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Dynamic Non-Invasive Detection of NADH Based on Blood Flow-Mediated Skin Fluorescence (FMSF) Method
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作者 Peng Liu Tengfei Bi +2 位作者 Gongzhi Du Long Yan Huayi Hou 《Open Journal of Applied Sciences》 2024年第6期1437-1453,共17页
Nicotinamide adenine dinucleotide (NADH/NAD+) is involved in important biochemical reactions in human metabolism, including participation in energy production by mitochondria. The changes in fluorescence intensity as ... Nicotinamide adenine dinucleotide (NADH/NAD+) is involved in important biochemical reactions in human metabolism, including participation in energy production by mitochondria. The changes in fluorescence intensity as a function of time in response to blocking and releasing of blood flow in a forearm are used as a measure of oxygen transport with blood to the tissue, which directly correlates with the skin microcirculation status. In this paper, a non-invasive dynamic monitoring system based on blood flow-mediated skin fluorescence (FMSF) technology is developed to monitor the NADH fluorescence intensity of skin tissue during the process of blocking reactive hyperemia. Simultaneously, laser speckle contrast imaging (LSCI) and laser Doppler flowmetry (LDF) were used to observe blood flow, blood oxygen saturation (SOt2) and relative amount of hemoglobin (rHb) during the measurement process, which helped to explore NADH dynamics relevant physiological changes. A variety of parameters have been derived to describe NADH fluorescence curve based on the FMSF device. The experimental results are conducive to understanding the NADH measurement and the physiological processes related to it, which help FMSF to be a great avenue for in vivo physiological, clinical and pharmacological research on mitochondrial metabolism. 展开更多
关键词 Reduced Nicotinamide Adenine Dinucleotide (nadh) Flow-Mediated Skin Fluorescence (FMSF) Laser Doppler Flowmetry (LDF) Blood Flow
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滑液囊支原体NADH氧化酶单克隆抗体的制备
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作者 刘晓涵 祁晶晶 +9 位作者 胡增金 李浩然 宋翠萍 尚原冰 王少辉 田明星 李涛 丁铲 蔡玉梅 于圣青 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第6期20-27,共8页
