贵州苗族人群MICA和MICB基因多态性及单倍型分析

为了探讨贵州苗族人群主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类链相关基因(MHC classⅠchain-related gene,MIC gene)MICA和MICB的分布特征,以丰富基因数据库中相关信息,进而研究某些疾病的遗传特征和进化史,采用基于序列特异性引物的聚合酶链反应(PCR-sequence-specific primer,PCR-SSP)和基于序列分型的聚合酶链反应(PCR-sequence-based typing,PCR-SBT)检测150例中国贵州苗族人群外周血DNA样本,分析该人群的MICA和MICB基因分布,用卡方检验对MICA和MICB基因分布频率的差异进行评估。基因分型结果显示,中国贵州苗族人群中MICA*019、MICA*045、MICA*008:04、MICA*002:01、MICA-A9、MICA-A4、MICB*005:02和MICB*002等位基因的频率显著高于其他等位基因。MICA和MICB等位基因的单倍型分析显示,MICA*019-MICB*005:02和MICA*008:04-MICB*005:02两种单倍型的分布频率较高,分别为17.40%和16.30%。PCR-SSP和PCR-SBT分析显示,MICA*010与MICB*005:02、MICA*002:01与MICB*005:02以及MICA*009:01与MICB*005:02这3种MICA和MICB等位基因存在连锁不平衡(P<0.01)。上述结果表明,中国贵州苗族人群MICA和MICB基因具有多态性且存在显著的连锁不平衡。本研究为中国少数民族MIC基因序列数据库提供了人群样本数据,该数据为研究MICA和MICB基因在同种异体移植和疾病易感性中的可能作用提供了基础资料。

耐高温柔性Mica/ZnO薄膜的制备与表征

以氟晶云母片为衬底,进行柔性ZnO透明导电薄膜(Mica/ZnO)的制备与表征。利用XRD和SEM表征可知,晶种水热法比直接水热法更有利于制备Mica/ZnO薄膜。研究发现,晶种水热法制备Mica/ZnO薄膜分为颗粒状ZnO晶体生长阶段、颗粒状ZnO晶体成长为棒状ZnO晶体阶段和棒状ZnO晶体成长三个阶段。采用晶种水热法制备Mica/ZnO薄膜适宜的晶化时间为26h,制备的致密棒状ZnO晶体长度约500nm左右。制备的Mica/ZnO薄膜可耐500℃以上的高温,为研究耐高温柔性ZnO透明导电薄膜提供更为丰富的柔性衬底材料和制备方法。

两湖地区肺癌人群MICA基因分布比较分析

目的研究两湖地区中荆州和衡阳肺癌人群MICA等位基因分布差异。方法采用PCR-SSP和PCR-SBT方法对样本MICA等位基因的多态性进行检测。结果衡阳组和荆州组各检出8种MICA等位基因,其中衡阳组中未检出MICA*027,荆州组中未检出MICA*009N;荆州患者组中分布频率最高的3种等位基因是MICA*00201、MICA*019和MICA*010;衡阳患者组中分布频率最高的3种等位基因是MICA*010、MICA*00201和MICA*01201;两组之间MICA等位基因分布间存在统计学差异。衡阳组和荆州组检出的MICA等位基因型、MICA-STR等位基因分布频率和MICA-STR等位基因型均不相同,但分布总体比较无统计学差异(P>0.05)。结论两湖地区肺癌人群MICA等位基因频率分布之间存在差异。

