LEF-1协助TCF-1决定蛋白免疫应答中滤泡辅助T细胞的功能

目的探讨在蛋白免疫应答中转录因子TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞的分化与功能中的地位。方法对他莫昔芬诱导的条件敲除Tcf7与Lef1小鼠采用NP-KLH联合铝佐剂免疫或者NP-CGG联合完全弗氏佐剂免疫,分析应答过程中滤泡辅助T细胞的分化与功能,检测蛋白免疫应答中T细胞与B细胞TCF-1与LEF-1的表达量,并用脾脏嵌合小鼠模型验证TCF-1与LEF-1对于滤泡辅助T细胞功能的重要性。结果Tcf7与Lef1敲除小鼠的滤泡辅助T细胞分化是正常的,而B细胞应答严重缺陷。同时,Tcf7敲除小鼠的B细胞应答也是缺陷的,而Lef1敲除小鼠的B细胞应答是完整的;TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞中大量表达,而在B细胞中不表达;脾脏嵌合小鼠模型提示,在有正常滤泡辅助T细胞的帮助下,B细胞中TCF-1与LEF-1的缺失不会导致B细胞应答缺陷。结论在蛋白免疫应答中,TCF-1与LEF-1对于滤泡辅助T细胞的分化是不重要的,LEF-1协助TCF-1通过影响滤泡辅助T细胞的功能而影响B细胞应答。

食管鳞癌外周血细胞PD-L1、PD-1及TCF-1 mRNA表达与预后的关系

目的探讨外周血细胞中程序性死亡配体-1(PD-L1)、程序性死亡受体(PD-1)及TCF-1 mRNA变化及其在食管鳞癌(ESCC)诊断和预后中的价值。方法回顾性分析2019年1月至2019年12月间河南科技大学第一附属医院临床医学院肿瘤医院病理确诊的91例ESCC患者和63例非癌对照外周血细胞中PD-L1、PD-1和TCF-1的mRNA表达变化,并通过ROC曲线分析诊断ESCC效能。Log-rank检验确定不同组别生存曲线差异,确定PD-L1、PD-1和TCF-1 mRNA表达与总生存期相关性。结果ESCC患者外周血细胞中PD-L1、PD-1和TCF-1 mRNA显著高于非癌对照者(P<0.05),其诊断ESCC的敏感性和特异性分别为0.58/0.68、0.92/0.64和0.95/0.58,AUC分别为0.66、0.84和0.78,且这3个mRNA分子表达呈正相关。PD-L1、PD-1、TCF-1 mRNA高表达的ESCC患者总生存期明显高于低表达者(P<0.05)。结论PD-L1、PD-1和TCF-1是ESCC潜在的诊断和预后生物标志物分子。

TAK1与TCF-4在非小细胞肺癌中表达及其相关性的初步研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中转化生长因子β激活激酶1(TAK-1)与T细胞因子-4(TCF-4)在mRNA以及蛋白水平的表达情况及其相关性,并分析两者与NSCLC患者临床病理因素的关系。方法收集NSCLC手术标本51例,每例均包含肺癌组织及配对癌旁组织,所有患者的术后诊断均经病理结果证实,通过RT-PCR以及Western blot法检测TAK1、TCF-4在癌组织及配对癌旁组织中的表达情况,并通过SPSS进一步分析两者的相关性及其与临床病理因素的关系。结果TAK1与TCF-4 mRNA以及蛋白水平在NSCLC患者癌组织中均高表达,其中TAK1蛋白的表达与NSCLC的TNM分期(P=0.022)、淋巴结转移(P=0.014)相关,TCF-4蛋白的表达与NSCLC的TNM分期相关(P=0.045)。TAK1在NSCLC组织中的表达与TCF-4呈正相关(r=0.427,P=0.002)。结论TAK1 mRNA及蛋白水平在NSCLC组织中均高表达,并与TCF-4呈正相关,TAK1有可能成为NSCLC诊断及预后的一个潜在靶标,并且TAK1与TCF-4的联合应用有可能成为一种更为理想的NSCLC辅助诊断及临床治疗方法。