为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E.coliBL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株... 为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E.coliBL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG2b亚类,间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2048000。经Westernblot和悬浮免疫荧光试验鉴定,该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应,与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析,该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体,符合杂交瘤细胞染色体的数目,证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体,为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。 展开更多
关键词 滑液支原体 nadh氧化酶 单克隆抗体
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具有电子转移路径的金属化氮化碳选择性再生NADH和光酶偶联CO_(2)还原
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作者 张鹏业 董文锦 +7 位作者 张媛媛 赵立楠 苑华磊 王传军 王文硕 王含笑 张洪禹 刘健 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第11期188-198,共11页
将CO_(2)转化为燃料和化学品被认为是缓解能源危机的一种有效策略.受自然光合作用的启发,光酶偶联结合了光催化和酶催化的优点,在绿色生物制造中具有较好的应用前景.铑(Rh)络合物是选择性再生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(M-NADH)的关键... 将CO_(2)转化为燃料和化学品被认为是缓解能源危机的一种有效策略.受自然光合作用的启发,光酶偶联结合了光催化和酶催化的优点,在绿色生物制造中具有较好的应用前景.铑(Rh)络合物是选择性再生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(M-NADH)的关键介体,其固定化可以提高体系的可持续性,并有效缩短电子传递路径,因而受到广泛关注.本文制备了联吡啶功能化的金属化氮化碳(PCNRhbpy_(4)),用于光酶偶联催化CO_(2)还原.首先以双氰胺为前驱体,通过两步退火法制备氮化碳(PCN),再与5,5’-二氨基-2,2’-联吡啶(DABP)进一步热缩合,然后锚定[Cp*RhCl2]2获得PCNRhbpy4,并通过透射电镜、扫描电镜、粉末X射线衍射、紫外可见光吸收光谱、瞬态表面光电压和荧光发射光谱等进行表征.结果表明,合成的PCNRhbpy4材料具有掺杂石墨烯结构,且通过残余的末端联吡啶结构均匀地固定了Rh络合物.以PCNRhbpy4作为光催化剂实现了1,4-NADH的100%选择性再生,并在2.0 min内实现了80%的NADH再生.进一步耦合固定在疏水膜上的甲酸脱氢酶,可以有效地将CO_(2)还原为甲酸盐,48 h内甲酸盐浓度达到7 mmol L^(-1).此外,光催化剂的循环实验结果表明,PCNRhbpy4具有较高的稳定性.反应机理研究结果表明,光生电子经N-掺杂石墨烯传递到Rh活性位点,并结合溶液中的质子,随后氢负离子通过环滑移机制传递到NAD+,高选择性再生1,4-NADH.综上,本文为Rh的固定化开辟了一条新路径,实现了光酶催化CO_(2)还原,为光酶催化在绿色生物制造的实际应用提供参考. 展开更多
关键词 仿生金属化 nadh再生 光酶偶联催化 CO_(2)还原 电荷转移
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甲酸脱氢酶用于辅酶NADH再生的研究进展 被引量:27
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作者 黄志华 刘铭 +2 位作者 王宝光 张延平 曹竹安 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1011-1016,共6页
NADH依赖型氧化还原酶广泛应用于精细化学品和手性化合物的生物合成,其中辅酶NADH作为还原当量起着关键的作用,NADH的再生关系到生物氧化还原过程能否进行.甲酸脱氢酶在辅酶NADH再生中的应用是目前代谢工程领域研究的热点之一.本工作回... NADH依赖型氧化还原酶广泛应用于精细化学品和手性化合物的生物合成,其中辅酶NADH作为还原当量起着关键的作用,NADH的再生关系到生物氧化还原过程能否进行.甲酸脱氢酶在辅酶NADH再生中的应用是目前代谢工程领域研究的热点之一.本工作回顾了甲酸脱氢酶的来源和氨基酸序列、酶的理化性质和催化机理等方面的研究进展,从化学稳定性、热稳定性和成本等方面阐述了甲酸脱氢酶在辅酶再生系统中的应用,讨论了甲酸脱氢酶用于辅酶再生的代谢工程平台的发展趋势,并对研究发展方向提出了一些设想. 展开更多
关键词 甲酸脱氢酶 辅酶(nadh)再生 氧化还原反应
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利用光驱动的生物杂合系统实现CO_(2)转化生产化学品
