非小细胞肺癌微卫星(GT/CA)_(n)重复序列多态性的研究进展

非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌最主要的组织学类型,患者数量庞大且晚期患者疗效差,现有治疗手段虽取得巨大进展但仍面临挑战。肿瘤的发生伴随大量基因组序列的不稳定,(GT/CA)_(n)重复序列是一种常见的微卫星序列,参与了基因转录和DNA甲基化等调控过程。现有研究表明,NSCLC中(GT/CA)_(n)重复序列的多态性与EGFR、HO-1和HIF-1α基因的表达密切相关,可作为探索NSCLC发生发展的分子机制、开发诊疗预后分子标志物及相关表观遗传学研究的切入点。本文总结了NSCLC中微卫星(GT/CA)_(n)重复多态性的相关研究,希望能为NSCLC的相关研究提供参考。

中国5个民族mtDNA(CA)n重复的多态性

目的 探讨中国维族、汉族、黎族、瑶族、藏族mtDNA 514-523位置(CA)n重复遗传多态性。方法应用自行设计的引物对维族、汉族、黎族、瑶族各100名无关个体及42名藏族无关个体进行直接测序。结果 维族人群发现5种等位基因,黎族4种,瑶族3种,而汉族、藏族只观察到两种等位基因。结论 五个民族间mtDNA(CA)_n重复次数存在差异,与国外其他人群相比也有差异。

Ca_(1—n)Sr_nS:Cu^+,Eu^(2+)的合成与光谱特征

研究了Ｃｕ＋，Ｅｕ２＋共激活的Ｃａ１—ｎＳｒｎＳ的发光性质、基质组分Ｃａ／Ｓｒ摩尔比与荧光性质的关系．Ｃｕ＋和Ｅｕ２＋在纯ＣａＳ基质中的发射光谱分别位于４３０ｎｍ及６３０ｎｍ附近．随着基质中Ｓｒ含量的增加，红、蓝发射带都向绿区移动；当基质为纯ＳｒＳ时，红、蓝发射带复合为一个主峰在５１７ｎｍ、半宽度为８０ｎｍ的带谱．实验结果表明：Ｃａ１—ｎＳｒｎＳＣｕ＋，Ｅｕ２＋是一种红。

纤溶酶原激活物抑制物-1基因第四内含子(CA)n多态性与脑梗死的关系

目的探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)基因第四内含子(CA)n多态性与脑梗死的关系。方法采用扩增片段长度多态性及银染技术,分析95例脑梗死患者和60例对照者的血浆PAI-1基因第四内含子(CA)n多态性,用发色底物分解法测定血浆PAI-1活性。结果脑梗死组血浆PAI-1活性明显高于对照组。(CA)n二核苷酸重复数少者血浆PAI-1活性较高,长重复数多者频率在脑梗死组较低。结论PAI-1基因第四内含子(CA)n二核苷酸重复数少可致血浆PAI-1活性增高,并参与脑梗死的发病。

河南汉族人群线粒体DNA(CA)n重复子的多态性及法医学应用

目的：探讨河南汉族人群线粒体（mt）DNA514～523位置（CA）n重复子的遗传多态性及应用。方法：应用PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、银染技术，对河南汉族214例无关个体血样进行mtDNA（CA）n重复子分型。并对5例腐败肌肉及5例角化组织用Chelex-100、二硫苏糖醇（DTT）联合Chelex-100法和PCR缓冲液法分型技术效果进行比较。结果：河南汉族214例无关个体中检出4种等位基因，重复5～8次，基因差异度0．5013。腐败肌肉及角化组织用DTT联合Chelex-100法和PCR缓冲液法均分型成功。结论：mtDNA（CA）n重复子多态性在河南汉族人群具有一定的法医学应用价值，尤其对于腐败肌肉及角化组织。

