miR-137通过靶向MCL1和谷氨酰胺转运SLC1A5调节肺癌细胞的铁死亡机制

目的 探讨miR-137通过靶向髓系白血病1蛋白(MCL1)和谷氨酰胺转运蛋白溶质载体家族A1成员(SLC1A)5调节肺癌细胞铁死亡的机制。方法 非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549从美国典型培养物保藏中心获得。培养基均补充有10%胎牛血清(FBS),在37℃的含5%CO_(2)的潮湿空气中孵育。培养细胞以进行miR-137载体转染,直至细胞融合度达到70%~80%。将培养细胞分为对照组、miR-137转染组和miR-137沉默组。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析细胞MCL1和SLC1A5、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4 mRNA表达。通过双重荧光素酶报告基因测定miR-137与MCL1和SLC1A的靶向作用。通过铁测定试剂盒测量每个细胞系中的Fe2+浓度。通过线粒体超氧化物(MitoSOX)指示剂测量了细胞中MitoSOX的产生。通过相应试剂盒检测活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。通过流式细胞仪检测细胞凋亡。通过Transwell法测定miR-137对细胞迁移、侵袭的影响。结果 miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组MCL1、GPX4和SLC1A5 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组MCL1、SLC1A5和GPX4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-137转染组显著降低了用Wt-SLC1A5和Wt-MCL1载体共转染的NSCLC细胞中的荧光素酶活性(P<0.05),而Mut-SLC1A5和Mut-MCL1模拟共转染荧光素酶活性酶无显著变化(P>0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著降低,线粒体相对膜电位显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著升高,线粒体相对膜电位显著降低(P<0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组ROS和MDA浓度显著降低,GSH浓度显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组ROS和MDA浓度显著升高,GSH浓度显著降低(P<0.05)。24、48和72 h时,miR-137转染组较miR-137沉默组和对照组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),72 h时miR-137沉默组较对照组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组细胞迁移、侵袭数量显著增多(P<0.05),miR-137转染组较对照组细胞迁移、侵袭数量显著减少(P<0.05)。结论 miR-137可以靶向调控SLC1A5和MCL1,诱导肺癌细胞铁死亡,从而促进细胞凋亡。

SLC7A11表达与双硫死亡、铁死亡及肿瘤关系的研究进展

研究已发现数十种调节性细胞死亡方式,包括铜死亡、铁死亡以及新鉴定的双硫死亡(disulfidptosis)等。其中,双硫死亡是由细胞内过量胱氨酸积累引起的二硫化物应激导致的细胞死亡方式,通常在葡萄糖饥饿的条件下发生。溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)作为参与多种新型细胞死亡方式的特定分子在肿瘤生长或进程中发挥了关键作用。本文针对双硫死亡并围绕其关键分子SLC7A11在肿瘤中的研究进展作一综述。

SLC7A11/xCT在肝脏疾病中的研究进展

肝脏作为人体内最大的消化器官,参与物质代谢、蛋白合成、解毒、凝血和免疫等各种与生命活动密切相关的生物学功能。溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11/xCT)是一种介导氨基酸转运的跨膜蛋白。随着相关研究的逐步深入,越来越多的证据表明SLC7A11参与多种肝脏疾病的病理生理过程。SLC7A11可以调节氨基酸代谢、氧化还原稳态及铁死亡等病理过程,同时近期研究发现其在一种全新的细胞死亡类型——双硫死亡(disulfidptosis)中发挥重要的作用。本文针对近年来SLC7A11的相关研究进行综述,阐述SLC7A11在肝脏疾病中的作用及调节机制,为以SLC7A11为靶点的肝脏疾病的治疗策略提供新的参考和依据。

