aMAP评分联合RAR及PIV构建慢性肝病患者肝细胞癌发生风险的预测模型

目的基于aMAP评分联合RAR及PIV构建并验证慢性肝病患者肝细胞癌(HCC)发生风险的预测模型。方法143例慢性肝病患者按照是否发生HCC分为HCC组32例及非HCC组111例,比较2组一般临床资料、aMAP评分及外周血指标水平。采用多因素Logistic回归分析住院慢性肝病患者发生HCC的影响因素,构建并验证列线图风险预测模型。结果与非HCC组比较,HCC组年龄大、男性比例高,总胆红素(TBIL)、红细胞分布宽度(RDW)、中性粒细胞计数(NEU)、单核细胞计数(MON)、aMAP评分、RDW与ALB比值(RAR)、泛免疫炎症值(PIV)水平高,白蛋白(ALB)、淋巴细胞计数(LYM)水平低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,较高aMAP评分、RAR、PIV是住院慢性肝病患者HCC风险的独立危险因素(P<0.05);据此构建的列线图风险预测模型受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)为0.823(95%CI:0.747~0.899),校准曲线显示预测值与实际观测值基本一致,Brier得分为0.125,决策曲线显示该模型具有明显的正向效益,Bootstrap法对预测模型进行内部验证的AUC为0.823(95%CI:0.820~0.825),提示模型具有良好的区分度。结论aMAP评分联合RAR及PIV构建的慢性肝病患者发生HCC的列线图风险预测模型预测性能良好,有助于指导个体化治疗及随访。

COX-2、RAR-β_2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及相互关系

目的研究环氧化酶-2(COX-2)、维甲酸受体β2(RAR-β2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)及周围正常黏膜组织中差异表达状况,探讨两者间相互关系及在ESCC中的作用。方法常规抽提33例食管癌及相应正常食管黏膜组织中总RNA,采用实时荧光定量PCR检测33例新鲜食管癌组织和正常黏膜组织中COX-2和RAR-β2基因的表达情况。结果与正常食管黏膜组织相比,食管癌组织中COX-2的表达明显上调,而RAR-β2的表达下调(P<0.05)。Ⅰ-Ⅱ级ESCC组织中RAR-β2mRNA的表达明显高于Ⅲ级ESCC组织(P<0.05);且RAR-β2mRNA的表达与患者是否喜好热烫饮食(T≥70℃)关系密切(P<0.05)。而COX-2 mRNA的表达与患者是否喜好腌制食物显著相关(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌与RAR-β2、COX-2的表达有密切相关性。

RAR-β_2基因启动子异常甲基化与散发性乳腺癌的关系

目的探讨RAR-β2基因(retinoic acid receptor β2 gene)在散发性乳腺癌中启动子异常甲基化状况,进而探讨在散发性乳腺癌早期诊断中的检测价值。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和实时荧光定量PCR法对62例散发性乳腺癌病人的癌组织,15例增生的乳腺组织,10例正常乳腺组织进行RAR-β2基因的异常甲基化的检测。结果散发性乳腺癌癌组织中50%(31/62)发生了RAR-β2基因甲基化,增生的乳腺组织标本中20%(3/15)发生了RAR-β2基因启动子甲基化,正常的乳腺组织中均未检测到RAR-β2基因的甲基化。散发性乳腺癌癌组织中甲基化率与年龄、绝经与否无相关性,与淋巴结转移和临床分期有相关性(P<0.05);散发性乳腺癌与增生的乳腺组织和正常的乳腺组织间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RAR基因甲基化可能参与了乳腺癌的发生发展过程,与乳腺癌的病理分期和预后评估等方面有关。

RARβ在宫颈癌及癌前病变中的表达调控和意义

目的:宫颈癌组织中的维甲酸受体β(retinoic acid receptor beta,RARβ)基因启动子区发生异常甲基化,一般提示其抑制基因的转录表达。本研究从mRNA和蛋白质水平观察宫颈癌发生与RARβ表达调控的关系和意义。方法:选择妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈鳞癌患者,收集新鲜组织标本37例及石蜡包埋组织126例,采用定量RT-PCR及免疫组织化学方法鉴定RARβmRNA及蛋白质表达水平。结果:1)与宫颈炎相比,RARB基因在CIN和宫颈癌组织中的mRNA表达水平明显下降,但是CIN与宫颈癌之间没有统计学差异(P>0.05)。2)RARβ蛋白在宫颈上皮细胞核正常表达,少数病例出现"部分缺失"(8%),但是随着CIN和宫颈癌发病进程,不仅发生"完全缺失",而且其缺失频率逐渐增高(38%和57%),与宫颈炎比较有显著差异(P<0.01)。结论:在宫颈癌及癌前病变组织中,RARβ转录水平表达下调及蛋白质水平表达出现缺失,可能是肿瘤发生的重要标志。本结果为进一步研究该基因异常甲基化相关的机制,并建立宫颈癌的生物标志物体系提供了客观依据。

