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水分胁迫下山黧豆中ABA及ODAP的积累研究 被引量:10
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作者 邢更生 周功克 +1 位作者 李志孝 崔凯荣 《应用生态学报》 CAS CSCD 2000年第5期693-698,共6页
用PEG、PEG +ABA、ABA分别处理 15d龄的山黧豆幼苗 ,取其叶片为实验材料 ,测定内源ABA、O DAP、MDA和H2 O2 含量以及几种抗氧化酶活性 ,结果表明 ,与对照相比处理材料叶片中ABA和ODAP含量显著增加 ;外源ABA的加入降低了PEG胁迫引起的MDA... 用PEG、PEG +ABA、ABA分别处理 15d龄的山黧豆幼苗 ,取其叶片为实验材料 ,测定内源ABA、O DAP、MDA和H2 O2 含量以及几种抗氧化酶活性 ,结果表明 ,与对照相比处理材料叶片中ABA和ODAP含量显著增加 ;外源ABA的加入降低了PEG胁迫引起的MDA和H2 O2 含量的增加 ,延缓了PEG胁迫引起的CAT活性的衰减 ,提高了GR活性 .用外源ABA长时间处理山黧豆 ,发现叶片中ABA含量显著增加 ,随后出现ODAP的积累 ;ABA处理初期 (0~ 3d)对叶片中活性氧代谢影响不大 ,随着ABA处理时间的延长 (7~ 15d) ,可引起叶片中SOD、POD、CAT、GR活性的降低 ,MDA、H2 O2 含量的增加 ,表明ABA确实可促进ODAP的积累 . 展开更多
关键词 山黧豆 ABA odap 水分胁迫 活性氧 膜脂过氧化
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山黧豆毒素ODAP的生物合成及与抗逆性关系研究进展 被引量:7
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作者 张大伟 邢更妹 +5 位作者 熊友才 焦成瑾 樊宪伟 王崇英 王亚馥 李志孝 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期2621-2630,共10页
有关山黧豆毒素ODAP的生物合成途径的前体物和合成程序已经证实,但其关键合成酶尚未分离与鉴定,因而无法克隆相应基因和利用反义RNA技术以控制其生物合成。研究表明,利用相应的抑制剂控制ODAP生物合成前体物可降低ODAP的积累量。山黧豆... 有关山黧豆毒素ODAP的生物合成途径的前体物和合成程序已经证实,但其关键合成酶尚未分离与鉴定,因而无法克隆相应基因和利用反义RNA技术以控制其生物合成。研究表明,利用相应的抑制剂控制ODAP生物合成前体物可降低ODAP的积累量。山黧豆中ODAP含量与其抗逆性之间密切相关,这与其能有效地清除山黧豆中.OH自由基有关,外源ODAP处理获同样效果。此外,因ODAP既是含氮化合物,又是游离氨基酸,极易溶于水,可在逆境胁迫下与脯氨酸和多胺一样大量而迅速地积累,推测它也可能作为细胞渗透调节物质和防脱水剂,并在氮代谢和能量代谢方面起重要作用。对今后该领域的重点研究方向也进行了探讨。 展开更多
关键词 山黧豆 odap 山黧豆中毒 生物合成 抗逆性
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水分胁迫对山黧豆萌发过程中β-ODAP和氨基酸的影响 被引量:4
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作者 薛崧 张林生 +2 位作者 曹让 王明华 汪沛洪 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第4期620-624,共5页
山黧豆 ( L athyrus sativus)种子在萌发过程中 ,根芽中 β- N-草酰基 - L- 2 ,3-二氨基丙酸( β- ODAP) 6d前逐渐增加 ,尔后不断下降 ;在水分胁迫条件下 ,β- ODAP和游离氨基酸含量随水分胁迫的增加而上升。子叶中 β- ODAP在 3d前高... 山黧豆 ( L athyrus sativus)种子在萌发过程中 ,根芽中 β- N-草酰基 - L- 2 ,3-二氨基丙酸( β- ODAP) 6d前逐渐增加 ,尔后不断下降 ;在水分胁迫条件下 ,β- ODAP和游离氨基酸含量随水分胁迫的增加而上升。子叶中 β- ODAP在 3d前高于根芽 ,然后下降并低于根芽 ,子叶中 β-ODAP含量随着胁迫的增加而降低。 展开更多
关键词 水分胁迫 山黧豆 游离氨基酸 β-N-草酰基-L-2 3-二氨基丙酸 种子萌发 抗逆性
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^(60)Coγ射线对山黧豆种胚发育进程中ODAP含量累积的抑制效应 被引量:1
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作者 王亚馥 徐庆 +5 位作者 王崇英 高清祥 杨汉民 李志孝 张立 陈耀祖 《核农学报》 CAS CSCD 1990年第3期189-192,共4页
用60^(Co)γ射线不同照射量分别处理山黧豆(Lathyrus sativus)干种子,辐照后检测了种胚发育过程中ODAP含量的动态变化。结果表明:种子中ODAP含量随着种胚发育进程而积累,特别是从心形胚到鱼雷胚时期,ODAP几乎成倍增加。但是辐照后,种胚... 用60^(Co)γ射线不同照射量分别处理山黧豆(Lathyrus sativus)干种子,辐照后检测了种胚发育过程中ODAP含量的动态变化。结果表明:种子中ODAP含量随着种胚发育进程而积累,特别是从心形胚到鱼雷胚时期,ODAP几乎成倍增加。但是辐照后,种胚累积ODAP的速率明显低于对照,尤以3.2kR处理最为明显。如以每克干重表示,对照ODAP含量开始有所上升,随后呈下降趋势,而辐照后的种胚,ODAP含量下降的速率远远大于对照。本文还讨论了这种抑制效应的可能机理。 展开更多
关键词 山黧豆 钴60 γ射线 odap