转录因子TCF-1对HIV-1特异性CD8+T细胞免疫应答的调节作用

目的探究转录因子TCF-1对HIV-1特异性CD8^(+)T细胞免疫应答的调节作用。方法收集HIV-1感染者的外周血,使用HIV-1特异性抗原肽刺激病人PBMC(外周血单个核细胞),应用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞的数目、TCF-1和T细胞耗竭相关的标志物的表达水平,定量PCR技术检测外周血的HIV-1病毒滴度。结果本研究发现,HIV-1慢性感染者的HIV-1特异性CD8^(+)T细胞中的TCF-1高表达的细胞亚群具有较好的细胞效应功能、较低的抑制性受体TIM3表达水平,并且TCF-1+CD8^(+)T细胞数目与血清中的HIV-1病毒载量呈负相关关系。结论TCF-1对病毒特异性CD8^(+)T细胞控制HIV-1感染具有重要的作用。

加味消癥方对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的保护作用及对肾小管上皮细胞TGF-β_(1)/Smad3信号通路的影响

目的:探讨加味消癥方对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的保护作用及对肾小管上皮细胞TGF-β_(1)/Smad3信号通路的作用影响。方法:观察加味消癥方对慢性肾衰竭大鼠的血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、肾脏病理及肾组织中FN1、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达水平的影响;观察加味消癥方对TGF-β_(1)诱导肾小管细胞损伤中TGF-β_(1)、Smad3、LC3、Beclin1及P62蛋白表达的影响。结果:与模型组相比,加味消癥方高剂量组的Scr水平及加味消癥各组和缬沙坦组的24 h尿蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01);实时荧光定量PCR法检测提示加味消癥方高剂量组的FN1、Col-ⅠmRNA相对表达量、加味消癥方中剂量组和缬沙坦组的Col-ⅢmRNA相对表达量、高剂量组和缬沙坦组的TGF-β_(1)mRNA相对表达量以及高、中、低剂量组和缬沙坦组的Smad3 mRNA相对表达量均较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01);Western Blot法检测提示加味消癥方高、中剂量组和缬沙坦组的FN蛋白表达量、加味消癥方高剂量组的Col-Ⅰ蛋白表达量、加味消癥方高、低剂量组和缬沙坦组的Col-Ⅲ蛋白表达量以及高、中剂量组的Beclin1蛋白表达量均较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01);Masson染色观察加味消癥方高剂量组的肾间质纤维化程度显著减轻(P<0.01)。此外,该组的48 h/72 h细胞存活率显著升高(P<0.01)。结论:加味消癥方可有效提升细胞存活率,改善肾间质纤维化程度保护肾功能,可能是通过TGF-β_(1)/Smad3通路调控自噬水平,下调FN1、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ水平实现的。

TCF-4在肺癌中高表达并与肺癌的进展有关

背景与目的T细胞因子4(Tcellfactor4,TCF-4)是Wnt信号传导通路的重要分子,但其mRNA及蛋白在肺癌组织及细胞系中的表达情况和意义的相关研究较少。本研究的目的是检测TCF-4在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学(S-P法)检测120例肺鳞癌和肺腺癌患者及10例癌旁正常肺组织中TCF-4的表达;应用免疫荧光法检测肺癌细胞系及HBE(人正常支气管上皮)细胞系中TCF-4的表达水平及亚细胞定位;应用RT-PCR方法检测九种肺癌细胞系中TCF-4mRNA的表达水平。结果在120例肺鳞癌和肺腺癌组织标本中,96例为TCF-4高表达(80.0%),其中包括37例同时有细胞浆和核表达(30.8%)。TCF-4的高表达水平与患者的TNM分期正相关(P=0.022),10例癌旁正常肺组织无TCF-4表达。免疫荧光显示TCF-4蛋白在正常支气管上皮细胞系中表达极弱,而在肺癌细胞系中则出现明显的表达,主要定位于细胞核。TCF-4的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达并不一致,巨细胞癌细胞系中相对较高,而腺癌细胞系中表达较低。结论TCF-4的高表达与肺癌的进展密切相关,有效抑制TCF-4在肺癌中的高表达可能成为肺癌治疗的新途径。

弧焊机器人TCF参数的标定

本文介绍了一种利用机器人正运动学方程和空间坐标变换关系来求解机器人的末端执行器参数的方法 .通过应用于本实验室的九自由度弧焊机器人的操作机 (6 DOF)对此方法进行了验证 ,并给出了实验结果 ,而且分析了此标定方法的优点及不足之处 .

miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路抑制胃癌细胞系生长侵袭能力的体外研究

目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,TOP/FOP荧光素酶检测β-catenin/TCF-4活性,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果:脂质体介导的miR-200amimics转染SGC7901后,β-catenin/TCF-4蛋白的表达均降低,β-catenin的表达出现了细胞核向胞浆的转移。TOP荧光素酶活性下降2.27倍,而FOP荧光素酶活性基本不变。转染miR-200amimics组细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力比空白组和阴性对照组明显下降,细胞周期出现G_0/G_1期阻滞。结论:提高miR-200a表达可以降低β-catenin/TCF-4信号通路的活性,抑制SGC7901的生长侵袭迁移能力。

NGX6对Wnt/β-catenin通路β-catenin/TCF/LEF转录活化的影响

目的:探讨NGX6基因对结肠癌Wnt信号转导通路β-catenin/TCF/LEF转录活化的影响,明确NGX6在Wnt/β-catenin信号转导通路中的作用机制。方法:(1)构建β-catenin野生型真核表达载体pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT),(2)转染外源性pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT)及pCMV-myc-NGX6于COS-7细胞,TCF-4荧光素酶报告质粒检测转染NGX6前后TCF-4的转录活性。(3)无外源性β-cate-nin,pCMV-myc-NGX6单独转染COS-7细胞及结肠癌SW620细胞,TCF-4荧光素酶报告质粒检测TCF-4的转录活性,并采用Western blot的方法检测两组细胞核内β-catenin及TCF-4的表达。结果:(1)成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT);(2)pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT)与pCMV-myc-NGX6共转染COS-7细胞较pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT)单独转染时TCF-4荧光素酶活性明显下降(P<0.05);(3)无外源性β-catenin,pCMV-myc-NGX6转染COS-7及SW620细胞后TCF-4荧光素酶活性较空白质粒转染组下降(P<0.05);(4)NGX6转染COS-7及SW620后核内β-catenin及TCF-4的表达下降。结论:NGX6对结肠癌中Wnt/β-catenin通路的β-catenin/TCF/LEF转录活化具有负性调节作用,其作用机制可能与NGX6抑制β-catenin的核转位有关。

三倍体毛白杨EMCC纸浆TCF漂白的研究

经过实验室模拟的延伸改良连续蒸煮 (EMCC) ,得到EMCC纸浆 :白度 35 8%ISO ,卡伯值 1 2 3 ,粘度 966mg/L。对EMCC纸浆进行OQP全无氯漂白 ,通过对O段中NaOH用量和温度对氧脱木素效果的影响 ,确定O段最适宜的工艺条件为 :浆浓 1 0 % ,用碱量 3% ,MgSO40 5 % ,氧压 0 6MPa ,温度 95℃ ,时间 60min。通过对Q段中不同EDTA用量和初始pH值对后续H2 O2 漂白效果影响的研究 ,确定较适宜的工艺条件为 :浆浓 1 0 % ,EDTA用量 0 3 % ,初始pH值 3 ,温度 70℃ ,时间 60min。P段较适宜的工艺条件为 :浆浓 1 0 % ,H2 O2 用量 3 % ,MgSO40 1 % ,NaOH 1 5 % ,温度 90℃ ,时间 1 80min。在优化的OQP条件下 ,EMCC纸浆的白度可达 80 %ISO以上 ,并保持较好的强度。

ECF和TCF漂白是造纸工业可持续发展的方向

介绍了当前我国纸浆漂白的现状及存在的问题,并从可持续发展的角度论述了ECF和TCF漂白 的重要性和必要性,指出ECF和TCF漂白是解决制浆工业面临的化工药品浪费大、纸浆产品档次低和污 染严重等问题的有效途径。并提出了发展ECF和TCF漂白的相关先进技术和建议。

基于平面模板的机器人TCF标定

针对末端夹持激光位移传感器的机器人TCF(tool/terminal control frame)标定,提出一种基于平面模扳的标定方法,机器人操作末端执行器使激光位移传感器在不同位形下对平面模板进行测量,再通过非线性最小.乘拟合求解标定参数.为了减小问题的奇异性,对标定时应该采取的参数控制策略进行了定性分析.该标定方法只需要一块表面精度较高的平面模板,而无需其它测量仪器,标定过程简单、易操作,且易于实现自动己.仿真和实验结果表明本文提出的标定方法具有较高的精度.