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作者 干雅梅 柴甜甜 +5 位作者 张健 高聪 宋伟 吴静 刘立明 陈修来 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期294-303,共10页
太阳能作为清洁能源之一,为缓解化石燃料枯竭和温室气体排放等问题提供了一种高效、经济、可持续的解决方案.自然界中的植物和光合微生物通过自身的光合系统收集并转化太阳能,从而生产生物燃料和生物化学品.然而,由于自然光合系统存在... 太阳能作为清洁能源之一,为缓解化石燃料枯竭和温室气体排放等问题提供了一种高效、经济、可持续的解决方案.自然界中的植物和光合微生物通过自身的光合系统收集并转化太阳能,从而生产生物燃料和生物化学品.然而,由于自然光合系统存在光吸收范围相对较窄、光生电子在传输过程中易损耗等问题,限制了太阳能到化学品的转化效率.为了解决上述难题,科研人员模仿自然光合作用中的关键部分,探索构建人工光合系统,相关研究引起了广泛关注.本文通过将碲化镉量子点(CdTe QDs)与大肠杆菌(E.coli)相耦合,构建了一种光驱动无机-生物杂合系统(IBPHS),用于捕获太阳能并驱动CO_(2)转化合成高价值化学品.该系统主要由光催化模块和生物催化模块组成.在光催化模块中,通过生物合成CdTe QDs进行光能捕获,并将其转化为电子.通过敲除E.coli的Cd2+外排蛋白(ZNTA)编码基因,实现了E.coli胞内Cd2+过量积累.通过“时空耦合”方式,并借助共聚焦显微镜、高分辨率透射电镜和X射线能谱分析,确认了CdTe QDs在E.coli胞内的组装合成.利用紫外-可见分光光度计研究了光催化模块对光子的吸收能力.结果表明,光催化模块的吸收峰位于400-420 nm.利用瞬时光电流,评估了光催化模块的光生电子能力.实验发现,该模块可以产生0.07μA光电流,表明完成了光催化模块的构建.在生物催化模块中,将光催化模块产生的电子用于还原NAD+再生NADH.采用NADH生物传感器,分析了E.coli胞内NADH含量,结果表明,在蓝光照射下E.coli胞内NADH含量比黑暗条件下提高了5.1倍.在此基础上,通过表达NADH依赖型乳酸脱氢酶(LDH)将丙酮酸还原为乳酸,在蓝光光照下乳酸积累量达到了0.44 g/L,而黑暗条件下无乳酸积累,从而验证了生物催化模块的有效性.基于光催化模块和生物催化模块,进一步组装构建了IBPSH,用于驱动CO_(2)还原合成甲酸和丙酮酸.在蓝光照射下,IBPHS能够合成0.65 g/L甲酸和0.18 g/L丙酮酸,其CO_(2)利用速率分别达到51.98 mg/gDCW/h和21.92 mg/gDCW/h,超过了光合细菌.综上所述,本文利用光催化模块与生物催化模块相耦合的方式,组装构建了一种新型的人工光合系统,实现了光驱动CO_(2)还原合成高附加值化学品,为理性设计材料-生物杂合系统提供了借鉴,同时也为挖掘绿色生物制造潜力、开发太阳能化学制造平台提供参考. 展开更多
关键词 人工光合系统 CO_(2)利用 光能转换 CdTe生物合成 nadh再生
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高效液相色谱法测定骨骼肌ATP、ADP、AMP、NAD^+、NADH含量 被引量:25
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作者 洪平 刘虎威 +2 位作者 靳光华 黎燕 杨奎生 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期57-60,共4页
采用高效液相色谱法测定骨骼肌腺嘌呤核苷酸和辅酶Ⅰ含量。高压液相系 统包括:惠普公司ZOBAX-C18反相柱5mm×12cm,590UV检测器。流动相为220mmol/L磷酸钾缓冲液,内含10%甲醇,用四丁基氢氧化... 采用高效液相色谱法测定骨骼肌腺嘌呤核苷酸和辅酶Ⅰ含量。高压液相系 统包括:惠普公司ZOBAX-C18反相柱5mm×12cm,590UV检测器。流动相为220mmol/L磷酸钾缓冲液,内含10%甲醇,用四丁基氢氧化胺TBAH调pH至65。等比洗脱,流速为08ml/min。检测波长为254nm。所有样品和标准品在进样前均用045μm孔径的虑膜过滤后进样5μl作色谱分析。结果表明:HPLC可以同时测定ATP、ADP、AMP、NAD+、NADH,分离效率高,操作简便,快速每个样品仅需15分钟,而且,重现性好,定性可靠,定量准确。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 骨骼肌 ATP ADP AMP NAD^+ nadh 含量测定
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NADH对L02细胞Bcl-2、Bax、P53、CD95及CD95L表达的影响 被引量:5
7
作者 徐小平 王瑜 +3 位作者 李开宗 窦科峰 刘发全 张积仁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期460-462,共3页
