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通过CRISPR-Cas9系统敲减PAEC中GGTA1和CMAH基因的效果检测 被引量:1
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作者 牟丽莎 白图雅 +1 位作者 谢崇伟 蔡志明 《深圳中西医结合杂志》 2015年第22期1-3,F0003,共4页
目的:检测由短回文重复序列(CRISPR)-Cas9系统敲减猪动脉内皮细胞(PAEC)中基因α1,3半乳糖基转移酶(GGTA1)和CMP-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)的效果。方法:通过CRISPR-Cas9系统,用已设计好的GGTA1和CMAH基因的guide RNA(g RNA)构建质粒... 目的:检测由短回文重复序列(CRISPR)-Cas9系统敲减猪动脉内皮细胞(PAEC)中基因α1,3半乳糖基转移酶(GGTA1)和CMP-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)的效果。方法:通过CRISPR-Cas9系统,用已设计好的GGTA1和CMAH基因的guide RNA(g RNA)构建质粒,以慢病毒为载体包装病毒和感染PAEC,对成功感染的细胞进行单克隆培养并挑选收集单克隆细胞,提取细胞基因组,进行PCR,琼脂糖凝胶电泳,退火、酶切,测序等方法对GGTA1和CMAH基因敲减的效果进行检测。结果:对单克隆细胞进行选择性测序,选择V2-g-a1、V2-c-b1、V2-c-d4单克隆细胞测序结果分别为:V2-g-a1细胞基因组突变位点在第205位;V2-c-b1细胞基因组突变位点在第240位;V2-c-d4细胞基因组突变位点在第246位。结论:CRISPR-Cas9系统成功构建质粒,完成慢病毒包装和感染细胞,成功敲减目的基因。 展开更多
关键词 GGTA1 CMAH CRISPR-Cas9 paec 单克隆细胞
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不同龄期家蚕蚕沙部分理化和微生物学性质研究 被引量:6
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作者 史才娟 陈芳艳 +3 位作者 钟杨生 王叶元 李文楚 林健荣 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期109-111,共3页
用生物化学和微生物学的技术方法,检测分析了2~5龄期家蚕蚕沙的部分理化性质和微生物类群的变化。结果表明,2~5龄蚕的蚕沙含水率在62%-66%之间,pH值接近中性;大蚕(4~5龄蚕)蚕沙的有机质、总氮含量较小蚕(2~3龄蚕)的蚕沙... 用生物化学和微生物学的技术方法,检测分析了2~5龄期家蚕蚕沙的部分理化性质和微生物类群的变化。结果表明,2~5龄蚕的蚕沙含水率在62%-66%之间,pH值接近中性;大蚕(4~5龄蚕)蚕沙的有机质、总氮含量较小蚕(2~3龄蚕)的蚕沙高,钙、镁、钾及微量元素铁、锰、铜、锌含量则低于小蚕的蚕沙;小蚕蚕沙中重金属元素铅、铬、汞的含量比大蚕蚕沙高。各龄蚕沙中的微生物类群和数量差异不明显,数量最多的是细菌,其次是放线菌,真菌最少。 展开更多
关键词 蚕沙 理化性质 微生物
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氡子体体积活度的液体闪烁计数方法研究 被引量:6
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作者 杨志杰 李则书 +3 位作者 侯胜利 刘皓然 张明 梁珺成 《计量学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期328-332,共5页
基于液体闪烁计数原理和滤膜采样技术,建立了一种氡(^222Rn)子体体积活度和“潜能浓度的测量方法。应用该方法对氡室中处于放射性平衡状态的氡子体体积活度进行了取样测量,氡子体α潜能浓度测量结果的扩展不确定度小于1.5%(k=2... 基于液体闪烁计数原理和滤膜采样技术,建立了一种氡(^222Rn)子体体积活度和“潜能浓度的测量方法。应用该方法对氡室中处于放射性平衡状态的氡子体体积活度进行了取样测量,氡子体α潜能浓度测量结果的扩展不确定度小于1.5%(k=2);用α能谱法对氡子体液体闪烁计数测量方法进行了旁证,两种方法的测量结果在不确定度范围内一致。 展开更多
关键词 计量学 液体闪烁计数法 α能谱法 氡子体体积活度 氡子体α潜能浓度
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人NK细胞对猪/人血管内皮细胞的差异粘附 被引量:1
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作者 冯志民 张晓峰 丰美福 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期542-546,共5页
采用51Cr标记法和3H TdR摄入法研究了人外周血NK细胞 (PBNK)和人NK细胞系———NK92对猪主动脉内皮细胞 (PAEC)和人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的粘附作用。结果表明 ,NK92和PBNK对PAEC的粘附率显著高于对HUVEC的粘附率 ;rhTNF α预刺激PAEC... 采用51Cr标记法和3H TdR摄入法研究了人外周血NK细胞 (PBNK)和人NK细胞系———NK92对猪主动脉内皮细胞 (PAEC)和人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的粘附作用。结果表明 ,NK92和PBNK对PAEC的粘附率显著高于对HUVEC的粘附率 ;rhTNF α预刺激PAEC/HUVEC后 ,PBNK的粘附率呈现TNF α剂量依赖性的增高 ;rhIFN γ预刺激NK92 /PBNK后 ,两者对PAEC粘附率的增幅均高于对HUVEC的增幅 ;CD11a (LFA 1)单抗可以不同程度地抑制PBNK对静息和TNF α激活的PAEC的粘附作用。这些结果提示 。 展开更多
