IGFBP-1、PCT联合CRP检测在胎膜早破并发绒毛膜羊膜炎中的预测作用

目的分析胰岛素生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)、降钙素原(PCT)联合C-反应蛋白(CRP)检测在胎膜早破(PROM)并发绒毛膜羊膜炎(HCA)中的预测价值。方法收集2020年1月至2023年1月北京市大兴区人民医院收治的128例PROM孕妇的临床资料,其中PROM并发HCA者37例(HCA组),单纯PROM 91例(非HCA组),对比HCA组与非HCA临床资料以及IGFBP-1、PCT、CRP表达情况,采用logistic回归分析影响PROM并发HCA的危险因素,绘制ROC曲线分析IGFBP-1、PCT、CRP对PROM并发HCA的预测效果。结果HCA组与非HCA组在人工流产史、年龄、孕周、孕次、胎位中比较,差异无统计学意义(P>0.05),HCA组破膜孕周<35周、PROM潜伏期≥48 h占比、IGFBP-1、PCT、CRP水平均明显高于非HCA组,差异有统计学意义(P<0.05);以是否发生HCA设为因变量(y=0,1),Logistic回归分析结果显示:破膜孕周<35周、PROM潜伏期≥48 h、IGFBP-1升高、PCT升高、CRP升高为影响PROM并发HCA的独立危险因素(P<0.05);ROC结果显示:IGFBP-1、PCT、CRP三者联合检测预测PROM并发HCA的灵敏度、特异度为0.976、0.910,三者联合诊断显著高于三者单独预测(P<0.05)。结论IGFBP-1、PCT、CRP在PROM并发HCA患者中表达水平明显升高,三指标联合检测有助于更好地预测HCA发生,为临床决策提供参考依据。

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b(miR-196b)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组(P <0.05)。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于稳定组(P <0.05)。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织(P <0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:临床分期[O^R=3.684(95%CI:1.259,10.778)]、术前淋巴结转移[O^R=3.557(95%CI:1.216,10.408)]、癌组织miR-196b表达[O^R=3.979(95%CI:1.359,11.641)]是NSCLC患者预后的危险因素(P <0.05),癌组织IGFBP-3表达阳性[O^R=0.220(95%CI:0.075,0.642)]是NSCLC患者预后的保护因素(P <0.05)。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%(95%CI:0.512,0.797)、60.00%(95%CI:0.496,0.781)、87.50%(95%CI:0.725,0.963),特异性分别为69.74%(95%CI:0.534,0.825)、76.32%(95%CI:0.603,0.892)、72.37%(95%CI:0.576,0.861),曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组(P <0.05)。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组(P <0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。

特发性矮小症儿童血清IGFBP-3、25(OH)D、Nesfatin-1和骨钙素水平及其临床意义

目的探讨特发性矮小症(ISS)儿童血清胰岛素生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、25羟维生素D[25(OH)D]、摄食抑制因子-1(Nesfatin-1)、骨钙素水平及其临床意义。方法选取矮小症儿童286例为观察组,其中ISS组152例,生长激素缺乏(GHD)组134例;同时选取健康儿童100例为对照组。比较各组血清IGFBP-3、25(OH)D、Nesfatin-1、骨钙素水平差异,及其与体格发育等临床特征的关系。结果观察组儿童身高、骨龄指数、血清IGFBP-3、25(OH)D、骨钙素水平低于对照组,而Nesfatin-1高于对照组(P<0.05)。ISS组儿童身高、骨龄指数、血清IGFBP-3、25(OH)D、骨钙素水平高于GHD组,而Nesfatin-1低于GHD组(P<0.05)。血清IGFBP-3、25(OH)D和骨钙素水平身高≥125 cm儿童高于<125 cm儿童、骨龄指数≥0.90儿童高于<0.90儿童;而Nesfatin-1趋势相反(P<0.05)。ISS儿童血清IGFBP-3、25(OH)D、骨钙素与儿童身高、骨龄指数呈正相关(P<0.05),Nesfatin-1与儿童身高、骨龄指数呈负相关(P<0.05)。结论与健康儿童相比,ISS儿童血清IGFBP-3、25(OH)D、骨钙素水平较低,Nesfatin-1水平较高,可能与儿童体格发育存在相关性。

