免疫固定电泳及血清蛋白电泳检测相关的临床资料分析

目的对2022~2023年8721例免疫固定电泳(IFE)检测的相关临床资料进行分析,为多种疾病的诊断提供参考依据。方法通过Sebia Hydrasys2电泳仪检测我院2022年1月至2023年7月就诊的8721例患者的免疫固定电泳,并对其相关临床资料进行统计分析。结果8721例免疫固定电泳结果中,阳性例数为2135(24.48%),阴性例数为6586(75.52%),阳性结果中以IgG-κ型占比最高(30.07%)。送检阳性率最高的前5位科室IFE主要型别存在差异,不同疾病类型IFE主要型别也存在差异。951例IFE阳性患者检测了血清蛋白电泳(SPEP),M蛋白在不同区带IFE主要类型有区别。SPEPγ区带M蛋白不同类型与TP含量相关。尿轻链κ的含量与不同疾病IFE结果无明显相关性,尿轻链λ含量与MM及肾功能不全患者IFE结果有关,而与其他疾病无关。血轻链κ及λ在IFE阳性患者中的表达量均显著高于阴性患者。结论不同科室、不同疾病IFE主要型别存在差异,SPEPγ区带M蛋白类型与TP含量有关,且尿轻链及血轻链与IFE结果相关。这些统计结果可为临床上相关疾病的诊断提供参考依据。

高重现毛细管电泳的研究进展

毛细管电泳(CE)因具有微量、快速、高效、分离模式丰富等特点得以快速发展并逐渐走向成熟,但在其推广应用过程中一直伴随着出峰稳定性或重现性不佳的问题。CE长期采用信号强度对迁移时间作图的测量模式,但迁移时间并非自变量,受诸多直接和间接因素的影响,故很难测得稳定或精密的电泳谱图。为解决此类问题,国内外很早就开展了不同层次的研究,出现了至少三类解决策略:一是设法控制和稳定电泳特别是影响电渗的条件,以提高出峰的重复性;二是设法调整电泳峰参数,主要是利用内标来校正出峰位置,以提高出峰的重现性,如作时间比例谱、校正时间谱、有效淌度谱、校正淌度谱等;三是寻找建立高重现CE(HRCE)实时测量的新理论、新原理、新方法,从根本上彻底解决问题,如本团队提出的加权淌度谱、迁移电量谱、电密度谱、偏摩尔电密度谱及其比例谱等,这些新式CE方法在适当范围内可以抵抗CE条件或参数的波动,给出高重现的电泳谱图。本综述旨在总结构建HRCE的理论表述和研究进展,阐明影响CE重现性的一些关键因素,核心是电泳峰的表述方式。综述简要归纳分析了CE发展以来文献中对电泳峰表述方式的研究,但不直接涉及和讨论通过仪器改进、实用方法相关的参数的优化、改善等提升CE重复性或重现性的研究及其进展。

多重PCR毛细管电泳细菌快速鉴定方法的建立和临床应用研究

目的针对引起人类感染的常见病原菌建立一种基于多重PCR毛细管电泳技术的快速细菌鉴定方法,评估其临床应用价值。方法建立23种常见病原菌的多重PCR毛细管电泳检测体系。收集150例临床微生物检测标本,分别用多重PCR毛细管电泳法(以下简称多重PCR法)、培养法进行检测。对两种方法的检测结果进行比较,评价多重PCR法的检测效能。结果150例标本中多重PCR法检出15种病原菌、培养法检出14种病原菌。多重PCR法检测阳性率为73.3%,培养法为70.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。多重PCR法对肺炎链球菌的检出率为16.0%,培养法为6.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。多重PCR法对混合菌标本的检出率为15.3%,培养法未检出混合菌标本。多重PCR法与培养法检测结果的符合率为79.3%。多重PCR法检测时间为3~6 h,培养法为2~4 d。结论与培养法比较,多重PCR法具有较高的时效性,对肺炎链球菌及混合菌标本具有较高的检出率,可满足临床标本病原微生物快速初筛的需求。