鸡SLC基因超家族分析及其在蛋壳形成不同时期的表达特征

【目的】鉴定出在蛋壳形成过程中可能参与钙转运的溶质载体(SLC)基因超家族成员,并分析SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征,为进一步探究SLC基因与蛋壳形成的相关性及揭示钙转运调控机制打下基础。【方法】基于NCBI和Ensembl数据库,检索并整理鸡SLC基因超家族全基因信息,通过ProtParam、Pfam、TBtool、NPS@:SOPMA、Euk-mPLoc 2.0及MEGA 11.0等在线软件进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR分析钙转运相关SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征。【结果】鸡SLC基因超家族包括56个亚家族,分布在包括Z染色体在内的32条染色体上,其编码蛋白主要分布在内质网和细胞膜上,大多数为疏水的碱性蛋白,涵盖81种结构域,主要参与核苷酸、糖类、氨基酸、神经递质、无机离子及有机离子等物质的运输,其中与钙离子(Ca^(2+))相关的SLC亚家族基因有SLC4、SLC8、SLC9、SLC24和SLC30。SLC8和SLC24亚家族基因在进化分支上的亲缘关系很近,存在直接与Ca^(2+)转运的结构域,主要定位在细胞膜和内质网上。实时荧光定量PCR检测结果表明,控制Ca^(2+)的SLC8和SLC24基因在产蛋鸡子宫部的表达显著高于未产蛋鸡(P<0.05,下同),进一步说明二者确实参与调控Ca^(2+)跨膜运输,但各成员间分工有所不同。【结论】鸡SLC基因超家族编码产物多为疏水的碱性蛋白,含有结合多种物质的结构域,定位于细胞或多种亚细胞结构膜上,表明SLC家族蛋白成员参与多种物质的跨膜转运过程。其中,SLC8和SLC24亚家族基因在蛋壳形成过程中协同调控Ca^(2+)从内质网释放并完成跨膜运输,分泌到输卵管子宫部而参与蛋壳的形成。

基于MODIS数据的Landsat-7 SLC-off影像修复方法研究

研究如何修复由于扫描行校正器SLC故障而造成的数据坏行,成为国际遥感研究的热点。文章在总结现有的修复方法基础上提出用相同时相的MODIS09数据修复SLC-off数据的方法。该方法采用时空自适应反射率融合模型(STARFM)算法实现MODIS09数据和TM/ETM+数据的融合,获得与SLC-off数据相同时相和空间分辨率的融合数据,然后采用局部线性直方图匹配完成对SLC-off数据填充。实验证明该方法修复效果明显好于传统方法,解决了传统修复方法中存在的一些问题,一定程度上提高了ETM+SLC-off数据的利用率。

顺铂对人肺腺癌细胞SLC-89细胞周期、p21及c-myc表达的影响

目的 观察顺铂对SLC 89细胞增殖、细胞周期、p2 1及c myc蛋白表达的影响 ,以揭示顺铂抗癌的机理。方法 运用体外细胞培养技术 ,以不同浓度的顺铂作用于培养的SLC 89细胞 72h ,分别运用MTT法测定细胞增殖和流式细胞术观察细胞周期的变化及p2 1和c myc蛋白的表达。结果 顺铂能显著抑制SLC 89细胞生长 ,72h的顺铂IC50 为 18.4 7μg/ml。顺铂能以浓度依赖方式减少S期细胞而阻滞细胞于G0 /G1期 ,并诱导细胞p2 1及c myc蛋白的表达。 结论 顺铂能显著抑制SLC 89细胞生长增殖、改变细胞周期分布并诱导细胞 p2 1及c myc蛋白的表达 ,这可能是顺铂抗癌作用的重要机理之一。