二方共享与(t,n)门限方案相结合的容侵CA方案

分析了现有容侵CA方案,提出了一种基于二方共享与(t,n)门限方案相结合的容侵CA方案,即先由CA应用服务器(CAA)、密钥服务器(SS)共享CA私钥,而后进一步将SS的共享密钥SK2利用门限密码的思想分成n份,并由n个密钥共享服务器(SSS)共享。在签名过程中既不需要由d2i(1≤i≤n)重构SK2,也不需要由d2i(1≤i≤n)与SK1重构SK。签名被分为CAA的初次签名与SS的二次签名,在形成正式签名前CAA要与SS相互认证,一旦发现对方签名异常,可即时向仲裁中心报警,从而提高了CA系统的安全性及容侵能力。

矮化中间砧短枝富士苹果Ca、N含量对苦痘病发病特征的影响

为研究果实Ca、N含量对苹果苦痘病发病特征的影响,笔者以矮化中间砧短枝富士苹果(天红2号/SH/八龙海棠)为试材,测定了健康果实、发病果实以及病果不同部位的Ca、N含量。结果显示,发病果实的全Ca量显著低于健康果实,全N量和N/Ca值均高于健康果实;发病程度越严重,全Ca量降低的越多,全N量和N/Ca值增加的越多。与健康果实相比,病果病斑部位的全Ca降低量和N/Ca比值增加量均大于无病斑部位,而无病斑部位的全N增加量大于病斑部位。说明苦痘病对果实Ca、N含量影响较大,而且,对病果不同部位的影响也有差异。本试验结果可为下一步研究苹果苦痘病对果实P、K等其他矿质元素的影响奠定基础,并为苹果苦痘病的防治提供理论依据。

梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞内Ca^(2+)及N型Ca^(2+)通道的变化及意义

目的对Ca2+和N型Ca2+通道在兔不全梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞中的变化进行研究。方法成年同龄雄性新西兰白兔30只,随机分两组,15只中膀胱出口不全梗阻8w尿流动力学证实为不稳定膀胱者为实验组,15只为对照组(成年雄性新西兰白兔仅仅手术游离兔膀胱颈而不做结扎梗阻为对照组)。采用急性酶法分离及传代培养的方法获得单个膀胱逼尿肌细胞,采用激光共聚焦显微镜观察模型膀胱逼尿肌细胞静态Ca2+浓度;运用共聚焦显微镜及免疫组织化学方法观察N型Ca2+通道在梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞中的变化。结果静息状态下不全梗阻性不稳定膀胱组逼尿肌细胞内游离钙离子浓度明显增高(Ca2+超负荷);共聚焦显微镜及免疫组化均证实不稳定膀胱逼尿肌细胞膜之N钙离子通道数量明显增多。结论膀胱逼尿肌细胞Ca2+及其N型Ca2+通道病理性改变是出现不稳定膀胱的重要因素。

Ca_(1-n)Ba_nS:Cu^+,Eu^(2+)的合成及其光谱特征

研究了Ｃｕ＋，Ｅｕ２＋共激活的Ｃａ１－ｎＢａｎＳ的发光性质、余辉特性、基质组份Ｃａ／Ｂａ摩尔比与发光性质的关系．随着基质中Ｂａ含量的增加，Ｃｕ＋的蓝区发射带（４１６ｎｍ附近）及Ｅｕ２＋的红区发射带（６３０ｎｍ附近）均逐渐向绿区移动，且蓝光与红光的相对发射强度发生变化．实验证明，Ｃａ１－ｎＢａｎＳ：０．００５Ｃｕ＋，０．００１Ｅｕ２＋是一种红、蓝发射强度可调的单基双能光转换材料．

青黑麦草结构日粮对五龙鹅N平衡及Ca、P消化规律的影响

在五龙鹅的基础日粮中添加青绿冬牧 70黑麦鲜草,基础日粮∶冬牧 70黑麦=1∶2、1∶3、1∶4,粗纤维的质量分数分别为17.92%、20.40%、22.27%,研究高粗纤维饲料对五龙鹅N平衡及Ca、P消化规律的影响.结果表明,随着冬牧 70黑麦鲜草饲喂量的增加,N沉积量差异不显著,N总消化率逐渐升高,Ca的吸收率逐渐降低,P的吸收率逐渐升高.五龙鹅能够耐受高粗纤维饲粮,其N沉积和Ca、P消化不受影响.

