温郁金和川郁金的PAPD研究

目的：探讨用ＰＡＰＤ技术解决Ｃｕｒｃｕｍａ属植物和药物分类存在的问题和争议。方法：对温郁金Ｃ．ｗｅｎｙｕｊｉｎ和川郁金Ｃ．ｓｉｃｈｕａｎｅｎｓｉｓ进行了ＰＡＰＤ研究。结果：２种亲缘关系很近，聚类结果表明难以从ＤＮＡ水平上把二者划分为２个种。结论：结合化学和形态资料，我们认为２种应予以合并，学名应用Ｃ．ｗｅｎｙｕｊｉｎ，但温郁金和川郁金经长期栽培，化学品质有一些区别，可分为２个药材品种。同时也指出了用花葶中央出和侧生作为分类依据值得商榷。此外，还证明温郁金与毛郁金Ｃ．

应用PAPD方法对鸡败血霉形体DNA多态性的研究

用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法，通过筛选的５个随机引物（ＯＰＨ－０２，ＯＰＨ－０５，ＯＰＨ－０７，ＯＰＨ－１３，ＯＰＧ－１６），对１４株鸡败血霉形体（ＭＧ）国际标准株和国内分离株进行了ＤＮＡ多态性研究。结果表明，５个引物共产生２１种条带，其中有３个条带分别为２个菌株所特有，扩增产物片段的长度在１５０～４５００ｂｐ之间，所有菌株均有１条共同条带，以ＯＰＨ－０５扩增产物的多态性最丰富。根据样品ＤＮＡ所获得的菌株间相似性指数表明，Ｄ９６０３与Ｄ９６０７相似指数最高，Ｓ６，Ｋ３９１３和Ｄ９６０４三者相互间相似性指数最低。提示ＲＡＰＤ方法可用于霉形体遗传标记的分析。

PAPD和POD分析技术在金银花品种鉴定中的应用

采用 RAPD标记与 POD分析方法对金银花两品系进行了分析 ,试图从 DNA分子水平上为两品系的鉴别提供依据。实验结果表明 ,RAPD技术可有效用于金银花两品系的分类与鉴别 ,POD图谱亦有一定的差异。

PAPD4基因缺失影响小鼠的运动功能

目的研究PAPD4基因敲除对小鼠行为和生理状态的影响。方法按性别、基因型将小鼠分为雄性对照、雄性全敲、雌性对照和雌性全敲。开放场、水迷宫、血糖检测、血压检测、T迷宫、糖水偏好和强迫游泳。结果雌性敲除鼠在开放场中的运动速度(P<0.05)和总运动距离(P<0.001)显著少于雌性对照。雌、雄敲除鼠在水迷宫中的运动速度低于同性对照,且雌性小鼠在第6次和第9次训练的运动速度存在显著低于对照(P 6<0.05,P 9<0.05);雄性小鼠在第4次和第9次训练的运动速度存在显著低于对照(P 4<0.01,P 9<0.05)。此外,雄性敲除鼠的基线血糖水平显著低于雄性对照(P<0.05);禁食16 h,其血糖水平显著高于对照(P<0.05),且禁食前后的血糖改变量显著低于对照(P<0.01)。结论PAPD4基因缺失可能影响小鼠的运动功能,并影响雄性小鼠的血糖水平。

安徽野生香菇ISSR和PAPD分析的比较

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)和简单序列重复区间扩增多态性(In ter-s im p le sequencerepeat,ISSR)技术,利用12条RAPD引物和10条ISSR引物对10个安徽香菇菌株进行了DNA标记比较分析。结果表明,ISSR-PCR较RAPD-PCR稳定,更具可操作性;供试菌株存在比较显著的遗传变异,具有较丰富的遗传多样性。

miR-200调控PAPD5蛋白对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响

目的观察MiR-200调控PAPD5蛋白对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响。方法应用qPCR检测miR-200在卵巢癌细胞株和卵巢癌组织中的表达;蛋白免疫印迹检测miR-200调节PAPD5的表达;Transwell侵袭实验检测miR-200的表达对卵巢癌A2780的侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-200的表达对卵巢癌A2780的迁移能力的影响。结果 miR-200在卵巢癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织,在A2780卵巢癌细胞株中的表达水平高于ES2和SKOV3细胞株(P<0.05)。miR-200-mimic组PAPD5蛋白水平低于对照组,A2780的细胞活性、细胞迁移率、穿膜细胞数高于对照组(P<0.05)。结论 miR-200可以通过调控PADA5的表达影响调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。

宫井洋大黄鱼遗传多样性的RAPD分析

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对取自宁德官井洋闽—粤东族大黄鱼的野生种群和养殖群体进行遗传多样性分析 .结果表明 ,野生种群的平均多态性为1 8 9% ,平均遗传差异度为 0 0 96 0 ;养殖群体的分别为 1 6 7%和 0 0 747;野生种群与养殖群体之间的相似系数为 0 995 9,遗传距离为 0 0 0 41 .分析结果表明官井洋大黄鱼野生种群和养殖群体遗传多样性水平较低的主要原因在于过度捕捞、有效繁育群体数量偏少及值得探讨的人工放流等 .提出官井洋大黄鱼仍具有一定的变异潜力 ,尽快采取有效的管理保护措施 ,可以保持乃至提高大黄鱼现有的遗传多样性水平 .