淋巴结转移乳腺癌患者中RARβ基因甲基化的预后判断价值

目的探讨视黄醇受体(RAR)β基因的DNA甲基化在乳腺癌发生发展过程中的意义。方法采用特异性MSP方法,检测乳腺癌和正常乳腺组织中RARβ基因的DNA甲基化状态,并结合其临床病理特性和预后进行分析。结果 192例乳腺癌组织中RARβ基因甲基化者50例(26%),而在正常乳腺组织中无一例甲基化,甲基化率与患者的肿瘤组织学类型、分期和肿瘤大小有相关性(P<0.05);淋巴结转移、ER阴性及HER2过度表达的癌组织中RARβ基因甲基化率增高,但无统计学意义。RARβ基因甲基化的乳腺癌患者的生存率低(P=0.268),尤其是淋巴结转移的乳腺癌患者(P=0.040)。结论 RARβ基因甲基化在乳腺癌的发生、发展中起着重要作用,可能与乳腺癌的侵袭性密切相关,可作为判断淋巴结转移的乳腺癌预后的分子生物学指标。

组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性

目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组织化学和WesternBlot方法检测AcH3、RAR—B：和Involucrin的表达；分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达及宫颈病变程度的关系。结果：随着宫颈病变的进展，AcH3、RAR-β2和Involucrin的表达逐渐降低，甚至缺失，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达呈正相关（r=0．797，P〈0．05），AcH3和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0．5479（Ach3）,r=-0．585（RAR-β2），P〈0．05]。结论：组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达调控有关，并可能参与宫颈癌的发生。

RARα mRNA和RARβ mRNA在过量RA致神经管畸形发生中的表达

目的探讨过量RA对金黄地鼠胚胎神经管RARα和RARβ mRNA表达的影响。方法采用原位杂交及图像分析,半定量分析正常及RA致畸金黄地鼠胚胎神经管中RARα和RARβ mRNA表达水平的变化。结果过量RA可使RARα和RARβ mRNA在金黄地鼠神经管中的表达水平呈现短时下降,随后又大幅上升的变化。结论过量RA引起的RARα和RARβ mRNA表达水平的变化与RA致金黄地鼠神经管畸形相关。

基于RAR格式的文本水印冗余空间算法研究

随着数字出版形式的不断丰富、版权主体和发行渠道的不断变更,RAR类压缩文件由于工具易于获取,操作简单,压缩方法丰富等特征受到越来越多的关注和使用。为解决RAR类压缩文件的盗版侵权等问题,通过分析当前数字出版环境对于文本水印要求的变化,详细解析了RAR文件格式,采用遍历寻找冗余空间的方式对RAR格式中水印可嵌入空间进行了研究,提出了文件头部可选字节增项和无效块追加的嵌入方法,给出了算法实现和评价分析,通过实验验证了该方法的可行性。

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对肺癌SPC-A-1细胞RAR-β基因去甲基化及其表达的作用

目的观察5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肺腺癌SPC-A-1细胞视黄酸受体β(RAR-β)基因甲基化状态的影响,探讨不同浓度5-Aza-CdR对RAR-β基因表达缺陷的调控机制。方法将体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株分为4组,分别是A组(未加药)及B、C、D组(分别加入3、6、12μmol/L的5-Aza-CdR)。采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测4组细胞RAR-β基因甲基化状态的差异,RT-PCR法检测4组细胞RAR-βmRNA表达水平的差异,Western blot检测4组细胞RAR-β蛋白表达水平的差异,流式细胞仪技术检测各组细胞周期及细胞凋亡率的差异。结果 A组标本检测出RAR-β基因为甲基化状态,而B、C、D组均检测出RAR-β为去甲基化状态。肺腺癌SPC-A-1细胞RAR-βmRNA及RAR-β蛋白表达水平低下,经5-Aza-CdR处理后,其表达水平明显增强(P<0.01)。5-Aza-CdR处理后(B、C、D组)的细胞凋亡率均较A组明显提高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肺癌RAR-β基因因甲基化出现表达缺陷,5-Aza-CdR具有明显去甲基化作用,可诱导RAR-β基因重新激活表达,促进肺癌细胞凋亡及抑制癌细胞增殖,从而发挥抗癌作用。

