中国北方汉族男性SHBG基因启动子(TAAAA)n多态分布及其与有氧能力的关联性研究

目的:探讨性激素结合球蛋白(SHBG)基因(TAAAA)n多态在中国北方汉族男性中的分布特征及其与有氧能力的关联性。方法:102名中国北方汉族健康青年男性受试者进行为期20周、每周3次5000米匀速跑的有氧耐力训练,训练前后分别测试VO2max和RE相关生理指标。使用GeneScan和测序方法分析SHBG(TAAAA)n多态等位基因和基因型。进行该多态与有氧能力初始值和耐力训练效果的关联性分析。结果:(1)在中国北方汉族男性中观察到(TAAAA)6～10次重复等位基因和11个基因型。其中,9次重复等位基因分布频率最高,10次重复等位基因分布频率最低;(2)当分别以7、8和9次重复作为分割点划分基因型时,发现长链组VO2max相关指标训练前初始水平平均值均大于短链组。其中,按7次重复划分时,≥7次基因型携带者训练前VO2max和VO2max时的VE初始值均有高于<7次携带者的趋势(P均为0.06);(3)不同基因型组间VO2max和RE各指标的耐力训练敏感性无显著性差异。结论:SHBG基因(TAAAA)n多态与男性有氧能力指标初始水平可能存在一定的关联性,推测重复次数较多的等位基因携带者的有氧能力初始水平较好,但与耐力训练敏感性无关联。

河南汉族男性原发性不育与SHBG基因启动子(TAAAA)n多态性的关联性

目的：探讨河南汉族男性原发性不育与性激素结合球蛋白（SHBG）基因启动子（TAAAA）n多态性的关联性。方法：分别收集288例河南汉族男性原发性不育患者和259例正常男性的精液或血液,酚-氯仿法提取DNA,PCR扩增目的片段,检测Y染色体微缺失,对无缺失个体进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染及生物测序分析SHBG基因启动子（TAAAA）n等位基因和基因型。结果：病例组Y染色体微缺失率为12.15%（35/288）,对照组未检出。检测到（TAAAA）五核苷酸5~10次重复、6个等位基因及20种基因型。病例组与对照组（TAAAA）n多态性构成比较,差异有统计学意义（P〈0.001）。其中,n=5、6、7、10时,2组间比较差异无统计学意义（P均〉0.008）;n=8为保护因素（P=0.002）,n=9为危险因素（P〈0.001）;n≥9时增加了原发性不育的风险（P〈0.001）。结论：河南汉族男性原发性不育与SHBG基因启动子（TAAAA）n多态性可能有一定关联性。

性激素结合球蛋白基因启动子(TAAAA)n重复多态与卵巢早衰的关联性

目的探讨性激素结合球蛋白(SHBG)基因启动子(TAAAA)n重复多态与卵巢早衰(POF)的关联性。方法应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶分离技术检测75例POF患者及167例卵巢功能正常的对照女性SHBG基因启动子(TAAAA)n多态性,比较并分析其在两组中的重复情况。结果 POF组和对照组的SHBG基因启动子(TAAAA)n重复范围分别为6~11次和4~10次,两组等位基因均值分别为(7.85±1.31)和(7.24±1.60),差异有统计学意义(P<0.05)。SHBG基因(TAAAA)n长重复多态(n≥8)在POF组和对照组分布分别为32.0%和20.4%,SHBG基因(TAAAA)n短重复多态(n<8)在POF组和对照组中的分布分别为68.0%和79.6%,长、短多态分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SHBG基因启动子(TAAAA)n多态可能与POF发病有关。