IGFBP-3抗原的真核表达分析及校准品制备评估

目的:观察IGFBP-3抗原在不同真核细胞中的表达差异,筛选最优的IGFBP-3抗原进行IGFBP-3抗原诊断试剂盒开发的校准品性能分析。方法:将人IGFBP-3基因分别克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K及哺乳动物细胞表达载体pCMV中,分别转化毕赤酵母GS115、HEK293细胞及CHO细胞进行表达。以Ni-NTA和SDS-PAGE技术对表达产物进行活性分析及纯化鉴定,利用IGFBP-3检测试剂盒对纯化抗原进行校准品性能分析。结果:IGFBP-3抗原表达过程中易降解,仅在HEK293细胞中成功得到全长蛋白,且配制成的校准品考核反应性及稳定性均满足需求,为诊断试剂盒的进一步开发奠定了坚实基础。结论:HEK293体系表达的IGFBP-3抗原更适用于试剂盒校准品。

IGF-1、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨类胰岛素一号生长因子(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清和肺癌组织中的表达及临床意义。方法 收集98例NSCLC纳入观察组,同时收集肺部良性病变40例纳入对照组。统计两组血清及肺癌组织中IGF-1、IGFBP-3表达。结果 观察组血清IGF-1水平高于对照组,IGFBP-3水平低于对照组,P<0.05。血清IGF-1、IGFBP-3水平与TNM分期、淋巴结转移、局部侵犯有关,P<0.05。观察组IGF-1阳性表达率显著高于对照组,IGFBP-3阳性表达率显著低于对照组,P<0.05。IGF-1、IGFBP-3阳性表达率与TNM分期、淋巴结转移、局部侵犯有关,P<0.05。血清IGF-1诊断NSCLC AUC为0.733,灵敏度55.5%,特异度91.2%,最佳截断值150.26μg/L;血清IGFBP-3诊断NSCLC AUC为0.799,灵敏度63.6%,特异度78.6%,最佳截断值1413.54μg/L。结论 NSCLC患者血清IGF-1、IGFBP-3主要与TNM分期、淋巴结转移及局部侵犯存在关系,且血清IGF-1、IGFBP-3水平可作为NSCLC辅助诊断手段。

不同剂量重组人生长激素对特发性矮小症患儿血清IGF-1和IGFBP-3表达的影响

目的:探讨不同剂量重组人生长激素(rhGH)对特发性矮小症(ISS)患儿血清类胰岛素一号生长因子(IGF-1)和重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)表达的影响。方法:以随机抽签法将2019年11月-2020年12月抚州市第一人民医院收治的90例ISS患儿分为三组(低、中、高剂量组),每组30例。三组均给予常规基础治疗,低、中、高剂量组分别给予皮下注射剂量为0.26、0.35、0.41 mg/kg的rhGH治疗,均连续治疗1年。比较三组治疗前和治疗1年后的生长发育相关指标[身高(Ht)、生长速率(GV)、身高标准差积分(HtSDS)、骨龄]和激素类指标(IGF-1、IGFBP-3)水平,评估三组不良反应发生率。结果:治疗前三组Ht、GV、HtSDS、骨龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗1年后,三组Ht、GV、HtSDS、骨龄比较,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1年后,与低、中剂量组比较,高剂量组Ht、GV、HtSDS、骨龄均明显较优,且中剂量组的GV优于低剂量组(P<0.05)。治疗1年后,高剂量组IGF-1、IGFBP-3水平均高于中、低剂量组(P<0.05)。低、中、高剂量组不良反应发生率分别为6.67%、10.00%、16.67%,三组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与低、中剂量rhGH相比较,给予ISS患儿高剂量rhGH治疗,更能有效促进患儿的生长发育,提高其血清IGF-1、IGFBP-3表达水平,且高剂量rhGH不会增加不良反应发生率,具有较高的安全性。