AFP抑制肝癌细胞中RA-RAR信号通路的传递

目的探讨肝癌细胞系Hep G2和HLE中,AFP参与RA-RAR信号通路的作用方式及其意义。方法Western blotting检测这两种细胞中AFP与RAR的含量;ATRA处理细胞后,免疫荧光法检测细胞中RAR定位;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况;采用激光共聚焦显微镜观察AFP与RAR在细胞中的定位情况;免疫共沉淀验证AFP与RAR的相互作用。结果 Western blotting结果显示Hep G2细胞为AFP阳性而HLE为阴性;免疫荧光结果显示加入ATRA后,RAR发生核转位和核聚集现象;FCM结果显示ATRA能够引起这两种肝癌细胞凋亡增加;激光共聚焦显微镜结果显示AFP与RAR在胞浆中存在共定位现象;免疫共沉淀结果证实在Hep G2细胞中AFP与RAR存在相互作用,而HLE因缺失AFP而检测不到。结论 AFP通过抑制RA-RAR信号通路的传递从而参与调控肝癌的发生发展。

非小细胞肺癌BALF中RAR-β基因甲基化与p53突变检测及相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中RAR-β基因甲基化与p53基因突变检测的临床意义及二者的相关性。方法收集非小细胞肺癌患者(肺癌组)85例及良性疾病患者(良性疾病组)70例的BALF标本,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测BALF中的RAR-β基因甲基化,PCR结合DNA测序法检测p53基因突变。结果肺癌组BALF中RAR-β基因甲基化率及p53基因突变率分别为49.4%、36.5%,均显著高于良性疾病组(P<0.01);(Ⅰ+Ⅱ)期RAR-β基因甲基化率(32.5%)高于同期p53基因突变率(12.5%)(P<0.05);(Ⅲ+Ⅳ)期RAR-β基因甲基化率及p53基因突变率均显著高于(Ⅰ+Ⅱ)期(P<0.01);发生RAR-β基因甲基化的肺癌患者p53基因突变率更高(P<0.01);发生p53基因突变的肺癌患者RAR-β基因甲基化率更高(P<0.01)。结论检测非小细胞肺癌患者BALF中RAR-β基因甲基化与p53基因突变有助于肺癌的诊断。

急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因检测的临床意义探讨

目的探讨 PML-RARα融合基因检测在临床检查急性早幼粒细胞白血病(APL)治疗前后的意义。研究 PML-RARα融合基因含量与急性早幼粒细胞白血病(APL)病变进程的关系。方法运用 RT-PCR 技术检测急性早幼粒细胞白血病患者治疗前后骨髓内 PML-RARα融合基因含量。结果所有 51 例初诊为 APL 的患者均做 PML-RARα融合基因检测,其中阳性 41 例,阳性率为 80.4%。初诊为 APL 的 51 例患者治疗 18 个月后(进行随访),其中死亡 3 例,阳性 3 例,阳性率为 5.9%。结论 PML-RARα融合基因的检测对 APL 诊断具有重要价值。定期检测 PML-RARα基因可尽早发现分子学复发以及时治疗,并避免血液学复发。

COUP-TE和RAR β受体的表达影响癌细胞对视黄酸的敏感性

视黄酸(RA)通过其受体RARs和RXRs发挥作用。Northern blot显示,RARβ的表达介导RA对癌细胞的生长抑制作用。然而,其它的结果表明,RARβ的表达还不能完全驱动癌细胞对RA的应答,由此提示,癌细胞的RA敏感性除了受RARβ影响外,还受其它因子影响。COUP-TF则是其中的一个因子。凝胶阻抑测定和CAT测定表明,COUP-TF通过降低βRARE的基础转录活性来加强癌细胞的RA敏感性。结果证实,RARβ和COUP-TF受体的表达能够调节癌细胞对RA的敏感性。

乳腺癌患者外周血浆中RAR-β_2基因启动子异常甲基化分析

目的:探讨RAR-β2基因(retinoic ac id receptorβ2 gene)启动子在散发性乳腺癌患者血浆中异常甲基化状况。方法:用甲基化特异PCR(MSP)法和实时荧光定量PCR法对62例散发性乳腺癌患者血浆和15例良性乳腺增生患者血浆中的RAR-β2基因启动子异常甲基化状况进行检测。结果:散发性乳腺癌患者血清中37%(28/62)发生了RAR-β2基因启动子甲基化,良性乳腺增生患者中均未检测到RAR-β2基因的甲基化。RAR-β2基因启动子甲基化状态与淋巴结转移和临床分期有相关性(P<0.05)。结论:乳腺癌患者外周血浆中RAR-β2基因启动子异常甲基化是散发性乳腺癌发生的早期事件,有望成为乳腺癌早期诊断的指标。

他扎罗汀对培养角质形成细胞表达RAR和RXR mRNA的影响

目的了解他扎罗汀对对数生长期角质形成细胞表达RAR和RXR mRNA的影响,探讨他扎罗汀治疗银屑病的可能机制。方法用原位杂交法对他扎罗汀干预不同时间段培养的角质形成细胞进行RAR和RXR mRNA染色,然后对各实验组测定数据进行统计学分析。结果他扎罗汀能在24,48,72h三个时间段显著降低RAR和RXR mR-NA的表达。结论他扎罗汀在治疗银屑病过程中可能不仅仅是通过抑制角质形成细胞的增殖达到疗效。

