IFN-β通过STAT1诱导SARI表达抑制AML细胞增殖并促进凋亡

目的:探讨IFN-β诱导SARI表达对急性粒细胞性白血病(AML)细胞增殖、凋亡的作用,并筛选其潜在的调控分子。方法:qPCR、Western blot筛选SARI低表达的AML细胞作为实验细胞株;不同浓度IFN-β干预AML细胞,于不同时间采用qPCR、Western blot检测SARI表达,选取IFN-β作用的适当浓度和时间;采用RNA-Seq转录组测序及KEGG富集分析初步筛选IFN-β诱导AML细胞SARI表达的潜在调控分子;通过相应分子抑制剂联合IFN-β处理AML细胞,MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡;明确该分子参与IFN-β诱导SARI表达对AML细胞增殖及凋亡的作用。结果:HL60和NB4细胞SARI表达相对较低,选为实验细胞株;1 ng/ml IFN-β作用12 h后AML细胞SARI表达升高且细胞增殖被抑制,凋亡增多;筛选STAT1为IFN-β诱导SARI表达的潜在调控分子;抑制STAT1后,IFN-β对AML细胞SARI表达、增殖抑制、凋亡促进的作用被明显逆转。结论:IFN-β可通过STAT1诱导AML细胞SARI表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

SARI及PI3K/AKT通路分子在AML患者骨髓中的表达及其临床意义

目的:探讨SARI及PI3K/AKT通路分子在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者骨髓中的表达情况及其临床意义。方法:收集100例AML患者的骨髓标本,并以30例造血干细胞移植健康供者作为正常对照。分别采用qPCR和Western blot检测SARI及PI3K/AKT通路分子的mRNA及蛋白表达。结果:AML患者骨髓中SARI mRNA的表达低于正常对照(P<0.05),且初诊和复发组中SARI mRNA和蛋白表达量均低于缓解组(P<0.05)。ROC曲线分析显示当SARI mRNA的截断值为0.191时,诊断AML的AUC为0.705,灵敏度为70.0%,特异度为66.2%;SARI mRNA高表达组AML初诊患者的缓解率高于未缓解率(P<0.05),配对t检验分析显示同一AML患者其初诊阶段SARI mRNA表达明显低于缓解阶段(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示SARI mRNA高表达组AML患者总生存时间长于低表达组(P<0.05)。初诊和复发组中PI3K、AKT、mTOR、4EBP1 mRNA表达均高于缓解组(P<0.05);除p-AKT外,初诊和复发组中上述分子及对应的磷酸化分子p-PI3K、p-mTOR、p-4EBP1蛋白表达均明显高于缓解组(P<0.05),且均与SARI蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论:SARI在AML骨髓中异常低表达,与患者疗效、预后密切相关,其机制涉及PI3K/AKT通路的激活。SARI可作为AML诊断、疗效与预后评估的新指标。

基于SARIMA-LSTM组合模型的油气集输系统能耗预测

油气集输是油田开发生产过程的重要阶段,准确预测油气集输系统能耗能够为生产调度和能源管控提供支持。为提高油气集输系统能耗预测的准确性,针对其线性和非线性特征,综合考虑数理统计和机器学习预测方法的优缺点,提出一种基于季节性差分自回归积分滑动平均(SARIMA)和长短期记忆(LSTM)神经网络的组合预测模型。根据S油田M环状掺水油气集输系统6年的运行数据,设计组合模型的网络结构,训练组合模型的网络参数。研究结果表明:与传统的SARIMA模型和LSTM神经网络相比,组合模型对三个能耗指标的预测准确性显著提高,可为企业调整生产运行方案和优化能源管控方案提供指导和数据支持。