关键词 paec HUVEC PBNK NK92 粘附作用 NK细胞 异种移植 排斥反应 血管内皮细胞
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电子对抗装备原理与运用“课程思政”的探索与实践 被引量:8
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作者 魏昱 何缓 彭世蕤 《空军预警学院学报》 2020年第4期309-312,共4页
为贯彻军校“注重各类课程中的思想政治教育”的基本要求,以电子对抗装备原理与运用课程为例,挖掘课程的思政元素,探析课程内容与课程思政的内在联系,寻找课程内容与思想政治教育的最佳契合点,探索出将两者有机结合起来的课程思政方式方... 为贯彻军校“注重各类课程中的思想政治教育”的基本要求,以电子对抗装备原理与运用课程为例,挖掘课程的思政元素,探析课程内容与课程思政的内在联系,寻找课程内容与思想政治教育的最佳契合点,探索出将两者有机结合起来的课程思政方式方法.该方法在向学员教授知识的同时,引导学员建立正确的思想政治观念,提高学员军政素养.问卷调查表明,该课程思政内容和实施方法得到了大多数学员和教员的认可,可为其他课程的“课程思政”提供借鉴. 展开更多
关键词 军校 电子对抗装备原理与运用 课程思政 电子对抗
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硅基片微型通孔加工技术 被引量:5
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作者 赵钢 褚家如 徐藻 《微细加工技术》 2004年第2期60-65,共6页
介绍了硅基片微型通孔的用途及在微机电系统发展中的重要性,从原理、过程、优缺点等方面详细叙述了激光打孔法、湿法刻蚀法、深度反应离子刻蚀法(DRIE)和光辅助电化学刻蚀法(PAECE)等四种硅基片微型通孔的加工方法,并对各种方法进行了比... 介绍了硅基片微型通孔的用途及在微机电系统发展中的重要性,从原理、过程、优缺点等方面详细叙述了激光打孔法、湿法刻蚀法、深度反应离子刻蚀法(DRIE)和光辅助电化学刻蚀法(PAECE)等四种硅基片微型通孔的加工方法,并对各种方法进行了比较,提出了各种方法的适用范围。 展开更多
关键词 微型通孔 微机电系统 深度反应离子刻蚀法 光辅助电化学刻蚀法
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食品包装材料中邻苯二甲酸酯向食品模拟物中的迁移规律 被引量:5
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作者 曾云想 梁婷婷 +1 位作者 汤明河 刘小平 《山地农业生物学报》 2016年第1期34-39,共6页
采用超高效液相-串联质谱法(UPLC-MS/MS)对不同温度、时间条件下的16种邻苯二甲酸酯(PAEs)从食品包装材料中向水性、酸性、酒性与脂肪性食品模拟物中的迁移律进行研究。结果表明:在食品模拟物富集浓度30μg/m L,富集时间6 h条件下,PAEs... 采用超高效液相-串联质谱法(UPLC-MS/MS)对不同温度、时间条件下的16种邻苯二甲酸酯(PAEs)从食品包装材料中向水性、酸性、酒性与脂肪性食品模拟物中的迁移律进行研究。结果表明:在食品模拟物富集浓度30μg/m L,富集时间6 h条件下,PAEs富集最佳。其中PAEs在不同食品模拟物中迁移率为:脂肪性>酒性>酸性>水性;在同一种食品模拟物条件下,随着迁移时间增长和温度增加都有助于PAEs迁移速率提高;同时,同一性质食品模拟液在同一温度条件下,随着分子链长逐步增长,相对分子质量依次增大,迁移率基本呈逐渐降低趋势。 展开更多
关键词 超高效液相-串联质谱法 邻苯二甲酸酯 食品模拟物 迁移规律
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体外培养肉鸡肺动脉内皮细胞的脂质过氧化损伤
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作者 潘家强 李锦春 +3 位作者 谭勋 王金勇 孙卫东 王小龙 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期107-110,共4页
采用组织贴块法培养肉鸡肺动脉内皮细胞(PAEC),并依据细胞形态学特点和凝血因子Ⅷ相关抗原免疫组化染色结果对所培养的细胞进行鉴定。以黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(X/XO)系统作为氧自由基发生系统建立PAEC氧化损伤模型。结果表明:肉鸡PAEC在... 采用组织贴块法培养肉鸡肺动脉内皮细胞(PAEC),并依据细胞形态学特点和凝血因子Ⅷ相关抗原免疫组化染色结果对所培养的细胞进行鉴定。以黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(X/XO)系统作为氧自由基发生系统建立PAEC氧化损伤模型。结果表明:肉鸡PAEC在体外能够存活并传5-6代。形态学观察和Ⅷ因子抗原免疫组化染色检查证明培养的细胞符合肺动脉内皮细胞的特点。氧自由基能够明显损伤PAEC,X/XO系统作用下细胞生长被抑制,甚至导致细胞死亡,并且这种抑制作用对XO有剂量依赖性。与正常对照组相比,损伤组PAEC培养液中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量升高,提示氧自由基促进了PAEC的脂质过氧化。这说明氧自由基对肉鸡肺动脉内皮细胞具有损伤作用,可能在肉鸡肺动脉高压综合征的发病过程中起重要作用。 展开更多
关键词 肉鸡 肺动脉内皮细胞 脂质过氧化损伤 体外培养 肺动脉高压综合征
