异紫堇碱对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用

目的探讨异紫堇碱对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法将A549细胞分为对照组,异紫堇碱低、中、高剂量组,miR-NC组,miR-1296-5p组,anti-miR-NC组,anti-miR-1296-5p组,异紫堇碱+anti-miR-NC组,异紫堇碱+anti-miR-1296-5p组。MTT法检测细胞增殖抑制率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,RT-qPCR法检测miR-1296-5p和花斑抑制因子同源物1(SUV39H1)mRNA表达,Western blot法检测相关蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-1296-5p和SUV39H1的靶向关系。结果不同剂量异紫堇碱处理A549细胞后,细胞增殖抑制率升高,迁移、侵袭细胞数降低,miR-1296-5p表达升高,SUV39H1 mRNA和蛋白表达降低,并呈剂量依赖性(P<0.05)。miR-1296-5p靶向调控SUV39H1,过表达miR-1296-5p可抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论异紫堇碱可能通过调控miR-1296-5p/SUV39H1抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

异紫堇啡碱对血管平滑肌钙内流和钙释放的影响

目的研究异紫堇啡碱（ＩＳＯＣ）对血管平滑肌钙内流和钙释放的影响，以初步阐明其作用方式。方法利用兔胸主动脉螺旋条标本观察ＩＳＯＣ对去甲肾上腺素（ＮＡ）及ＫＣｌ量效曲线的影响和对无钙液中ＮＡ、ＣａＣｌ２复钙、咖啡因缩血管效应的影响。结果ＩＳＯＣ１０μｍｏｌ·Ｌ－１对ＮＡ的量效曲线呈非竞争性拮抗作用，而对高钾的作用则不明显。在无钙液中，ＩＳＯＣ１００μｍｏｌ·Ｌ－１能明显抑制ＮＡ所致的收缩及复钙后外钙内流诱发的收缩，ＩＳＯＣ１０及３０μｍｏｌ·Ｌ－１则只作用于前者；各实验浓度的ＩＳＯＣ对咖啡因在无钙液中的缩血管作用均无影响。结论ＩＳＯＣ抑制受体中介的钙释放和钙内流，但不是典型的钙拮抗剂。

对叶榕叶和细枝的化学成分研究

采用柱色谱法从对叶榕FicushispidaL.叶和细枝的95%甲醇溶液中分离得到10个化合物。通过理化性质和波谱数据分析分别鉴定为α-豆甾醇(1)、正癸烷(2)、叶黄素(3)、乌苏酸(4)、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、7-羟基香豆素(6)、香草酸(7)、齐墩果酸-28-O-α-D-吡喃葡萄糖苷(8)、异紫堇定碱(9)和原阿片碱(10)。化合物9和10首次从该植物中分离得到。

红茂草生物碱正交提取工艺模式优化及清除自由基作用的研究

为研究红茂草(Dicranostigma leptodum(Maxim.)Fedde)生物碱的正交提取工艺条件及其清除自由基作用。采用单因素水平测定,从10种相关因素中筛选出乙醇体积分数、超声波作用时间、液料比、回流时间、浸提液pH值、浸泡时间共6种主要影响因素,按照L25(56)正交表进行正交试验,用SPSS 17.0软件进行统计分析,优选出最佳正交提取工艺模式;将正交提取浓缩液进行HPLC检测,并测定其对羟自由基(.OH)和氧自由基(O2.-)的清除作用。结果表明:红茂草生物碱最佳提取工艺条件为乙醇体积分数65%、超声波作用时间20min、液料比15∶1、回流时间2.5h、浸提液pH=8、浸泡时间4h;在最佳提取工艺条件下红茂草提取液中生物碱的含量为9.2794%;红茂草生物碱在25.0和1.8mg.mL-1时,对.OH和O2.-清除效果显著,其清除率为58.70%和49.26%,IC50为23.50和1.75mg.mL-1。该工艺方法简便、可靠、提取率高,提取液清除自由基作用显著。

异紫堇碱衍生物抗菌及抑肿瘤作用的研究

研究异紫堇碱(isocorydine,ICD)半合成衍生物8-氨基-异紫堇碱(8-NH2-ICD)的抗菌及抑制肿瘤生长作用。用琼脂扩散法和最低抑菌浓度测定法测定8-NH2-ICD的抑菌作用,用MTT法测定该化合物对细胞增殖的抑制作用。不同浓度的8-NH2-ICD对7种常见致病菌具有明显抑制作用,其中对伤寒沙门氏菌和大肠埃希菌的抑制作用显著高于其它菌,8-NH2-ICD对产气杆菌的抑制作用相对较弱。8-NH2-ICD对9种肿瘤细胞系生长抑制程度不同,对胃腺癌细胞MGC803和胶质瘤细胞M059K的增殖具有较强的抑制作用,对人正常细胞生长抑制作用较弱。8-NH2-ICD具有较强的抑制病原菌和抑制肿瘤细胞生长的作用。