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草酸与家山黧豆中ODAP生物合成及其抗逆性关系的研究 被引量:1
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作者 张大伟 邢更妹 +3 位作者 严则仪 王崇英 李志孝 王亚馥 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期63-69,共7页
山黧豆中含β-N-草酰-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-α,β-diaminopropionic,ODAP),ODAP是引起山黧豆中毒的主要成分.在山黧豆不同发育期,用草酸合成抑制剂、外源草酸和水分胁迫等处理后分析各器官中ODAP积累消长动态与山黧豆抗逆性... 山黧豆中含β-N-草酰-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-α,β-diaminopropionic,ODAP),ODAP是引起山黧豆中毒的主要成分.在山黧豆不同发育期,用草酸合成抑制剂、外源草酸和水分胁迫等处理后分析各器官中ODAP积累消长动态与山黧豆抗逆性及其产量因子等之间的关系,结果如下:BHB不仅降低了各器官中草酸的质量浓度,而且明显抑制了ODAP积累;外源草酸或水分胁迫处理后,促进了内源草酸和ODAP的积累;BHB在降低了成熟种子中ODAP质量分数的同时,也降低了山黧豆的抗逆性,但在生长后期处理既可抑制种子中ODAP积累,又不致严重影响山黧豆的产量和抗逆性.这表明,草酸是ODAP生物合成的前体物之一,为获得低毒山黧豆提供了一条切实可行而有效的途径. 展开更多
关键词 山黧豆 β-N-草酰-α β-二氨基丙酸 草酸 2-羟基丁炔酸丁酯 聚乙二醇
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山黧豆中β-ODAP及其他氨基酸的提取和HPLC分析 被引量:1
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作者 李小波 樊琛 +5 位作者 龙立梅 李柰 曹学丽 李雪帆 牛晓峰 贾平 《食品科学技术学报》 CAS 2015年第2期42-47,共6页
利用氯甲酸对硝基卞酯(PNZ-Cl)作为柱前衍生化试剂,建立了山黧豆中神经毒素β-N-草酰基-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-α,β-diaminopropionic,β-ODAP)及其他游离氨基酸的同时分析法。HPLC法为色谱柱Ultimate XB-C18,流动相乙... 利用氯甲酸对硝基卞酯(PNZ-Cl)作为柱前衍生化试剂,建立了山黧豆中神经毒素β-N-草酰基-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-α,β-diaminopropionic,β-ODAP)及其他游离氨基酸的同时分析法。HPLC法为色谱柱Ultimate XB-C18,流动相乙腈和乙酸-乙酸钠缓冲溶液(p H值=4.6),梯度洗脱程序0~5 minφ(乙腈)25%,5~30 minφ(乙腈)25%~90%,流速0.8 m L/min,柱温30℃,检测波长300 nm。利用该方法对山黧豆中β-ODAP及其他游离氨基酸的提取条件中乙醇体积分数、山黧豆粉的质量浓度(ρ(山黧豆粉))、提取温度等进行了优化。结果表明,在φ(乙醇)为10%,ρ(山黧豆粉)为0.025 g/m L,提取温度为60℃时,提取效率较高。 展开更多
关键词 山黧豆 β-N-草酰基-L-α β-二氨基丙酸 氨基酸
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山黧豆胚胎发育过程中ODAP和一些大分子物质含量的变化 被引量:1
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作者 王亚馥 徐庆 +3 位作者 陆卫 王仑山 李志孝 张立 《植物学通报》 CSCD 1990年第3期37-41,共5页
应用微量分析方法检测了山黧豆胚胎发育过程中ODAP毒素含量和核酸、蛋白质、糖类等大分子物质的含量变化。结果表明:每粒种子的ODAP含量随着胚的发育而增加。每粒种子DNA量随着细胞的迅速分裂而增加,R、蛋白质、淀粉含量随着胚的发育而... 应用微量分析方法检测了山黧豆胚胎发育过程中ODAP毒素含量和核酸、蛋白质、糖类等大分子物质的含量变化。结果表明:每粒种子的ODAP含量随着胚的发育而增加。每粒种子DNA量随着细胞的迅速分裂而增加,R、蛋白质、淀粉含量随着胚的发育而成倍地增加,当进入心形胚时这些物质的增加更为迅速。如以每克干重中的含量来表示,那么ODAP、DNA及可溶性糖含量则随胚的发育而下降,其它大分子物质含量在胚发育前期升高,进入心形胚时,这些物质达到最高峰;到鱼雷胚时,这些物质含量开始下降,直到胚基本分化完全时,降到最低点;只有酸性蛋白质含量一直保持增长。 展开更多
关键词 山黧豆 胚胎发育 大分子物质 odap
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Eu ^(3+) Improving Drought Tolerance But Decreasing ODAP Level in Grass Pea (Lathyrus Sativus L.) Seedlings 被引量:1
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作者 熊友才 邢更妹 +3 位作者 郑峥 王亚馥 李志孝 李凤民 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第S1期502-507,共6页