基于Landsat-7 ETM+SLC-OFF影像的山地冰川流速提取与评估——以Karakoram锡亚琴冰川为例

Landsat-7机载扫描行校正器(Scan Line Corrector,SLC)失效后的ETM+影像(SLC-OFF影像)约有22%的数据缺失,严重限制了该影像在冰川研究中的应用,特别对长期缺乏高质量遥感影像的高亚洲地区冰川运动连续监测产生较大影响.以Karakoram中部最大的锡亚琴冰川为例,初步评估了Landsat-7 ETM+SLC-OFF影像在山地冰川表面流速提取方面的适用性和可行性.选取2009年和2010年两景SLC-OFF影像,运用局部直方图匹配法(Local Linear Histogram Match,LLHM)和加权线性回归法(Weighted Liner Regression,WLR)修复缺失数据条带,并利用亚像元互相关方法对修复后两景影像进行冰川表面流速估算.结果表明,LLHM和WLR两种方法均能有效修复冰川区Landsat-7 SLC-OFF影像,其冰流估算结果与同期Landsat-5 TM影像的冰流结果较为一致,三者冰流速估算精度分别为±5.9 m·a^(-1)、±6.3 m·a^(-1)和±4.0 m·a^(-1),验证了Landsat-7 SLC-OFF影像在山地冰川流速监测中的应用潜力.

顺铂对人肺腺癌细胞SLC-89作用的机理探讨

目的 观察顺铂对SLC 89细胞增殖生长、端粒酶活性、细胞周期、p5 3、bcl 2及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响 ,探讨顺铂抗癌作用的机理。方法 以不同浓度的顺铂作用于培养的SLC 89细胞 72h ,运用MTT法测定细胞增殖 ,端粒酶重复序列扩增—酶联免疫吸附法 (TRAP ELISA)检测细胞端粒酶活性以及流式细胞术观察细胞周期的变化和p5 3、bcl 2及PCNA的表达。结果 顺铂能显著抑制SLC 89细胞的生长 ,IC50 为 18.47mg/L。顺铂能以浓度依赖方式下调SLC 89细胞端粒酶活性 ,减少S期细胞而阻滞细胞于G0 /G1期 ,降低bcl 2和PCNA的表达 ,同时诱导 p5 3的表达。 结论 顺铂能显著抑制SLC 89细胞生长增殖、改变细胞周期分布、降低端粒酶活性及bcl 2与PCNA的表达 ,并诱导 p5 3的表达 ,这可能是顺铂抗癌作用的重要机理。

Slc24a5在不同毛色绵羊皮肤中的表达和定位研究

为研究阳离子交换体(solute carrier family 24member 5,Slc24a5)在不同毛色绵羊皮肤中的表达情况,探究其与毛色形成之间的关系采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析黑色和白色绵羊皮肤中Slc24a5的相对表达量,并运用Western blot和免疫组织化学方法对不同体色绵羊皮肤中Slc24a5蛋白的表达和定位情况进行分析.结果显示:Slc24a5基因在黑色绵羊皮肤组织中的相对表达量是白色绵羊皮肤组织的20.53倍(P<0.01);Western blot印迹结果证实绵羊皮肤组织总蛋白中存在分子量约为51kD的蛋白质条带,且黑色绵羊皮肤平均蛋白表达量显著高于白色绵羊(P<0.01).免疫组织化学结果显示,Slc24a5在绵羊皮肤毛囊外根鞘和毛基质处均呈阳性表达,且根据光密度值分析显示,Slc24a5在黑色绵羊中的平均蛋白质表达量显著高于白色绵羊.以上研究结果显示Slc24a5可能与绵羊毛色形成具有一定的相关性.