免疫固定电泳检测室内质量控制样品的研制和评价

目的 制备适用于琼脂糖凝胶免疫固定电泳(IFE)检测的室内质量控制样品,并对其均匀性、稳定性、适用性进行评价。方法 依据实验室内部研制质量控制样品相关指南要求,基于临床样本,自制琼脂糖凝胶IFE检测阴性、弱阳性、阳性质控品,并对其进行均匀性、稳定性和适用性评价。结果 3个浓度水平质控品的均匀性良好。质控品开瓶后,2~8℃冷藏保存4个月,检测结果一致性较好;不启封-40℃冰箱冻存5年,检测结果一致性较好;同品牌其他系列检测系统和不同品牌检测系统检测结果一致性也较好。结论 制备的琼脂糖凝胶IFE检测室内质量质控样品具有良好的均匀性、稳定性、适用性,可满足临床实验室质量控制要求。

血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳方法的优化

乙酸纤维素薄膜电泳是生物化学与分子生物学实验常规项目之一,临床上广泛应用于血清蛋白、糖蛋白及核酸等生物大分子的分离与检测。该实验受环境和人为因素影响较多,初次操作往往难以取得理想的实验结果,更换乙酸纤维素薄膜厂家后,原来的实验条件分离血清蛋白存在蛋白条带聚集、分不开现象。缓冲液离子浓度和成分是影响乙酸纤维素电泳的最关键因素,采用pH 8.6,离子强度0.025 M/L、0.075 M/L的巴比妥缓冲液;pH 8.6,离子强度0.05 M/L、0.08 M/L的硼酸缓冲液,用4种缓冲液对新膜进行筛选,并对电泳时长及上样进行优化。结果表明,用pH 8.6、离子强度为0.08 M/L硼酸缓冲液,电压100 V,电泳时长50 min,分离兔血清蛋白实验结果比较理想,能满足实验教学及临床检验要求。

血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳综合实验设计

血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验是生物化学实验课程中的经典实验,但因其操作单一、等待时间过长,学生的收获感不强,有必要进行综合设计。把上课时间分为三个时段,在各个时段设计多种学习活动:串讲原理、做练习题使相关知识融会贯通;阅读文献,提出疑问;设置试误样品组、做相关实验,启发学生顿悟。通过这些学习活动,学生不仅学会了电泳技术的基本操作,还深刻理解了实验原理,强化了勇于探索的科学精神,体会了顿悟的快乐。

基于条件优化探索对流免疫电泳技术的实验教学设计

为了提高对流免疫电泳实验的成功率和缩短电泳时间,本实验以BSA和自制备的兔抗BSA抗血清作为实验材料,通过优化和改变电泳介质、电泳缓冲液等条件,观察比较抗原-抗体沉淀线形成的位置、形状情况来探索符合实验教学要求的过程方案。结果表明,在100 V电压下,采用TAE作为缓冲液、1.0%~1.2%的琼脂凝胶作为电泳介质时,电泳15~20分钟内可形成白色、清晰可见的抗原-抗体沉淀线,实验效果最佳。

工艺条件对汽车电泳涂装的影响及缺陷分析

介绍了汽车电泳涂装的基本原理,通过试验方法分析了工艺条件参数对电泳涂装质量的影响及常见缺陷产生原因。

SSR分子标记两种电泳方法在水稻品种上应用的比较

为了研究聚丙烯酰胺电泳和毛细管电泳在水稻分子检测中的应用,以水稻品种为材料,分别使用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测和毛细管电泳检测,并对2种电泳进行比较分析。结果表明,聚丙烯酰胺凝胶电泳对少量样本检测和引物筛选时更经济适用,毛细管电泳检测结果适用于指纹图谱和高通量材料的检测分析,试验中可以根据不同要求选择不同的电泳方法。