Drought tolerance and toxicity variation of grass pea (Lathyrus Sativus L.) were studied in the presence and absence of earth element Eu 3+ under the pot-culture condition. The addition of exogenous Eu 3+ increases th... Drought tolerance and toxicity variation of grass pea (Lathyrus Sativus L.) were studied in the presence and absence of earth element Eu 3+ under the pot-culture condition. The addition of exogenous Eu 3+ increases the survival days (SD) and lowered the stomatal sensitivity of grass pea seedlings under the decreasing soil moisture from -0.2 MPa to -1 MPa, suggesting that Eu 3+ can improve the ability of grass pea seedlings to tolerate drought. But in this case, Eu 3+ is found to significantly inhibit the increase in contents of plant toxicity β-N-oxalyl-L-a, β-diaminopropionic acid (ODAP) level in leaves. Therefore, the results demonstrate that Eu 3+ application is a potential agronomic approach to improve drought tolerance while lowering the toxicity level in grass pea productivity. 展开更多
关键词 grass pea β-N-oxalyl-L-a β-diaminopropionic acid (odap) europium ion (Eu 3+) survival days stomatal sensitivity drought tolerance rare earths
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基于分光光度法的137份山黧豆种质资源ODAP含量分析 被引量:4
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作者 郝晓鹏 王燕 +3 位作者 董雪 田翔 赵建栋 畅建武 《山西农业科学》 2021年第2期211-214,共4页
采用Emmrich改进后的Rao分光光度法对137份山黧豆种质资源叶片进行ODAP含量检测并划分等级,旨在为山黧豆ODAP次生代谢物的研究和利用提供重要参考。结果表明,在137份资源当中ODAP含量呈现正态分布;根据ODAP含量,将137份山黧豆资源划分为... 采用Emmrich改进后的Rao分光光度法对137份山黧豆种质资源叶片进行ODAP含量检测并划分等级,旨在为山黧豆ODAP次生代谢物的研究和利用提供重要参考。结果表明,在137份资源当中ODAP含量呈现正态分布;根据ODAP含量,将137份山黧豆资源划分为5级并筛选到高毒、低毒资源各8份。 展开更多
关键词 山黧豆 种质资源 分光光度法 odap 三七素
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Analysis of Toxin β-N-Oxalyl-α, β-diaminopropionic Acid (β-ODAP),its Isomer α-ODAP and Other Free Amino Acids in Lathyrus sativus 被引量:2
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作者 ZeYiYAN ChengJinJIAO +2 位作者 FenMinLI YongMinLIANG ZhiXiaoLI 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2005年第5期627-630,共4页
A method has been presented for the simultaneous analysis of neurotoxin β-N-oxalyl-α, β-diaminopropionic acid (β-ODAP) and its non- or low-toxic isomer α-ODAP as well as other amino acids in Lathyrus sativus extr... A method has been presented for the simultaneous analysis of neurotoxin β-N-oxalyl-α, β-diaminopropionic acid (β-ODAP) and its non- or low-toxic isomer α-ODAP as well as other amino acids in Lathyrus sativus extracts after derivatization with para-nitrobenzyloxycarbonyl chloride (PNZ-Cl) by reversed-phase (C18 column) high performance liquid chromatography (RP-HPLC). Detection limits of isomers were 0.08 μg/mL for both β-, α-ODAP, for homoarginine 0.09 μg/ mL at a signal-to-noise ratio of 3:1. 展开更多
关键词 HPLC β-N-oxalyl-L-α β-diaminopropanoic acid α-odap HOMOARGININE PNZ-Cl.