Wnt/β-catenin-TCF信号通路介导溃疡性结肠炎相关癌变分子机制研究

溃疡性结肠炎相关癌变机制尚未明确,可能与炎症反复发作以及炎症细胞产生多种细胞因子、活性氧等因素,激活经典的Wnt/β-catenin-TCF通路突变,出现结肠黏膜上皮细胞反复坏死、再生、增殖,甚至癌变。该文主要探讨Wnt/β-catenin通路介导溃结癌变相关机制研究进展。

APC/β-catenin/TCF通路在奥曲肽调控结肠癌SW480中的分子机制

目的:研究奥曲肽(Octrotide,OCT)对结肠癌SW480细胞中APC/β-catenin/TCF通路各热点分子在mRNA水平和蛋白水平表达量的影响,初步探讨OCT调控SW480细胞APC/β-catenin/TCF通路的分子靶点.方法:(1)mRNA检测:体外培养人结肠癌SW480细胞,分为对照组和OCT组(10-10mol/L),分别提取两组细胞的总RNA,以RT-PCR法检测APC2、AXIN、CK1α、CyclinD1、FZD7的mRNA,筛选出两组细胞5个基因mRNA的表达差异;(2)蛋白检测:体外培养人结肠癌SW480细胞,分为对照组和OCT1、2、3组(10-14、10-12、10-10mol/L),分别提取4组细胞的总蛋白,以Western blot法检测APC2、CK1α、CyclinD1的蛋白质,鉴定4组细胞中3个基因在蛋白水平的表达差异.结果:(1)mRNA检测:OCT组(10-10mol/L)中APC2、CK1α的mRNA表达上调(均P<0.05),CyclinD1的mRNA表达下调(P<0.05),AXIN和FZD7的mRNA改变无统计学意义(P>0.05);(2)蛋白检测:OCT1、2、3组中APC2、CK1α蛋白表达上调(P<0.05),CyclinD1蛋白表达下调(P<0.05),且呈浓度依赖性.结论:OCT通过强化APC2、CK1α"负反馈"调节作用,下调靶基因CyclinD1,负性调控结肠癌SW480中APC/β-catenin/TCF通路.

改良硫酸盐桉木浆TCF漂白

改良硫酸盐桉木浆氧脱木素后经二甲基二环氧乙烷（ＤＭＤ）处理，脱木素率达７３％，之后再加一段碱处理（Ｅ），脱木素率进一步提高到８４％；采用ＯＴＱＰ、ＯＴＥＱＰ和ＯＴＥＰＱＰ漂序可将巨尾桉深度脱木素浆分别漂白到９００％、８９７％和９０２％ＩＳＯ白度。

健脾补肾方对辐射损伤小鼠β-catenin、TCF及PPARγ蛋白表达的影响

目的研究健脾补肾方对辐射损伤模型小鼠β-链蛋白(β-catenin)、T细胞因子(TCF)及过氧化酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白表达的影响,探讨其对造血功能的调控机制。方法采用6.0 Gy X射线照射建立辐射损伤模型小鼠,然后将造模成功小鼠随机分为模型组、健脾补肾方小剂量组(100%浓度)、健脾补肾方大剂量组(200%浓度)、阿胶浆组,每组12只。另随机选取12只正常小鼠作为正常组。正常组、模型组给予生理盐水0.2m L/10 g灌胃,2次/d,其余3组分别用健脾补肾方小剂量、大剂量和阿胶浆混悬液0.2 m L/10g灌胃,2次/d。9 d后处死小鼠,取血检测外周血白细胞计数,收集骨髓检测β-catenin、TCF及PPARγ蛋白表达情况,制作骨髓病理切片观察骨髓病理改变情况,测定脂肪空泡面积。结果模型组外周血白细胞计数及β-catenin、TCF蛋白表达量明显低于正常组(P均<0.05),PPARγ蛋白表达量及骨髓脂肪空泡面积均明显高于正常组(P均<0.05);健脾补肾方小剂量组、健脾补肾方大剂量组、阿胶浆组外周血白细胞计数及β-catenin、TCF蛋白表达量均明显高于模型组(P均<0.05),PPARγ蛋白表达量及骨髓脂肪空泡面积均明显低于模型组(P均<0.05),尤以小剂量组明显。结论健脾补肾方可通过增强β-catenin/TCF通路的转导,抑制下游靶基因PPARγ的表达,从而抑制骨髓脂肪化,促进骨髓造血功能的重建。

