基于MCP-1/CCR2通路研究miR-28-5p对老龄自发性高血压大鼠的干预作用

目的研究基于单核细胞趋化蛋白(MCP)-1/CC趋化因子受体(CCR)2通路微小核糖核酸-28-5p(miR-28-5p)对老龄自发性高血压大鼠的干预作用。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠6只设为正常组,自发性高血压大鼠18只分为模型组、对照组、miR-28-5p组各6只,miR-28-5p水平检测采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法,检测肺功能相关指标,采用酶联免疫法检测炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测MCP-1及CCR2通路相关蛋白表达。结果与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及左室收缩压(LVSP)水平明显较高,左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)水平明显较低(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05)。与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较高(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05)。结论miR-28-5p可通过调控MCP-1、CCR2通路蛋白水平改善老龄自发性高血压大鼠的心功能,干预抑制炎性反应。

通经定晕丸阻断颈椎病大鼠NF-κB激活MCP-1/CCR2通路及TNF-α及IL-1β、IL-6表达的研究

目的:研究通经定晕丸阻断颈椎病大鼠核因子-κB(NF-κB)激活单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:用手术的方法制作颈椎病大鼠模型,用通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。4周后检测,腹主动脉取血,进行血液黏度,血液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取颈椎椎间盘进行组织形态学分析;实时定量PCR检测颈椎椎间盘组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达,Western blot检测椎间盘组织中NF-κBp65蛋白表达。结果:通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)可显著改善颈椎病模型大鼠的一般状况,降低血液低切黏度值、中切黏度值、高切黏度值,促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量及椎间盘组织中MCP-1、CCR2和NF-κBp65的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),减轻促炎因子对椎间盘造成的损伤,降低颈椎间盘高度和退变程度,降低纤维环裂隙、髓核、细胞数量、软骨厚度,其中以通经定晕丸10.0 g/kg剂量组作用效果更为显著。结论:通经定晕丸对颈椎病模型大鼠具有较好的治疗的作用,其作用机制与降低血液黏度,抑制MCP-1/CCR2信号通路激活、NF-κB活化及TNF-α、IL-1β和IL-6的生成相关。

MCP-1/CCR2在老年高血压不同证型中的表达

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体人CC趋化因子受体-2(CCR2)在老年高血压不同证型中的表达情况。方法 90例高血压患者随机分为肝阳上亢型、肝火上炎型、肝肾阴虚型各30例,选择30例健康人血清为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MCP-1浓度,应用流式细胞仪检测单核细胞表面CCR2的表达。结果肝火上炎组、肝阳上亢组、肝肾阴虚组血清MCP-1水平和单核细胞表面CCR2表达率均高于健康对照组,且肝肾阴虚组高于肝火上炎组和肝阳上亢组,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。结论 MCP-1和CCR2可能参与了不同证型高血压的发生发展过程,且随着病程的延长、病情的加重,MCP-1/CCR2的生成也就越多。

IL-8/CXCR1/2信号通路在卵巢癌发生发展中的研究进展

CXC趋化因子受体1/2(CXCR1/2)是一类G蛋白偶联受体,白细胞介素-8(IL-8)是肿瘤炎症微环境中的一种重要趋化因子。IL-8通过结合CXCR1/2激活下游信号通路,参与肿瘤细胞增殖、上皮-间充质转化(EMT)、侵袭转移、血管生成等过程。IL-8/CXCR1/2信号通路可促进多种肿瘤的增殖、侵袭、转移等过程,但IL-8/CXCR1/2信号通路在肿瘤发生、发展过程中的调控机制目前尚不明确,尤其是在卵巢癌细胞增殖、EMT、侵袭转移、血管生成中的调控机制。由于IL-8/CXCR1/2信号通路可拮抗卵巢癌的化疗效果,因此研究IL-8/CXCR1/2信号通路与卵巢癌发生、发展的关系至关重要。