SLC基因修饰树突状细胞及不同免疫方式抗肿瘤作用探讨

目的:应用次级淋巴组织趋化因子(SLC)成熟肽基因/重组腺相关病毒(rAAVSLC)转染树突状细胞(DC),探讨一种基因修饰DC的新方法及其抗肿瘤的生物学活性。方法:体外构建rAAVSLC,按MOI为10、50、100与腺病毒(Ad2)协同转染小鼠骨髓来源成熟和未成熟DC,GFP作为成功转染的示踪蛋白。RTPCR在mRNA水平、ELISA在蛋白水平检测SLC表达,Transwell检测转染DC的培养上清对T细胞的趋化作用。瘤苗的在体效应通过C57BL/6J小鼠肿瘤模型验证。皮下接种Hepal6肿瘤细胞后成瘤小鼠分成3组:①生理盐水对照组,瘤内或足垫注射NS;②单纯DC对照组,瘤内或足垫注射未修饰DC;③SLC基因修饰DC组,瘤内或足垫注射SLC基因修饰的DC。每隔7天注射1次,观察各组小鼠肿瘤的生长情况。4周后分离瘤体,用荧光免疫组化检测瘤体内CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润情况。结果:rAAVSLC在MOI为100时能成功转染DC,未成熟DC的转染效率显著高于成熟DC,并产生对T细胞有明显趋化生物学活性的SLC。动物实验表明,瘤内注射SLC修饰后DC,肿瘤大小与对照组有明显差异,免疫组化显示瘤体内有较多的CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润。足垫注射SLC修饰的DC与对照组相比,抗肿瘤作用无显著差异。结论:rAAVSLC在Ad2的辅助下能有效转染未成熟DC并能表达具有趋化生物学活性的SLC。SLC基因修饰的树突状细胞瘤内注射以其对CD4+T细胞、CD8+T细胞的吸引作用而发挥了明显的抗肿瘤作用,同时也进一步证实用树突状细胞进行肿瘤生物免疫治疗时,不同免疫方式对疗效有明显影响。

基于单一影像局部回归模型修复的Landsat 7 ETM SLC-OFF图像质量评价

以时段相近的Landsat 5TM影像为参照,通过定性评价(目视)和定量评价(均方根误差、平均差异)方法,分别对单一影像自适应局部回归和单一影像固定窗口局部回归模型修复后的Landsat 7ETM SLC-OFF数据的图像质量进行评价。结果表明,无论是以Landsat 5TM影像还是Landsat 7ETM SLC-OFF影像作为填充影像,得到的修复图像的B1、B2、B3波段均存有一定的条纹,使其应用受到一定限制;但B4、B5、B7波段则没有条纹,这3个波段基本可以应用。对比发现RGF模型方法修复后的影像效果优于FGF模型方法的效果;从填充图像类型看,以Landsat 7ETM SLC-OFF为填充图像修复的影像比以Landsat 5TM为填充图像修复的影像效果更好。

AB SLC500与Modbus网络通信的实现

AB SLC500不支持Modbus协议,所以不能直接与Modbus网络通信。为了实现两者快速准确的通信,深入研究了Modbus协议,并在AB SLC500 BASIC-T模块中开发了Modbus应用程序,实现了SLC500与Modbus网络的通信。应用SLC500编写梯形图程序来控制其他设备和网络,由于程序冗长,增加了信息传输的延迟,不利于实时传送。BASIC-T模块的应用,与过去直接应用SLC500控制其他设备和网络相比,提高了控制的效率和响应速度,即提高了控制系统整体的实时性。实验测试结果表明,此方案能保证数据传输的准确性、可靠性和高效性。

基于Gamma-SLC混合密度估计的雷达目标识别

通过分析高分辨距离像(HRRP)的统计特性,提出一种Gamma模型与基于累积量的随机学习算法(SLC)相结合,估计HRRP概率密度的新方法:Gamma-SLC方法。该方法具有Gamma分布针对性强,估计准确与SLC适应性强的优点,同时回避了二者的缺点。另外,借鉴最大熵原则的非高斯性测度,设计了一个新的评价概率密度估计效果的准则。基于外场实测数据的实验证明了Gamma-SLC方法的有效性。

国产SLC-B(L)催化剂在双峰聚乙烯管材料工业生产中的应用

将开发的SLC-B(L)催化剂应用于规模为250kt/a的"北星双峰"(Borstar)工艺的聚乙烯(PE)装置,生产的双峰PE管材料的性能指标达到现行企业质量标准的优等品标准。SLC-B(L)催化剂与同类进口催化剂的动力学行为有所不同。SLC-B(L)催化剂的小试聚合评价结果表明,与同类进口催化剂相比,SLC-B(L)催化剂的初始活性较高、氢调敏感性稍差、堆密度较大、小试产品中细粉含量较低。SLC-B(L)催化剂的工业应用结果表明,SLC-B(L)催化剂的活性比进口催化剂高近20%,氢调敏感性较进口催化剂略差,生产的双峰PE管材料粉料的平均粒径略小且细粉含量有所增加。

