酯酶同工酶IEF电泳及香菇品种鉴别

本研究旨在建立一种鉴别香菇品种的高效、高分辨率方法，即聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦同工酶电泳法，并利用此方法对28个香菇品种进行检测。实验结果表明，不同香菇品种均有基础酶带的存在，但不同品种间在酶带条数，pI值及酶活性上有差异。

半夏药材中蛋白质IEF电泳图谱的研究

目的通过对半夏及其近缘植物的蛋白质电泳图谱比较,研究半夏药材的电泳鉴别方法。方法应用等电聚焦(isoe lectrofocus ing,IEF)技术,对不同产地半夏及其近缘植物块茎进行比较。结果半夏具有稳定的IEF电泳图谱,显示具有8条特征蛋白质带,并测定了其等电点(P I)值,半夏与其几种近缘植物的IEF谱有明显的区别。结论半夏IEF电泳图谱可作为半夏药材的鉴别依据,半夏特征蛋白质的P I值为半夏的鉴定和蛋白质分离纯化提供了参数。

IEF纯化重组A型肉毒毒素保护性抗原

在大肠杆菌中高效表达的重组A型肉毒毒素保护性抗原 (rBoNTaH46 8) ,是以包涵体形式存在 .将表达菌株发酵后 ,裂解菌体 ,制备包涵体 ,溶解后的包涵体溶液经样品处理 ,通过等电聚焦制备型电泳纯化 .纯化的重组A型肉毒毒素保护性抗原 (rBoNTaH46 8)纯度高于 90 %,产量及回收率高 .纯化的重组表达产物酶联检测具有结合活性 ,这为下一步A型肉毒毒素抗毒素的研制打下基础 .

华南几个优质高产水稻品种胚乳蛋白IEF组分中理想蛋白分布的比较

运用等电聚焦凝胶电泳、层析自动扫描、微量蛋白分离纯化、氨基酸自动分析等方法技术和ＦＡＯ／ＷＨＯ评价蛋白质营养水平标准及统计学方法，比较研究了目前华南地区几个优质高产高蛋白水稻品种胚乳全蛋白不同ＰＩ（等电点）范围ＩＥＦ（等电聚焦）组分的含量比率、营养水平和出现理想蛋白（Ｉｄｅａｌｐｉｏｔｅｉｎ，人体吸收利用率最高的蛋白）组分的机率。主要结果是：胚乳蛋白按划分的五个ＰＩ范围的组分含量比率、营养水平和出现理想蛋白组分的机率，在供试品种之间差别明显，但有共同基本趋势－在弱酸性ＰＩ范围、特别在ＰＩ６．０～５．２的组分，营养水平和出现理想蛋白组分的机率，均较其他ＰＩ范围的高。这对于从胚乳蛋白中分离出具体的理想蛋白组分（多肽链）、对于应用传统的及最新的生物技术来提高稻米蛋白营养品质，均有重要意义。

滋肾通络方对阴阳两虚型糖尿病EDIEF-5影响的研究

目的:观察自拟方滋肾通络方对阴阳两虚型糖尿病ED患者IEF-5的影响。方法:纳入阴阳两虚型糖尿病ED患者60例,治疗组和对照组各30例,在控制血糖药物的基础上,治疗组应用滋肾通络方,对照组应用金匮肾气丸,两组均服药8周,统计药物干预后阴阳两虚型糖尿病ED患者IEF-5的积分变化。结果:经过8周的治疗,治疗组IEF-5积分的改善优于对照组,并总有效率治疗组优于对照组。结论:滋肾通络方可提高阴阳两虚型糖尿病ED患者IEF-5积分。

IEF/SDS PAGE双向电泳技术的建立

IEF/SDS PAGE双向电泳的高分离度是各种类型的单向PAGE无法比拟的.以Bio—Rad公司的PROTEAN Ⅱ xi 2-D电泳系统为基础,初步研究了IEF/SDS PAGE双向电泳技术建立的条件.

闸坝河流河道内生态需水研究--以淮河为例

提出了一种估算闸坝下游河道内生态需水的方法——改进的生态水力半径法（AdaptedEcological Hydraulic Radius Approach,AEHRA）,该法能够同时计算输出相应河段的生态水位,方便对闸坝进行调度。将其应用到淮河,以鱼类作为生态保护目标,估算了上、中、下游共4个典型闸坝下游河段的生态需水和生态水位,结果表明：①鱼类产卵期内需要较大的生态流量,其顺序为：蚌埠〉周口〉颍上〉白龟山,下游大于上游,中游居中,受断面影响显著;非产卵期则为：周口〉颍上〉蚌埠〉白龟山,中游大于上下游,受河流鱼种影响较大。周口闸下河段全年各月生态需水量相同,需加强上游闸坝的联合调度满足冬季12-3月的生态需水;②要维持河道内生态流量,需进行闸坝调度调整下游水位,保证生态水位;③淮河受人类活动影响剧烈,河流的连续性被切断,生态需水变化没有连续性,只有根据最小生态水位通过闸坝调度,维持河道生态系统最小生态需水,才能逐步恢复淮河健康生态。