苏州地区5岁以下严重急性呼吸道感染(SARI)住院患儿的病毒病原学和临床特征分析

目的了解苏州地区5岁以下严重急性呼吸道感染(severe acute respiratory infection,SARI)住院患儿的病毒病原学构成、季节分布和临床特征,为苏州地区SARI病例的临床诊断治疗及防控提供线索和依据。方法对2011年3月至2012年2月期间在苏州大学附属儿童医院内科急诊病房及呼吸科病房住院治疗的5岁以下SARI病例采集鼻咽部分泌物进行实验室检测,同时收集患儿的既往病史及临床特征等相关信息。结果共纳入SARI病例746例,其中474例采集了鼻咽部分泌物。病毒阳性检出率为46.0%,其中流感病毒A型2.1%、B型11.0%、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)26.6%、腺病毒3.2%、副流感病毒Ⅰ型2.7%、Ⅲ型4.0%,未检测到副流感Ⅱ型病毒。RSV全年均有流行,流感A、B型病毒则主要在冬、春季流行。男性患儿RSV阳性率高于女性患儿(P<0.05);流感病毒、RSV、腺病毒、副流感病毒在不同年龄段SARI患儿的阳性率差异皆有统计学意义(P<0.05)。病毒检测阳性患儿咳嗽、喘息及肺炎的发生率显著高于阴性患儿(P<0.05);RSV及副流感病毒在肺炎患儿中的检出率明显高于其他诊断(P<0.05)。纳入研究的SARI患儿平均住院天数7.38天,中位数为7天。SARI患儿在病程中接受糖皮质激素治疗与住院时间密切相关。结论苏州地区5岁以下SARI住院患儿病毒检出率最高的是RSV和流感病毒,病毒感染可能是加重SARI病例临床症状的原因之一;不同病毒感染所致疾病特征有所差异,流感病毒以上呼吸道感染和肺炎为主,RSV以毛细支气管肺炎为主。

BATF2/SARI通过抑制p53依赖的NF-κB转录活性诱导肿瘤细胞凋亡

BATF2/SARI是一种新发现的转录因子,具有与BATF和BATF3类似的碱性亮氨酸拉链结构,可抑制AP-1转录因子家族(AP-1 transcription factors)活性,从而发挥抑癌作用.但目前关于BATF2表达调节与功能尚不十分清楚.本研究证明,BATF2通过抑制p53相关的NF-κB活性诱导细胞凋亡.实时定量PCR检测mRNA揭示,BATF2/SARI在p53-野生型的A549、HeLa细胞高水平表达,但在p53-缺失型的H1299细胞表达较低.基因转染结合MTT法、TUNEL法显示,过表达BATF2可诱导凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;这种抑制效应与细胞p53表达水平相关.采用含NF-κB或AP-1结合位点的(人工合成)启动子驱动的荧光素酶报告基因活性分析发现,过表达BATF2既可抑制AP-1,又可抑制NF-κB转录活性;抑制NF-κB活性与细胞p53状态有关.RNA干扰敲减A549、HeLa细胞的p53表达可消除过表达外源BATF2引起的NF-κB活性下降.本研究结果提示,BATF2通过抑制NF-κB及AP-1转录活性诱导凋亡,从而抑制细胞增殖;BATF2对NF-κB活性的抑制作用依赖p53.因此,BATF2作为一种抑癌基因产物,其作用机制可能比当前的认识和预期更为复杂.

BCR-ABL抑制剂STI571对慢性髓系白血病细胞株K562中SARI基因表达影响的研究

为了探讨抑癌基因SARI(suppressor of AP-1regu lated by IFN)在慢性髓系白血病(CML)中表达调控可能的分子机制,收集了46名CML患者和40名健康志愿者外周血样品,使用实时定量PCR技术检测2组人群中SARI基因的相对表达水平。在体外以CML细胞株K562为研究模型,使用BCR-ABL抑制剂STI571(im atinib)处理K562细胞,用实时定量PCR技术检测SARI基因的相对表达水平。结果表明,CML患者外周血中SARImRNA相对表达量明显低于健康志愿者,2组间具有明显的统计学差异(p<0.001)。使用STI571(2.5μm o l/L)处理K562细胞24小时后SARImRNA相对表达量明显高于未处理K562细胞,两组间差异具有显著性(p<0.001)。结论:CML患者外周血SARImRNA表达水平降低可能与该疾病的发生发展过程相关联,而且SARI基因表达下调与BCR-ABL抑制作用有关。本研究为CML患者基因治疗的研究提供了新线索。