SLC12A3基因Arg913Gln多态与上海地区汉族人群T2DM肾病的关系

目的探讨溶质载体家族12成员3(SLC12A3)基因Arg913Gln(G→A)多态与上海地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)及糖尿病肾病(DN)的相关性。方法上海地区258例汉族T2DM患者(T2DM组)根据24h尿白蛋白排泄率(AER)分为未合并肾病组(DN0组,n=95)和合并肾病组(DN组,n=163),后者又分为微量蛋白尿肾病亚组(DN1组,n=95)和显性蛋白尿肾病亚组(DN2组,n=68);以无糖尿病和肾病且口服葡萄糖耐量试验(OGTT)正常者作为对照组(n=82)。应用PCR直接测序法检测各组多态基因型;比较各组间基因型、等位基因频率及临床变量间的差异。结果检出多态基因型GG、GA和AA。T2DM组的多态基因型和等位基因频率高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);T2DM组各亚组间多态基因型和等位基因频率比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。T2DM组GA+AA基因型患者的三酰甘油(TG)、AER、空腹血胰岛素(FINS)和HOMA-IR值均显著高于GG基因型患者(均P<0.05)。结论上海地区汉族人群SLC12A3基因Arg913Gln(G→A)多态与T2DM和DN无显著相关性;GA+AA基因型携带者的AER显著高于GG基因型携带者。提示Arg913Gln多态(G→A)可能是中国上海地区汉族T2DM患者蛋白尿显著增加的一个标志。

SLC-B双峰分布PE催化剂活性均衡性的研究

研究了不同关键组分配比对SLC-B催化剂聚合性能的影响,确定了催化剂制备过程中各组分配比的最佳范围,利用正交试验研究了催化剂活性的均衡性参数。结果表明:选用合适的n(Mg)/n(SiO_2),n(OH)/n(Mg),n(Al)/n(Mg)以及催化剂中w(Ti)为(2.2±0.1)%时催化剂具有最佳的综合性能,从而解决了催化剂活性的均衡性问题。使用SLC-B催化剂,在实验室中利用淤浆聚合和气相流化床聚合相结合的方法,通过调节2个反应器的产率比,成功实现了双反应器生产具有双峰相对分子质量分布特征的聚乙烯产品。

趋化因子SLC和免疫佐剂CpG-ODN联合应用对小鼠移植黑素瘤的疗效

目的:探讨次级淋巴组织趋化因子(seccondary lymphoid tissue chemokine,SLC)和CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)联合应用对小鼠移植黑素瘤的治疗效果及其可能机制。方法:制备SLC-Fc融合蛋白,体外检测SLC-Fc对小鼠淋巴细胞的趋化效应。建立小鼠黑素瘤移植模型,随机分生理盐水对照组、CpG-ODN组、SLC-Fc组以及SLC-Fc+CpG-ODN组共4组。观察治疗后各组小鼠肿瘤的生长情况,流式细胞术检测移植瘤组织中淋巴细胞的种类和浸润情况。结果:成功制备SLC-Fc蛋白,SLC-Fc对小鼠淋巴细胞具有剂量依赖性(0.03、0.3和3μg/L)趋化作用。瘤内注射SLC-Fc和(或)CpG-ODN明显抑制肿瘤的生长,联合治疗组瘤体明显小于对照组(P<0.01),并且小鼠存活时间也明显延长。联合治疗组瘤体内CD4+、CD8+T淋巴细胞和CD11c+树突状细胞较对照组显著增多(P<0.05,P<0.01),并且其肿瘤引流淋巴结也明显增大。结论:SLC和CpG-ODN联合应用对小鼠移植黑素瘤有抑制作用,其机制与趋化CD4+T、CD8+T细胞和促进DCs增殖有关。