鄂尔多斯盆地长7段重力流砂岩长石溶蚀特征及控制因素

基于岩心薄片、扫描电镜、能谱分析、X射线衍射全岩分析及溶蚀实验,研究鄂尔多斯盆地三叠系延长组7段(简称长7段)重力流砂岩中长石溶孔发育特征及控制因素,明确长石溶孔的形成与分布,为预测优质储集层分布提供依据。研究表明:(1)研究区长7段砂岩中的长石经历3类成岩作用:长石次生加大、黏土以及方解石的交代、长石碎屑的溶蚀作用。(2)长7段致密砂岩中的长石溶蚀主要源于有机酸溶蚀,此外还受长石类型、长石早期蚀变程度以及砂岩中云母碎屑对有机酸的缓冲作用影响。(3)不同长石的溶蚀程度不同,表现为钾长石较斜长石易溶蚀,钾长石中正长石较微斜长石易溶,未蚀变的长石较早期高岭土或绢云母化的长石易溶蚀。(4)溶蚀实验显示云母的存在会抑制长石溶蚀,相同质量的云母对有机酸的消耗能力明显强于长石。(5)在云母含量低的情况下,长7段砂岩长石溶孔较为发育,储集层物性得以改善,而云母含量较高的地区长石溶孔则明显减少。

新疆白杨河铀矿区白色云母短波红外光谱及电子探针成分特征

铀是我国战略性关键金属资源之一,对科技发展和国家安全具有重要意义。新疆白杨河铀矿床是我国重要的热液型铀矿床,铀成矿过程中广泛发育白色云母。已有研究表明,白杨河铀矿床白色云母短波红外光谱蕴含着丰富的地质信息,记录了其形成热液环境及其与矿化的关系,但其短波红外光谱变化规律及其地质影响因素研究依然薄弱。因此,运用短波红外光谱技术和电子探针微区分析等分析方法对矿床白色云母进行分析研究。研究表明:白杨河铀矿床白色云母Al-OH特征吸收峰波长在2190和2220 nm之间漂移变化,电子探针化学组分表明其发生了明显的Tschermak(契尔马克)替换,Al-OH特征吸收峰波长直接受Mg和Fe含量以及Fe/(Fe+Mg)比值的影响,也受围岩成分的影响。Al-OH特征吸收峰波长较短的白色云母反映了相对高温的热液流体环境,而Al-OH特征吸收峰波长较长的白色云母则代表了相对低温的热液流体环境。白杨河铀矿床铀矿化点附近白色云母具有相对较短的Al-OH特征吸收峰波长、较大的ISM(伊利石光谱成熟度)值和较低的FWHM 2200(半峰宽)值。综合白色云母的Al-OH特征吸收峰波长、ISM值和FWHM2200值的空间变化规律,可以推断白杨河铀矿床的热液矿化中心位于杨庄花岗斑岩与上泥盆统火山岩的北部接触带。这不仅对完善白杨河铀矿床成因和深部与外围勘探具有重要的实际意义,对其他热液型金属矿产勘查亦具有重要的参考价值。

某低品位高钙萤石矿浮选试验研究

萤石与方解石的有效分离一直是选矿界的难题。某萤石矿中CaF_(2)含量(质量分数,下同)为17.71%,CaCO_(3)含量高达37.04%,S含量为1.98%,属含硫低品位高钙萤石矿,主要矿物为萤石、方解石和云母。矿石中萤石与脉石矿物嵌连关系复杂,针对矿石性质特点开发了先浮硫化矿、再浮萤石同步抑制硅酸盐和碳酸盐矿物的浮选工艺,以脂肪酸类CY-1为捕收剂、改性水玻璃和有机高分子CYH作为组合抑制剂,采用“浮硫-浮萤石1粗7精-中矿集中返回”流程,获得CaF_(2)品位为90.81%、回收率为75.25%的萤石精矿,实现了高钙萤石矿中萤石与方解石、云母的有效分离,为该矿石的开发利用提供了技术依据。

白藜芦醇抑制结肠癌干细胞增殖并增强MICA/B的表达

目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测Res对CCSC凋亡的影响;流式细胞术检测Res对CCSC生长周期及主要组织相容性复合体Ⅰ类分子相关链A/B(MICA/B)表达的影响。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长。球形细胞中CD133+细胞占91.07%±1.79%,CD44+细胞占90.33%±1.78%。与对照组相比,Res能明显抑制CCSC增殖,并且呈时间、剂量依赖性;Res作用48 h后,CCSC细胞周期G0/G1期比例显著升高,S期下降,呈剂量依赖性;随着药物浓度增加,CCSC的凋亡率增加,MICA/B的表达增强。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导培养出CCSC,Res能剂量依赖性地抑制CCSC的增殖,与阻滞细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡有关;Res能增强CCSC中MICA/B的表达,增强其免疫原性。