白族草药紫金龙成分的研究

从白族草药紫金龙根中分离得到 3种生物碱 ,通过 UV,IR,MS等方法解析 ,鉴定其结构 ,确定为普罗托品、右旋异紫堇丁和右旋紫堇丁 ,其中普罗托品盐酸盐为生药的 1 .1 %。

异可利定对大鼠心肌缺血及缺血/再灌注所致心律失常的影响

目的探究异可利定对大鼠心肌缺血及缺血/再灌注所致心律失常的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、心肌缺血/再灌注模型组、阳性药维拉帕米组、异可利定(2.5、5、10 mg·kg^(-1))组,共6组,每组16只。结扎大鼠左冠状动脉建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,记录Ⅱ导联心电图,并测定大鼠心肌缺血面积、心肌梗死范围及心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等生化指标。结果异可利定可以明显降低大鼠缺血/再灌注室性早搏(ventricular extrasystole,VE)、室性心动过速(ventricular tachycardia,VT)、心室颤动(ventricular fibrillation,VF)的发生率;减少缺血期间大鼠心肌缺血面积和心肌梗死范围;明显升高缺血/再灌注损伤心肌SOD、GSH-Px的含量,降低MDA含量。结论异可利定对心脏缺血/再灌注损伤有保护作用,可能与其抗氧化作用有关。

异紫堇定的扩血管作用与环核苷酸的关系(英文)

应用血管平滑肌等张收缩和放射免疫测定环核苷酸水平等方法研究了异紫堇定扩血管作用及其机理 .结果表明 ,异紫堇定浓度依赖性地松弛去甲肾上腺素 (NE ,1μmol·L- 1)和KCl(30mmol·L- 1)预收缩的兔胸主动脉螺旋条 ,EC50 分别为 (12 .6± 4 .4 )和 (447± 38) μmol·L- 1,对NE的作用比对KCl强 36倍 .亚甲蓝 (10 μmol·L- 1)可部分抑制异紫堇定的扩血管作用 ,但不受格列本脲 ,吲哚美辛 ,普萘洛尔或N L 硝基精氨酸影响 .异紫堇定还可促进cGMP生成增加 ,并可被亚甲蓝完全阻断 .异紫堇定对cAMP的生成无影响 .结果提示 ,异紫堇定的扩血管作用至少部分通过激活鸟苷酸环化酶 。

荷包地不容生物碱成分研究及3种阿朴菲类生物碱的毒性初步评价

采用硅胶柱色谱分离技术,结合TLC、紫外光谱、NMR、MS等方法对荷包地不容(Stephania.dicentrinifera H.S.Lo&M.Yang)中生物碱成分进行研究。采用小鼠尾静脉注射法进行同亚属植物中所得三种阿朴菲类(Aporphine,AP)生物碱的急性毒性试验,用Bliss法计算半数致死量(LD50)并比较几种AP类生物碱的毒性与结构的关系。结果分离和鉴定了3个生物碱成分,分别为AP型的荷包牡丹酮(Dicentrinone,Dico)和荷包牡丹碱(Dicentrine,Dic),以及原小檗碱(Protoberberine,PBB)型的四氢巴马汀(Tetrahydropalmatine,Tet)。其中Dico为首次从荷包地不容中分离出来,其LD_(50)=7.266 mg/kg,Dic的LD50=26.802 mg/kg,异可利定(Isocorydine,Isoc)的LD_(50)=32.167 mg/kg。

异紫堇定对兔输卵管平滑肌活动的影响

以住的研究表明,异紫堇定(isocorydine)有钙拮抗剂样作用。输卵管平滑肌的收缩活动是卵子运行的推动力之一,受多种因素的控制,并与细胞内游离钙浓度有关。本实验观察了异紫堇定对兔输卵管平滑肌机械活动及对卵运动的影响,并初步分析其作用机制。

异紫堇定预防大鼠急性肺水肿中镁离子的测定

采用异紫堇定预防大鼠急性肺水肿 ,测定肺组织和心脏组织镁离子的变化 .实验分组 :正常生理盐水对照组 ;单纯异紫堇定对照组 ;肺水肿实验组和异紫堇定药物预防组 .结果表明 :肺水肿组的肺组织含水量明显增加 ,两种组织中镁离子含量显著降低 ,而异紫堇定可以明显地阻止其变化 .对其预防机制进行了探讨 .

