H9N2亚型禽流感病毒M1和NA基因在昆虫细胞中的表达

为通过昆虫细胞表达出H9N2亚型禽流感病毒M1和NA蛋白,并鉴定其免疫活性,利用PCR技术扩增H9N2亚型禽流感病毒M1和NA基因,以pFastBacDual为转移载体构建重组转移载体pFastBacDual-M1和pFastBacDual-NA;将阳性重组转移载体分别转化至DH10Bac感受态细胞,得到重组杆粒rBacmid-M1和rBacmid-NA;将重组杆粒分别转染Sf9昆虫细胞,获得含M1和NA基因的重组杆状病毒rBV-M1和rBV-NA;运用IFA和Western-blot鉴定M1和NA蛋白的表达情况,同时以NA蛋白为包被抗原,运用间接ELISA方法鉴定NA蛋白的反应活性。结果显示,IFA鉴定均出现特异性绿色荧光,Western-blot检测M1和NA蛋白大小分别约为28和52 ku,ELISA检测NA蛋白对抗H9N2阳性血清有很高的反应值。结果表明,M1和NA蛋白可在昆虫细胞中特异性表达且具有反应原性。本试验为进一步研发H9N2亚型禽流感诊断技术和疫苗奠定了基础。

根治手术治疗pT_(2-3)N_(0-1)M_(0)期胸段食管鳞癌的临床预后分析

目的探讨pT_(2-3)N_(0-1)M_(0)期胸段食管鳞癌患者根治术后的预后生存状况及影响因素。方法选取2017年1月—2019年11月于新疆医科大学第一附属医院行根治手术治疗的138例pT2-3N0-1M0期胸段食管鳞癌患者,回顾性整理分析所有患者临床及随访资料。患者在手术治疗后1年内需3~6个月复查1次,之后6~12个月复查1次,3年后复查改为每年1次。全组患者术后随访至2022年12月。统计患者治疗后局部复发、淋巴结转移、生存等预后情况,使用Logistic回归分析影响pT2-3N0-1M0期胸段食管鳞癌患者预后的因素。结果138例患者中129例患者完成随访,随访率为93.48%;术后3年内预后不良患者78例,预后良好患者51例,预后不良率为60.47%。不同预后患者的年龄、性别构成、肿瘤位置、术后是否辅助化疗及组织学分化程度比较,差异均无统计学意义(P>0.05);预后不良组pT_(3)期、p N_(1)期、合并脉管瘤栓、肿瘤直径>3 cm患者所占比例高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,pT_(3)期、p N_(1)期、合并脉管瘤栓以及肿瘤直径>3 cm是影响食管鳞癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论pT2-3N0-1M0期食管鳞癌患者预后情况与pT和pN分期、合并脉管瘤栓情况、肿瘤直径密切相关。pT_(3)期、pN_(1)期、合并脉管瘤栓以及肿瘤直径>3 cm是影响食管鳞癌患者预后不良的危险因素。临床上对于存在上述危险因素的患者需予以重视,并早期进行干预,以降低预后不良的发生风险。

航测单模型(m+1)(2n+1)个标准点的相对定向

将6个标准点的航测单模型相对定向扩充为(m+1)(2n+1)个标准点的相对定向。

T1-2N0M0喉鳞癌单纯放射治疗患者的预后因素分析

目的 探讨单纯放射治疗(简称放疗)的早期喉鳞癌患者的生存预后,为优化治疗方案提供参考。方法 回顾分析2010年1月1日—2018年12月31日及前瞻分析2019年1月1日—2021年12月31日期间病理确诊为T1-2N0M0喉鳞癌且在我科接受根治性放疗的患者的临床资料。采集患者的年龄、性别、分期、放疗方式、放疗剂量、免疫生化指标等信息,规律随访并统计患者的预后因素。结果 回顾入组患者95例,其中T1期76例、T2期19例;接受三维适形放疗(3-DCRT)93例、调强放疗(IMRT)2例;患者的1年、2年、5年总生存率(OS)分别为98.9%±1.1%、95.5%±2.2%、85.9%±4.0%。前瞻入组患者66例,其中T1期31例、T2期35例;一半以上患者接受容积调强放疗(VMAT);1年、2年OS分别为100%和97.2±2.7%,均优于回顾入组患者。年龄、分期、Ki67表达水平未对预后产生明显影响。结论 早期单纯放疗的喉癌患者,预后很好,而且随着放疗技术的改进,前瞻入组患者比回顾入组患者的远期预后更好。