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6个山黧豆品种的β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性及其关系分析
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作者 付筱 宋瑶瑶 +1 位作者 陈红 徐全乐 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1068-1075,共8页
山黧豆(Lathyrus spp.)种质资源评价与筛选长期聚焦于获得低β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionicacid,β-ODAP)含量或低蛋白酶抑制剂活性的品种。为了研究β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性之间的潜在关系... 山黧豆(Lathyrus spp.)种质资源评价与筛选长期聚焦于获得低β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionicacid,β-ODAP)含量或低蛋白酶抑制剂活性的品种。为了研究β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性之间的潜在关系,该研究利用SDS-PAGE、酶活检测和相关性分析等方法对家山黧豆(L.sativus)、扁荚山黧豆(L.cicera)等6个山黧豆品种的蛋白酶抑制剂活性、β-ODAP含量及二者之间的关系进行了分析。结果表明:(1)不同山黧豆品种的醇溶蛋白和可溶蛋白电泳图谱呈现出显著的差异。(2)不同山黧豆种子的胰蛋白酶抑制剂活性介于100~190 TIU之间,胰凝乳蛋白酶抑制剂活性介于5~9 CIU之间。(3)β-ODAP含量与丝氨酸乙酰基转移酶活性的皮尔逊相关系数可达0.76,呈显著正相关关系。(4)山黧豆转录组数据(SRP145030)中的β-ODAP生物合成关键基因与Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(Bowman-Birk inhibitor, BBi)基因表达水平呈显著负相关关系。该研究结果为进一步探讨分析山黧豆β-ODAP和BBi生物合成的调控与平衡,改善山黧豆的含硫氨基酸水平等奠定了基础。 展开更多
关键词 山黧豆 抗营养因子 β-odap 胰蛋白酶抑制剂 胰凝乳蛋白酶抑制剂
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山黧豆活性成分β-ODAP的检测方法研究进展
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作者 杨玲娟 焦成瑾 +1 位作者 张小寒 赵菲佚 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期507-516,共10页
β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)是山黧豆中的一种重要非蛋白氨基酸,与三七中的三七素为同一种次生代谢物,具有止血、兴奋神经、抗菌等多种生物活性。自20世纪60年代和80年代在山黧... β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)是山黧豆中的一种重要非蛋白氨基酸,与三七中的三七素为同一种次生代谢物,具有止血、兴奋神经、抗菌等多种生物活性。自20世纪60年代和80年代在山黧豆等豆类和三七等植物中分别发现β-ODAP以来,科研工作者建立了多种检测方法。该文对近年来国内外有关检测β-ODAP的传统分析法、高效液相色谱法(HPLC)、色谱-质谱法(GC/LC-MS)、毛细管电泳法及酶学分析法等的基本原理及应用研究进展进行了综述,这些检测方法各有所长,具体选择依实验条件和实验目的而定。其中,柱前衍生化高效液相色谱法是目前应用最广泛的方法,高成本同位素内标的LC-MS则被誉为“金标准”。但特异、快速和低成本的检测方法一直是人们的追求目标,因而进一步完善酶传感器技术是β-ODAP检测领域在将来的主要研究方向。 展开更多
关键词 β-odap 色谱 毛细管电泳 酶学分析
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微生物发酵法降解山黧豆毒素的研究 被引量:6
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作者 姚明明 李志孝 +3 位作者 黄凯 赵兴秀 孟尧 孟延发 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期439-442,共4页