用液相等电聚焦电泳纯化藻蓝蛋白亚基

以纯藻蓝蛋白(C-phycocyan in,C-PC)为材料,采用Rotofor系统进行液相等电聚焦(L iqu id-phase iso-eletric focusing,LP-IEF)电泳纯化C-PC的α,β亚基,探讨蛋白质亚基纯化的制备电泳(Preparative eletro-phoresis)技术.结果显示,样品经2次等电聚焦电泳后,C-PC的α,β亚基分别浓集在pH=4.9和pH=4.1附近,平板超薄等电聚焦(Slab u ltra th in IEF)和SDS-PAGE电泳鉴定表明分别为高纯度的C-PCα,β亚基.提示LP-IEF是分离纯化等电点差异蛋白质活性亚基的简便有效的方法.

酪蛋白磷酸肽(CPPs)测定方法的研究

酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphopeptides简称CPPs)是到目前为止所发现的唯一具促钙吸收作用的短肽。在日本和德国已经由国家列入重点推荐的功能性食品添加剂。由于其生物活性中心为：－SerP－SerP－SerP－Glu－Glu－，所以CPPs实际上是一系列含有磷酸丝氨酸簇的短肽。国外主要用高效毛细管区带电泳(High performance capillary zone electrophoresis,HPCE)和高效液相色谱(HPLC)对CPPs进行定量测定和纯度测定。这些方法所需设备昂贵，对操作人员素质要求高，不能适应不同层次的要求。本项研究对直接定磷法、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS－PAGE)法、聚丙烯酰胺等电聚焦电泳(IEF)法测定CPPs进行了探讨和比较。结果表明：这三种方法都可以用来对CPPs进行定量测定，但适用于不同情况，定磷法适用于产业测定；SDS－PAGE法适用于CPPs的组分测定，而IEF则适用于较精确的测定。

中国大豆脂肪氧化酶类型鉴定及酶活性分析

大豆制品的豆腥味与脂肪氧化酶（Ｌｏｘ）引起酶促的脂质过氧化作用有关。应用改进的等电聚焦凝胶电泳方法，对中国２６个省９００份大豆资源进行类型鉴定，发现中国大豆资源中有缺失Ｌｏｘ－１、缺失Ｌｏｘ－２、缺失Ｌｏｘ－３及缺失Ｌｏｘ－２，３的珍贵材料，其中缺失Ｌｏｘ－３的材料较丰富。应用电泳图谱在激光光密度计上扫描，测定酶带峰值面积，比较了同一品种及品种间各条同工酶带活性差异。通过脂肪氧化酶漂白胡萝卜素生化实验，定量测定了品种脂肪氧化酶活性。

苦瓜种子发育过程中水溶性蛋白组分的研究

选取在果型和果色上具典型性的4个苦瓜品种为材料，对不同发育时期种子的可溶性蛋白提取物进行了SDS-PAGE和IEF分析．结果表明，所有品种苦瓜种子均含有丰富的可溶性蛋白（14.4～116.0kD），其中以分子量为27．6，47．4和43．4kD的蛋白含量较高，有3种蛋白的分子量在30kD左右，不同品种之间在小分子量蛋白的表达上有一定差异；所有品种种子均含有4种以上的碱性蛋白，但不同品种之间碱性蛋白的含量和积累规律存在一定的差异．

低磷营养胁迫条件下小麦RNA酶与酸性磷酸酶活性的变化

低磷营养胁迫条件下，长穗偃麦草一中国春二体异附加系的RNA酶（RNase）活性显著提高，RNase的IEF研究结果表明，对照条件下只有极微弱的活性带，而磷饥饿状态下则诱导出明显的特异活性带，但诱导出的活性带无基因型间的差异。长稳偃麦草－中国春和灯芯偃麦草－中国春两套二体异附加系根系分泌的酸性磷酸酶（AcPh）活性不同程度的显著提高。IEF结果表明，低磷胁迫诱导出低pH范围内（PH3－5）的特异活性带，且活性带无基因型间的差异。

小麦T型细胞质雄性不育系与可育系叶片蛋白质双向电泳分析

利用育性恢复基因 (Rf3)的近等基因系 1 0 31— 1、S— 1 65和 1 0 31— 1与S— 1 65之间的正交与反交 ,创建了四个实验品系 ( 1 0 31— 1、S— 1 65、不育品系、反交品系 ) ;采用改进的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶双向电泳技术 ,从发育遗传学的角度 ,对小麦T型细胞质雄性不育和可育株旗叶表达的相关蛋白产物进行差异分析。通过对旗叶蛋白的双向电泳分析 ,发现 4个品系有相近的蛋白质双向电泳图谱。没有相应穗中差异蛋白质的出现。