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缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF─A、─B链及其受体α、β亚基基因表达的影响
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作者 刘健 王培勇 +2 位作者 罗德成 孙秉庸 苟俊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期285-288,共4页
为了研究缺氧性肺动脉高压形成的机理,采用核酸分子杂交技术观察缺氧对肺动脉内皮细胞(PAEC)血小板源性生长因子(PDGF)-A链、-B链及其受体α、β亚基基因表达的影响。结果表明低氧和无氧(2.5%O2和0%O2)1... 为了研究缺氧性肺动脉高压形成的机理,采用核酸分子杂交技术观察缺氧对肺动脉内皮细胞(PAEC)血小板源性生长因子(PDGF)-A链、-B链及其受体α、β亚基基因表达的影响。结果表明低氧和无氧(2.5%O2和0%O2)1.5、3hPAEC的PDGF-A链mRNA表达显著增加(P<0.01,vs常氧组),而6~48hPDGF-A链mRNA表达水平无明显改变。低氧和无氧1.5~48h均能显著地增加PAEC的PDGF-B链mR-NA表达(P<0.05)。常氧条件下PAEC均能低水平地表达PDGF-α亚基受体和β亚基受体,低氧和无氧则上调此两受体mRNA表达水平(P<0.05)。由此说明缺氧不仅能使PAEC“旁分泌”PDGF参与肺动脉平滑肌细胞增殖调节,也使PAEC通过“自分泌”PDGD及上调其膜上的PDGF受体基因表达,参与缺氧肺动脉内皮细胞自身功能调节,从而在缺氧性肺动脉高压肺血管收缩反应增强及肺血管结构改建中发挥重要作用。 展开更多
关键词 缺氧 肺动脉 内皮细胞
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间充质干细胞源性外泌体在肺动脉高压治疗中的应用 被引量:1
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作者 陈垚鑫 邓芝花 钱进先 《中国急救医学》 CAS CSCD 2022年第7期635-638,共4页
肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一种严重的、发展性疾病,病理变化以炎症激活、肺血管重塑及血管闭塞为主,临床表现为肺动脉压力的进行性升高、右心室肥厚,甚至右心衰竭,目前的临床治疗尚缺乏改善PAH的有效治疗方法... 肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一种严重的、发展性疾病,病理变化以炎症激活、肺血管重塑及血管闭塞为主,临床表现为肺动脉压力的进行性升高、右心室肥厚,甚至右心衰竭,目前的临床治疗尚缺乏改善PAH的有效治疗方法。间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)具有多谱系分化、抗炎、修复组织等多种特征,其通过旁分泌方式分泌的外泌体具有其相似的生物功能,在PAH治疗方面发挥了重要的作用。MSCs来源的外泌体通过抑制肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PAMSC)增殖、肺动脉内皮细胞(pulmonary artory endothelial cell,PAEC)凋亡和迁移,以及调节炎症及代谢水平,改善肺血管重塑,降低肺动脉压力。本文主要介绍MSCs及其分泌的外泌体在PAH治疗方面相关机制的研究。 展开更多
关键词 肺动脉高压(PAH) 肺血管重塑 间充质干细胞(MSCs) 外泌体(exosome) 肺动脉平滑肌细胞(PAMSC) 肺动脉内皮细胞(paec)
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一种新的非Gal异种移植抗原——FAM234A的鉴定
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作者 谢崇伟 戴文杰 +2 位作者 张军方 蔡志明 牟丽莎 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期354-359,共6页
目的探讨FAM234A是否为一种新的非Gal异种移植抗原。方法用α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪的原代猪主动脉内皮细胞(PAEC)免疫食蟹猴。将免疫的猴血清与PAEC孵育,其中经免疫产生的猴抗猪细胞抗体能够识别并结合PAEC表面的未... 目的探讨FAM234A是否为一种新的非Gal异种移植抗原。方法用α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪的原代猪主动脉内皮细胞(PAEC)免疫食蟹猴。将免疫的猴血清与PAEC孵育,其中经免疫产生的猴抗猪细胞抗体能够识别并结合PAEC表面的未知抗原。采用流式细胞术测定PAEC表面结合的猴抗猪细胞抗体的平均荧光强度(MFI),用以表示PAEC表面抗原的含量。利用慢病毒介导的短发夹核糖核酸(shRNA)敲减PAEC中的FAM234A基因,检测该细胞结合的猴抗猪细胞抗体含量是否减少,以确定该基因是否为潜在的移植抗原。结果 PAEC中的非Gal抗原能够在猴体内引发大量的猴抗猪细胞抗体。在GTKO小型猪的PAEC中用shRNA敲减FAM234A基因后,PAEC结合的猴IgG抗体减少。结论 FAM234A是一种新的非Gal异种移植抗原。 展开更多
关键词 异种移植 非Gal抗原 主动脉内皮细胞(paec) FAM234A 食蟹猴 α-1 3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO) 流式细胞术 短发夹核糖核酸(shRNA) 基因敲减 巴马小型猪 五指山小型猪 慢病毒