基于粒子群优化MICA的间歇过程故障监测

多向独立成分分析(MICA)能够获取信号的高阶统计量信息,在间歇过程故障监测中得到长足发展。针对Fast ICA算法提取非高斯独立成分时,易受初始点的影响,梯度下降无法收敛到极小点以及算法运行前独立主元个数未知的不足,提出基于粒子群优化的MICA算法。并引入支持向量数据描述(SVDD)算法确定过程监控统计量的置信限,避免了核密度估计带来的"维数灾难"等问题。实验设计由青霉素发酵仿真平台完成,结果显示了本文方法优越于传统MICA方法,能够保证获取非高斯性最大的独立成分,使得对故障的监测更加及时有效。

广州地区106例汉族人群MICA和MICB微卫星基因座单体型研究

利用聚合酶链反应和荧光(6-FAM)自动化检测技术对广东地区汉族106例无亲缘关系样本进行MICA基因外显子5和MICB基因内含子1微卫星基因座多态性及其单体型分布调查。根据群体资料估算两者间的单体型频率、连锁不平衡参数、相对连锁不平衡参数。结果显示,广州地区汉族人群MICA和MICB微卫星基因座基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡法则,共检出MICA微卫星基因座5个等位基因,MICB微卫星基因座14个等位基因。其中MICA A5基因频率最高(0.2877),A4基因频率最低(0.1321)。MICB CA14等位基因频率最高(0.3255),CA19、CA28等位基因频率最低(0.0047),未检出CA27。21种MICA-MICB单体型频率大于1％(连锁不平衡参数>0),其中单体型A5-CA14(16.73％),A5.1-CA18(8.75％),A4-CA26(3.76％),A9-CA15(3.66％)和A6-CA21(2.61％)为强连锁常见单体型(x^2>3.84,P<0.05)。

MICA基因微卫星多态在中国13个群体中的分布

通过对中国 1 3个群体 (云南汉族、广东汉族、山东汉族、白族、傣族、拉族、黎族、纳西族、撒拉族、畲族、土族、佤族和云南藏族 )共 5 77例无亲缘关系的研究对象的DNA样本进行MICA基因微卫星扫描分型 ,获得了该微卫星的不同等位基因在各群体中的遗传数据。结果表明 ,该微卫星在不同群体中的分布存在差异 ,并有较高的多态信息含量 (PIC) ,是一个有用的遗传标记 ,在人类进化研究、个体识别、亲子鉴定。

MHCI类样分子(MICA)在部分肿瘤组织和肿瘤细胞系中的表达及临床意义

目的:探讨MHCI类样分子(MICA)在肿瘤组织和肿瘤细胞系中的表达及其临床意义。方法:分别采用半定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测肿瘤组织和肿瘤细胞系MICA表达,MTT法测定NK细胞细胞毒活性。结果:人红白血病细胞K562、喉癌细胞系Hep2、宫颈癌细胞系Hela、肝癌细胞系HepG2和结直肠癌细胞系HT29均有MICAmRNA和蛋白表达,而人Burkitt淋巴瘤Raji和高转移肺癌PG不表达MICA。MICA表达阳性的肿瘤细胞对NK杀伤敏感性明显高于MICA阴性者。多数肿瘤组织存在MICAmRNA和蛋白表达,但并非在所有肿瘤均有表达,癌旁组织均无MICA表达。结论:肿瘤细胞表达MICA可激发NK细胞对肿瘤的杀伤,NKG2D及其配体的相互作用在肿瘤免疫监视中起着非常重要的作用,肿瘤细胞分泌sMICA分子为肿瘤发生免疫逃逸的机制之一。