融入探究和思政特色的新胶体电泳实验

本案例以解决传统Fe(OH)_(3)胶体电泳实验中存在的胶体废液浪费、缺乏探究性以及思政育人难融入等局限为出发点,通过发展胶溶法、引入表面带不同电荷AgI胶体制备及其带电性质自主判断环节,守正创新,赋予该实验项目以资源节约、绿色环保、富有探究性等特色。尤其重要的是,本案例通过综合采用任务驱动自主学习、翻转课堂、研讨启发等多种教学模式,将经典基础物理化学实验与提高我国数量巨大但来之不易的钢铁资源的循环利用率和改变学生对胶体带电性质的固有认识有机结合起来,在潜移默化中弘扬/培育了学生“绿色”化学理念、可持续发展责任担当、科学辩证思维素养以及创新精神等。本案例已初步推广应用于本校的胶体电泳实验教学中,教学反响热烈,达到了专业知识、技能传授与课程思政育人相济相长的教学效果;为提升传统实验的专业育人和思政育人效果提供有益借鉴。

乙酸纤维素薄膜电泳不同点样法的实验条件优化

针对目前“乙酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白”实验教学中存在的问题,本试验以牛血清为材料,通过比较不同点样法、缓冲液、电压和电泳时间,以期得到便于操作、清晰可辨图谱的操作条件。结果表明:毛细管和钢笔点样的图谱虽然优于盖玻片,但操作不方便;在硼酸盐缓冲液中电泳,图谱最清晰且重复利用次数多;低压(90 V)时蛋白条带分不开,而高压(160 V)电泳时条带发生弥散影响也会电泳分辨率;适宜电压条件下,需电泳80 min以上才可将牛血清中各条蛋白条带分离开来。因而认为乙酸纤维薄膜电泳法分离牛血清白蛋白的最佳和最方便操作条件为:以盖玻片进行点样,在硼酸缓冲液中稳压120 V电泳100 min。

全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用及准确性分析

目的 探讨地中海贫血筛查中全自动血红蛋白电泳的应用及准确性。方法 选取2023年1—12月于天水市第一人民医院就诊的2 000名育龄人群为研究对象,所有研究对象均接受全自动血红蛋白电泳检查,对所有疑似地中海贫血患者进行基因检测,判断全自动血红蛋白电泳筛查准确性。结果 经全自动血红蛋白电泳筛查,显示疑似α-地中海贫血患者515例、疑似β-地中海贫血患者385例。对上述900例全自动血红蛋白电泳呈阳性患者采用基因检测,确诊α-地中海贫血患者420例、β-地中海贫血患者320例。全自动血红蛋白电泳筛查中α-地中海贫血、β-地中海贫血准确率分别为81.56%、83.12%。α-地中海贫血患者血红蛋白(hemoglobin,Hb)、平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)高于β-地中海贫血患者(P<0.05)。结论 地中海贫血筛查中,利用全自动血红蛋白电泳与常规血液分析,成本效益较高且简便易行,能有效区分疑似α-地中海贫血患者、疑似β-地中海贫血患者,在此基础上辅以基因检测可以提升地中海贫血疾病诊断的准确性。

免疫球蛋白测定和免疫电泳在多发性骨髓瘤的诊断中的临床应用

目的探讨免疫球蛋白定量检测、免疫蛋白电泳和免疫固定电泳在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的应用与价值。方法收集在2020年6月-2021年6月期间就诊于本院确诊为MM患者58例血清,检测血清免疫球蛋白定量[IgG,IgA,IgM,κ轻链(kappa light chain)和λ轻链(lambda light chain)],并进行血清蛋白电泳及免疫固定电泳,评价上述检测指标在MM诊断中的临床应用价值。结果58例MM患者中41人经蛋白电泳检测发现存在M蛋白,检出阳性率为70.7%,经免疫固定电泳检测后;54例检测阳性,阳性率93.1%,差异有统计学差异。另外IgG型32例(55.2%)、IgA型8例(13.8%)、IgM型3例(5.1%)、轻链型8例(13.8%),同时相应对类型的免疫球蛋白和轻链增高并伴其它组分免疫球蛋白及轻链降低。结论免疫球蛋白及轻链检测、免疫蛋白电泳是临床初筛多发性骨髓瘤的重要方法,而免疫固定电泳能够快速、准确的对MM进行诊断及分型,可作为MM常规检测方法之一。