人高致病性禽流感病毒H5N1安徽株HA、M2蛋白双顺反子表达载体的构建及表达研究

将我国分离的人H5N1亚型禽流感病毒A/Anhui/1/2005作为研究对象,扩增其HA和M2基因片段并克隆至DNA疫苗表达载体pVRC中,构建成真核表达质粒。为提高HA的表达量,按照人偏爱密码子将HA基因进行优化改造,经全基因合成后插入真核表达载体pVRC,以β-actin蛋白为内参比证明了优化后的HA蛋白表达效果明显提高。将M2基因和优化后的HA基因共同克隆入双顺反子表达载体pIRES中,获得同时表达HA或M2的双顺反子真核表达质粒;通过Western blot和间接免疫荧光检测方法,确认构建的重组质粒在真核细胞中成功地表达了目的蛋白HA和M2。通过上述结果为进一步开展人高致病性禽流感病毒安徽株HA和M2基因的功能与致病性研究及使用表达HA和M2蛋白进行新型人用禽流感双价疫苗研发奠定基础。

H1N2亚型猪流感病毒HA、NP、NA、M和NS基因的克隆与序列分析

对3株H1N2亚型猪流感病毒（SIV）：Sw／GX／17／05、Sw／HN／I／05和Sw／GX／13／06的血凝素（HA）、核蛋白（NP）、神经氨酸酶（NA）、基质蛋白（M）和非结构蛋白（NS）基因进行克隆和序列分析。结果显示：3株分离毒株HA、NP、NA、M和NS基因之间核苷酸同源性分别为91．3％～98．0％、98．4％～98．8％、97．4％～98．3％、98．8％～99．8％和98．1％～98．4％。遗传进化分析显示：分离毒株与美国分离的三源基因重排HIN2sIV具有较近的亲缘关系；在HA、NP、M和NS基因进化树中，3株分离毒株均位于古典H1N1亚型SIV群，在NA基因进化树中，3株分离毒株则位于人流感病毒群。HA和NA基因推导氨基酸序列分别与代表毒株古典H1N1SIVA／swine／Maryland／23239／1991（H1N1）和人H3N2流感病毒A／BuenosAires／4459／96（H3N2）比较分析显示：HA（95．4％～96．1％）和NA（96．6％～97．2％）具有较高的氨基酸同源性；糖基化位点、抗原位点和受体结合位点（HA）处氨基酸存在一定的差异，这些氨基酸差异对病毒生物学特性的影响有待于进一步研究。

CHK1-CDK1通路介导的G2/M检验点对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨检查点激酶1(CHK1)-细胞周期依赖激酶1(CDK1)信号通路异常与上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的关系。方法:分别将CDK1、CHK1基因特异性shRNA质粒及阴性对照质粒转染卵巢上皮性癌SK-OV-3、OVCAR-3细胞,分别采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡情况,分别采用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中CDK1和CHK1的表达情况,采用Western blot法检测各组细胞中p-CDK1、Cyclin B1、p-CHK1(ser345)、CDC25C、p-CDC25C以及增殖和凋亡相关蛋白PCNA、Ki-67、Caspase8、Cleaved-Caspase3的表达情况。结果:分别沉默CDK1、CHK1基因后,SK-OV-3和OVCAR-3细胞增殖受到抑制、凋亡率增加;PCNA、Ki-67蛋白表达减少,Caspase8、Cleaved-Caspase3蛋白表达增加(P<0.05)。此外,沉默CHK1基因可引起p-CHK1和p-CDC25C表达减少、p-CDK1蛋白表达升高(P<0.05)。结论:CHK1-CDK1信号通路介导的G2/M检验点参与调节卵巢癌细胞的增殖和凋亡。

m/(n+1)公式可以休矣!——水文频率分析中绘点位置的研究

我国的水文频率分析习惯采用适线法,长期是以期望值公式(P_((m))=m/(n+1))计算绘点位置。但是,由这套适线法求得的设计值是有偏差的,其原因就在于所取的绘点位置不合适。本文建议了一套以纵标期望值P{E[X_((m))]}为绘点位置的“动点动线”适线程序。实践表明建议的程序是可行的,计算成果也是合理的。本文还进一步通过统计试验途径,对两种绘点位置的适线法作了检验,结果表明新适线法在不偏性和有效性两个方面都有显著改进。

