite Impulse Response)数字滤波器,对基因序列进行滤波,与IIR(Infinite Impulse Response)数字滤波器计算的结果对比,获得了较好的仿真结果.

microRNA-155与恶性肿瘤的研究进展

microRNAs是一种非编码的短链RNA,可在转录后水平调控靶基因的表达和翻译,涉及多种细胞发育过程。研究表明,microRNA-155(miR-155)是一个典型的多功能microRNA,参与炎症、感染、免疫等多种生理病理过程,并与肿瘤的发生、发展关系密切。近年来microRNAs的异常与肿瘤调控成为研究的热点,对于揭示肿瘤基因表达、预防疾病发展、开拓新的治疗靶点意义深远。本文就microRNA-155与恶性肿瘤的研究进展做一综述。

^(125)I-r-Sak大鼠单剂量给药的药物动力学

为测定r -Sak在大鼠体内的药代动力学参数及给药一个剂量后的分布和排泄。用12 5I标记法研究大鼠单剂量静脉注射12 5I -r -Sak的药物动力学参数及体内分布和排泄情况。结果表明 ,12 5I -r-sak按 70 μg/kg及 84 0 μg/kg两种剂量静脉给药后 ,在大鼠体内均可以二室模型拟合。低、高两种剂量的T1/2 (α) 分别为 5 .4 7± 2 .13、8.4 5± 4 .5 0min ,T1/2 ( β) 分别为 96.15± 2 2 .2 9、5 8.78± 3 2 .79min ,AUC分别为 0 .895± 0 .4 5 5、3 8.3 6± 5 .181μg·min·mL- 1,经统计分析 ,T1/2 (α) 、T1/2 ( β) 在两剂量组间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,AUC随剂量增加而显著增加 (P <0 .0 5 )。12 5I -r -Sak在大鼠体内的分布以肾脏中放射活性为最高 ,其次为血浆、肝脏、肺脏、脾脏、心脏 ,在脑内也有很高浓度。排泄试验表明 ,在给药后 96h ,累计的尿和粪排泄的放射性以及被甲状腺组织富集的放射性碘已近 80 %。

缺血再灌注损伤对新生鼠肾小管上皮细胞β_1-整合素及其mRNA表达的影响

目的 探讨新生动物肾脏缺血再灌注损伤中 β1 -整合素的变化特点。方法 建立新生大鼠不同时段的肾脏缺血再灌注模型 ,应用免疫荧光法和原位杂交法检测 β1 -整合素及其 m RNA在肾小管上皮细胞的分布和表达量。结果 1β1 -整合素在正常时主要分布在肾小管上皮细胞基底侧的细胞膜上 ;缺血 0 .5 h后其分布的变化不明显 ;再灌注 0 .5 h后 β1 -整合素开始向细胞侧壁和顶部转移 ;再灌注 2 h后这种改变最明显并伴表达的减少和肾小管结构的破坏 ,但肾小管腔中没有表达 ;从再灌注 2 4 h起开始进入恢复阶段 ,β1 -整合素逐渐重新回到基底部 ;再灌注 12 0 h后恢复阶段基本结束 ,但表达量仍低于正常。 2 β1 -整合素 m RNA主要在细胞浆中表达 ,缺血再灌注0 .5～ 2 h其表达量较正常时无减少反而有一定程度的增加 ,再灌注 2 4～ 12 0 h后仍未降至正常水平。结论 β1 -整合素在缺血再灌注时分布发生“去极化“现象并伴随表达减少 ,而其 m RNA的表达不降反升高 ,说明在缺血再灌注损伤中同时存在影响 β1 -整合素分布和其合成的因素。

NGF和CGRP对局灶性脑缺血再灌注后大鼠皮质CHOP蛋白表达的影响

目的探讨外源性神经生长因子(NGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注后大鼠顶叶皮质神经元CHOP蛋白表达的影响及其作用机制。方法用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,应用免疫组织化学方法,免疫印迹法(W estern B lotting)测定CHOP蛋白表达;M etamoph图像分析系统对结果进行分析。结果假手术组大鼠顶叶皮质未见CHOP蛋白表达;缺血组CHOP蛋白在缺血再灌注后12 h明显表达,24 h达高峰,72 h显著下降,缺血组较假手术组CHOP蛋白表达显著增加(P<0.01);NGF组和CGRP组CHOP蛋白表达分别弱于缺血组(P<0.01);NGF和CGRP合用组CHOP蛋白表达明显弱于缺血组(P<0.01),也分别弱于NGF组和CGRP组(P<0.01)。结论NGF和CGRP能分别下调局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质CHOP蛋白表达,联合应用则作用更强,二者对保护脑缺血神经元可能有协同作用。