醋酸亮丙瑞林对特发性中枢性性早熟女童血清IGF⁃1、IGFBP⁃3水平的影响

目的观察醋酸亮丙瑞林对特发性中枢性性早熟(ICPP)女童血清IGF⁃1、IGFBP⁃3的影响。方法选取2019年4月至2022年4月自贡市第四人民医院326例ICPP女童,随机分为观察组和对照组各163例,对照组予以醋酸甲地孕酮片,观察组加以醋酸亮丙瑞林微球皮下注射。比较两组临床疗效、BA/CA、成年预测终身高、乳房发育情况、血清性激素、B超检查结果、血清IGF⁃1、IGFBP⁃3及不良反应。结果治疗6个月后,观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组BA/CA均较治疗前减小,且观察组小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组成年预测终身高均较治疗前增加,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组乳房发育Tanner分期Ⅱ期、Ⅲ期占比低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组血清LH、E2、FSH水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组子宫容积、卵巢容积、卵泡直径均较治疗前减小,且观察组小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组血清IGF⁃1、IGFBP⁃3水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论醋酸亮丙瑞林治疗ICPP可下调性激素及IGF⁃1、IGFBP⁃3表达,抑制第二性征发育及骨成熟。

黄条鰤igfbp-1和igfbp-2基因克隆、表达及其生长调控作用

胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding proteins,IGFBPs)在调节胰岛素样生长因子的生物学活性和生长调控中起着至关重要的生理作用。本研究克隆了黄条鰤(Seriola aureovittata)igfbp-1、igfbp-2a和igfbp-2b等3个基因cDNA编码的开放阅读框(ORF)序列,分析了其组织分布特征,并检测了工厂化不同养殖密度下黄条鰤肝脏中5个基因igfbp-1、igfbp-2a、igfbp-2b、igf-1和igf-2对生长的调控作用。结果显示,igfbp-1的ORF长为741 bp,共编码246个氨基酸;igfbp-2a的ORF长度为882 bp,共编码293个氨基酸;igfbp-2b的ORF长度为810 bp,共编码269个氨基酸。它们均具有广泛的组织表达特性,其中在肝脏中显著高表达,且具有性别二态性表达特性。工厂化养殖条件下,低密度组实验鱼生长速度最快且igfbp-1、igfbp-2a、igfbp-2b、igf-1和igf-2表达量均最高,与中、高密度组有显著性差异(P<0.05),且与血清IGF-1、GH表达趋势相同,与皮质醇含量及葡萄糖浓度的趋势相反;而中、高密度组实验鱼的生长及igfbp-1、igfbp-2a、igfbp-2b、igf-1和igf-2表达量均无显著差异。本研究表明,igfbp-1、igfbp-2a和igfbp-2b参与了不同养殖密度下黄条鰤生长的调控过程,且与igf-1、igf-2对生长的表达调控存在正向协同效应。研究结果为阐释黄条鰤生长的分子机制以及工厂化条件下适宜养殖密度的调控提供了理论依据。