胃裸区清扫联合D2根治术治疗T_(1-3)N_(0-2)M_0近端胃癌的临床疗效

目的对胃裸区清扫联合D 2根治术治疗T1-3N0-2M0近端胃癌的临床疗效展开对比分析。方法选取62例T1-3N0-2M0近端胃癌患者分为治疗组和对照组(n=31),比较2组患者临床治疗效果。结果 2组患者临床治疗总有效率、复发率和3年生存率分别为87.10%、9.68%、58.06%和64.52%、32.26%、35.48%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者治疗后生活质量指数评分显著高于对照组患者和治疗前的,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在治疗T1-3N0-2M0近端胃癌临床上胃裸区清扫联合D 2根治术效果较为理想。

(m,n)型二重(r_1,r_2)-循环矩阵的逆和广义逆

利用矩阵的Kronecker积给出了非奇异的(m,n)型二重(r1,r2)-循环矩阵求逆矩阵的一个计算公式,同时该方法还可以推广到求奇异的(m,n)型二重(r1,r2)-循环矩阵的反射g逆.

M_nAr(n=1,2;M=Cu、Ag、Au)分子的从头算研究

使用相对论赝式及相应的基组,在从头算(Ab initio)方法中Hartree-Fock(HF)、Mller-Plesset(MP2)理论水平上研究贵金属与稀有气体氩掺杂所组成的MnAr(n=1,2;M=Cu、Ag、Au)分子体系的几何结构与稳定性。结果显示,贵金属与Ar原子之间相互作用较小,必须进行基组重叠误差修正EBSSE计算其结合能。含Au的分子体系的结合能最大,稳定性较强,能隙Egap最大,化学活性弱。含Ag的分子体系能隙最小,化学活性最强。电子相关效应对M-Ar的键长修正非常显著,而对M-M键长和M-M-Ar键角的修正很小,电子相关效应使键长缩短、振动频率提高、能量降低、使分子的结构更加紧密,使体系更加稳定。

D2根治术联合胃裸区清扫治疗T_(1-3)N_(0-2)M_0近端胃癌临床效果分析

目的探究T_(1-3)N_(0-2)M_0近端胃癌采用胃裸区清扫联合D2根治术治疗的临床疗效。方法选取T_(1-3)N_(0-2)M_0近端胃癌患者50例,随机数字法分为2组,各25例。对照组患者均采用D2根治术治疗,观察组患者均采用胃裸区清扫联合D2根治术治疗,观察比较2组患者治疗效果。结果观察组患者3年生存率为76.0%,复发率为20.0%;对照组患者3年生存率为40.0%,复发率为36.0%,观察组均明显优于对照组(P<0.05)。结论 T_(1-3)N_(0-2)M_0近端胃癌采用胃裸区清扫联合D2根治术治疗,可有效提高患者3年生存率,延长患者生命,并降低患者复发率,临床疗效显著,应用价值高。

D2根治术联合胃裸区清扫治疗T1-3N0-2M0近端胃癌的疗效及对患者生存率的影响

目的探讨针对T1-3N0-2M0近端胃癌患者,临床治疗中采取D2根治术+胃裸区清扫的手术治疗方式对患者疾病的治疗效果。方法选取2017年2月至2018年5月本院收治的84例患者并随机分成两组,每组42例。对照组单纯实施D2根治术治疗,实验组采取D2根治术联合胃裸区清扫治疗,比较两组治疗效果及生存率。结果实验组治疗总有效率为88.10%,高于对照组的61.91%,差异具有统计学意义(P<0.05);与术后1个月比较,两组术后3、6个月生活质量评分均明显提高,且实验组高于对照组(P<0.05);实验组2年期生存率为92.86%,明显高于对照组的76.19%(P<0.05)。结论针对T1-3N0-2M0近端胃癌,采取D2根治术联合胃裸区清扫治疗效果显著,患者远期生存率高,值得临床推广应用。