K562和K562/AO2细胞HLA I类分子与MICA/B的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响

本研究探讨K562亲本细胞株及多药耐药细胞株K562/AO2细胞表面HLAI类分子和MHCI类链相关分子(MICA/B)的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。用流式细胞仪检测K562和K562/AO2细胞株HLAI类分子和MICA/B的表达情况;LDH释放法测定3例健康人NK细胞在不同效靶比时对K562和K562/AO2细胞的杀伤活性;效靶比10∶1时,用抗HLAI类分子单克隆抗体(W6/32)和抗MICA/B单克隆抗体(BAMO-1)分别封闭MHCⅠ类分子和MICA/B,观察NK细胞杀伤K562及K562/AO2细胞活性的变化。结果表明:K562和K562/AO2细胞均不表达HLAI类分子,K562细胞的MICA/B表达较K562/AO2明显增高(P<0.01)。效靶比5∶1、10∶1、20∶1、30∶1时NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性分别为(29.32±0.12)%、(45.33±0.78)%、(58.37±0.87)%、(72.37±0.96)和(12.47±0.91)%、(24.36±1.11)%、(33.29±1.03)%、(53.87±1.27)%,各效靶比时NK细胞对K562细胞的杀伤活性较K562/AO2细胞明显增强(P=0.000);效靶比10∶1时W6/32不抑制NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性,BAMO-1能明显抑制NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性。结论:MICA/B在K562和K562/AO2细胞表达的差异与NK细胞的杀伤活性有关;NK细胞对K562/AO2细胞杀伤活性降低与HLAI类分子无关;MICA/B在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降。

可溶性MICA在乳腺癌免疫逃逸中的作用

目的:观察乳腺癌患者血清中可溶性MICA(sMI-CA)表达情况,探讨sMICA在乳腺癌免疫逃逸中的作用。方法:ELISA方法检测乳腺肿瘤患者外周血sMICA的分泌。流式细胞术(FCM)检测sMICA及白细胞介素15(IL-15)对NK细胞表面NKG2D表达的影响。MTT法检测NK细胞对乳腺癌细胞的杀伤活性。结果:ELISA结果显示,血清sMICA含量在健康成年人血清中为阴性,在乳腺良性肿瘤患者血清中含量为(76.8±22.3)ng/L,在恶性肿瘤患者血清中含量为(205.36±71.27)ng/L,乳腺癌患者中血清sMICA含量高低与TNM分期呈正相关。应用含sMICA的血清与NK细胞共培养可明显下调NK细胞的杀瘤活性[(76.2±6.7)%vs(48.4±4.1)%],NK细胞表面NKG2D表达和上清中IFN-γ分泌量也下降。IL-15明显上调NK细胞表面NKG2D表达,增加培养上清IFN-γ分泌量和增强NK对MCF-7的杀瘤活性。结论:sMICA表达与乳腺癌TNM分期正相关,sMICA通过下调NK细胞NKG2D表达水平而降低NK细胞杀瘤活性,在肿瘤免疫逃逸中起重要作用。IL-15可以上调NK细胞NKG2D的表达并增强NK细胞杀瘤活性。

不同肿瘤细胞表面MICA的表达及NK细胞杀伤活性的研究

目的观察不同肿瘤细胞表面MICA的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法以体外培养的K562(人慢性髓原白血病细胞株)、MCF-7(乳腺癌细胞株)、HR-8348(直肠腺癌细胞株)、CNE-2(人鼻咽癌细胞株)、Hela(人宫颈癌细胞株)为靶细胞,流式细胞仪检测细胞表面MICA的表达,以K562细胞作为对照,应用LDH释放法检测不同效靶比情况下体外培养的NK细胞对靶细胞的杀伤活性。结果K562、MCF-7、HR-8348、CNE-2、Hela细胞表面均表达MICA,体外杀伤试验表明NK细胞对上述肿瘤细胞均有杀伤活性,anti-MICA单抗可部分封闭NK细胞对靶细胞的杀伤活性。结论NK细胞对K562、MCF-7、HR-8348、CNE-2、Hela细胞具有较高的杀伤活性,可作为一种生物治疗手段。