干扰性小核糖核酸靶向抑制趋化因子受体4基因表达对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨干扰性小核糖核酸(siRNA)靶向抑制鼻咽癌细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因表达对癌细胞增殖、侵袭的影响及机制。方法收集新乡医学院第一附属医院2014年1月至2016年12月保存的鼻咽癌及相应的癌旁组织标本各42例,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4 mRNA及蛋白表达。将人鼻咽癌细胞系CNE-2Z分为空白对照组(细胞未做任何处理)、阴性对照组(细胞转染无义siRNA序列)和CXCR4转染组(细胞转染CXCR4的靶向siRNA序列),转染48 h后采用Western blot法检测各组细胞中CXCR4、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达;应用细胞计数试剂盒和Transwell小室分别检测细胞的增殖和侵袭能力。结果鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4 mRNA表达分别为5.526±0.143、0.953±0.091,蛋白表达分别为0.522±0.047、0.053±0.011,鼻咽癌组织中CXCR4 mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(P<0.05)。CXCR4转染组细胞中CXCR4、MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞存活率、细胞侵袭数均显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),但空白对照组和阴性对照组细胞中CXCR4、MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞存活率、细胞侵袭数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞中CXCR4基因表达可显著降低肿瘤细胞的增殖与侵袭能力,其机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。

火麻仁油对代谢综合征大鼠NF-κB/MCP-1/CCR2信号通路及促炎因子表达影响

目的:观察火麻仁油对代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠核因子-κB(NF-κB)/单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用喂养高盐高脂高糖饲料,建立实验性MS大鼠模型,然后用火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。实验大鼠分别于给药后的第2周和第4周进行实验,检测大鼠血压(BP)、肥胖相关指标(体重、腹围、体长,计算Lee's指数和肥胖指数);进行血液中空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取肝组织进行组织形态学分析;实时定量PCR检测肝组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达; Western blot检测肝组织中MCP-1、CCR2和NF-κB p65蛋白表达。结果:火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg可显著改善MS模型大鼠的一般状况,降低BP、体重、腹围、Lee's指数和肥胖指数,降低血液中FBG、FINS、FAA、TG、TC、LDL-D及TNF-α、IL-1β和IL-6含量,升高血液中HDL-D含量,抑制肝组织脂肪变性及炎症细胞浸润,降低肝组织中NF-κB p65和MCP-1、CCR2表达。结论:火麻仁油对大鼠MS具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制MCP-1、CCR2表达、NF-κB活化及促炎因子的生成相关。

汉黄芩素调节MCP-1/CCR2信号通路对妊娠高血压大鼠心脏炎症的影响

目的探讨汉黄芩素调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/CC类趋化因子受体2(CCR2)信号通路对妊娠高血压大鼠心脏炎症的影响。方法通过灌胃亚硝基左旋精氨酸甲酯构建妊娠高血压大鼠模型。将大鼠随机分为对照组(等量0.9%NaCl)、模型组(等量0.9%NaCl)和低、高剂量实验组(灌胃3.33、13.32 mg·kg^(-1)汉黄芩素)及硫酸镁组(腹腔注射100 mg·kg^(-1)硫酸镁)、重组大鼠MCP-1蛋白(rRMCP-1)组(腹腔注射0.026 mg·kg^(-1)rRMCP-1)、高剂量+rRMCP-1组(灌胃13.32 mg·kg^(-1)汉黄芩素+0.026 mg·kg^(-1)rRMCP-1),每组12只。各组给药1天1次,持续7 d。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;用免疫荧光染色检测大鼠心肌组织中M1、M2型巨噬细胞表达;用蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织中MCP-1蛋白表达。结果对照组、模型组和低、高剂量实验组及硫酸镁组、rRMCP-1组、高剂量+rRMCP-1组的血清TNF-α水平分别为(10.06±0.41)、(23.39±0.57)、(19.89±0.62)、(13.64±0.51)、(12.97±0.48)、(28.84±1.05)和(17.15±0.69)pg·mL^(-1);M1型巨噬细胞表达的荧光强度分别为32.26±1.43、58.84±2.11、50.66±1.89、36.69±1.57、35.87±1.59、67.73±2.01和48.53±1.86;M2型巨噬细胞表达的荧光强度分别为31.15±1.20、46.56±1.03、51.92±1.04、59.11±0.82、59.26±0.83、40.26±1.12和45.53±1.65;MCP-1蛋白表达水平分别为0.58±0.03、1.86±0.11、1.62±0.09、0.76±0.07、0.78±0.06、2.16±0.13和1.34±0.12。模型组上述指标与对照组比较,低、高剂量实验组和硫酸镁组、rRMCP-1组上述指标与模型组比较,高剂量实验组上述指标与高剂量+rRMCP-1组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论汉黄芩素可能通过抑制MCP-1/CCR2信号通路抑制妊娠高血压大鼠心脏炎症反应。