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Reshaping Agriculture Using the Nuclear Techniques: The Pakistan Case
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作者 Mukhtar Ahmed Rana 《Agricultural Sciences》 2018年第9期1168-1172,共5页
The field of nuclear agriculture is introduced very briefly. Nuclear agriculture research/development system in Pakistan is described highlighting the achievements of the system partners. Description and discussion ar... The field of nuclear agriculture is introduced very briefly. Nuclear agriculture research/development system in Pakistan is described highlighting the achievements of the system partners. Description and discussion are generalized in concluding remarks at the end of the article. This article is an experimental guide for a developing nuclear agriculture system. 展开更多
关键词 NUCLEAR AGRICULTURE The paec CROP VARIETIES HUNGER
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Adhesion of subsets of human blood mononuclear cells to porcine endothelial cells 被引量:1
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作者 Xiaofeng Zhang Zhimin Feng +2 位作者 Meifu Feng Hongfang Wang Ban Liqin 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2000年第7期626-630,共5页
Cellular immune response is a major barrier to xenotransplantation, and cell adhesion is the first step in intercellular recognition. Flow-cytometric adhesion assay has been used to investigate the differential adhesi... Cellular immune response is a major barrier to xenotransplantation, and cell adhesion is the first step in intercellular recognition. Flow-cytometric adhesion assay has been used to investigate the differential adhesions of monocyte (Mo), natural killer celi (NK) and T lymphocyte (T) present within human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) to porcine aortic endothelial cells (PAEC), and to demonstrate the effect of human interferon-γ (hIFN-γ) or/and tumor necrosis factor-α (hTNF-α) pretreatment of PAEC on their adhesiveness f or different PBMC subsets. The preferential sequence for PBMC subset binding to resting PAEC is Mo, NK and T cells, among which T cells show the slightest adherence; hTNF- a can act across the species, and augment Mo, NK and T cell adhesion ratios by 40%, 110% and 3 times, respectively. These results confirm at the cell level that host Mo and NK cells are major participants in the cellular xenograft rejection, thereby, providing a prerequisite for further studying the 展开更多
关键词 HUMAN peripheral blood MONONUCLEAR CELL (PBMC) PORCINE aortic endothelial CELL (paec) HUMAN tumor necrosis factor-α (hTNF-α) CELL ADHESION phenotypic analysis.