α/β干扰素通过上调SARI表达抑制淋巴瘤细胞的增殖

目的初步探讨α/β干扰素抑制淋巴瘤细胞增殖的分子机制。方法用IFN-α/β处理淋巴瘤细胞(Namalwa、JeKo-1)和白血病细胞(Jurkat、THP-1)24 h,CCK-8法检测IFN-α/β对上述细胞的增殖抑制效果;RT-PCR、real-time PCR、Western blot检测其SARI mRNA和蛋白水平的变化;对SARI基因启动子区的转录因子结合位点进行生物信息学预测。结果 IFN-α和IFN-β均可有效杀伤Namalwa和JeKo-1淋巴瘤细胞(P<0.05),且均能显著诱导淋巴瘤细胞SARI mRNA和蛋白的表达(P<0.05),但两种干扰素对Jurkat和THP-1白血病细胞的存活及SARI的表达均无显著影响(P>0.05);生物信息学分析显示,SARI启动子区含有转录因子STAT的结合位点。结论上调SARI表达可能是IFN-α/β抑制淋巴瘤细胞增殖的机制之一,而SARI的上调可能是由STAT介导的。

SARI基因促进急性髓性白血病细胞凋亡机制的探讨

目的:通过慢病毒载体过表达SARI(Suppressor of AP-1,regulated by IFN)基因,探讨SARI基因促进急性髓性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡的分子机制。方法:构建SARI基因过表达的慢病毒载体,感染AML细胞HL-60和NB4,应用实时荧光定量PCR和Western blot对感染后细胞进行过表达的鉴定。两株AML细胞均设空白对照组(CON组)、空载体对照组(NC组)及SARI组,应用Western blot检测SARI过表达后两株AML细胞组凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xl、Bax和凋亡途径相关蛋白CytoC、Caspase8、Caspase9、Caspase3、Actived-Caspase3、PARP的表达变化。结果:SARI组细胞的SARI mRNA和蛋白表达水平均显著高于CON组和NC组(P<0.05),表明SARI过表达成功。SARI过表达的HL-60和NB4细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表达均下调,促凋亡蛋白Bax表达上调。CytoC表达增加,Caspase8、Caspase9、Caspase3剪切激活,Actived-Caspase3上调,PARP下调,PARP剪切体上调。结论:SARI基因促进AML细胞凋亡可能是通过激活外源性凋亡途径及与外源性凋亡途径交叉的内源性凋亡途径。

SARI过表达对CBFL细胞凋亡的影响及其机制

目的:探讨SARI基因过表达对核结合因子白血病(CBFL)细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:通过17号外显子测序验证CBFL细胞模型Kasumi-1细胞负载c-KIT N822K突变。构建SARI基因过表达慢病毒载体,并转染Kasuimi-1细胞。采用荧光定量PCR和Western blot鉴定细胞转染后SARI基因过表达效果。设置空白对照(CON)、空载体对照(NC)和SARI过表达(OE)3组。MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、Cyto C、Caspase 9、Caspase 3、cleaved-Caspase 3、PARP、cleavedPARP,以及PI3K/Akt通路蛋白PI3K(p85)、p-PI3K(p85)、Akt、p-Akt的表达变化。结果:Kasumi-1细胞具有c-KIT N822K突变。成功构建稳定过表达SARI基因的Kasumi-1细胞。与NC组细胞相比,OE组细胞增殖减缓,凋亡增加;抗凋亡蛋白BCL-2表达降低,促凋亡蛋白BAX表达增高;出现Cyto C蛋白的表达;Caspase 9、Caspase 3表达降低,cleaved-Caspase3表达增高;PARP表达降低,活性剪切体cleaved-PARP表达增高,PI3K/Akt通路蛋白p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt磷酸化水平下调(P<0.05)。结论:SARI基因过表达可通过线粒体途径诱导CBFL细胞凋亡,机制可能与PI3K/Akt信号通路失活有关。