RP-HPLC法同时测定紫金龙中2种生物碱的含量

目的：建立同时测定紫金龙中异可利定和普罗托品的含量测定方法。方法：采用LunaC18 100A色谱柱，流动相以三乙胺-0．2％磷酸（0．1：35）为（A），甲醇-乙腈（14：1）为（B）梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，检测波长为285nm，进样量20μL，柱温为25℃。结果：异可利定在0．065mg·mL^-1～0．195mg·mL^-1范围内线性良好，回归方程为Y=19974X＋2．3524（r=0．9999），平均回收率为97．0％，RSD为1．6％；普罗托品在0．025mg·mL^-1 - 0．075mg·mL^-1范嗣内线性良好，回归方程为Y=20923X-4．3441（r=0．9998），平均回收率为98．9％，RSD为1．8％．结论：该方法简便、准确重现性好，适用于紫金龙中异可利定和普罗托品的定量分析。

异紫堇定预防大鼠肺水肿的实验研究

本研究用中草药异紫堇定预防用肾上腺素所致大鼠急性致死性肺水肿。实验分三组：正常生理盐水对照组，肺水肿实验组及异紫堇定预防组。结果表明，注射肾上腺素导致大鼠１００％致死性肺水肿，动物约十分钟后死亡，双肺明显肿大、出血、水肿、肺系数明显增高。而另外两组未发生肺水肿，１００％存活处死。大鼠存活率、存活时间、肺系数与肺水肿组相比均有显著差异。显示了异紫堇定具有明显的预防肺水肿效应。

小藤铃儿草的生物碱成分

自小藤铃儿草Dactylicapnos torulosa(Hook.f ct Thomas.)Hutchins中分得六个单体,通过UV,IR,MS,~1HNMR和^(13)CNMR解析,鉴定了四个,其中一个为新化合物,命名为紫金龙碱(zijinlongine,Ⅰ),其他三个为已知化合物:氯化1-甲氧基小檗碱(1-methoxylberberium chloride,Ⅱ),氯化三乙基苯胺(triethylphcnylamium chloride,Ⅲ)和异紫堇定(isocorydine,Ⅳ)。Ⅱ和Ⅲ系首次从植物中得到。

异紫堇啡碱对PGF2α诱导心肌细胞肥大的作用

目的 从细胞水平研究异紫堇啡碱对PGF2α诱导心肌肥大的作用。方法 利用培养的新生大鼠心肌细胞 ,以细胞直径大小和蛋白含量为心肌肥大反应的指标 ,用Fura 2 /AM为荧光指示剂测定心肌细胞内钙浓度。结果 异紫堇啡碱 10 4mol/L可明显抑制PGF2α诱导的心肌细胞肥大和细胞内钙增加。结论 异紫堇啡碱可抑制PGF2α诱导心肌细胞肥大 。

异紫堇碱调控LncRNA HCG18/miR-380-5p通路抑制乳腺癌生长及转移

目的探讨异紫堇碱(ICDE)对乳腺癌生长及转移的影响及其对LncRNA HCG18/miR-380-5p通路的调控作用。方法采用不同剂量的异紫堇碱处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231(ICDE 10.8μmol·L^(-1)组、ICDE 32.5μmol·L^(-1)组、ICDE 97.4μmol·L^(-1)组),正常培养的MDA-MB-231细胞记为Con组。MDA-MB-231细胞分别转染si-NC、si-HCG18(si-NC组、si-HCG18组),pcDNA、pcDNA-HCG18分别转染入MDA-MB-231细胞后加入异紫堇碱处理细胞(ICDE 97.4μmol·L^(-1)+pcDNA组、ICDE 97.4μmol·L^(-1)+pcDNA-HCG18组);采用MTT实验、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用qRT-PCR法检测乳腺癌组织与癌旁组织以及各组MDA-MB-231细胞中HCG18、miR-380-5p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测HCG18与miR-380-5p的靶向调控关系;采用Western blot法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果与Con组比较,ICDE 10.8μmol·L^(-1)组、ICDE 32.5μmol·L^(-1)组、ICDE 97.4μmol·L^(-1)组细胞增殖抑制率降低,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少,MMP-2、MMP-9蛋白水平降低;与癌旁组织比较,乳腺癌组织中HCG18的表达水平升高,miR-380-5p的表达水平降低,而ICDE可抑制HCG18的表达及促进miR-380-5p的表达;HCG18可靶向结合miR-380-5p;与si-NC组比较,si-HCG18组细胞增殖抑制率降低(P<0.05),克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少,MMP-2、MMP-9蛋白水平降低;与ICDE 97.4μmol·L^(-1)+pcDNA组比较,ICDE 97.4μmol·L^(-1)+pcDNA-HCG18组miR-380-5p的表达水平降低,细胞增殖抑制率升高,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均明显增多,MMP-2、MMP-9蛋白水平升高。结论异紫堇碱可通过调控HCG18/miR-380-5p通路从而抑制乳腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