为了寻找具有降解山黧豆神经毒素(ODAP)的菌株,本实验选择30种菌株,以含有已知量的ODAP的山黧豆粉提取液为培养基,采用邻苯二甲醛法检测培养前后培养基中ODAP的消耗量,筛选具有能够明显利用和消耗ODAP的菌株.实验结果表明,有2种菌株对O... 为了寻找具有降解山黧豆神经毒素(ODAP)的菌株,本实验选择30种菌株,以含有已知量的ODAP的山黧豆粉提取液为培养基,采用邻苯二甲醛法检测培养前后培养基中ODAP的消耗量,筛选具有能够明显利用和消耗ODAP的菌株.实验结果表明,有2种菌株对ODAP有明显的降解和消耗作用.还探讨了这两种菌株在山黧豆培养基中的生长情况与ODAP降解情况的相关性以及酶促反应的基本动力学,从所获得的试验结果可断定被筛选出的2株菌种经发酵可产生ODAP降解酶. 展开更多
关键词 山黧豆 β-N-草酰-L-α β-二氨基丙酸(odap) 微生物发酵法 odap降解酶
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山黧豆毒素生物化学及去毒研究进展 被引量:6
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作者 焦成瑾 王崇英 +1 位作者 李志孝 王亚馥 《草业学报》 CSCD 2005年第1期100-105,共6页
对近年来山黧豆毒素的生物化学和去毒研究进展作了综述。毒素生物化学包括毒素的化学成分、生物合成以及外界环境对毒素生物合成的影响;去毒研究主要涉及毒素的遗传和低毒品种的选育、组织培养和遗传转化及食用前种子去毒方面的近况。... 对近年来山黧豆毒素的生物化学和去毒研究进展作了综述。毒素生物化学包括毒素的化学成分、生物合成以及外界环境对毒素生物合成的影响;去毒研究主要涉及毒素的遗传和低毒品种的选育、组织培养和遗传转化及食用前种子去毒方面的近况。就毒素的可能生物学意义进行了扼要讨论,对今后山黧豆的研究方向作了简要展望。 展开更多
关键词 山黧豆 神经毒素(β-odap) 毒素生物化学 低毒品系 组织培养
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渗透胁迫对山黧豆幼苗H_2O_2及毒素积累的影响 被引量:13
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作者 邢更生 周功克 +1 位作者 李志孝 崔凯荣 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 2001年第1期5-8,共4页
用PEG经根部处理 15d龄的山黧豆幼苗 ,取幼苗叶片为实验材料 ,测定过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶 (POD)活性、过氧化氢 (H2 O2 )和毒素 ( β N oxalyl α ,β diaminopropionicacid ,ODAP)的含量。结果表明 ,随着PEG处理时间的延长 ,POD... 用PEG经根部处理 15d龄的山黧豆幼苗 ,取幼苗叶片为实验材料 ,测定过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶 (POD)活性、过氧化氢 (H2 O2 )和毒素 ( β N oxalyl α ,β diaminopropionicacid ,ODAP)的含量。结果表明 ,随着PEG处理时间的延长 ,POD和CAT活性降低 ,而H2 O2 和ODAP含量显著升高 ;在PEG处理液中加入二乙基二硫代氨基甲酸钠 (diethyldithiocarbamate ,DDC)和氨基三唑 (aminotriazole ,AT)后分别抑制和促进H2 O2 的产生 ,DDC可降低叶片中ODAP的含量 ,AT则使ODAP积累。由此我们推测 。 展开更多
关键词 渗透胁迫 山黧豆 过氧化氢 毒素 抗氧化酶 豆科
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山黧豆160年研究历程及进展 被引量:7
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作者 徐全乐 蒋景龙 +4 位作者 焦成瑾 张大伟 Neil C.Turner Shiv Kumar 熊友才 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1583-1604,共22页