我国棉花抗枯萎病品种的遗传多样性分析

利用RAPD标记从分子水平上对在生产上有较大影响的 5 1个抗枯萎病陆地棉品种进行了遗传多样性分析。 5 1个陆地棉品种在 4 1个具多态性的随机引物上扩增得到 82个多态性位点。应用NTSYS pc 1.80数据分析软件 ,非加权组平均法 (UPGMA)聚类。 5 1个品种之间的平均成对Jaccard’s相似系数为 0 .5 98。有 17.1%的品种对在遗传上相似性较大 ,相似系数大于 0 .70 0。品种对相似系数在平均值附近 [0 .5 0 0 ,0 .70 0 ]区间上所占的比例最大 ,为 6 6 .9%。遗传差异较大 (相似系数小于 0 .5 0 0 )的品种所占的比例仅为 16 %。总体来说 ,我国抗枯萎病棉花品种之间的相似性较高。我国陆地棉品种资源整体上遗传多样性水平低下 ,以及我国抗枯萎病品种资源狭窄的遗传基础是导致陆地棉品种遗传多样性较贫乏的重要因素。从亚洲棉、海岛棉和其它棉属种内引进抗病基因成为棉花抗枯萎病育种取得突破性进展的关键。研究同时以相似系数矩阵为基础 ,构建了 5 1个抗枯萎病陆地棉品种的UPGMA树状聚类图。

板栗优良品种(无性系)苗木分子标记鉴别研究

利用RAPD标记对浙江省林木良种审定委员会审定 (认定 )和通过省级鉴定的 8个板栗品种及无性系进行指纹分析 ,鉴别出各板栗品种 (无性系 )。实验过程中对 684个随机寡核苷酸引物进行了重复筛选 ,经筛选共获得 9个稳定的RAPD标记 ,构建了板栗的DNA指纹图谱。经过大量的实验 ,确定了鉴别板栗优良品种 (无性系 )的较为理想的实验程序 ,获得了RAPD良好的重复性 ,建立了较完整的板栗RAPD分析的技术体系 ,用大田苗进行初步验证 。

中国野生葡萄果实抗炭疽病基因的RAPD标记

以葡萄种间杂交组合 88 110 [毛葡萄 83 4 96 (♀ )×欧洲葡萄粉红玫瑰 ]的F1群体为试材 ,运用RAPD技术 ,采用集群分离分析 (bulkedsegregantanalysis,BSA)法进行中国野生葡萄抗炭疽病基因连锁的分子标记研究。获得了与抗炭疽病基因相连锁的RAPD标记 :OPC15 130 0 ,并在 5 0株杂种后代、中国野生葡萄 8种 32个株系、14个欧洲葡萄品种中证明了该标记是可以遗传的。

紫菜无性系特异SCAR标记的获得

1 引言 紫菜为我国重要的大型经济海藻,在开发利用紫菜种质资源的过程中,种质混杂问题,长期以来一直是困扰其应用的严重问题.分子标记技术,如RAPD技术、AFLP技术、SSR技术克服了传统的形态分类学方法的诸多缺点,已经广泛应用于农作物的种质资源鉴定中[1-5].但是在海藻种质鉴定中的应用刚刚起步[6].

牙鲆和大菱鲆养殖群体的分子标记和遗传变异

用 16个 10碱基随机引物对养殖牙鲆 (Paralichthysolivaceus)和大菱鲆 (Scophthalmusmaximus)进行基因组随机扩增多态性DNA (RAPD)遗传分析。发现 :( 1)多个引物具有种的特异性扩增带。其中引物S7扩增的 690和 1160bp带 ,引物S2 扩增的 680bp带为牙鲆的种的特异性谱带 ;而引物S7扩增的 653和889bp带 ,引物S2 扩增的 650、870、990及 1161bp带为大菱鲆的种的特异性谱带 ;( 2 )牙鲆和大菱鲆群体内个体间的平均遗传相似度分别为 0 .90 5和 0 .94 5;用SAS软件对群体内个体间的平均遗传相似度的方差分析结果表明 ,在牙鲆群体内存在显著差异 (P <0 .0 5) ,而在大菱鲆群体内则差异不显著 ,表明大菱鲆的种质较单一 ,存在近交衰退的危险 ;( 3)牙鲆和大菱鲆的香农氏遗传多样性指数分别为 2 .735和 3.758。