[Ca(NH_2)_2]_n(n=1～5)团簇的密度泛函理论研究

用密度泛函理论(DFT)的杂化密度泛函B3LYP方法在6-31G*基组水平上对[Ca(NH2)2]n(n=1～5)团簇各种可能的构型进行几何结构优化,预测了各团簇的最稳定结构.并对最稳定结构的振动特性、成键特性、电荷特性等进行了理论研究.结果表明:团簇易形成环状结构,以金属Ca原子团簇作为骨架,NH2基结合在金属团簇骨架上,并主要是Ca—N成键和Ca—Ca成键.团簇中Ca—N键长为0.225～0.257nm,Ca—Ca键长为0.312～0.354nm,N—H键长为0.102～0.103nm,H—N—H键角为102.9°～104.2°;团簇中Ca原子的自然电荷在1.657e～1.720e之间,N原子的自然电荷在-1.543e～-1.592e之间,H原子的自然电荷在0.349e～0.367e之间,Ca原子和NH2基之间相互作用呈现较强的离子性;对比团簇和晶体的结构及IR谱表明,NH2基在团簇和晶体中的结构基本一致。

腐败及角化组织的DNA提取及mtDNA(CA)n重复子分型

目的建立腐败及角化组织的mtDNA(CA)n重复子分型方法。方法收集腐败肌肉、指(趾)甲及毛干各10份,采用Chelex-100法、含有DTT的Chelex-100处理法及PCR缓冲液处理法三种方法提取DNA,经PCR扩增,PAG电泳分离、银染技术进行mtDNA(CA)n重复子分型。结果10份腐败肌肉用3种方法提取DNA均获得分型成功;10份指(趾)甲及毛干,用Chelex-100法提取DNA,只有1份指甲分型成功,用含有DTT的Chelex-100处理法及PCR缓冲液处理法提取DNA均获得分型成功。结论用本文建立的方法提取DNA适用于腐败及角化组织的mtDNA(CA)n重复子分型检验,在法医学上具有一定的应用价值。

NO_3^-——N及NH_4^+——N对烤烟N、P、K、Ca、Mg的含量及总灰分积累的影响

在NO_3^-N及NH_4^-各一半组成的7个施N水平下,用黄壤进行盆栽,研究了对烤烟叶内N、P、K、Ca、Mg的含量及总灰分积累的影响.由施N水平对叶全N含量所拟合的曲线,其拟合度高,因此叶含N量可作为N素营养诊断的指标之一.施N水平与K、Ca、Mg的含量呈正关相,与P的含量呈负相关.通径分析的结果表明,施N水平对K、Ca、Mg起直接促进作用,对P的含量却是负效应;施N水平及K、Ca、Mg含量对总灰分的积累均直接或间接地起到积极作用,尤以施N水平及K的含量作用为最大.

N-甲基-D-天门冬氨酸受体介导缺氧SD大鼠PO/AH区神经元Ca^(2+)浓度的变化

目的研究N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体特性,探讨NMDA对缺氧大鼠PO/AH区神经元Ca2+浓度的影响。方法给大鼠应用NMDA受体激动剂NMDA和拮抗剂丙戊酸,观察其在正常和缺氧条件下对PO/AH区神经细胞内Ca2+浓度的影响。结果在正常条件下,细胞内Ca2+荧光比值为0.95,第40秒加入NMDA后[Ca2+]i的荧光强度迅速增高,25s后达到峰值2.054,并稳定在此水平,其升幅为(109±52)%,加入激动剂后30 s内达到峰值3.783,并持续稳定在此水平,加入NMDA后[Ca2+]i升高了(286±91)%;缺氧条件下神经元[Ca2+]i在加入丙戌酸后由平台向下的降幅为(103±45)%。结论[Ca2+]i的升高主要是由于NMDA受体通道开放,细胞外游离Ca2+易化扩散入胞内所致,丙戊酸可有效地降低NMDA受体活性,从而使细胞内游离Ca2+浓度明显下降,具有保护神经元免受缺氧损伤的作用。