血清NLR、sVCAM-1和IGFBP-3水平与妊娠期肝内胆汁淤积症病情程度和疾病预后的相关性

目的探讨血清中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、可溶性血管细胞黏附因子-1(sVCAM-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)水平检测在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)病情和预后评估的价值。方法将2019年1月-2021年12月南通大学附属海安医院收治的83例ICP孕妇列入观察组,根据血清总胆汁酸(TBA)水平分为轻度亚组(n=34)、中度亚组(n=30)和重度亚组(n=19),根据妊娠结局分为良好亚组(n=65)和不良亚组(n=18);选择同期产检和分娩的健康产妇35名列入对照组。检测比较观察组和对照组、观察组中不同病情严重程度和不同妊娠结局亚组的NLR、sVCAM-1和IGFBP-3水平,Pearson分析NLR、sVCAM-1和IGFBP-3水平与血清ALT、TBil水平以及胎儿生长受限(FGR)和术后出血量的相关性,绘制ROC分析单独和联合检测NLR、sVCAM-1和IGFBP-3水平对ICP病情和预后的评估效能。结果观察组的NLR和sVCAM-1分别为(3.76±0.85)和(769.50±69.53)pg/L,高于对照组的(1.82±0.49)和(423.29±48.37)pg/L,观察组的IGFBP-3为(4.38±0.72)μg/L,低于对照组的(5.73±0.96)μg/L,差异有统计学意义(t=9.528、15.947、11.852,均P<0.05)。观察组重度亚组的NLR和sVCAM-1分别为(4.86±1.02)和(952.41±89.76)pg/L,高于中度和轻度亚组的(3.90±0.85)、(734.65±67.53)pg/L和(2.71±0.69)、(564.52±55.49)pg/L;重度亚组的IGFBP-3为(2.36±0.42)μg/L,低于中度和轻度亚组的(2.93±0.54)μg/L和(3.58±0.67)μg/L,差异有统计学意义(Z=23.924、36.571、17.862,均P<0.05)。观察组妊娠结局不良亚组的NLR和sVCAM-1分别为(4.95±1.05)和(971.46±92.35)pg/L,高于良好亚组的(3.67±0.78)和(698.75±63.24)pg/L,不良亚组的IGFBP-3为(2.24±0.39)μg/L,低于良好亚组的(3.12±0.58)μg/L,差异有统计学意义(t=8.207、7.853、7.426,均P<0.05)。Pearson分析显示,观察组的NLR和sVCAM-1与ALT、TBil和术后出血量呈正相关,与FGR呈负相关;IGFBP-3与FGR呈正相关,与ALT、TBil和术后出血量呈负相关(P<0.01)。ROC显示,NLR、sVCAM-1和IGFBP-3水平单独及联合检测评估ICP的AUC分别为0.691、0.638、0.725和0.914,联合检测的敏感度和特异度均高于任一单项检测,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清NLR、sVCAM-1和IGFBP-3水平联合检测对ICP患者的病情程度和预后评估的临床价值较高。

IGF-1/IGFBP-3摩尔比值在矮身材患儿重组人生长激素治疗时的变化研究

目的观察不同病因矮身材患儿用重组人生长激素(rhGH)治疗1年期间IGF-1/IGFBP-3摩尔比值变化,为其评价rhGH治疗效果及安全性提供理论依据。方法研究对象为2017年5月至2022年11月就诊于我院门诊,随访1年且临床资料完整的67例矮身材患儿[小于胎龄儿(SGA)12例、生长激素缺乏症(GHD)18例和特发性矮身材(ISS)37例]。分别于初始治疗(治疗0月),治疗3、6、9、12月,记录3组患儿身高、体重、rhGH治疗相关不良反应事件,同时测定IGF-1水平、IGFBP-3水平,并计算IGF-1/IGFBP-3摩尔比值。同时将我院儿童保健门诊0~13岁正常健康体检儿童(247名)作为对照人群,收集临床资料,测定IGF-1、IGFBP-3水平,计算IGF-1/IGFBP-3摩尔比值。结果矮身材患儿的IGF-1/IGFBP-3摩尔比值与IGF-1水平呈正相关(r=0.843,P<0.001);IGF-1/IGFBP-3摩尔比值SDS与IGF-1SDS水平呈正相关(r=0.773,P<0.001);rhGH治疗1年期间,SGA、GHD及ISS患儿的IGF-1/IGFBP-3摩尔比值与IGF-1水平出现相应变化,且变化趋势相同,说明IGF-1/IGFBP-3摩尔比值也可以是评价矮身材rhGH治疗疗效的一个生物标志物。且当IGF-1水平超过2 SDS时,IGF-1/IGFBP-3摩尔比值相对稳定,未发现不良反应事件,表明IGF-1/IGFBP-3摩尔比值在rhGH治疗安全性评估中具有合理性。结论IGF-1/IGFBP-3摩尔比值是评价矮身材rhGH治疗的一个生物标志物;rhGH治疗期间,IGF-1/IGFBP-3摩尔比值在rhGH疗效和安全性评估中具有一定科学依据。