MICA分子在NK细胞杀伤乳腺癌中的作用

目的观察乳腺肿瘤细胞膜MHCⅠ链相关分子A(MHC class I chain-related gene A,MICA)及血清中可溶性MICA表达,探讨MICA在NK细胞杀伤乳腺癌中的作用。方法流式细胞术检测膜型MICA(mMICA)及NK细胞表面NKG2D表达,观察膜型MICA、可溶性MICA(sMICA)对NKG2D表达的影响;免疫组织化学检测膜型MICA及可溶性MICA的表达及分布;抗体封闭法观察膜型MICA与NKG2D相互作用。结果乳腺细胞膜型MICA在正常组织不表达,在良性肿瘤表达量为(38.5±7.5)%,恶性肿瘤表达量为(53.2±5.6)%。可溶性MICA含量在健康成年人为阴性,在乳腺良性肿瘤患者血清中含量(76.8±22.3)pg/mL,在恶性肿瘤患者中含量(205.36±71.27)pg/mL。经NKG2D或MICA抗体封闭后,NK细胞的杀瘤活性显著减弱。含可溶性MICA的血清可明显下调NKG2D的表达。结论大部分乳腺肿瘤细胞膜都有MICA的表达,可作为乳腺肿瘤相关性抗原。膜型MICA与NKG2D的相互识别在介导NK细胞抗乳腺癌中起重要作用,而可溶性MICA通过下调NKG2D表达介导肿瘤免疫逃逸。

湖北某低品位铌钽矿选矿工艺试验研究

针对湖北某花岗伟晶岩型铌钽矿进行了选矿试验研究,确定了重磁粗选—粗精矿浮选—酸化焙烧、浸出—萃取、反萃—磁选尾矿浮选分离长石、石英的联合选矿工艺流程。试验获得的铌钽精矿产品中Nb2O5品位53.96%、Ta2O5品位21.33%,Nb2O5回收率63.48%、Ta2O5回收率53.05%。其中,在重磁粗选阶段通过粗磨分级—摇床工艺,考察了磨矿细度和磁场强度对铌钽预富集的影响,试验得到产率9.47%,可工业应用的一级绢云母产品;针对强磁精矿进行浮选,考察了捕收剂种类对浮选效果的影响,在苯乙烯膦酸与正辛醇用量比4︰1、药剂用量1500g/t的条件下进行两次精选,获得Nb2O5品位为10.578%、Ta2O5品位为4.753%的浮选精矿;在纯硫酸体系下对浮选精矿产品进行了酸化焙烧浸出试验研究,铌钽分解液在低酸条件下采用甲基异丁基甲酮(MIBK)萃取钽、在高酸条件下采用磷酸三丁酯(TBP)萃取铌,萃取液均采用纯水进行反萃,反萃后的铌、钽液用氨水沉淀后焙烧,得到高纯Nb2O5和Ta2O5产品;对磁选尾矿进行浮选获得可工业利用的长石精矿和石英精矿。试验对绝大部分有用矿物实现了富集,高效富集铌钽的同时实现了伴生矿物的综合回收。

肺癌细胞中NKG2D配体MICA及ULBP高表达及其在CIK介导的肿瘤细胞杀伤中的作用

目的:探索肺癌细胞中NKG2D配体的表达量及其与CIK细胞介导的肿瘤细胞毒性的关系。方法:在肺癌组织、癌旁组织及肺癌细胞株中用实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹法检测NKG2D配体的表达量。应用流式细胞仪检测肿瘤细胞株A549和QG56表面NKG2D配体的表达情况。体外分离培养CIK细胞,比较NKG2D单克隆抗体预处理CIK细胞和无NKG2D单克隆抗体预处理CIK细胞介导的肿瘤细胞毒性。结果:NKG2D在肺癌组织及肺癌细胞株中高表达。CIK细胞对肺癌细胞株A549表现出较强的细胞毒性,但用NKG2D单克隆抗体预处理CIK细胞后可显著降低这种作用(P<0.05)。结论:NKG2D配体在肺癌组织和肺癌细胞株中高表达。对于CIK细胞介导的肺癌细胞杀伤作用,NKG2D与其配体的相互作用至关重要。