T1-3N0-2M0近端胃癌采用胃裸区清扫联合D2根治术治疗的临床分析

目的:探讨T1-3N0-2M0近端胃癌患者的治疗过程中,应用胃裸区清扫联合D2根治术治疗的临床效果。方法:选取大邑县人民医院2013年6月-2014年8月收治的80例T1-3N0-2M0近端胃癌患者作为研究对象,随机分为观察组与对照组各40例。观察组应用胃裸区清扫联合D2根治术治疗,对照组仅应用D2根治术进行治疗,观察对比两组患者临床治疗效果。结果:观察组治疗总有效率为95.0%,对照组治疗总有效率为70.0%,治疗效果明显低于观察组,组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:T1-3N0-2M0近端胃癌患者的治疗过程中,应用胃裸区清扫联合D2根治术治疗具有较好效果。

T1-2N1M0期乳腺癌术后同步放化疗对YY-1阳性表达患者治疗效果的影响

目的探讨T1-2N1M0期乳腺癌术后同步放、化疗对阴阳因子-1(YY-1)阳性表达患者疗效的影响,为T1-2N1M0期乳腺癌术后辅助治疗方法选择提供参考。方法选取行改良乳腺癌根治术治疗、病理分期T1-2N1M0期、YY-1阳性表达的乳腺癌患者200例,随机分为对照组和研究组,各100例。均采用AC(阿霉素+环磷酰胺)或AC-T(阿霉素+环磷酰胺-多西他赛)方案行术后辅助化疗,研究组同时给予放疗。随访观察患者局部控制率及生存率。结果对照组局部控制率及3年生存率分别为80.23%、89.53%,低于研究组的93.26%、97.75%。结论 T1-2N1M0期、YY-1阳性表达的乳腺癌患者术后给予同步放、化疗,较单纯化疗比较,有助于提高局部控制率及3年生存率。

关于Z_p上的(m,n)型二重(r_1,r_2)-循环矩阵的逆

采用扩展的Euclid算法讨论Zp上的(m,n)型二重(r1,r2)-循环矩阵的求逆问题。复数域C上的(m,n)型二重(r1,r2)-循环矩阵的求逆问题已经有了很多结果,但对于Zp上的二重循环矩阵的研究都很少,也没有给出具体计算方法。用张量积将Zp上的(m,n)型二重(r1,r2)-循环矩阵的求逆问题转化为求环上二元多项式的乘法逆,由于该二元多项式的系数是Zp上的,没有具体算法可以采用。将计算机代数中求多项式的逆矩阵的方法推广后,给出了求Zp上的(m,n)型二重(r1,r2)-循环矩阵的逆的具体算法步骤。

术后放疗在pT1-2N0M0乳腺癌中的作用——基于倾向性匹配评分法分析

目的通过分析pT1-2N0M0乳腺癌根治术后复发的高危因素,并应用倾向评分匹配法(PSM)分析探讨术后放疗获益的亚组患者。方法收集1998年8月-2008年8月的pT1-2N0M0乳腺癌根治术后患者993例,按是否行术后放疗分为放疗组(PMRT)和未放疗组(NPMRT),对NPMRT组通过COX多因素分析复发预后因素,根据影响局部复发独立因素个数,建立危险亚组(低危组、中危组和高危组)。对PMRT与NPMRT组间的临床病理特征进行倾向性评分匹配,匹配后的人群采用Kaplan-Meier法分析术后放疗作用。结果在低、中危组中放疗对局部区域复发率或总生存率的差异无统计学意义(P=0.715/0.215、P=0.880/0.377),高危组中的差异有统计学意义(P=0.035/0.034)。结论pT1-2N0M0患者总体复发率较低,但其中同时具有肿瘤直径≥4 cm、未绝经者、肿瘤位置(位于内侧或中央区)和雌激素受体(ER)阴性等的高危复发亚组患者5年局部区域复发率(LRR)高达21.1%,需给予术后放疗降低局部复发。