肾脏特异性高表达基因SLC12A1在肾透明细胞癌中低表达的研究

目的验证肾脏特异性高表达基因SLC12A1在肾透明细胞癌中的低表达,初步研究该基因的表达与肾透明细胞癌发生发展的相关性并探讨其临床意义。方法临床收集23例肾透明细胞癌患者癌组织和癌旁正常组织样本,采用荧光定量PCR、免疫组织化学和Western blot的方法分别检测肾透明细胞癌组织和癌旁正常组织中的SLC12A1基因mRNA和蛋白质的表达水平差异。结果肾透明细胞癌组织中SLC12A1的mRNA和蛋白质表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。结论肾透明细胞癌组织中SLC12A1表达量明显降低。该结果对进一步阐明肾透明细胞癌发生、发展的分子机理具有一定的学术意义,可能为肾透明细胞癌的诊断和治疗提供一种新的思路。

SLC基因家族单核苷酸多态性与汉族孕产妇重度子痫前期易感性的关系

目的探讨SLC基因家族单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）与汉族孕产妇重度子痫前期易感性的相关性。方法选取2011年3月至2013年3月确诊的合并重度子痫前期孕产妇125例和健康孕产妇140例为研究对象,利用Mass ARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台（MALDI-TOF-MS）对SLC9A3、SLC4A1和SLCO4C1基因的4个SNPs位点进行基因分型。结果基因分型成功率为98.11%。与对照组相比,重度子痫前期组rs2074107的等位基因分布（χ^2=0.992,P=0.319）和基因型分布（χ^2=0.886,P=0.648）均无显著性差异。与对照组相比,重度子痫前期组rs2857078、rs4957061和rs10066650的等位基因分布（χ~2=7.720,P=0.005;χ^2=19.755,P=0.000;χ^2=15.078,P=0.000）和基因型分布（χ^2=6.608,P=0.037;χ^2=20.116,P=0.000;χ^2=12.026,P=0.002）均具有显著性差异,但进行Bonferroni校正后rs2857078位点的2组间基因型分布无显著性差异（Pc=0.074）,而rs4957061和rs10066650的2组间基因型分布均具有显著性差异（Pc=0.000,Pc=0.008）。与CC基因型相比,rs4957061的TT基因型显著增加重度子痫前期发生的危险性（P=0.001）,OR值（95%可信区间）为3.080（1.615~5.875）。如表3与TT基因型相比,rs10066650的GT和GG基因型均增加重度子痫前期发生的危险性（P=0.033,P=0.003）,OR值分别为1.938（1.050~3.577）和5.814（1.628~20.758）。结论 SLC9A3和SLCO4C1基因的单核苷酸多态性可能与重度子痫前期易感性有关。

无参考图条件下的Landsat-7 SLC-off图像缺失像素填充算法研究

针对2003年以后Landsat-7扫描线纠正器失效问题,提出一种利用回归分析和三次样条插值对图像缺失像素进行恢复的算法,该方法无需使用参考图,并以非监督分类结果为准则。首先对图像进行预处理,包括条带定位、非监督分类和局部平均灰度计算;然后,利用回归分析计算在每个条带像素的3个方向上条带外侧像素的灰度变化趋势;在非监督分类准则下,通过判断各个方向条带两侧像素类型异同的策略确定条带当前像素的填充方向;随后,对条带边界点和非边界点采用不同算法分别填充。对非边界像素,在填充方向上利用三次样条插值计算当前像素的灰度插值;最后,对条带进行自适应滤波处理。实验结果表明,在不需要参考其它遥感影像与数据的条件下,研究方法与常用的有参考图方法相比较差别不大,而其均方根误差值17.590 4接近于最优的权重线性回归方法的17.400 6。