TIMP-2·IGFBP-7对成例肾病综合征急性肾损伤发生发展的预测价值

目的 明确[TIMP-2]×[IGFBP-7]对成例肾病综合征急性肾损伤发生的预测价值。方法 选取2020年12月—2022年12月济南市第八人民医院收治的102例肾病综合征患者为研究对象,根据急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的发生情况分为AKI组(n=29)及非AKI组(n=73)。对比两组患者的TIMP-2、IGFBP-7、[TIMP-2]×[IGFBP-7]水平,并评估其预测价值。结果 AKI组入院时的TIMP-2、IGFBP-7、[TIMP-2]×[IGFBP-7]水平分别为(3.34±0.57)ng/mL、(159.48±28.95)ng/mL、(543.54±168.17)(ng/mL)2均高于非AKI组,差异有统计学意义(t=11.507、9.184、12.132,P<0.001)。[TIMP-2]×[IGFBP-7]预测AKI的AUC、95%CI、P值、约登指数、敏感度及阴性预测值均高于单一TIMP-2预测和IGFBP-7预测,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 [TIMP-2]×[IGFBP-7]对肾病综合征发生AKI有早期预测价值,可为临床提供诊断依据,改善患者预后。

猪脂肪组织中IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化及其品种差异

采用荧光定量PCR技术分析长白猪和太湖猪背部皮下脂肪组织中胰岛素样生长因子2和胰岛素样生长因子结合蛋白3基因在30、60、90、120和150日龄时表达水平的发育性变化。结果表明:(1)品种内日龄间比较,长白猪IGF2mRNA在30日龄时的表达量极显著高于其他日龄(P<0.01),之后逐渐下降,至120日龄降到最低,150日龄时又明显上升;太湖猪IGF2mRNA在30～60日龄的表达量较高,90日龄降至最低,120日龄迅速回升,之后又有所下降。两品种IGFBP3mRNA表达的发育性变化模式基本相同,30日龄时表达量最高,60日龄显著下降(P<0.05),之后趋于平缓但略有波动。(2)品种间同日龄比较,120日龄时太湖猪IGF2mRNA的表达量极显著高于长白猪(P<0.01),150日龄时太湖猪IGFBP3的表达量极显著低于长白猪(P<0.01),其余日龄间两品种差异均不显著(P>0.05)。研究结果提示:猪脂肪组织IGF2和IGFBP3基因表达存在明显的发育性变化和品种差异;IGF2基因表达水平的降低可能与脂肪细胞的增殖有关。

缢蛏IGFBP基因结构及生长性状相关SNP筛选

类胰岛素生长因子结合蛋白（IGFBP）是IGF系统的一部分,主要参与IGF的运输、定位和生物活性调节。本研究采用RACE技术和长PCR技术,克隆了缢蛏IGFBP基因的c DNA和DNA全长序列,应用荧光定量PCR技术分析了缢蛏不同发育时期和不同组织中IGFBP mRNA的表达特征,并进一步筛选了IG FBP基因与生长性状相关的SNP位点。序列分析表明,缢蛏IGFBP c DNA序列全长631 bp,包括5＇端非编码区60 bp,3＇端非编码区136 bp和开放阅读框435 bp,编码144个氨基酸。该基因含有保守的IGFBP-N端,包含12个半胱氨酸残基,其中1~18个氨基酸为信号肽,属于分泌型蛋白。IGFBP DNA全长3 122 bp,其中包含1个内含子（2 687 bp）和2个外显子（200和235 bp）。荧光定量PCR结果显示,IGFBP mRNA在消化腺组织中表达量最高;在缢蛏的稚贝期,IGFBP mRNA呈现高表达,而在其他发育时期表达量低。在IGFBP基因中筛选到4个SNP位点,其中1个SNP位点与缢蛏的壳长和体质量呈显著相关。