雄激素受体基因CAG多态性与迟发性性腺功能减退症的相关性研究

目的:研究雄激素受体基因(AR)重复序列(CAG)n多态性与迟发性性腺功能减退症(LOH)的关系,探讨LOH的发病机制。方法:共调查1 000例40～70岁中老年男性,其中19例迟发性性腺功能减退症患者,随机抽取127例正常健康中老年男性,测定甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、血清总睾酮(TT)、游离睾酮(fT),测量身高、体重、腰围(WC)、血压,并采用DNA测序方法进行AR基因外显子1氨基端转录调节区(CAG)n重复序列长度测定,比较两组各指标之间的差异。结果:(CAG)n重复次数为15～32(23.05±2.95)。正常健康中老年男性的体重指数(BMI)、FBG较LOH患者显著下降(P<0.01),而TG、TT及fT较LOH患者显著升高(P<0.01)。正常健康中老年男性AR基因(CAG)n重复数为22.54±3.06;LOH患者AR基因(CAG)n重复数为23.23±2.24;LOH患者(CAG)n重复数略高于正常健康人群,但两者比较无统计学意义(P=0.946)。(CAG)n重复长度显示:长组(n≥22)AR基因(CAG)n在LOH组和正常健康中老年男性组的频率分别为73.68%和48.82%(P<0.05)。相关分析显示:TT、fT与(CAG)n重复序列无明显相关性(r=0.04和r=0.025,P>0.05)。结论:LOH男性AR基因(CAG)n重复序列呈现多态性,长(CAG)n重复多态可能是LOH发病的遗传因素,但仍需进一步扩大样本量证实。

中国特发性无精子症和少精子症患者雄激素受体基因CAG重复多态性研究

目的分析中国特发性无精子症和少精子症患者雄激素受体(AR)基因(CAG)n微卫星多态性并探讨该多态性与精子生成障碍发生的关系。方法应用PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析技术对52例少精子症患者和31例无精子症患者的外周血标本进行CAG重复数测定,分析该微卫星多态性和精子生成障碍发生的关系。结果少精子症患者组和无精子症患者组CAG重复数均数分别为22.19和22.13,CAG重复数≥28的百分率分别为1.9%和3.2%,比例逐渐升高。结论AR基因(CAG)n微卫星的CAG重复数在中国男性不育患者中呈现多态性,与精子生成障碍发生的关系有待进一步研究。

广西地区正常人群SCA3/MJD基因多态性研究

目的探讨广西地区汉族正常人群SCA3/MJD基因(CAG)n重复拷贝数的正常变异范围。方法应用荧光PCR及毛细管电泳片段长度分析对广西75名正常人SCA3/MJD基因(CAG)n重复拷贝数进行分析。结果广西地区SCA3/MJD基因(CAG)n在正常人群中的变异范围为13～34个拷贝,集中于13个拷贝,其等位基因频率为52.00%,杂合频率为69.33%,共17种等位基因。结论 SCA3/MJD基因(CAG)n重复序列在广西正常人群中呈现多态性,SCA3/MJD基因(CAG)n重复拷贝数正常变异范围存在地区差异。

雄激素受体基因CAG多态性对男性激素避孕有效性影响的研究

目的:分析应用肌注十一酸睾酮酯(TU)进行激素避孕的男性志愿者中起反应者与不起反应者雄激素受体(AR)基因(CAG)n微卫星多态性,并探讨该多态性对激素避孕效果的影响。方法:29例TU不起反应者和34例起反应者分别作为试验组和对照组,应用PCR和DNA测序技术对两组外周血标本进行CAG重复数测定,分析该微卫星多态性对激素避孕效果的影响。结果:试验组和对照组CAG重复数的均数分别为23.62和22.97,均数比较差异无显著性(P>0.05)。短组CAG(n≤22)在试验组和对照组的分布分别为51.7%、50.0%;长组CAG(n>22)在试验组和对照组分布分别为48.3%、50.0%,长短组分布相同。CAG重复数与精子密度之间未见相关性。在FSH浓度>0.2IU/L组中,CAG重复数>22的受试者达到无精子症的机会是其他受试者的1.5倍。结论:受试者AR基因(CAG)n重复数呈多态性,但不反应组与反应组之间不具有显著性差异,AR基因CAG重复数或其他因素与男性激素避孕效果之间的关系有待进一步探讨。