SARI算法安全性分析和改进方法

SARI(Self-authentication and recovery image watermarking system)算法是LIN和CHANG小组提出的,可以承受JPEG压缩的多媒体内容认证技术,它的安全性取决于分组函数和阀值的选定,简单的线性函数和单一的阀值必然导致其破解系统的复杂度较低,理论分析和仿真实验结果说明这种模型的弱点.将加密技术与分组函数配合使用并采用编码技术可以有效地提高破解系统的复杂度,增加系统的安全性.

Zebularine对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖和SARI表达的影响

目的:探讨Zebularine对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖和SARI表达的影响。方法:选用MDA-MB-231细胞株,分别通过不同浓度的Zebularine作用细胞株24 h后收集细胞,运用MTT法测定Zebularine对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞的增殖;通过Western Blot检测Zebularine对乳腺癌细胞株SARI的表达。结果:随着药物浓度的增加,Zebularine能够明显抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖(P<0.05),Zebularine能够显著提高乳腺癌细胞株MDA-MB-231 SARI蛋白的表达(P<0.05)。结论:Zebularine通过抑制乳腺癌细胞增殖,促进SARI蛋白的表达,从而发挥肿瘤抑制作用。

SARI基因真核表达载体的构建及稳定转染HeLa细胞系的建立

目的构建人SARI基因真核表达载体,并建立稳定转染的HeLa细胞系。方法采用RT-PCR技术从正常人外周血单个核细胞cDNA文库中扩增SARI基因序列,连接插入至pCMV-N-Flag真核表达载体,并对重组质粒进行酶切及测序鉴定;阳离子聚合物介导重组质粒转染HeLa细胞后,用G418抗生素筛选稳定转染的细胞系。间接免疫荧光检测Flag-SARI融合蛋白在HeLa细胞系中的表达定位。RT-PCR及Western blot检测SARI mRNA及蛋白的表达变化。结果双酶切和DNA测序表明pCMV-Flag-SARI真核表达质粒构建成功。经G418筛选后,RT-PCR和Western blot表明,转染重组质粒的HeLa细胞系中SARI mRNA及蛋白的表达明显升高。间接免疫荧光结果显示,Flag-SARI融合蛋白在HeLa细胞系的胞质和胞核中均有表达,且胞质荧光信号强于胞核。结论成功构建pCMV-Flag-SARI真核表达载体,表达的FlagSARI蛋白主要定位于HeLa细胞系的胞质中。

5-氮杂胞苷逆转SARI基因甲基化对人乳腺癌细胞生长和侵袭的影响

目的:观察5-氮杂胞苷(5-Aza)逆转SARI(suppressor of activator protein-1 regulated by interferon)基因甲基化对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长和侵袭的影响。方法:用5和10μmol/L 5-Aza处理MDA-MB-231细胞72 h,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测SARI基因启动子的甲基化状态,RT-PCR的方法检测SARI基因mRNA的表达,Western blot的方法检测SARI蛋白的表达,MTT实验和集落形成实验检测MDA-MB-231细胞的生长状态,Transwell侵袭实验检测MDA-MB-231细胞的侵袭能力。结果:MSP实验检测观察到,经5-Aza处理后,MDA-MB-231细胞中SARI基因启动子甲基化水平显著下降(P<0.01);RT-PCR和Western blot结果显示,经5-Aza处理后,MDA-MB-231细胞中SARI表达显著升高(P<0.05)。MTT和集落形成实验表明,经5-Aza处理后,MDA-MB-231细胞的增殖能力显著下降(P<0.05)。Transwell侵袭实验表明,经5-Aza处理后,MDA-MB-231细胞的侵袭能力显著减弱(P<0.05)。结论:5-Aza能够逆转MDA-MB-231细胞中SARI基因启动子甲基化状态,上调SARI表达水平,恢复其抑制肿瘤细胞生长和侵袭的能力。