G1-like与F/98-like进化谱系的P B2、M基因在H5N6亚型禽流感病毒重配中的竞争优势研究

为评价不同H9N2亚型病毒供体在H5N6亚型禽流感病毒(AIV)重配中的作用,本研究选取全套内部基因与S基因型H9N2 AIV高度同源的3株H5N6 AIV流行株MZ34、YB0597和JT131,利用反向遗传学技术在MZ34的8基因重组质粒基础上另外添加F/98-like来源的PB2和M质粒,即以MZ34(8)+F/98(PB2+M)的10质粒组合(Group 1)共转染细胞进行重组H5N6病毒的竞争性拯救;PCR扩增经3轮空斑纯化后PCR扩增拯救病毒的PB2和M基因并测序鉴定。同时,为排除来源于同一母本病毒的8质粒易于自我组合包装的可能干扰,又将MZ34的PB2和M质粒替换为YB0597或JT131来源的质粒,构成另外的2种10质粒组合Group 2:MZ34(6)+YB0597(PB2+M)+F/98(PB2+M)和Group 3:MZ34(6)+YB0597(PB2)+JT131(M)+F/98(PB2+M),经共染获得拯救病毒,对其PB2和M基因PCR扩增后测序鉴定。结果显示,从Group1、Group 2和Group 3中拯救获得的重组H5N6病毒中PB2基因的构成情况S∶H分别为41∶23、48∶15以及37∶19,M基因的构成情况S∶H分别为40∶24、31∶32以及25∶31,而PB2和M基因的组合情况SS∶SH∶HS∶HH分别为27∶14∶13∶10、26∶22∶5∶10以及17∶20∶8∶11。表明相较于H型的F/98-like PB2与M基因,S型的G1-like PB2基因在各10质粒转染组的拯救的H5N6病毒重配中具有更显著的竞争优势,而G1-like M基因仅在Group 1组拯救的重组病毒中表现出优势,但G1-like PB2与M基因间的竞争优势叠加效应不明显。本研究为解析S基因型H9N2 AIV作为H7N9、H10N8等新型重组流感病毒内部基因供体的相关机制提供重要参考。

Cu_(m)-Fe_(n)/Ti_(1-x)Sn_(x)O_(2)复合催化剂的脱硝性能及抗硫活性

采用共沉淀法制备Ti_(1-x)Sn_(x)O_(2)复合氧化物,浸渍负载质量分数10%的CuO_(x)和FeO_(y)活性组分,制备一系列Cu_(m)-Fe_(n)/Ti_(1-x) Sn_(x)O_(2)催化剂。探究不同Ti/Sn和Cu/Fe(物质的量比)对Cu_(m)-Fe_(n)/Ti_(1-x)Sn_(x)O_(2)催化剂的NH_(3)-SCR反应活性的影响。研究结果表明,Ti_(0.67)Sn_(0.33)O_(2)载体可促进活性组分CuO_(x)和FeO_(y)的相互作用。当Cu/Fe为3∶1时,在300℃下NO_(x)的转化率达到91.3%;向反应体系通入286 mg/m^(3) SO_(2)反应3 h后,NO_(x)的转化率仅下降2.6%。X射线光电子能谱(XPS)、程序升温还原(H_(2)-TPR)、程序升温脱附(NH_(3)-TPD和NO_(x)-TPD)的表征表明,CuO_(x)和FeO_(y)之间存在相互作用,与单一的Cu/Ti_(0.67)Sn_(0.33)O_(2)和Fe/Ti_(0.67)Sn_(0.33)O_(2)对比,复合催化剂表面吸附氧浓度相对增加15%~33%,总酸量增大56%,从而提高了催化剂脱硝活性。

AX=b在(m,n)型二重(r_1,r_2)-循环矩阵中的反问题

给出线性方程组AX =b反问题在 (m ,n)型二重 (r1,r2 ) 循环矩阵类中有解的充分必要条件和充分条件 .