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF-、IGFBP_3的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞 ,然后在细胞培养液中分别添加 0、7.8、15 .6、31.2、6 2 .5 μm ol/ L 铜。结果表明 ,软骨细胞在 4种浓度的铜中可存活并增殖 ,而且能增加胰岛素样生长因子 (IGF- )、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3 )的分泌量。但随铜浓度的增加 ,其存活率、增殖率、3 H- Td R掺入率及 IGF- 、IGFBP3 的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加 31.2μmol/ L铜对软骨细胞的增殖作用最强 ,增殖率、3 H- Td R掺入数、IGF- 、IGFBP3 的分泌量显著高于对照组 (P <0 .0 1)。表明 31.2 μmol/ L 铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌 IGF- 、IGFBP3 的最适浓度。

IGFBP-3基因多态性及其与中国美利奴羊部分羊毛性状的关联性分析

采用PCR-SSCP方法对中国美利奴羊和哈萨克羊中IGFBP-3基因的多态性进行了检测,并对不同基因型与中国美利奴羊部分羊毛性状间的关联性进行了分析。结果在位于内含子1区的一段178bp的扩增产物经SSCP分析后出现了3种基因型,基因型AA、AB和BB及等位基因A、B在中国美利奴羊中的频率分别为0.70、0.24、0.06和0.82、0.18;在哈萨克羊中的频率分别为0.87、0.13、0.00和0.93、0.07。序列分析发现:在该序列的122位碱基表现多态性(g.122G>T)。所研究的两个群体在该位点上均处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.01)。不同基因型对部分羊毛性状有一定的影响:不同基因型个体在剪毛后体重和净毛率上没有明显差异。AA、AB及BB基因型个体的羊毛伸直长度逐渐变短,其中AA与AB基因型之间差异极显著(P<0.01)。AA型个体的剪毛量和羊毛密度要明显低于AB型(P<0.01)和BB型个体(P<0.05);羊毛纤维直径则明显高于AB型(P<0.01)和BB型(P<0.05)个体。

五指山猪8种组织IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化研究

采用Q-PCR技术检测了胰岛素样生长因子2(IGF2)和胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)基因在30、60、90、120和150日龄五指山猪心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、肌肉、胃脏和小肠等8种组织中的mRNA表达水平。结果表明:(1)IGF2基因在8种组织中的表达呈相似的变化规律:各组织mRNA表达量随着日龄的增加而降低,30日龄时表达量最高,150龄时表达量最低,差异显著(P<0.01);(2)IGFBP3基因在心脏、肺、脾脏、肾脏、肠、胃等组织中的mRNA表达规律相似:即从30～150日龄,依次递减;而肝脏和肌肉mRNA表达从30日龄开始上升,肝脏在90日龄达最高,肌肉在60日龄时达最高,随后二者开始下降,在150日龄时达最低水平。以上结果初步揭示了五指山猪IGF2和IGFBP3基因表达的发育性变化模式,为深入研究五指山猪生长发育及矮小性状形成机理提供了基础数据。

类胰岛素生长因子结合蛋白IGFBP-3的研究进展

类胰岛素生长因子(Insulin-like growth factor,IGF)信号系统是进化上非常保守的信号转导途径,包括2个IGF配体、2个IGF受体和6个IGF结合蛋白(IGF binging protein,IGFBP)。IGFBP能结合IGF并调节其作用。IGFBP-3是血液中主要的IGF载体蛋白。离体(in vitro)实验研究发现,IGFBP-3可以抑制或促进IGF的作用,在缺乏IGF受体的细胞中IGFBP-3仍然具有活性。由此可见,IGFBP-3除了具有IGF依赖性作用,还具有IGF非依赖性作用。此外还发现IG-FBP-3能定位于细胞核并与类视黄醇X受体-α(Retinoid X receptor-α,RXRα)结合。越来越多的研究结果显示出IGFBP-3在生物体内作用的复杂性,使探讨IGFBP-3体内(in vivo)作用机制的研究成为热点。本文综述了IGFBP-3的功能、作用机制,与肿瘤、血管生成的关系,以及正常状态下IGFBP-3的生理功能。