AAV介导的BATF2/SARI过表达抑制肝癌细胞HepG2增殖

目的探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的BATF2/SARI过表达对肝癌细胞HepG2细胞活力的影响及其分子机制。方法通过分子克隆技术构建AAV介导的BATF2/SARI过表达载体,用包装纯化后的AAV-BATF2感染HepG2细胞,MTT检测其对细胞活力的作用,荧光素酶分析其对NFκB转录活性的影响。结果重组AAV-BATF2载体构建成功,AAV-BATF2感染的HepG2细胞生长活力受到明显抑制,NFκB转录活性明显下调。结论重组AAV-BATF2病毒感染人肝癌细胞HepG2可抑制肿瘤细胞增殖,其对NFκB转录活性的抑制可能是其发挥作用的机制之一。

杂交狼尾草、印度豇豆喂草鱼试验研究

经过60 d喂养,添加杂交狼尾草组的草鱼每尾平均日增重为(15.6l±0.14)g,添加印度豇豆组的草鱼每尾平均日增重为(15.03 g±0.34 g).均比全配合饲料组(9.66 g±0.26 g)高,经方差分析差异极显著(P< 0.01)。说明添加杂交狼尾草、印度豇豆对草鱼生长增重明显。另外,投喂杂交狼尾草、印度豇豆明显提高草鱼背部肌肉氨基酸水平,增加了鱼肉中人体必需氨基酸、呈味氨基酸的含量。

2016年至2018年云南省住院严重急性呼吸道感染病例监测结果分析

目的探讨云南省住院严重急性呼吸道感染(SARI)病例流行病学、临床和流感病原学变化特征。方法对2016年1月至2018年12月云南省哨点医院监测到的SARI病例进行流行病学和临床特征调查,并采集咽拭子标本开展流感等呼吸道病毒检测。结果2016年1月至2018年12月,云南省哨点医院SARI病例占同期住院病例的1.20%(717/59917)。检出流感核酸阳性率为4.60%(33/717)。随机抽取的流感阴性SARI病例中,检出其他呼吸道病毒感染阳性率为23.81%(30/126),主要包括呼吸道合胞病毒、副流感病毒和偏肺病毒等。SARI病例主要来源于呼吸内科和儿内科,以青壮年和婴幼儿为主。流感确诊病例以青壮年儿童和老年人为主。并发症主要包括肺炎、呼吸衰竭和急性呼吸窘迫综合征等。SARI病例和确诊流感病例均主要集中于冬春季。SARI%和ILI%变化趋势相似。结论SARI监测作为流感样病例(ILI)监测的有效补充,建议加强呼吸道传染病防控知识的健康宣教,对重点人群推广接种流感疫苗,开展呼吸道多病原检测。