目的 研究抗氧化剂NADH对体外培养的正常人肝细胞系L0 2缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法 实验分组 :将培养的L0 2细胞分为 :缺血再灌注损伤组 (I R) ,缺血再灌注损伤 +NADH(I R +NADH)及对照组 (未经处理的L0 2细胞 )。... 目的 研究抗氧化剂NADH对体外培养的正常人肝细胞系L0 2缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法 实验分组 :将培养的L0 2细胞分为 :缺血再灌注损伤组 (I R) ,缺血再灌注损伤 +NADH(I R +NADH)及对照组 (未经处理的L0 2细胞 )。用流式细胞仪观察细胞处理后6、12、18及 2 4h细胞的凋亡率及 12h时 ,Bcl 2、Bax、P5 3、CD95及CD95L的表达 ,并以透射电镜观察细胞凋亡的超微结构。结果 NADH可明显抑制缺血再灌注损伤细胞的凋亡 ,并能上调Bcl 2表达 ,下调Bax、P5 3、CD95及CD95L的表达 ,与I R组相比较差异显著 (P <0 .0 5 )。透射电镜下可见典型的凋亡细胞的特征。结论 NADH对缺血再灌注损伤诱导的L0 2肝细胞有明显地保护作用。其作用机制可能与通过调节Bcl 2、Bax、P5 3。 展开更多
关键词 nadh 缺血再灌注损伤 凋亡 流式细胞仪 抗氧化剂 L02细胞 Bcl-2 Bax P53 CD95 CD95L 肝细胞
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阿魏酸聚合修饰玻碳电极的制备及其对NADH的催化氧化 被引量:16
8
作者 张玉忠 赵红 袁倬斌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1765-1769,共5页
研究了阿魏酸修饰电极的制备、性质及对 NADH的电催化作用 .该电极在 0 .1 mol/L磷酸缓冲溶液( p H =6.60 )中 ,于 -0 .1~ +0 .5 0 V ( vs. Ag/Ag Cl)电位范围内呈现一对氧化还原峰 ,其式量电位 E0 为+0 .1 88V( vs.Ag/Ag Cl) ,且 E0 ... 研究了阿魏酸修饰电极的制备、性质及对 NADH的电催化作用 .该电极在 0 .1 mol/L磷酸缓冲溶液( p H =6.60 )中 ,于 -0 .1~ +0 .5 0 V ( vs. Ag/Ag Cl)电位范围内呈现一对氧化还原峰 ,其式量电位 E0 为+0 .1 88V( vs.Ag/Ag Cl) ,且 E0 随 p H增加而负向移动 .电子转移系数为 0 .496,表观电极反应速率常数( ks)为 6.6s-1.电极反应的电子数为 1且有 1个质子参与 .该修饰电极对 NADH氧化具有很好的催化作用 .在 NADH存在下 ,电极过程由扩散控制 ,扩散系数为 1 .76× 1 0 -6cm2 /s.NADH浓度在 0 .0 1~ 5 .0 mmol/L范围内与峰电流呈现良好的线性关系 .通过计时安培法测得催化速率常数为 6.82× 1 0 3 mol-1· L· s-1. 展开更多
关键词 阿魏酸 电聚合 修饰玻碳电极 制备 nadh 催化氧化 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 电催化
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肌红蛋白作催化剂荧光分析法高灵敏检测NADH 被引量:10
9
作者 郑琦 刘志洪 蔡汝秀 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期137-140,共4页
基于肌红蛋白对NADH与H2O2之间的反应具有催化作用,提出了一种催化荧光光谱测定NADH的新方法.在实验选定的最佳反应条件下,该反应体系的荧光强度与NADH的浓度在1.6×10-7~2.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为4.1... 基于肌红蛋白对NADH与H2O2之间的反应具有催化作用,提出了一种催化荧光光谱测定NADH的新方法.在实验选定的最佳反应条件下,该反应体系的荧光强度与NADH的浓度在1.6×10-7~2.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为4.1×10-8mol/L.对1.0×10-6mol/LNADH的标准样品作了9次重复测定,其相对标准偏差RSD=4.6%. 展开更多
关键词 肌红蛋白 催化剂 荧光分析法 高灵敏检测 nadh 过氧化物模拟酶 还原型辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
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钠、钾离子对肌质网囊泡NADH氧化酶和伴生超氧自由基的调控 被引量:7
10
作者 周贞洁 刘仁臣 +2 位作者 蔡知音 褚克平 夏若虹 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期183-188,共6页