秃疮花药材质量标准研究

目的建立甘肃省地方习用药材秃疮花的质量标准。方法采用性状鉴别、显微鉴别及薄层色谱法建立秃疮花的定性鉴别方法,采用高效液相色谱法建立秃疮花中异紫堇碱含量测定方法,按《中国药典》(2015年)附录方法测定秃疮花中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及醇溶性浸出物。结果优化的薄层色谱条件,可以特征性地实现12批秃疮花药材的定性鉴别,且样品均显示有异紫堇碱的斑点。12批秃疮花药材的异紫堇碱在1.9~406.0 mg/mL内呈良好的线性关系(r=0.9999),加样回收率为94.15%~102.54%,RSD=0.39%~1.42%;水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、异紫堇碱分别为2.22%~7.63%、6.29%~10.51%、0.23%~0.76%、17.12%~23.34%、9.04%~14.32%、0.118%~0.940%。结论建立的薄层色谱法可以实现甘肃省地方习用药材秃疮花的定性鉴别,高效液相色谱法简便、可行,可用于秃疮花中异紫堇碱的含量测定,为秃疮花质量标准的建立提供依据。

异紫堇啡碱对培养乳鼠心肌内游离钙的影响

目的 观察异紫堇啡碱 (ISOC)对去甲肾上腺素 (NA)和高钾所致培养乳鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ]i)增高的影响 ,初步分析该药心脏效应的作用原理。方法 利用钙荧光指示剂Fura - 2 /AM负载的培养乳鼠心肌细胞 ,动态地观察在ISOC存在下 ,由NA和高钾所增加的 [Ca2 + ]i 改变。结果 ISOC对培养乳鼠心肌细胞的静息 [Ca2 + ]i 无影响 ,其在 10 -5和 3× 10 -5mol/L时也不显著抑制高钾所致心肌细胞 [Ca2 + ]i 的增高 ,但能降低由NA所升高的心肌细胞 [Ca2 + ]i。结论 ISOC抑制由受体中介的心肌细胞 [Ca2 + ]i

异紫堇啡碱抑制血管平滑肌由受体中介的细胞内游离钙的增高

目的 观察扩血管药异紫堇啡碱 (ISOC)对去甲肾上腺素 (NA)和高钾所致血管平滑肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)增高的影响 ,分析该药扩血管作用的原理。方法 利用钙荧光指示剂Fura 2 /AM负载的家兔血管平滑肌培养细胞 ,动态地观察在ISOC存在下 ,由NA和高钾所增加的 [Ca2 + ]i的改变 ,分析ISOC对NA和高钾所致钙内流和 /或钙释放的影响。结果 ISOC对血管平滑肌静息 [Ca2 + ]i无影响 ,该药在 10 -5和 5× 10 -5mol/L时对高钾所致 [Ca2 + ]i的增高也无明显抑制 ,但能明显抑制NA所致细胞 [Ca2 + ]i的增高。结论 ISOC抑制由受体中介的血管平滑肌 [Ca2 + ]i的增高。

异紫堇定对家兔缺血——重灌条件下红细胞脂流动性的影响

本研究用家兔造成急性失血性休克缺血———重灌，测定在缺血以及缺血———重灌条件下异紫堇定对血浆ＭＤＡ含量及红细胞膜脂流动性的影响。结果显示家兔在缺血以及重灌后红细胞膜流动性明显降低（Ｐ＜００５），而异紫堇定可以阻止逆转防止膜流动性的降低，用药后使其膜流动性与缺血前对照水平相比差异无显著性（Ｐ＜００５）。