具有高效过滤和恒定泄气量功能的无创正压通气面罩研制及功能测试

目的研发一种具有高效过滤和恒定泄气量功能(EFCL)的无创正压通气(NPPV)面罩,并探讨其有效性。方法进行EFCL面罩发明设计,并完成其产品制造。将20例健康人作为研究对象,根据不同面罩类型分为两组:试验组采用EFCL面罩;对照组采用传统NPPV面罩和侧孔型呼气阀的组合。每个研究对象均采用试验组和对照组的前后交叉研究。在标准化试验条件及呼气气道正压(EPAP)为5、10 cm H_(2)O条件下,监测两组面罩内呼气末二氧化碳分压(Pet CO_(2));吸气气道正压(IPAP)从5 cm H_(2)O逐步递增至10、15、20 cm H_(2)O时,监测两组各节点呼气阀泄气量;评价两组面罩操作性和舒适性。结果在相同EPAP水平(5 cm H_(2)O或10cm H_(2)O),试验组面罩内Pet CO_(2)均显著低于对照组(均P<0.05);IPAP从5 cm H_(2)O逐步递增至20 cm H_(2)O时,试验组呼气阀泄气量维持相对恒定,对照组呼气阀泄气量则随IPAP压力增高而增加。两组面罩的操作性、舒适性均具有较高的满意率和一致性。结论EFCL面罩具有高效过滤和恒定泄气量的功能,为降低NPPV面罩应用中的交叉感染风险提供新方法。

板蓝根生物碱抗猪细小病病毒的作用

探讨板蓝根水溶性生物碱、脂溶性生物碱和板蓝根混合生物碱对猪细小病毒的体外抑制作用。采用醇提法从板蓝根中提取了水溶性生物碱和脂溶性生物碱,将脂溶性生物碱和水溶性生物碱按照1:10的比例混合而配置成混合生物碱,并测定3种生物碱对PK-15细胞的最大无毒浓度(TD0),应用先加药后接种病毒、先接种病毒后加药、病毒和药物体外作用2h后再同时加入细胞单层3种加药方式测定了生物碱的体外抗PPV效果。结果表明,板蓝根水溶性生物碱的TD0为62.5μg/mL,板蓝根脂溶性生物碱的TD0为50μg/mL,板蓝根混合生物碱的TD0为65μg/mL。板蓝根水溶性生物碱对PPV的最小阻断浓度、最小抑制浓度和直接杀灭浓度分别为7.81、15.62、7.81μg/mL。板蓝根脂溶性生物碱对PPV的最小阻断浓度、最小抑制浓度和直接杀灭浓度分别为0.78、12.5、0.78μg/mL。板蓝根混合生物碱对PPV的最小阻断浓度、最小抑制浓度和直接杀灭浓度分别为7.81、12.5、0.78μg/mL。板蓝根脂溶性生物碱和板蓝根混合生物碱的抗猪细小病毒作用相同,但是板蓝根混合生物碱和板蓝根脂溶性生物碱的抗病毒作用比板蓝根水溶性生物碱的抗猪细小病毒要好。

山核桃采摘技术与装备研究现状

山核桃(Carya cathayensis Sary.)具有很高的营养价值和保健作用。研究和开发山核桃采摘装备应结合其生物特性和生长环境,满足安全性、经济性和实用性等要求。介绍了国内外林果采摘装备的研究现状,分析了采摘装备中各关键技术的性能特点,并对山核桃采摘新技术进行了展望。山核桃采摘装备的研制和推广,可有效降低果农劳动强度,提高劳动效率。

豆科牧草印度豇豆、印尼大绿豆在福州北峰生长性状及产能估算

在福州北峰进行了2年的印度豇豆、印尼大绿豆生长性状观察与测定，并对这两种牧草的营养成分、产能情况进行分析和估算。结果表明，印尼大绿豆全年产鲜草量为65800kg·hm^-2，印度豇豆全年产鲜草量为54700kg·hm^-2；印度豇豆株高明显高于同期生长的印尼大绿豆，但其平均单位高度的生物量却低于印尼大绿豆。印度豇豆的粗蛋白、粗脂肪和可溶性碳水化合物分别为19．37％、3．56％和19．25％，均高于印尼大绿豆的18．10％、3．45％和18．87％，而其纤维素、木质素（34．02％和18．47％）却低于印尼大绿豆（35．32％、18．68％）。种植1hm^2印度豇豆和印尼大绿豆每年可分别获得60．77×10^6kJ和94．72×10^6kJ热能值；扣除人工辅助能的投入后，在福州北峰山地种植豆科牧草的太阳能利用率为0．271％～0．412％。