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Detection of Phaeocystis globosa using sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay(NPA-SH) 被引量:10
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作者 Zhen Yu Mi Tiezhu Yu Zhigang 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2008年第12期1481-1486,共6页
Phaeocystis globosa Scherffel is one of the common harmful algae species in coastal waters of the southeastern China.In this study,sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay(NPA-SH)was used to qu... Phaeocystis globosa Scherffel is one of the common harmful algae species in coastal waters of the southeastern China.In this study,sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay(NPA-SH)was used to qualitatively and quantitatively detect P. globosa.Results showed that this method had good applicability and validity in analyzing the samples from laboratory cultures and from fields.The linear regression equation for P.globosa was obtained,and the lowest detection number of cells was 1.8×104 c... 展开更多
关键词 harmful algae blooms Phaeocystis globosa Scherffel sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay npa-sh
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运用双特异分子探针技术对胶州湾三种硅藻的检测 被引量:3
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作者 甄毓 于志刚 +2 位作者 蔡青松 米铁柱 李荣秀 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期24-32,共9页
利用本实验室首创的双特异分子探针技术对胶州湾常见的3种硅藻-旋链角毛藻(Chaeto-ceros curvisetus Cleve)、尖刺拟菱形藻(Pseudo-nitzschia pungens(Grunowex Cleve)Halse)和中肋骨条藻(Skeletonema costatum(Greville)Cleve)进行定... 利用本实验室首创的双特异分子探针技术对胶州湾常见的3种硅藻-旋链角毛藻(Chaeto-ceros curvisetus Cleve)、尖刺拟菱形藻(Pseudo-nitzschia pungens(Grunowex Cleve)Halse)和中肋骨条藻(Skeletonema costatum(Greville)Cleve)进行定性与定量分析。结果表明,无论是对实验室样品还是自然样品进行检测,本技术均有较好的适用性,对3种目标藻的最低检测细胞数分别为4.2×104、9.4×103和6.0×104个细胞。统计分析表明,双特异分子探针技术对3种目标藻的分析结果与经典的显微镜镜检结果没有显著性差异。本技术利用了多孔酶标板进行检测,整个实验过程约7h,可在较短时间内分析大量样品中的多种微藻,为同时监测多种赤潮藻开辟了一条新途径。 展开更多
关键词 胶州湾 旋链角毛藻 尖刺拟菱形藻 中肋骨条藻 双特异分子探针技术
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3-硝基丙酸预处理对多巴胺能神经元保护作用的研究 被引量:1
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作者 邓学军 孙圣刚 +1 位作者 曹学兵 李红戈 《脑与神经疾病杂志》 2004年第3期196-198,共3页
目的:研究3-硝基丙酸(3-NPA)预处理对MPP+(1-甲基4苯基-吡啶离子)损害的多巴胺能神经元是否具有保护作用。方法:将MPP+加入到培养的多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞中制作帕金森病的细胞模型,在加入MPP+(0.25mmol/L)前,分别单次或多次加入3-N... 目的:研究3-硝基丙酸(3-NPA)预处理对MPP+(1-甲基4苯基-吡啶离子)损害的多巴胺能神经元是否具有保护作用。方法:将MPP+加入到培养的多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞中制作帕金森病的细胞模型,在加入MPP+(0.25mmol/L)前,分别单次或多次加入3-NPA(0.2mmol/L)形成预处理,应用四氮唑盐(MTT)检测细胞生存率,[3H]DA摄取率测定多巴胺能细胞突触前功能,观察3-NPA预处理对它们的影响。结果:3-NPA预处理后,预处理组细胞生存率分别为71.8%(单次),85.2%(多次),较MPP+组(54.3%)明显提高;[3H]DA摄取率分别为65.8%(单次)80.3%(多次),较MPP+组(50.1%)明显提高,且多次预处理较单次预处理效果更好。单加3-NPA对细胞无影响。结论:3-NPA预处理对多巴胺能神经元有明显的保护作用,多次预处理的保护作用更加显著。 展开更多
关键词 3-硝基丙酸 预处理 SH—SY5Y细胞 1-甲基-4苯基-吡啶离子
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Detection of Prorocentrum donghaiense using sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay 被引量:2
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作者 CHEN Jie ZHEN Yu +1 位作者 MI Tiezhu YU Zhigang 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2009年第2期121-126,共6页
Prorocentrum donghaiense is an important harmful algae bloom (HAB) causing creature in China's seas, and the conventional visual detection can not cope with long-term monitoring and highthroughput sampling projects... Prorocentrum donghaiense is an important harmful algae bloom (HAB) causing creature in China's seas, and the conventional visual detection can not cope with long-term monitoring and highthroughput sampling projects. An assay for P. donghaiense with sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay (NPA-SH) was established. Tests with mixed samples and spiked field ones confirmed its good specificity and sensitivity. The cell number of P. donghaiense correlated well with the optical density, and the regression equation is y=4× 10^- 6x+ 0.694 9, in which x is the cell number, and y is the optical density, with r2=0.953 5. These results show that the NPA-SH method has good feasibility in the detection of P. donghaiense. Results of NPA-SH and microscopy are excellent for each sample. The NPA-SH method was a simple way in quantitative detection of P. donghaiense, and the whole process could be finished in about six hours, which provided a new approach in high-throughput sampling and long-term monitoring of P. donghaiense. 展开更多
关键词 Prorocentrum donghaiense ribosomal RNA S1 enzyme sandwich hybridization integrated with nuclease protection assay npa-sh
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应用电致化学发光分子探针技术对微小原甲藻的检测
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作者 朱霞 甄毓 +3 位作者 米铁柱 于志刚 池振明 路兴岚 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期640-646,共7页
以双特异分子探针技术(NPA-SH)为基础,运用电致化学发光技术(ECL)和磁性微球分选技术对其进行改进,成功建立了用于赤潮藻类定性定量分析的电致化学发光分子探针(ECL-MP)检测新技术.设计微小原甲藻特异性NPA探针并对其进行联吡啶钌和生... 以双特异分子探针技术(NPA-SH)为基础,运用电致化学发光技术(ECL)和磁性微球分选技术对其进行改进,成功建立了用于赤潮藻类定性定量分析的电致化学发光分子探针(ECL-MP)检测新技术.设计微小原甲藻特异性NPA探针并对其进行联吡啶钌和生物素标记,优化磁性微球使用量,在ECL检测装置中启动电化学反应,建立光信号与微小原甲藻细胞数目间的ECL-MP分析曲线并对其进行验证.结果表明,标记后的NPA探针具有一定的特异性和实用性;4μg是检测20μL目标藻杂交混合液的最适磁性微球使用量;在最适条件下,微小原甲藻细胞数的线性分析范围6.25×102~4×104个;比较ECL-MP和显微计数方法的样品检测结果,在95%置信区间内二者无显著差异(t-检验).ECL-MP方法为实现微小原甲藻现场样品的快速准确检测提供了一种新方法. 展开更多
关键词 电致化学发光 双特异分子探针 微小原甲藻 联吡啶钌 三丙胺
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