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Differential recognition of MHC class I molecules of xeno-/allo-endothelial cells by human NK cells 被引量:1
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作者 冯志民 张晓峰 +1 位作者 王宏芳 丰美福 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2000年第2期176-182,共7页
Using human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) and porcine aortic endothelial cells (PAEC) as target cells, human peripheral blood NK cells (PBNK) and NK92 cells as effector cells, the differential cytotoxicitie... Using human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) and porcine aortic endothelial cells (PAEC) as target cells, human peripheral blood NK cells (PBNK) and NK92 cells as effector cells, the differential cytotoxicities of NK cells to allo- and xeno-endothelial cells were studied. The influence of MHC class I molecules on the cytotoxicity of human NK cells was assayed using acid treatment, and blockades of MHC class I antigens, CD94 and KIR (NKB1). The results indicated that the killing of PAEC by the two kinds of NK cells is higher than that of HUVEC. After acid-treatment, the cytotoxicity of the two kinds of NK cells to PAEC and HUVEC is significantly enhanced, but the magnitude of the enhancement is different. The enhancement of NK killing to acid treated HUVEC is much greater than that to PAEC. Blockade of CD94 mAb did not alter the NK cytotoxicity, while blockade of NKB1 mAb enhanced the cytotoxicity of PBNK to HUVEC and PAEC by 95% and 29% respectively. The results above suggested that the differential recognition of MHC I molecules of xeno-endothelial cells by human NK cells could be the major reason for higher NK cytotoxicity to PAEC. KIR might be the primary molecule that transduced inhibitory signals when endothelial cells were injured by NK cells. 展开更多
关键词 human UMBILICAL vein ENDOTHELIAL CELLS (HUVEC) porcine aortic ENDOTHELIAL CELLS (paec) peripheral blood natural KILLER CELLS (PBNK) NK92 acid treatment MHC class I MOLECULES cytotoxicity.
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Genistein inhibits human TNF-α-induced porcine endothelial cell adhesiveness for human monocytes and natural killer cells
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作者 Xiaofeng Zhang Yan Gu +2 位作者 Zhimin Feng Liqin Ban Meifu Feng 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2002年第6期470-475,共6页
Cellular immune response is a major barrier to xenotransplantation. Human tumor necrosis factor-α (hTNF-α) possesses cross-species activity and directly amplifies the immune rejection via the upregulation of adhesio... Cellular immune response is a major barrier to xenotransplantation. Human tumor necrosis factor-α (hTNF-α) possesses cross-species activity and directly amplifies the immune rejection via the upregulation of adhesion molecules on porcine endothelium. We investigated the role of protein tyrosine phosphorylation in the induction of expression of E-selectin and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), and the augmentation of adhesion of human peripheral blood monocytes (PBMo) and natural killer cells (PBNK), after rhTNF-α-stimulation of porcine aortic endo-thelial cells (PAEC) in vitro. rhTNF-α-increased adhesiveness of PAEC for both PBMo and PBNK was dose-dependently reduced by pretreatment of PAEC with the selective protein tyrosine kinase (PTK) inhibitor genistein. The inhibitory effect occurred at the early time of PAEC activation triggered by rhTNF-α, and was completely reversible. PTK activity assay indicated that genistein also suppressed rhTNF-α stimulated activation of protein tyrosine 展开更多
关键词 GENISTEIN HUMAN tumor necrosis factor-α (hTNF-α) PORCINE aortic endothclial CELLS (paec) HUMAN PERIPHERAL BLOOD monocytes (PBMo) HUMAN PERIPHERAL BLOOD natural killer CELLS (PBNK) cell adhesion.
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