膀胱移行细胞癌基因组(CA)n重复序列不稳定性的研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌基因组 (CA)n重复序列不稳定性与肿瘤生物学特性的相关性。方法 2 6例膀胱移行细胞癌肿瘤基因组DNA ,Inter SSRPCR扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果 PCR扩增产物约 2 0多种 ,片段大小为 1 0 4～ 1 2 0 0bp ,带型的差异主要是增加或减少 ;染色增强或减弱 ,不稳定系数与肿瘤的分级呈正相关。结论 膀胱移行细胞癌基因组中平均有 1 2 .8%的 (CA)n重复序列DNA片段与正常组织基因组有差异 ,肿瘤分级越高差异越大。

GCK基因3'端(CA)_n重复序列多态性非放射性分析方法的建立及与NIDDM关系的研究

葡萄糖激酶（ＧＣＫ）基因３′端的（ＣＡ）ｎ微卫星重复序列具有多态性，据此建立了一种非放射性的双碱基重复序列的分析方法。对中国人ＧＣＫ基因３′端（ＣＡ）ｎ重复序列多态性的分布情况进行了研究，对这一多态性与非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）之间的关系进行了探讨。结果显示，人群中有３′端（ＣＡ）ｎ重复序列的多态性等位基因型。

不同泌乳阶段奶牛饲料中N、P、Ca的生物学利用率研究

试验选用体况、胎次、产奶量相近的中国荷斯坦新产牛和泌乳高峰牛各6头,分别在第0 d、5 d、10 d测定(估测)各生理阶段奶牛产奶量、饲料采食量和粪尿排放量,同时,采集其饲料、牛奶、粪便和尿样进行N、P、Ca百分含量测定,通过分析饲料、牛奶、粪便和尿中N、P、Ca含量,计算出各泌乳期奶牛N、P、Ca的生物学利用率。结果表明,新产牛对N、P、Ca的表观吸收率分别为77.21%±1.91%、56.08%±8.22%和47.62%±7.47%,表观存留率分别为15.6%±9.70%、12.38%±12.07%和32.5 2%±7.93%;泌乳高峰牛对N、P、Ca的表观吸收率分别为76.37%±3.08%、60.15%±8.54%和49.58%±9.89%,表观存留率分别为18.26%±6.35%、23.65%±9.57%和36.56%±10.96%。新产牛对N、P、Ca的表观吸收率与泌乳高峰牛对N、P、Ca的表观吸收率之间均无显著差异(P>0.05),而对N、P、Ca的表观存留率,泌乳高峰牛均高于新产牛。

东北地区健康汉族人群Dystropin基因内含子49的(CA)n多态性研究

目的 :探讨中国东北地区健康汉族人群 Dystropin基因内含子 49的二核苷酸 CA重复多态分布。方法 :应用同位素 (α- 32 P d CTP)掺入的聚合酶链反应 (polym erase chain reaction,PCR)方法 ,对无遗传关系的东北地区汉族女性 42人 ,男性 5人 ,共 89条 X染色体的 Dystropin基因内含子 49的 (CA) n多态做了研究。结果 :内含子 49的 (CA) n多态中共检测到 12个等位片段 ,长度 2 30～ 2 5 0 bp。多态频率从短片段开始依次为 A0 .0 112、B0 .15 73、C0 .0 337、D0 .112 4、E0 .0 44 9、F0 .0 5 6 2、G0 .10 11、H0 .12 36、I0 .2 135、J0 .112 4、K0 .0 2 2 5、L 0 .0 112。可提供信息量为 87.2 %。实际检测到的杂合子率为 76 .19% (32 /4 2 )。结论 :49(CA) n多态是 DMD基因诊断中非常有意义的遗传标记之一。