电泳共沉积法制备金刚石/Al_(2)O_(3)/玻璃复合涂层的工艺

以304不锈钢为基体,采用电泳共沉积法制备复合涂层,并通过烧结方式实现涂层在基体的固化。研究电泳共沉积过程中不同悬浮液组成、沉积电压、沉积时间和Al^(3+)质量分数等因素对涂层性能的影响,对涂层进行微观结构表征和力学性能测试,并使用该工艺制备抛光盘,用于蓝宝石的抛光。结果表明:当沉积电压为50 V,沉积时间为6 min,添加质量分数为0.10%的Al^(3+)时,可获得光滑、均匀的金刚石/Al_(2)O_(3)/玻璃复合涂层;复合涂层经450℃烧结3 h后,表面致密均匀,硬度达521 HV,复合涂层的耐磨性、与基体的结合强度均良好;使用抛光盘对蓝宝石进行抛光,可将表面粗糙度降低90.2%。

胶束毛细管电泳分离分析积雪草及其制剂中的4种三萜类有效成分

以pH=9.72的40%甲醇-16 mmol/L SDS-20 mmol/L硼砂溶液作为隐运行电解质,在分离电压25 kV,进样时间7 s,进样压力3447.38 Pa(0.5 psi),柱温25℃,PDA检测波长214 nm的仪器条件下,建立了一种胶束毛细管电泳法,能同时分离分析积雪草及其制剂中的羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸和积雪草酸4种三萜类有效成分.运用此方法分析测定积雪草及其制剂中的4种三萜类有效成分的含量,加标回收率90%~110%,相对标准偏差均不超过5%.

基于pH响应涂层柱的毛细管电泳法在线富集和分离糖蛋白

本研究通过静电自组装法制备了一种3-氨基苯硼酸(APBA)修饰的纳米金(AuNPs@APBA)涂层毛细管柱,该毛细管柱兼具抗非特异性吸附性和富集选择性,将其作为分离通道,建立了基于pH响应涂层柱的糖蛋白在线富集与分离方法。首先,采用柠檬酸钠还原法制备金纳米颗粒(AuNPs),再将APBA通过静电自组装修饰到AuNPs表面,制得AuNPs@APBA纳米材料;利用离子吸附作用将AuNPs@APBA吸附到毛细管内壁上,制得AuNPs@APBA涂层毛细管柱。在pH为8的条件下,糖蛋白能够与毛细管内表面的硼酸基团结合形成硼酸酯,从而被吸附;当pH为3时,硼酸酯发生解离并释放出糖蛋白,基于上述原理,该方法能够实现糖蛋白的选择性在线富集与分离。实验结果表明,与使用普通电泳法的裸柱相比,经AuNPs@APBA涂层毛细管柱富集后,卵清蛋白(OVA)的峰面积增大了2646倍,而牛血清白蛋白(BSA)的峰面积仅增大了847倍;并且,将鸡蛋清样品稀释1×10^(6)倍后,仍可利用该方法对糖蛋白进行检测。该方法样品用量少,操作简单,分离效率高,可用于实际样品中痕量糖蛋白的在线富集与分离。

实验教学中醋酸纤维素薄膜电泳的条件优化

醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白是生物化学实验课中的一项基础实验技术。目前,诸多医学院校基础医学及生物学专业均开设了此项实验。但是由于实验方法的不同,且实验过程中的影响因素较多,学生获得的实验结果也存在多种问题。经过多年实验教学探索,西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物系实验教学团队优化了醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白的实验方案,增强了实验教学内容的互动性,确保了实验结果的稳定性,使学生更好地掌握了水平电泳分离蛋白质的理论知识并获得了成功的实验验证。