旋毛虫肌幼虫可溶性抗原、排泄分泌抗原的电泳分析

本文报道了应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（ＩＥＦ）电泳及二维电泳（ＩＥＦ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对旋毛虫肌动虫排泄分泌（ＥＳ）抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫ＥＳ抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后用考马斯亮蓝染色蛋白质，结果显示１６条蛋白带，分子量范围２１～８０ＫＤ，其中主带９条。ＩＥＦ电泳后分别用ＰＡＳ染多糖、考马斯亮蓝Ｒ－２５０染蛋白质、Ｎｉｌｅ＇ｓ蓝染脂、醋酸ａ－萘酯／坚固蓝染酪酶同工酶，结果肌幼虫ＥＳ抗原分别显示１６，２６、７及０条带；肌幼虫可溶性抗原分别显示２１、３８、４及１１条带。二维电泳后用考马斯亮蓝Ｇ－２５０染色多肤斑点，结果ＥＳ抗原显示多肽斑点６１个；肌幼虫可溶抗原显示１２２个多肽斑点。

新的水稻谷蛋白α-1亚基缺失突变体(英文)

从水稻受精卵ＭＮＵ处理后代中获得４个谷蛋白α－１亚基缺失突变品系。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ分析表明这些突变体在共同缺失１条ｐＩ６．８２多肽的同时，或形成新的多肽，或其他多肽表现量增加，这些突变体是由结构基因控制的。ＩＥＦ分析同时显示２条多肽ＰＩ６．８２和ＰＩ８．５８源自同一条谷蛋白前驱体。这４个突变体对于改良水稻谷蛋白品质、研究谷蛋白生物合成遗传调控机制以及揭示谷蛋白基因功能是不可多得的研究材料。

长穗偃麦草酸性磷酸酶与碱性磷酸酶编码基因的染色体定位

以一套中国春-长穗偃麦草二体异附加系与二体异代换系为材料,用等电聚焦(IEF)研究长穗偃麦草基因组中酸性磷酸酶(AcPh)与碱性磷酸酶(APH)编码基因的染色体定位。结果表明,AcPh大多聚焦于pH5～7范围内,其编码基因位于3E染色体,而APH编码基因则位于4E染色体。由于5E染色体的附加,AcPh活性带强度显著减弱。

宽叶韭种内分化的同工酶及可溶性蛋白的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）对宽叶韭的３个代表居群内不同植株间的过氧化物酶、酯酶和１６个居群间的酯酶（ＥＳＴ）、过氧化物酶（ＰＯＸ）、葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤＨ）、苹果酸酶（ＭＥ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、天冬氨酸转移酶（ＡＡＴ）、腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）８种同工酶系统以及可溶性蛋白进行了分析。结果发现：居群内不同植株的酶谱无差异；居群间的酶谱存在多态性，酶谱差异明显，且各居群均有其特征酶谱。采用“排序”方法和聚类分析，对宽叶韭１６个居群酶谱的相似系数和酶谱距离进行了研究。同工酶谱表型差异彼此显著的３个代表居群的可溶性蛋白双向电泳图谱也表现出明显差异，印证了同工酶的分析结果。结合细胞学的最新核型证据，从生物化学角度确定了这１６个居群间的亲缘关系和彼此的分化程度。结果表明：宽叶韭明显分为两大类，即冬季不倒苗和冬季倒苗两类，在同一类型中各居群之间彼此近缘，且冬季不倒苗的类型分化程度较高。本研究首次将多种同工酶的综合分析与聚类分析及可溶性蛋白双向电泳用于葱属植物的种内分化研究。

多功能基离子交换纤维的合成及其对贵金属吸附性能研究

以腈纶纤维为原料,经二步反应合成了含多功能基的离子交换纤维。通过元素分析和红外光谱分析给出了合成纤维具有的功能基团,测定了合成纤维对贵金属离子的吸附容量和分配系数,并讨论了动态吸附及回收金、钯、铂离子的影响因素。该纤维对Au ,Pd ,Pt 具有良好的吸附和解吸性能,用于水合成试样中Au ,Pd ,Pt 的分离和富集,获得了满意结果。

水稻种子贮藏谷蛋白的改良电泳分析法(英文)

利用１５％～２５％丙烯酸胺梯度凝胶的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析法可将水稻种子贮藏谷蛋白分离为３个酸性（α）亚基和３个碱性（β）亚基。通过调整两性电解质比例对现有等电点聚焦电泳分析法进行改良，可将谷蛋白酸性亚基和碱性亚基分别分划为１３和１４条多肽带。将上述两种方法结合起来的双向电泳分析法可以高清晰度地离析谷蛋白并获得单一多肽。此改良的电泳分析系统有助于确定水稻谷蛋白变异及谷蛋白的生化研究。