湖南汉族人群MICA基因多态性分析

为了解湖南地区汉族人群MICA基因第2、3和4外显子多态性分布特点,采用PCR-SSP方法对162名无亲缘关系湖南汉族人群MICA等位基因进行分析。结果显示:在湖南汉族人群中共检测出12个等位基因和28种基因型,各等位基因分布频率有差异,其中以MICA*00801基因频率最高(37.9%),其次为MICA*00201/020(20.1%)和MICA*010(17.3%),频率最低的是MICA*019和MICA*031。将MICA基因在湖南汉族人群中的分布与该基因在其他人群中的分布进行比较,显示MICA基因的分布在不同人群之间存在差异,可作为中国人群的遗传标志。

食管癌中MICA的表达及其意义

目的:观察食管癌细胞株组织膜MHCⅠ链相关分子A(MHC class Ⅰ chain-related gene A,MICA)及血清中可溶性MICA表达,探讨食管癌中MICA的表达及其临床意义。方法:流式细胞术检测膜型MICA(mMICA)及NK细胞表面NKG2D表达,ELISA方法检测乳腺肿瘤患者外周血可溶性MICA(sMICA)的分泌。分组实验分析可溶性MICA(sMICA)对NKG2D表达的影响。结果:食管细胞膜型MICA在食管癌旁组织无表达,在31.7%食管癌组织有表达,表达量为(42.2±3.6)%。可溶性MICA含量在健康成年者为阴性,食管癌患者中74.67%阳性,含量为(1977.30±292.67)ng/L。食管癌患者中血清sMICA含量高低与TNM分期呈正相关,远处转移组比无远处转移组高(P<0.05),但和病理类型表达无差异。含可溶性M!CA的血清可明显下调NK细胞NKG2D的表达,从而降低NK细胞对食管癌细胞株ECA-109的杀伤活性。结论:食管癌细胞膜表达MICA,可作为食管肿瘤相关性抗原。而可溶性MICA含量高低与TNM分期呈正相关,可通过下调NK细胞NKG2D表达介导肿瘤免疫逃逸。

骨肉瘤组织中MICA、MMP-9和NF-κB蛋白的表达及相关性

目的探讨骨肉瘤组织中MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC class Ⅰ chain-related A,MICA)、MMP-9和NF-κB的表达及相互间的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白表达和脱落机制提供组织学依据。方法应用免疫组织化学方法检测66例骨肉瘤、11例骨母细胞瘤,8例骨化性纤维瘤和6例正常骨组织中MICA蛋白的表达情况,并检测66例骨肉瘤组织中MMP-9和NF-κB蛋白的表达情况。结果(1)MICA蛋白在骨肉瘤组织、骨母细胞瘤、骨化性纤维瘤和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)、9%(1/11)、0(0/8)、0(0/6),骨肉瘤组织中MICA表达与骨母细胞瘤(P=0.01)、骨化性纤维瘤(P<0.01)和正常骨组织(P<0.05的差异有显著性。(2)骨肉瘤组织中MMP-9和NF-κB表达率分别为55%(36/66)和73%(48/66);NF-κB与MICA(r=0.373,P<0.01)和MMP-9(r=0.536,P<0.01)的表达呈正相关关系。结论MICA蛋白可作为骨肉瘤诊断的分子标志物;NF-κB可能参与MICA蛋白表达和脱落的分子机制,NF-κB可作为骨肉瘤免疫治疗的候选靶点。