离子注入拟南芥种子引起M_1和M_2代变异的遗传分析

采用改良RAPD技术 ,对不同离子注入的拟南芥种子M1代基因池DNA、M1和M2 代株植物DNA进行变异分析及遗传稳定性分析。M1代基因池DNA分析表明 :178个随机引物中有 5 3个随机引物扩增出差异带 ,重复实验证明一些引物的PCR产物的条带具有相当的稳定性。实验结果表明 ,变异频率在一定范围内与注入剂量有关。特别是M2 代的遗传稳定性分析证明 :利用与M1代相同的引物进行PCR分析 ,其变异带与M1吻合 ,故可能离子注入引起的变异是真实遗传的。

应用RAPD标记对东方鲀属进行种类鉴别及其聚类分析

利用 RAPD技术对红鳍东方、假睛东方、暗纹东方和从日本引进的红鳍东方 4个种进行了遗传标记鉴别研究。在事先优化的条件下 ,2 0个随机引物共扩增出 134条谱带清晰、重复性高的 DNA片段 ,其中多态性片段 77条。结果证实每一种均有其特异性扩增图谱 ,可作为种鉴定的依据 ;用 UPGMA和 NJ等方法进行聚类 ,构建的系统树与借助形态学和生化特征进行的传统分类结果一致。研究表明 ,RAPD作为一种新的分子标记 。

中国野桑蚕DNA多态性研究初报

用RAPD技术对浙江省、陕西省和重庆地区的野桑蚕及家蚕品种C1 0 8和大造进行了DNA多态分析。结果发现 :中国野桑蚕具有极为丰富的遗传多样性 ,就DNA多态性而言 ,不仅地区之间有很大的差异 ,同一地区不同个体之间的DNA多态性差异也类似家蚕品种之间的差异 ;同时 ,野桑蚕也与家蚕有较大的相似性 ,其共有的DNA带数高达 1 3 6%,相似系数也在 0 6以上 。

4个绵羊品种随机扩增多态DNA分析

本研究利用RAPD技术研究了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊 4个绵羊品种的亲缘关系。从 10 0条引物中筛选出的 16条引物 ,共扩增出 14 6条带 ,其中 94条表现出多态性 ,占 6 4 .4 %。它们间遗传距离较小 ,小尾寒羊与大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊的遗传距离分别为 0 .0 6 4 9、0 .0 6 73和 0 .10 2 8,用UPGMA法构建了树状聚类图。结果显示 ,小尾寒羊、大尾寒羊和洼地绵羊首先聚一起 ,说明它们亲缘关系较近 ,起源于共同的原始祖先。据推测滩羊也起源于蒙古羊 ,但它生活在陕西、宁夏等省 ,与山东环境条件差别较大 ,在自然选择的作用下发生了变异 ,这可能是滩羊与其它绵羊间遗传距离大的主要原因。

草莓属二倍体种东北草莓(Fragariamandschurica Staudt)研究

从中国吉林、黑龙江、内蒙古收集到5份形态相近的二倍体野生草莓,经多年植物分类学性状观察鉴定为东北草莓(FragariamandschuricaStaudt),该中文名为首次赋予,此前国内尚无该种的记载。“Manchuria”意为满州,是对中国东北的旧称。该种植株绒毛多少及其着生方式、花器官、种子等诸多性状明显不同于森林草莓(F.vescaL.)。RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA)鉴定技术也对这一结果给予有力支持,而且表明二倍体东北草莓与四倍体东方草莓(F.orientalisLozinsk)、六倍体麝香草莓(F.moschataDuch.)的亲缘关系最近,东北草莓可能是它们的原始种。

嗜水气单胞菌的随机扩增多态DNA分型

用 4 5条随机引物对不同来源的 9株嗜水气单胞菌进行了 DNA指纹分析 ,其中 10条引物呈现良好的多态性和稳定性。建立的随机扩增多态 DNA(RAPD)反应的最佳条件 :模板 DNA 2 0 ng,随机引物 0 .8μm ol/ L ,d NTP 15 0μmol/ L,Mg2 + 3.5 mm ol/ L,Taq酶 2 .0 U;95℃预变性 5 min,94℃变性 6 0 s,36℃退火 70 s,72℃延伸 12 0 s,4 0个循环。初步建立了嗜水气单胞菌的 RAPD指纹图谱 ,分析了 9株嗜水气单胞菌之间的遗传距离。据此将 9株菌归为 3个组 ,为该菌的分型提供了新的方法。