CTLA-4基因多态性调节溃疡性结肠炎患者CTLA-4 mRNA稳定性和蛋白水平

目的 研究细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T-lymphocyte associated antigen 4,CTLA-4）基因3＇非转录区（AT）n重复序列多态性对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）患者CTLA-4mRNA稳定性和基因表达的影响.方法 采用实时定量PCR方法检测膜型CTLA-4（full length CTLA-4,flCTLA-4）和可溶性CTLA-4（soluble CTLA-4,sCTLA-4）mRNA表达,半衰期法分析其mRNA稳定性.免疫组化检测flCTLA-4蛋白表达.酶联免疫吸附实验测定sCTLA-4蛋白水平.荧光PCR-毛细管电泳技术检测300例UC患者和700名健康对照者CTLA-4基因（AT）n重复序列多态性.结果 活动期UC患者肠黏膜sCTLA-4 mRNA的表达显著低于缓解期UC患者（P=0.004）.在UC患者中,（AT）n重复序列长等位基因携带者表达低水平的flCTLA-4和sCTLA-4 mRNA以及sCTLA-4蛋白（均P＜0.01）.携带长等位基因的UC患者CTLA-4 mRNA的稳定性明显降低.UC患者CTLA-4基因（AT）n重复序列长等位基因携带者（≥116 bp）频率显著高于正常对照组（P＜0.01）,且与广泛型结肠炎相关（P=0.008）.结论 UC患者CTLA-4基因（AT）n重复序列多态性与CTLA-4基因表达水平相关,携带（AT）n重复序列长等位基因的UC患者CTLA-4 mRNA及蛋白的表达降低,提示CTLA-4基因在UC遗传免疫发病机制中起重要作用.

联合运用St14(DXS52)位点VNTR和FⅧ基因内的(CA)n重复多态性诊断甲型血友病

目的 提高甲型血友病 (hemophilia A,HA)家系成员基因诊断及产前基因诊断的准确性和可诊断率。方法 采用 St14 (DXS5 2 )位点的可变串联重复序列和 F 基因第 13内含子的 (CA) n重复多态性连锁分析对 HA家系进行间接基因诊断。结果 单用上述 2个多态位点中的 1个对 9个 HA家系进行连锁分析 ,可诊断率均为 6 6 .7% ,联合 2个多态位点 ,可诊断率则提高到 88.9% ,完成了 4个家系的产前基因诊断 ,并监测到 1例单用 St14位点的可变串联重复序列多态连锁分析可能发生的产前诊断的误诊。结论联合采用上述 2个多态位点可以对近 90 %的 HA家系作出快速、准确的基因诊断和产前基因诊断。

血红素加氧酶1基因多态性与新生儿高胆红素血症的相关性研究

目的探讨血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)启动子区域的g-413A>T单核苷酸多态性和二核苷酸(GT)n重复序列多态性与新生儿高胆红素血症(neonatalhyperbilirubinemia)的相关性。方法运用改良的多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,IMLDR)技术对60例高胆红素血症新生儿(病例组)和60例健康新生儿(对照组)的HO-1基因启动子g-413A>T单核苷酸多态性和二核苷酸(GT)n的重复序列多态位点进行分型。结果病例组和对照组在性别、出生体重、胎龄、日龄、分娩方式和喂养方式等方面的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,病例组HO-1基因启动子g-413A>T的等位基因以及基因型分布的差异没有统计学意义(P>0.05)。病例组与对照组HO-1基因的S等位基因频率及SS基因型频率分布的差异存在统计学意义(P<0.05)。本研究还发现与L等位基因以及LL基因型比较,S等位基因以及SS基因型可显著提高新生儿患高胆红素血症的风险。最后,本研究发现SS基因型患者的血清胆红素浓度明显高于LS和LL基因型患者。结论 HO-1基因启动子区域的(GT)n重复序列多态性与血清胆红素水平与高胆红素血症的发生发展密切相关。