ERK1/2和Akt通路对控制性低压后处理兔缺血/再灌注损伤脊髓线粒体功能的影响

目的研究PI3K/Akt和ERK1/2通路对控制性低压后处理兔缺血/再灌注损伤脊髓线粒体功能的影响。方法30只日本大耳白兔随机分为5组(n=6):假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R),控制性低压后处理组(Post),控制性低压后处理+PD98059组(Post+PD)、控制性低压后处理+LY294002组(Post+LY)组。除Sham组外,其余各组分别于肾动脉下水平阻断腹主动脉25 min。Post组:再灌注开始10 min采用控制性低灌注压后处理法球囊部分排空,将腹主动脉远端血压控制在5.99～7.32 kPa,10min后球囊完全开放。Post+PD组、Post+LY组:同Post组,并分别于腹主动脉开放前1 min鞘内注射ERK抑制剂PD98059(3μg,20μl)、PI3K/AKT抑制剂LY294002(10μg,20μl)。再灌注24 h后将实验动物处死,取脊髓组织用Western blot技术测定Caspase-3、胞质Cytochrome C蛋白表达;电镜观察线粒体结构。结果与I/R组比较,Post组Caspase-3和胞质Cytochrome C蛋白表达明显减少,线粒体结构破坏减轻。ERK抑制剂PD98059和PI3K/Akt抑制剂LY294002减弱了Post的作用。结论控制性低压后处理对缺血/再灌注损伤脊髓线粒体功能有保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt和ERK1/2通路有关。

飞行时间质谱技术在肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤研究中的应用

目的应用MALDI-TOFMS技术检测和探讨肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠血清中蛋白质组学的变化。方法制备大鼠肾脏I/R模型后,分别于再灌注后6、12、24h选取各组血清样本,经MALDI-TOFMS分析检测,并对各组具有差异的多肽指纹图谱鉴定分析。用SPSS13.0软件对数据进行处理。同时采用Mascot Search进行蛋白质数据库检索以确定其性质。结果①本研究中血清经IMAC-Cubead处理后,在m/z为2081Da处,检测得到具有统计学意义的多肽指纹图谱;②采用Mascot Search,进行了蛋白质数据库检索,均鉴定为大鼠纤维蛋白原片段。结论纤维蛋白原在肾脏缺血/再灌注损伤中可能起重要作用。

大鼠脑缺血再灌注后糖基化终产物及其受体RAGE、分泌型RAGE的表达

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注后血清分泌型RAGE、缺血脑组织糖基化终产物及其受体RAGE的表达。方法:本实验分为假手术组和脑缺血2 h后再灌注12 h、24 h、48 h组,共四个实验组,每组20只健康成年大鼠,雌雄不限。应用单侧大脑中动脉阻断法制作局灶型脑缺血模型,脑缺血2 h后再灌注。采用ELISA法检测血清分泌型RAGE水平,免疫组化法检测缺血脑组织糖基化终产物及其受体的变化,应用原位杂交法检测RAGEm-RNA。结果:与假手术组比较,脑缺血再灌注后大鼠血清分泌型RAGE水平下降。免疫组化结果显示脑组织糖基化终产物及其受体蛋白表达的阳性细胞数量与假手术组比较,呈增高趋势,再灌注24 h时,糖基化终产物及其受体蛋白表达达高峰,再灌注48 h时,表达有所下降。统计学分析提示再灌注24 h组、48 h组分别与假手术组比较,差异显著,具有统计学意义(P<0.05-0.01),而两组之间相比较,无显著差异(P>0.05)。原位杂交法检测脑缺血再灌注48 h组缺血脑组织RAGEmRNA阳性细胞数增加,与假手术组比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:脑缺血再灌注后缺血脑组织糖基化终产物及其受体的表达升高,而分泌型RAGE在大鼠脑缺血再灌注后血清中的含量及脑组织内的表达均下降。上述变化可能是脑缺血再灌注损伤的机制之一。