在全球范围内曾多次发生因过量食用山黧豆导致神经中毒事件,使得国内外对于山黧豆的种植和利用存在一定的误解和偏见,山黧豆的优良农艺价值和潜在功能食品利用价值也受到一定限制。但山黧豆适应性强、分布范围广,是全球气候变化条件下... 在全球范围内曾多次发生因过量食用山黧豆导致神经中毒事件,使得国内外对于山黧豆的种植和利用存在一定的误解和偏见,山黧豆的优良农艺价值和潜在功能食品利用价值也受到一定限制。但山黧豆适应性强、分布范围广,是全球气候变化条件下农业可持续发展和地力维持的优选作物,在食品安全、生态文明建设和乡村振兴新形势下,进一步研究和挖掘利用这一古老的优良作物具有重要的战略意义。山黧豆相关研究报道可追溯到1861年,距今已有160年的历史。在同行学者的不懈努力下,山黧豆基础研究及种质资源利用等方面均取得了显著的阶段性成果。该文系统回顾了山黧豆研究160年以来的发展历程,依托历史文献进行了梳理和分析。首先,基于山黧豆神经活性物质β-ODAP的分离和鉴定、神经山黧豆中毒机制的探索、β-ODAP生物合成途径解析等重要研究节点将整个山黧豆研究进程划分为山黧豆中毒因素的探索、神经山黧豆中毒机理解析和神经山黧豆中毒及β-ODAP生物学功能的再认识等三个阶段。其次,总结了山黧豆在毒理学研究、种质资源利用、品质改良基础研究等方面取得的重要进展。特别是以兰州大学为代表的中国学者在β-ODAP的分析检测、生物合成途径、山黧豆生理生态学研究及种质资源利用等方面进行了深入探讨,确立了中国在国际山黧豆研究中的主流地位。最后,针对目前山黧豆分子生物学基础研究相对滞后、种质资源缺乏系统利用等问题进行了展望,提出了未来的重点发展方向,为山黧豆种质资源的进一步深入挖掘和应用提供参考。 展开更多
关键词 山黧豆 β-odap 神经兴奋性作用 膳食平衡 功能食品
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山黧豆毒素的薄层分离 被引量:3
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作者 焦成瑾 杨玲娟 +5 位作者 雷新有 马旭凤 袁子宇 杨晓鹏 梁芳艳 李志孝 《氨基酸和生物资源》 CAS 2007年第4期76-80,共5页
通过对山黧豆中常见的20几种游离氨基酸薄层层析发现,其毒素ODAP的Rf值与好几种相关氨基酸的接近,而用阳离子交换柱对氨基酸抽提样进行简单的分离纯化,第一个洗脱出来的即为ODAP,这样在排除其它氨基酸干扰的情况下再进行ODAP的薄层分析... 通过对山黧豆中常见的20几种游离氨基酸薄层层析发现,其毒素ODAP的Rf值与好几种相关氨基酸的接近,而用阳离子交换柱对氨基酸抽提样进行简单的分离纯化,第一个洗脱出来的即为ODAP,这样在排除其它氨基酸干扰的情况下再进行ODAP的薄层分析将得到准确的结果。 展开更多
关键词 山黧豆 odap 薄层层析 离子交换
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两步固态法发酵降解山黧豆毒素的研究 被引量:1
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作者 赵兴秀 李志孝 孟延发 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期37-40,共4页
从保存的菌种中筛选到B_2和B_(13)2株菌,通过2步固态发酵,在山黧豆培养基中先接菌株B_2培养3d (37℃),灭菌后再接菌株B_(13),培养3d(37℃),灭菌后用0.2 mol/L的HClO_4在0~4℃提取1h,然后利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生试剂,通过... 从保存的菌种中筛选到B_2和B_(13)2株菌,通过2步固态发酵,在山黧豆培养基中先接菌株B_2培养3d (37℃),灭菌后再接菌株B_(13),培养3d(37℃),灭菌后用0.2 mol/L的HClO_4在0~4℃提取1h,然后利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生试剂,通过高效液相色谱(HPLC),检测了对照和处理中α,β-草酰氨基丙氨酸(ODAP)的含量及降解率。结果发现,对照中β-ODAP和α-ODAP平均含量分别为1.146 mg/g和0.653 mg/g,处理中β-ODAP和α-ODAP的平均含量分别为0.203 mg/g和0.0909 mg/g,处理中的β-ODAP和α-ODAP比对照中的β-ODAP和α-ODAP的平均含量降低了82.2%和86%,而且发酵后处理的蛋白含量明显高于对照。 展开更多
关键词 固态发酵 山黧豆 β-N-草酰基-α β-二氨基丙酸
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山黧豆β-腈基丙氨酸合成酶基因LsCAS的原核表达及蛋白聚合状态分析