目的探讨Na+、K+浓度对骨骼肌肌质网囊泡氧化还原系统的调控作用及对Ca2+释放通道的影响。方法提取肌质网囊泡,分别检测其在不同Na+、K+浓度下还原型辅酶Ⅰ(nicotinamideadeninednucleotide,NADH)氧化初速率、超氧产率、[3H]-ryanodine... 目的探讨Na+、K+浓度对骨骼肌肌质网囊泡氧化还原系统的调控作用及对Ca2+释放通道的影响。方法提取肌质网囊泡,分别检测其在不同Na+、K+浓度下还原型辅酶Ⅰ(nicotinamideadeninednucleotide,NADH)氧化初速率、超氧产率、[3H]-ryanodine结合率和Ca2+释放速率的变化。结果高浓度的Na+、K+对肌质网NADH的氧化初速率和伴生的超氧自由基产率均有抑制作用;在[3H]-ryanodine结合实验中,高浓度的Na+、K+也压抑了NADH诱导的受配体结合的升高;同样,在Ca2+释放动力学实验中,不同浓度的K+调控了由NADH诱导的Ca2+释放初速率。结论骨骼肌肌质网膜上可能存在具有对Na+、K+浓度敏感并中介超氧自由基产生的NADH氧化还原系统,其参与调节Ca2+释放通道的活性。 展开更多
关键词 NA^+ K^+ nadh氧化酶 超氧自由基 Ca^2+释放通道 调控
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碳原子线修饰电极的循环伏安行为及其对NADH的电催化作用 被引量:4
11
作者 陶菲菲 薛宽宏 +2 位作者 沈伟 尹寿银 徐雯 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2004年第1期68-70,共3页
研究了碳原子线修饰电极在 1 5 5~ 10 5 6pH值范围内的 9种不同电解质溶液中的循环伏安行为 ,发现该修饰电极本身具有电化学响应 .在pH值为 6 80的磷酸盐缓冲溶液中 ,与裸玻碳电极相比 ,1mM的NADH在碳原子线修饰电极上的氧化峰电位负... 研究了碳原子线修饰电极在 1 5 5~ 10 5 6pH值范围内的 9种不同电解质溶液中的循环伏安行为 ,发现该修饰电极本身具有电化学响应 .在pH值为 6 80的磷酸盐缓冲溶液中 ,与裸玻碳电极相比 ,1mM的NADH在碳原子线修饰电极上的氧化峰电位负移 0 3 90V ,氧化峰电流增加 4 1倍 ,显示该修饰电极具有突出的电催化活性 . 展开更多
关键词 碳原子线 修饰电极 循环伏安行为 nadh 电催化 sp同素异形体
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碳纳米管/壳聚糖修饰电极的制备及其对NADH的电催化氧化 被引量:8
12
作者 丁中华 康天放 +1 位作者 郝玉翠 张雁 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期374-377,共4页
本文用浓硝酸活化多层碳纳米管,将壳聚糖与活化后的碳纳米管制备成复合材料,并将其滴涂于玻碳电极表面,制备出烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的电化学传感器。采用循环伏安法研究了该传感器的电化学性质以及对NADH的电催化氧化行为。... 本文用浓硝酸活化多层碳纳米管,将壳聚糖与活化后的碳纳米管制备成复合材料,并将其滴涂于玻碳电极表面,制备出烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的电化学传感器。采用循环伏安法研究了该传感器的电化学性质以及对NADH的电催化氧化行为。实验结果表明,NADH在该电极上于+0.37V(vs.SCE)左右出现一氧化峰,与未修饰的玻碳电极相比,该修饰电极明显降低了NADH的氧化峰电位,消除了反应中间产物对电极表面的污染问题。对实验条件进行了优化,建立了碳纳米管/壳聚糖修饰电极微分脉冲伏安法测定NADH的方法。本文方法具有较好的重现性和选择性,对NADH检测的线性范围为1.0×10^-4~9.0×10^-3mol/L,检测限为9.2×10^-5mol/L。 展开更多
关键词 碳纳米管 壳聚糖 nadh 电催化氧化
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过量表达NADH氧化酶加速光滑球拟酵母合成丙酮酸 被引量:5
13
作者 董志姚 李秀芬 +2 位作者 刘立明 堵国成 陈坚 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1061-1066,共6页
【目的】进一步提高光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)发酵生产丙酮酸的生产强度。【方法】将来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中编码形成水的NADH氧化酶noxE基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株T.glabrata CCTCCM202019中,获得了一... 【目的】进一步提高光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)发酵生产丙酮酸的生产强度。【方法】将来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中编码形成水的NADH氧化酶noxE基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株T.glabrata CCTCCM202019中,获得了一株NADH氧化酶活性为34.8U/mg蛋白的重组菌T.glabrata-PDnoxE。【结果】与出发菌株T.glabrata CCTCC M202019相比,细胞浓度、葡萄糖消耗速率和丙酮酸生产强度分别提高了168%、44.9%和12%,发酵进行到36h葡萄糖消耗完毕。补加50g/L葡萄糖继续发酵20h,则使丙酮酸浓度提高到67.2g/L。葡萄糖消耗速度和丙酮酸生产强度增加的原因在于形成水的NADH氧化酶过量表达,导致NADH和ATP含量分别降低了18.1%和15.8%,而NAD+增加了11.1%。【结论】增加细胞内NAD+含量能有效地提高酵母细胞葡萄糖的代谢速度及目标代谢产物的生产强度。 展开更多