芒果苷对自发性高血压大鼠相关血管形态学及MCP-1/CCR-2通路的影响

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)颈动脉、胸主动脉、肠系膜上动脉形态学变化,进一步深入研究芒果苷对SHR相关血管炎性因子表达及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR-2)通路的影响。方法:SHR 40只,随机分为模型组,苯那普利组(10 mg·kg-1)与芒果苷低、中、高剂量组(25,50,100 mg·kg-1),另选同周龄8只雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为正常组。连续灌胃8周后,每两周观察各组大鼠收缩压情况,苏木素-伊红(HE)染色观察颈动脉、胸主动脉、肠系膜上动脉形态学,免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉MCP-1,CCR-2的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测胸主动脉MCP-1,CCR-2 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组炎症细胞明显增多,收缩压显著高于WKY组血压(P <0. 01),胸主动脉中MCP-1,CCR-2蛋白和mRNA表达显著升高(P <0. 01);与模型组比较,苯那普利以及芒果苷高剂量组炎症细胞明显减少,内皮边缘有改善、纤维组织浸润明显好转,收缩压显著降低(P <0. 01),苯那普利及芒果苷低、中、高剂量组胸主动脉中MCP-1,CCR-2蛋白和mRNA表达水平显著降低(P <0. 01)。结论:自发性高血压大鼠颈动脉、胸主动脉、肠系膜上动脉存在一定的炎症损伤。其机制可能是芒果苷通过抑制SHR血管中MCP-1/CCR-2通路表达,从而对血管产生抗炎作用。

苦参碱减轻慢性肾小球肾炎大鼠肾脏损伤及其机制

目的探讨苦参碱(Mat)通过调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)信号通路对慢性肾小球肾炎大鼠肾脏损伤的影响。方法采用皮下注射牛血清清蛋白的方式建立慢性肾小球肾炎大鼠模型,将50只大鼠随机均分为对照组、模型组、苦参碱低、高剂量组(Mat-L组、Mat-H组)、苦参碱^(+)CCR2组(Mat^(+)CCR2组),每组10只,连续灌胃4周。检测24 h尿蛋白排泄量;剥离脾脏与胸腺,计算脏器指数;检测各组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;HE染色法观察各组大鼠肾组织病理变化;ELISA法检测肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6水平;流式细胞术检测各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群比例;Western blotting法测定MCP-1、CCR2蛋白表达。结果模型组大鼠脾脏指数和胸腺指数显著降低,肾组织有大量炎症细胞浸润,24 h尿蛋白、BUN、Scr、TNF-α、IL-6以及MCP-1、CCR2表达显著升高,外周血T细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)以及CD4^(+)/CD8^(+)比值显著降低,CD8^(+)比例显著升高(P<0.05);Mat-L组、Mat-H组大鼠脾脏指数和胸腺指数升高,肾组织炎症浸润现象改善,24 h尿蛋白、BUN、Scr、TNF-α、IL-6以及MCP-1、CCR2表达显著降低,外周血T细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)以及CD4^(+)/CD8^(+)比值显著升高,CD8^(+)比例显著降低(P<0.05);CCR2减弱了Mat-H对慢性肾小球肾炎大鼠免疫功能的影响。结论苦参碱可以缓解慢性肾小球肾炎大鼠的炎症损伤,提高大鼠外周免疫功能,其作用机制可能与抑制MCP-1/CCR2信号通路有关。