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甘蓝SLR1启动子在烟草及芥菜中的表达分析
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作者 兰彩耘 周雯 +4 位作者 杜杨梅 任雪松 司军 李成琼 宋洪元 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期65-70,共6页
为研究甘蓝SLR1启动子在异源植物中的表达特点,将GUS报告基因在1.5kb长的SLR1启动子驱动下,通过农杆菌介导法分别导入烟草和芥菜.转基因植株经PCR鉴定显示GUS报告基因已经整合到烟草和芥菜基因组中.转基因植株开花后花器官组织的GUS化... 为研究甘蓝SLR1启动子在异源植物中的表达特点,将GUS报告基因在1.5kb长的SLR1启动子驱动下,通过农杆菌介导法分别导入烟草和芥菜.转基因植株经PCR鉴定显示GUS报告基因已经整合到烟草和芥菜基因组中.转基因植株开花后花器官组织的GUS化学染色分析结果显示SLR1启动子主要在烟草和芥菜开花前2天至开花后的柱头中大量表达,部分转基因烟草植株开花后的花冠,转基因芥菜植株花萼、花瓣及花丝中也有明显的表达,但在两种转基因植株花粉中均未检测到GUS表达活性,显示甘蓝SLR1启动子在异源植物中不是一个严谨的柱头特异启动子. 展开更多
关键词 甘蓝slr1启动子 烟草 芥菜 表达分析
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水稻SLR1基因的克隆及其植物表达载体的构建
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作者 尉连伶 冯晓燕 范六民 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第2期435-436,453,共3页
[目的]为研究水稻中的SLR1蛋白的功能及寻找与其相互作用的GA信号转导蛋白奠定基础。[方法]以水稻品种日本晴基因组DNA为模板,根据水稻SLR1基因cDNA序列设计1对特异引物进行PCR扩增,回收PCR产物连接到pGEMT载体中,经筛选得到水稻SLR1基... [目的]为研究水稻中的SLR1蛋白的功能及寻找与其相互作用的GA信号转导蛋白奠定基础。[方法]以水稻品种日本晴基因组DNA为模板,根据水稻SLR1基因cDNA序列设计1对特异引物进行PCR扩增,回收PCR产物连接到pGEMT载体中,经筛选得到水稻SLR1基因的克隆pGEMTSLR。最后采用酚仿抽提和乙醇沉淀的方法构建水稻SLR1基因的正义和反义表达载体。[结果]通过PCR扩增获得了约为1.9kb的特异片段。回收PCR产物,将克隆片段和pGEMT载体连接后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞,重组克隆经酶切鉴定后提取重组质粒pGEMTSLR1。该研究成功构建了SLR1基因的正义表达载体pCAMSLR(约0.7kb)和反义表达载体pCAMASLR(约1.2kb)。[结论]采用冻溶法可将表达载体pCAMSLR和pCAMASLR导入农杆菌并进行水稻的遗传转化。利用SLR1基因的正义和反义表达载体,可观察转基因植株中该基因的表达上调和下调对植物的影响。 展开更多
关键词 水稻 slr1基因 植物表达载体 构建
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利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建水稻OsSLR1敲除突变体 被引量:1
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作者 耿敏 王婷婷 +3 位作者 陶英瑜 于丽静 吴铭 张春玉 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第24期8122-8128,共7页
GA是种子萌发的促进因子,能解除种子休眠和刺激萌发,GA的信号通路可以通过对DELLA蛋白的去抑制作用来完成的。通过对不同物种的DELLA蛋白功能的研究,发现不同物种的DELLA蛋白的功能具有高度保守性,本实验主要研究水稻中的DELLA蛋白SLR1... GA是种子萌发的促进因子,能解除种子休眠和刺激萌发,GA的信号通路可以通过对DELLA蛋白的去抑制作用来完成的。通过对不同物种的DELLA蛋白功能的研究,发现不同物种的DELLA蛋白的功能具有高度保守性,本实验主要研究水稻中的DELLA蛋白SLR1,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建OsSLR1基因敲除突变株。首先,通过对OsSLR1的结构和功能域进行分析比对,最终选择3个靶点;然后,利用重组法构建CRISPR/Cas9敲除载体;最后,通过农杆菌介导法,将敲除载体转染成熟的日本晴水稻愈伤,待培育出幼苗,通过PCR和Western Blot进行鉴定。最终筛选得到1株Os SLR1敲除突变株系slr1-1,通过观察突变体萌发表型,发现slr1-1突变体第2天发芽率显著高于日本晴,而且slr1-1突变体的生长速度显著快于日本晴。通过不同浓度PAC对slr1-1突变体萌发表型的影响,发现水稻的DELLA蛋白SLR1敲出的突变体种子萌发不受PAC抑制,表明OsSLR1是通过调控GA信号途径影响水稻种子的萌发,详细的调控机制和互作蛋白等还有待深入的研究。通过对SLR1调控GA信号通路控制水稻的萌发的研究,提高水稻的萌发率,保持优良的水稻种子萌发力,为解决水稻种植上的出芽率不齐等问题提供新的品种。 展开更多
关键词 水稻 SLENDER RICE1(slr1) CRISPR/Cas9 基因编辑
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Pyramiding of the dep1-1 and NAL1NJ6 alleles achieves sustainable improvements in nitrogen-use efficiency and grain yield in japonica rice breeding 被引量:5
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作者 Xiaopeng Xu Kun Wu +11 位作者 Ruineng Xu Jianping Yu Jing Wang Ying Zhao Yun Wang Wenzhen Song Shuoxun Wang Zhi Gao Yongjia Zhong Xinxin Li Hong Liao Xiangdong Fu 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期325-328,共4页
Rice is one of the most important cereal crops in the world, and a substantial increase in grain yield is necessary for food security. However, high yields of semidwarf modern rice varieties are heavily dependent on t... Rice is one of the most important cereal crops in the world, and a substantial increase in grain yield is necessary for food security. However, high yields of semidwarf modern rice varieties are heavily dependent on the application of mineral nitrogenous fertilizer (Tilman et al., 2002;Sun et al., 2014). Nitrogen (N)-insensitive sponses associated with reduced N-use efficiency (NUE) is a major characteristic of the green revolution varieties (GRVs), in which the growth-inhibiting protein SLENDER RICE1 (SLR1) accumulates (Li et al., 2018). Unfortunately, increasing the level of N fertilizer use to reach the full yield potential of GRVs is subject to diminishing returns, quite apart from its deleterious effect on the environments (Rahn et al., 2009;Liu et al., 2015). Therefore, there is an urgent need to develop new rice GRVs that increase NUE while maintaining their high yields. Recently, several genes (e.g., DEP1, OsNRTl.lB, OsNRT2.3b, ARE1 and GRF4) responsible for improved NUE have been identified in rice (Sun et al.. 2014;Hu et al., 2015;Fan et al., 2016;Wang et al., 2018;Li et al., 2018). More importantly, boosting the activity of the transcription factor GRF4 overcomes the ability of SLR1 to prevent the GRF4-GIF1 interaction, which in turn promotes the coordinated expression of the genes involved in N assimilation and carbon fixation and consequently enhances the NUE of rice GRVs, thereby improving our ability to grow crops sustainably (Li et al., 2018). However, current understanding of the genetic basis for improving NUE remains at the level of identification of a number of quantitative trait loci (QTLs), without any understanding of the nature of the gene products. 展开更多
关键词 SLENDER RICE1 (slr1) N-use efficiency (NUE) green REVOLUTION VARIETIES (GRVs)
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