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作者 贾海燕 李辰浩 +3 位作者 宋瑶瑶 刘凤娟 焦成瑾 徐全乐 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1605-1610,共6页
该研究从山黧豆种子萌发6 d后的幼苗根中扩增到β-腈基丙氨酸合成酶基因(LsCAS)的CDS序列,并构建pGEX2T-LsCAS表达载体;经诱导表达后,通过GST亲和层析进行LsCAS蛋白纯化,并利用GST标签抗体和大豆半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CS)... 该研究从山黧豆种子萌发6 d后的幼苗根中扩增到β-腈基丙氨酸合成酶基因(LsCAS)的CDS序列,并构建pGEX2T-LsCAS表达载体;经诱导表达后,通过GST亲和层析进行LsCAS蛋白纯化,并利用GST标签抗体和大豆半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CS)抗体对纯化蛋白进行Western-blot验证;纯化后的LsCAS蛋白经凝血酶切除GST标签抗体后,利用凝胶过滤预装柱Superdex 200 Increase 10/300 GL分析判断分子量。结果显示:(1)山黧豆LsCAS基因的CDS序列为1035 bp,编码344个氨基酸;其编码的蛋白质具有典型的CBS-like蛋白功能结构域胱硫醚β-合酶(CBS)和半胱氨酸合成酶(CS)。(2)成功构建LsCAS基因的原核表达载体pGEX2T-LsCAS并进行蛋白纯化;SDS-PAGE检测表明,所获融合蛋白条带单一,大小在64 kD左右;Western-blot分析发现,诱导后的菌体蛋白和纯化后的重组蛋白中均能检测到特征条带,说明所获融合蛋白为山黧豆LsCAS蛋白。(3)纯化的山黧豆LsCAS蛋白在412 nm的特征吸收峰显示,LsCAS隶属于磷酸吡哆醛(PLP)依赖的半胱氨酸合成酶家族;分子排阻试验证实山黧豆LsCAS为PLP依赖性蛋白酶,可能以四聚体方式发挥作用。研究结果为进一步探讨山黧豆LsCAS的调控及其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 山黧豆 β-腈基丙氨酸合成酶 原核表达 蛋白纯化 磷酸吡哆醛
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山黧豆LsSULTR基因的克隆与表达分析 被引量:2
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作者 陈红 曾鹏 徐全乐 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1954-1961,共8页
为研究山黧豆(Lathyrus sativus)硫酸盐转运蛋白(sulfate transporter,SULTR)与内源活性物质β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)含量之间的关系,该研究采用序列比对的方法,从山黧豆转录... 为研究山黧豆(Lathyrus sativus)硫酸盐转运蛋白(sulfate transporter,SULTR)与内源活性物质β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)含量之间的关系,该研究采用序列比对的方法,从山黧豆转录组数据(SRP145030)中查找SULTR基因序列,并进行生物信息学分析;采用PCR方法克隆基因全长序列并进行组织特异性表达分析,以筛选与β-ODAP含量相关的SULTR基因。结果表明:(1)经序列比对共查找到13条SULTR基因序列,其编码蛋白分别隶属于SULTRⅠ-Ⅳ。其中LsSULTR3;3和LsSULTR3;5具有SULTR蛋白家族保守的STAS结构域(PF01740)和Sulfate_transp结构域(PF00916),且二者活性受到转录因子MYB和激素响应等多个顺式作用元件的共同调节,并受蛋白水平互作及磷酸化等翻译后修饰调控。(2)成功获得LsSULTR3;3和LsSULTR3;5基因全长cDNA分别为1962 bp和1923 bp,分别编码653和640个氨基酸。(3)半定量RT-PCR分析显示,LsSULTR3;3在山黧豆主根、成熟叶、茎、花、盛荚初期(S2)种子和鼓粒满期(S6)种子中表达,并在茎中的表达量较高;LsSULTR3;5在山黧豆主根、侧根、花、S2时期种子中均有表达,且花中的表达量最为显著。该研究结果为进一步研究山黧豆中硫酸盐的吸收、转运及同化、β-ODAP的生物合成途径等奠定了基础。 展开更多
关键词 山黧豆 硫酸盐转运蛋白 β-odap 基因克隆 蛋白活性调控
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