关键词 光滑球拟酵母 nadh氧化酶 nadh
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核黄素与NADH在紫光波段的激光诱导荧光光谱研究 被引量:4
14
作者 葛琳琳 丁蕾 +3 位作者 闫静 王颖萍 郑海洋 方黎 《原子与分子物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期125-131,共7页
基于细胞代谢荧光体的激光诱导荧光探测,在生物反应过程监测与生物活性物质探测中具有广泛的应用.本文利用波长可调谐激光光源,结合液体射流进样装置,研究了核黄素与NADH等生物荧光体在紫光波段(389 nm~404 nm)激发的荧光光谱,并考察... 基于细胞代谢荧光体的激光诱导荧光探测,在生物反应过程监测与生物活性物质探测中具有广泛的应用.本文利用波长可调谐激光光源,结合液体射流进样装置,研究了核黄素与NADH等生物荧光体在紫光波段(389 nm~404 nm)激发的荧光光谱,并考察了激光强度、样品浓度等参数对荧光光谱特性的影响.实验观察到核黄素的激发光谱在402.5 nm处出现"波谷",具有特征性,选择403.5 nm激光激发,核黄素的浓度灵敏度约为NADH的八百分之一.这些结果为发展生物荧光探测与识别技术提供了新的基础数据. 展开更多
关键词 激光诱导荧光 核黄素 nadh 液体射流
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在Klebsiella pneumoniae醛脱氢酶失活菌中构建NADH再生系统 被引量:3
15
作者 黄志华 张延平 +2 位作者 黄星 王宝光 曹竹安 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期75-80,共6页
生物法生产1,3-丙二醇(1,3-Propanediol,1,3-PD)是当前工业生物技术研究的热点之一,生产过程中,需要消耗还原当量NADH,NADH的有效供给决定了1,3-PD的产量和得率。采用PCR的方法从Candidaboidinii基因组中克隆编码fdh的基因,将该基因片... 生物法生产1,3-丙二醇(1,3-Propanediol,1,3-PD)是当前工业生物技术研究的热点之一,生产过程中,需要消耗还原当量NADH,NADH的有效供给决定了1,3-PD的产量和得率。采用PCR的方法从Candidaboidinii基因组中克隆编码fdh的基因,将该基因片段插入载体pMALTM-p2X,构建表达载体pMALTM-p2X-fdh,并转入醛脱氢酶失活菌KlebsiellapneumoniaeDA-1HB,获得重组菌KlebsiellapneumoniaeDAF-1。在IPTG浓度0.5mmol/L时,诱导3h后甲酸脱氢酶表达明显;发酵过程中甲酸脱氢酶比酶活达到4.82U/mg;与出发菌株K.pneumoniaeDA-1HB相比,重组菌DAF-1合成1,3-丙二醇的浓度提高了19.2%。 展开更多
关键词 醛脱氢酶 甲酸脱氢酶 KLEBSIELLA PNEUMONIAE nadh 1 3-丙二醇
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天青Ⅰ修饰玻碳电极的电化学性质及其对NADH的催化氧化 被引量:3
16
作者 王娜 袁若 +2 位作者 柴雅琴 朱强 黎雪莲 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第5期537-539,共3页
本文利用滴涂于玻碳表面的Nation膜中负电性的磺酸基与天青Ⅰ阳离子之间的静电作用,以实现天青Ⅰ的固定化,从而制备出Nafion/天青Ⅰ电催化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)传感器。采用循环伏安法考察了传感器的电化学性质,并研究了... 本文利用滴涂于玻碳表面的Nation膜中负电性的磺酸基与天青Ⅰ阳离子之间的静电作用,以实现天青Ⅰ的固定化,从而制备出Nafion/天青Ⅰ电催化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)传感器。采用循环伏安法考察了传感器的电化学性质,并研究了该修饰电极对NADH的电催化作用。实验结果表明:该修饰电极对NADH有良好的电催化作用,NADH氧化峰电位比未修饰的玻碳电极负移了660mV,响应电流与NADH的浓度在8.7×10^-5~1.5×10^-2mol/L范围内呈良好的线性关系。该方法检出限为3.0×10^-5mol/L。 展开更多
关键词 nadh 天青Ⅰ 电催化氧化 修饰电极
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猪囊尾蚴线粒体NADH脱氢酶的基因克隆 被引量:7
17
作者 张莉 刘殿武 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期34-36,共3页