KMnO_4用于麦草浆TCF漂白的研究

探讨了ＫＭｎＯ４对纸浆的漂白作用和活化作用。结果表明，ＫＭｎＯ４是一种良好的漂白剂和活化剂，具有替代Ｏ３漂白的可能性。Ｏ—Ｍｎ—Ｐ和Ｏ—Ｍｎ—Ｑ—Ｐ漂序可将ＮａＯＨＡＱ麦草浆漂至８０％ＩＳＯ，从而彻底避免了氯化有机物的生成。

奥曲肽对结肠癌SW480细胞Wnt通路β-catenin/TCF及下游靶基因表达的影响

目的研究不同浓度奥曲肽对结肠癌SW480细胞增殖以及对SW480细胞Wnt／β-catenin信号通路的影响，阐明其抗肿瘤的作用机制。方法采用MTT比色法测定不同浓度奥曲肽对SW480细胞增殖的抑制作用；应用Westernblot法分析不同浓度奥曲肽对SW480细胞核中β—catenin、TCF-4及Wnt信号通路下游靶分子C—myc、CyclinDl蛋白表达的影响。结果奥曲肽可抑制SW480细胞的增殖，并在10-10～10-8M浓度范围内呈剂量依赖性，在48h内呈时间依赖性，浓度为10-8M时抑制作用最强，浓度为10-11M以下对细胞增殖无抑制作用。浓度为10-6、10-8、10-10M的奥曲肽对β—catenin蛋白、TCF-4蛋白、C—myc蛋白及CyclinDl蛋白的表达有明显抑制作用，与未经奥曲肽处理的细胞比较有统计学意义（均P〈0．01）。结论奥曲肽对Wnt／β-catenin信号通路的抑制作用可能是通过减少β—catenin在细胞核内的聚集，抑制TCF-4的激活，从而抑制下游靶基因C—myc及CyclinDl。

miR-454-3p靶向TCF-4对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨miR-454-3p与TCF-4的靶向关系,以及对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法miR-454-3p mimic和(或)pLV-TCF-4转染GRC-1细胞后,采用qRT-PCR法检测miR-454-3p和TCF-4 mRNA水平;Western blot法检测TCF-4蛋白的表达;双荧光素酶报告实验验证miR-454-3p与TCF-4的靶向关系;MTT法检测细胞增殖情况;Hoechst染色检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移能力;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果miR-454-3p mimic抑制TCF-4 mRNA和蛋白的表达;pLV-TCF-4缓解miR-454-3p对TCF-4蛋白表达的抑制作用。miR-454-3p mimic与TCF-4野生型报告载体共转,荧光素酶活性降低;与TCF-4突变型报告载体共转后,荧光素酶活性无明显变化。与GRC-1组相比,miR-454-3p mimic转染到GRC-1细胞后,细胞增殖倍数明显降低(P<0.01),细胞凋亡率由(5.08±1.21)%增加到(23.12±1.82)%,伤口愈合率由(58.43±6.32)%降低到(32.15±5.16)%,侵袭细胞数目由113.54±9.27减少至51.21±6.03;共转染miR-454-3p mimic和pLV-TCF-4后,能够逆转上述改变。结论miR-454-3p可通过靶向TCF-4抑制人肾癌细胞GRC-1的增殖和迁移,诱导细胞凋亡。

竹材化学浆ECF/TCF漂白技术

目前新建漂白竹浆企业时应该考虑使用ECF或TCF漂白技术。杂竹EMCC深度脱木质素硫酸盐浆经三段ECF漂序DQP、D0(EOP)D1可以漂白至80%ISO;另一种竹材硫酸盐浆使用低ECF漂白EopD(PO),可漂白至88%ISO;国外的一种竹材硫酸盐浆氧脱木质素后,使用DE(D/N)D、D(EOP)DP、D(EOP)D(PO)、D(EOP)QP或D(EOP)Q(PO)等ECF三段漂白,可漂白至88%～90%的白度。竹材硫酸盐浆使用Eop(ZQ)(PO)、EopA(PO)(PO)等三段或四段TCF漂白,也能够漂白至88%～90%ISO的白度,同时纸浆具有符合要求的黏度和强度性能。竹材硫酸盐浆漂白推荐的ECF漂序为OD(EOP)D(PO)、OD(EOP)DP;L-ECF漂序为OD(EOP)Q(PO);TCF漂序为Eop(ZQ)(PO)(PO)、O(ZQ)(PO)(ZQ)(PO)。