基于双柔性电极模拟叉指图案电极的液体介电泳研究

介电泳通过非均匀电场作用于介电液体内偶极子影响表面润湿性,实现液滴接触角可调,克服了电润湿效应的接触角饱和限制,但其驱动电极需图案化处理,难以实现实用的三维可调光学器件.本文采用外裹绝缘介电层且互不导通的双柔性电极缠绕于平板基底形成二维平面线墙,模拟叉指图案电极以驱动液体介电泳,给出了“液滴-叉指平面线墙”模型的接触角与电压理论关系.在0—250 V_(rms)电压范围内实验测量的接触角变化可达32°,符合上述理论关系,为构造液体介电泳三维可调光学器件提供了理论和实验基础.

微弧氧化钛电泳沉积制备氧化镁涂层及其抗菌性与生物相容性

口腔种植修复术失败的主要原因是术后细菌在种植体表面黏附形成生物膜并导致周围炎症,主要致病菌为牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis,P.g),植入物相关感染严重影响手术效果及增加患者痛苦与费用,因此须赋予植体表面抗菌能力以降低感染发生率。微弧氧化(Micro-arc oxidation,MAO)技术是通过高电压形成牢固结合且具备良好骨整合性能的氧化涂层,同时已有研究发现镁及其化合物(氧化镁)具有良好抗菌性和生物相容性。将MAO与电泳沉积(Electrophoretic deposition,EPD)技术结合,在多微孔的二氧化钛表面沉积纳米氧化镁(nano-MgO)涂层,并评价其体外抗菌性能及生物相容性。通过SEM、XRD、EDS观察样品表面形貌结构、测定元素组成。通过稀释涂板计数法、细菌活死染色及SEM观察评价nano-MgO涂层对P.g的体外抗菌性能。通过将人牙龈成纤维细胞(HGF)与nano-MgO涂层共培养后CCK-8法、细胞活死染色及骨架染色观察评价nano-MgO涂层体外生物相容性。研究结果发现,nano-MgO颗粒在二氧化钛多微孔表面均匀-团聚沉积且覆盖率随沉积时间增加。各组样品对P.g的体外抗菌性能在24 h为6%~54%,在72 h为39%~79%。显微观察(活死及SEM)样品表面活菌比例随沉积时间而减少。各组样品与HGF共培养1 d后细胞相对存活率为79%–67%,5 d后为93–85%。荧光显微观察发现MAO钛样品表面几乎无死细胞,其余4组表面死细胞比例随沉积时间增加,各组样品表面细胞形态完整且各组间无明显差异。MAO钛表面EPD nano-MgO涂层具备良好体外抗菌性能及生物相容性,研究成果可为降低口腔种植修复术的感染发生率、减少患者痛苦及手术费用提供一种新方法。

电泳沉积改性对高模量碳纤维在水中分散性的影响

高模量碳纤维(HMCF)因经过高温石墨化,表面惰性高,表现出很强的疏水性,不易在水中分散,成为湿法制备碳纤维纸需要克服的瓶颈。为改善HMCF在水中的分散性,采用电泳沉积二维过渡金属碳化物MXene的方法对其进行表面改性,研究了电泳沉积参数、纤维特性对HMCF表面改性效果及其在水中分散性的影响。结果表明,经过MXene表面改性后,HMCF表面的极性官能团数量增加,在水中的分散性得到了一定的改善。MXene沉积4min时BHM3碳纤维在水中的分散情况改善最为显著,对水的接触角从100.7°降至36.2°,达到一级分散水平,沉降时间增加到42min。相同条件下,MXene在HMCF表面的均匀分布能提升纤维在水中的分散性。