IGF-I与IGFBP-1基因对京海黄鸡生长性状的遗传效应分析

旨在对IGF-I和IGFBP-1基因部分SNPs与鸡生长性状进行关联分析。试验以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP方法检测2个候选基因的单核苷酸多态性(SNPs),采用一般线性模型(GLM)分析基因型与生长性状的遗传效应。结果表明,IGF-I基因外显子3序列的60bp处有A→G的点突变,在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB 3种基因型,A等位基因频率为0.613,B等位基因的频率为0.387;IGFBP-1基因外显子2序列的21bp处有A→T的点突变,104bp处有T→C的突变,在京海黄鸡中检测到CC、CD和DD 3种基因型,C等位基因频率为0.558,D等位基因频率为0.442。IGF-I基因BB基因型个体4周龄体质量显著高于AA和AB型个体(P<0.05);IGFBP-1基因DD基因型个体8周龄体质量显著高于CC基因型个体(P<0.05),4、12和16周龄体质量差异极显著(P<0.01)。因此,推测这些SNPs对京海黄鸡生长性状具有一定的影响,应用于鸡育种过程中的标记辅助选择可以加快育种进程。

IGFBP-5及p53与汉防己甲素抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的关系研究

目的研究汉防己甲素(tetrandrine,Tet)抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用及可能的分子机制。方法采用CCK-8、流式及Western blot分析不同浓度Tet对MCF-7细胞增殖与凋亡的影响;通过real-time PCR、Western blot检测Tet对MCF-7细胞IGFBP-5表达的影响;应用CCK-8分析Tet及IGFBP-5过表达或沉默表达对Tet抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响;利用Western blot检测Tet对MCF-7细胞p53表达的影响,以及过表达IGFBP-5和(或)Tet对乳腺癌MCF-7细胞p53表达的影响。结果 Tet呈浓度和时间依赖性抑制MCF-7细胞增殖,诱导G1期阻滞,并降低PCNA表达水平;同时,Tet明显增加MCF-7细胞凋亡比例,升高Bad的蛋白水平,降低Bcl-2的蛋白水平。Tet上调MCF-7细胞IGFBP-5的表达水平,过表达IGFBP-5增加Tet对MCF-7细胞的增殖抑制作用,而沉默IGFBP-5则减弱Tet的这种作用。Tet升高MCF-7细胞的p53蛋白水平,降低MDM2的蛋白水平;过表达IGFBP-5增强Tet对p53表达的促进和对MDM2表达的抑制作用。结论 Tet对MCF-7细胞增殖具有抑制作用,机制可能与其上调IGFBP-5而增强p53信号的功能有关。

pEGFC1-IGFBP7诱导恶性黑素瘤SK-MEL-28细胞的凋亡

目的:构建胰岛素样生长因子结合蛋白7(insulin-like growth factor binding protein7,IGFBP7)表达质粒(pEGFC1-IGFBP7),研究IGFBP7对恶性黑素瘤细胞SK-MEL-28凋亡的影响。方法:构建pEGFC1-IGFBP7质粒,并将pEGFC1-IGFBP7质粒及空质粒分别转染入SK-MEL-28细胞,荧光显微镜观测细胞转染效率,Annexin-FITC/PI检测转染后SK-MEL-28细胞的凋亡。结果:成功构建pEGFC1-IGFBP7质粒,用Effectene试剂能将pEGFC1-IGFBP7质粒有效转染入SK-MEL-28细胞,转染效率达61%。流式细胞仪结果显示pEGFC1-IGFBP7可明显促进SK-MEL-28细胞凋亡,转染24h后的凋亡率达(28.4±2.57)%,转染空质粒及未转染组细胞凋亡率分别为(5.8±0.44)%和(6.4±0.71)%(F=406.138,P<0.05)。结论:pEGFC1-IGFBP7能有效诱导黑素瘤SK-MEL-28细胞凋亡,为IGFBP7为基础的黑素瘤基因治疗提供了实验依据。