目的 研究猪囊尾蚴线粒体 NADH脱氢酶亚单位 1基因的结构特点。 方法 提取猪囊尾蚴 m RNA,反转录合成 c DNA,构建 c DNA文库。用兔抗囊尾蚴抗血清筛选文库 ,得到阳性克隆 ,将其亚克隆到 p Bluescript SK质粒中测序 ,并与 Gen Bank中... 目的 研究猪囊尾蚴线粒体 NADH脱氢酶亚单位 1基因的结构特点。 方法 提取猪囊尾蚴 m RNA,反转录合成 c DNA,构建 c DNA文库。用兔抗囊尾蚴抗血清筛选文库 ,得到阳性克隆 ,将其亚克隆到 p Bluescript SK质粒中测序 ,并与 Gen Bank中核苷酸序列进行同源性分析。 结果与结论  3次筛选得到 1个阳性克隆 ,其长度为 10 82bp。其中 1~ 5 78bp为开放阅读框 ,编码猪囊尾蚴线粒体 NADH脱氢酶亚单位 1的 192个氨基酸残基 ,5 79~ 10 82 bp为 t RNA- Asn、t RNA- Ile与 t RNA- Pro的基因编码区。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 线粒体 nadh脱氢酶 基因克隆 CDNA文库
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基于线粒体COⅠ和NADH-6基因分子检测的中日家蚕和野桑蚕亲缘关系的研究 被引量:8
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作者 李兵 浜野国胜 +2 位作者 蜷木理 原和二郎 沈卫德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期470-473,共4页
为了进一步明确家蚕和野桑蚕的亲缘关系,收集了中国和日本的一些家蚕和野桑蚕品种资源,提取了家蚕和野桑蚕的总mRNA,通过RT-PCR克隆了家蚕和野桑蚕线粒体DNA(mtDNA)的细胞色素氧化酶亚基1基因(cytochromeoxidasesubunit1gene,COⅠ)和NAD... 为了进一步明确家蚕和野桑蚕的亲缘关系,收集了中国和日本的一些家蚕和野桑蚕品种资源,提取了家蚕和野桑蚕的总mRNA,通过RT-PCR克隆了家蚕和野桑蚕线粒体DNA(mtDNA)的细胞色素氧化酶亚基1基因(cytochromeoxidasesubunit1gene,COⅠ)和NADH-6基因,并制备探针进行了DIG-RFLP检测。结果表明,中国和日本的家蚕与中国野桑蚕的COⅠ和NADH-6基因的DIG-RFLP的分子多态性相同,但与日本野桑蚕存在差异。此结果从线粒体水平证实了中国和日本的家蚕都起源于中国野桑蚕,而不是起源于日本的野桑蚕。 展开更多
关键词 家蚕 野桑蚕 MTDNA 细胞色素氧化酶基因1 nadh-6基因 RFLP
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烟酰胺辅酶NADH新型模型物的合成与表征 被引量:2
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作者 茹祥莉 郝二军 +4 位作者 贺燕燕 焦琼 刘郁 刘芳铭 程红 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第3期103-104,129,共3页
烟酰胺辅酶NADH的新型模型物BNAH和9-苯基占吨(9-PhXnH)在药物的绿色合成中显示越来越重要.本文分别以烟酰胺和9-苯基占吨醇为原料合成了辅酶NADH重要模型物BNAH和9-苯基占吨,该合成路线原料易得,反应条件温和,操作简单,产率高,产品纯度... 烟酰胺辅酶NADH的新型模型物BNAH和9-苯基占吨(9-PhXnH)在药物的绿色合成中显示越来越重要.本文分别以烟酰胺和9-苯基占吨醇为原料合成了辅酶NADH重要模型物BNAH和9-苯基占吨,该合成路线原料易得,反应条件温和,操作简单,产率高,产品纯度高,并通过核磁共振氢谱、元素分析、紫外等分析手段,对BNAH和9-苯基占吨进行了结构表征. 展开更多
关键词 BNAH 9-苯基占吨 合成 烟酰胺辅酶
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NAD^+/NADH代谢机制研究进展 被引量:12
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作者 李达 伦永志 周士胜 《生物技术通讯》 CAS 2010年第1期98-102,共5页
NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,小到细胞的各种生命活动,大到整个生命结构的平衡,都需要能量来维持。同时,细胞的氧化还原状态,特别是NAD+/NADH的水平直接影响着细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程。故而有关细胞内NAD+... NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,小到细胞的各种生命活动,大到整个生命结构的平衡,都需要能量来维持。同时,细胞的氧化还原状态,特别是NAD+/NADH的水平直接影响着细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程。故而有关细胞内NAD+或NADH代谢的研究近年在国际上形成了一个新的热点。我们以NAD+/NADH代谢为重点,综述国内外关于该机制的研究现状。 展开更多
关键词 NAD+ nadh 代谢
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