PML-RAR α基因在早幼粒细胞性白血病发病中的作用研究

目的：通过封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因对ＮＢ４细胞生长分化作用的影响，探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因与ＡＰＬ发病的关系。方法：用反义核酸封闭ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的表达。ＮＢ４细胞的生长、分化及功能，通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及ＮＢＴ还原试验判定；细胞周期应用流式细胞仪分析。结果：ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的封闭能够抑制ＮＢ４细胞生长，促进其分化成熟，同时可降低Ｓ期细胞的百分比（由５６％降至３７％）。结论：急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）特征性的染色体易位ｔ（１５；１７）形成的ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因，是ＡＰＬ发病的分子基础。

儿童急性早幼粒细胞白血病PML-RAR_α融合基因连续检测的临床意义

目的 :研究儿童急性早幼粒细胞白血病 (APL)的临床治疗和PML RARα 融合基因连续检测的意义。 方法 :以全反式维A酸 (ATRA)单用或联合化疗进行诱导缓解 ,常规联合化疗巩固 ,常规化疗、小剂量化疗和维A酸 (Tretinoin)交替维持治疗的方案 ,治疗 10例儿童APL。应用逆转录聚合酶链扩增 (RT PCR)方法在病程的不同阶段连续检测PML RARα变化 ,作为鉴测微小残留白血病细胞的指标。 结果 :10例APL中完全缓解 (CR) 9例 ,CR率 90 %。 9例CR患儿中 4例在CR后 14～ 4 2个月复发 ;1例仍在继续治疗中 ;生存期达 34个月 ;4例在连续CR 4～ 5年后已停药 ,停止治疗时间为 18～ 96个月 ,生存期达 72～ 15 6个月。 10例患儿中 ,8例在病程中PML RARα 转为阴性 ,首次转阴时间为 6～ 4 2个月 ,1例持续阳性。4例复发患儿中 ,2例复发前持续阳性 ,2例为病程中由阴性转为阳性。 5例仍生存者 ,至少已 2次连续检查为阴性。 1例在病程中由阴性转为阳性、2例分别在持续CR 36和 4 2个月仍阳性的患儿 ,在治疗干预后均转阴 ,且长期生存。结论 :在连续CR期定期检测PML RARα 可早期发现分子复发 ,及时干预治疗可避免血液学复发。持续PML

颅咽管瘤中RARα及PPARβ/δ表达与RA作用的相关性

目的检测颅咽管瘤中RARα及PPARβ/δ的表达,分析其表达量与RA作用效果的相关性,探讨RA靶向治疗颅咽管瘤的分子机制.方法 RT-PCR法检测31例体外培养的颅咽管瘤细胞中PPARβ/δ、RARα的表达情况,MTT法测定RA对PPARβ/δ、RARα不同表达的颅咽管瘤细胞的抑制率,分析其表达情况与RA作用是否存在相关性.结果 RT-PCR结果显示,不同颅咽管瘤细胞中PPARβ/δ、RARα表达存在差别.31例原代培养的颅咽管瘤细胞按其核受体表达不同分为PPARβ/δ>RARα、RARα>>PPARβ/δ、RARα>PPARβ/δ3组;MTT结果显示在相同RA药物作用下RARα>PPARβ/δ组的抑制率明显高于RARα>PPARβ/δ组、PPARβ/δ>RARα和对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 PPARβ/δ、RARα的表达可作为评估RA治疗颅咽管瘤效果的有效指标.PPARβ/δ表达低的颅咽管瘤细胞对RA更敏感;靶向升高RARα或者靶向降低PPARβ/δ的表达都有益于颅咽管瘤的治疗.

RaR决策:一种新的投资决策方法

在VaR(风险价值)的基础上,提出了RaR(风险收益率)的概念,通过分析正态分布和极值分布情况下的RaR计算结果,得出了RaR与期望收益及风险之间存在一种线性关系的结论.基于此,提出了一种新的投资决策方法,发现这种方法可以替代传统的效用函数决策法来进行投资决策.最后,利用这种新方法对投资组合的选择为例,说明了这种方法的可行性.

RAR反应剂开发与RAR橡胶沥青混合料应用研究

从改性机理、配方优选、胶结料特性及混合料性能验证等方面对RAR反应剂进行系统研究,并通过铺筑试验路验证了RAR反应剂的性能。这种反应剂可以通过化学交联的方式有效改善胶粉沥青的性能,用RAR反应剂制作橡胶沥青混合料施工工艺简单易行,具有重要的工程推广意义。