^188Re-cNGQGEQc放射性标记及其对肺腺癌细胞的抑制作用

【目的】探讨放射性核素^188Re间接法标记小分子肽cNGQGEQc的可行性,并观察^188Re-cNGQGEQc对肺腺癌A549细胞的体外抑制作用。【方法】^188Re-cNGQGEQc和^188Re-cNAQAEQc(阴性多肽)的制备采用双半胱氨酸(EC)为双功能螯合剂的间接标记法,测定标记多肽的标记率、比活度、放化纯度、脂水分配系数,并观察在正常人血清中的稳定性。采用CCK-8法测定^188Re-cNGQGEQc对体外培养的肺腺癌A549细胞株的抑制效应,观察不同放射性剂量的^188Re-cNGQGEQc对肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用,计算相对抑制率及半数有效抑制浓度(IC50),并与^188Re标记的阴性多肽及^188ReO4-进行比较。【结果】^188Re-cNGQGEQc的标记率为(90.24±1.58)%,比活度为(4.07±0.14)TBq/(mmol/L),C18柱纯化后放化纯度为(98.42±0.32)%,^188Re-cNGQGEQc的脂水分配系数lgP为(-2.90±0.03),在37℃正常人血清中放置24 h其放化纯度为(89.08±0.94)%。抑制性实验结果表明^188Re-cNGQGEQc对肺腺癌A549细胞的增殖具有显著的抑制作用,且与放射剂量呈明显正相关;而且^188Re-cNGQGEQc的IC50值为44.88×10^7 Bq/L,明显低于阴性多肽的93.45×10^7 Bq/L和^188ReO4-的99.60×10^7 Bq/L(P<0.01)。【结论】使用双功能螯合剂EC建立了标记率高、体外稳定的^188Re标记小分子肽的方法,体外实验证实^188Re-cNGQGEQc能有效地抑制肺腺癌A549细胞的增殖,研究结果为后续开展小分子多肽的放射靶向治疗肺癌的体内应用提供实验基础。

^188Re标记生物分子研究进展

188Re半衰期只有16.9h,最大β射线能量为2.11MeV,同时伴随有适于显像能量为155keV的γ射线。因此是一种理想的治疗用放射性核素,本文综述了188Re生物标记的各种方法及研究进展,188Re标记放射性药物用于肿瘤核医学治疗的前景十分令人鼓舞。

MCF-7乳腺癌细胞摄取188Re-DTPA-DG的实验研究

目的:研究乳腺癌细胞(MCF-7)对188Re标记二乙三胺五乙酸葡糖胺(DTPA-DG)的摄取。方法:采用γ计数法在不同时间段评价乳腺癌细胞(MCF-7)对188Re-DTPA-DG(3.7kBq/10μl)的摄取。结果:乳腺癌肿瘤细胞(MCF-7)对188Re-DTPA-DG的摄取率明显高于对照组188ReO4-(P<0.05);实验组30min与4h细胞摄取率差异存在显著性意义(P<0.05),而对照组不同时间点细胞摄取率差异无显著性意义(P>0.05)。结论:188Re-DTPA-DG容易被乳腺癌细胞(MCF-7)摄取,使188Re在肿瘤细胞内发挥辐射效应成为可能,从而为临床肿瘤治疗提供理论依据。

[^188Re(CO)3L]^n新型配合物的小鼠体内生物分布

选择了3种三齿配体(二(2-吡啶甲基)-胺基)-乙胺(L1NH2)、(二(2-吡啶甲基)-氨基)-乙酸(L2H)和((6-胺基-N-叔丁氧基羰基-己基)-吡啶-2-甲基氨基)-乙酸(L3NH2),用于设计合成新的以fac-[188Re(CO)3]+为核心的放射性药物。3种配体在低浓度(10-5mol/L)的条件下,反应时间小于60 min,标记率可达90%以上,放射化学纯度大于92%;3种标记物的体外稳定性均很高,标记后24 h内基本不分解。生物分布结果表明,配合物均能较快地从血液和多数的组织器官中清除,主要通过排泄系统代谢,并初步探讨了这3个配合物在小鼠体内的生物分布行为可能与它们的脂水分配系数lgP有关。lgP值(-0.36)高的配合物[188Re(CO)3L3NH2],24h时在各个器官中放射性保留均高于其它2个配合物,但可能不是唯一的影响因素。总的来说,3个配基是用fac-[188Re(H2O)3(CO)3]+标记的比较理想的双功能螯合剂。

^188Re标记锡硫混悬液对荷人结肠癌裸鼠模型的治疗研究

以荷人结肠癌裸鼠为动物模型．研究了^188Re标记的锡硫混悬液对荷人结肠癌的治疗效果、在裸鼠体内的稳定性及经瘤内注射后的体内器官分布．并用电镜观察了治疗后肿瘤的组织学变化。结果表明，^188Re标记的锡硫混悬液有较好的抑瘤率，且在瘤内能长时间稳定存在。经^188Re标记的锡硫混悬液治疗后，肿瘤细胞多为变性坏死。

^188Re食管支架辐射生物物理特点

探讨^188Re食管支架辐射生物物理效应机制。采用热释光法和细胞存活分数法分析^188Re食管支架放射生物物理特点。^188Re支架初始放射性活度128MBq，体模驻留1h，2、6、11mm诸深度点吸收剂量分别为1．28、0．115、0．011Gy。另外，经2、6、11mm厚度体模作用于ECA109细胞24h测定吸收剂量分别为31．25、3．21、0．123Gy，细胞存活分数分别为0．02％、35．18％、91．22％。^188Re核素支架β射<6mm超近距离治疗其辐射生物效应明显，而11mm超出^188Re最大射程外依然存在较弱放射生物效应。^188Re核素支架具备超近距离治疗肿瘤的辐射生物效能，并且辐射微观粒子波粒二重性的能量逐层传递而产生射程外生物物理效应。

^188Re血管内照射对新西兰白兔损伤血管内膜增生的影响

目的研究^188Re血管内照射对新西兰白兔损伤血管内膜增生的影响，探讨^188Re血管内照射对预防再狭窄的可行性及作用。方法60只新西兰白兔随机分为对照组（n=30）和照射组（n=30），均行腹主动脉球囊内皮拉伤术。照射组球囊损伤内膜后行^188Re照射治疗。管腔下0．5mm处累计吸收剂量为15Gy；对照组则不行血管内照射。分别于术后1、3、6周处死动物，取病理组织学标本进行分析。结果与对照组对比，照射组第3、6周的新生内膜面积明显减小（2．11±0．17mm^2VS3．02±0．71mm^2，P=0．003；2．63±0．84mm^2 vs 3．80±0．99mm^2，P=0．023），管腔面积明显增加（5．87±0．57mm^2 vs 4．96±0．64mm^2，P=0．009；4．74±0．59mm^2 vs 4．16±0．40mm^2，P=0．037），管腔周径明显增大（4．61±0．78mmVS3．64±0．93mm，P=0，040；3．85±0．65mm vs 3．12±0．56mm，P=0．031），管腔狭窄程度明显降低（23．04±4．85mm^2 vs 33．44±6．47mm^2，P=0．003；30．82±7．18mm2 vs 41．46±10．95mm^2，P=0．038）。结论^188Re血管腔内照射能有效抑制损伤血管的新生内膜增生，改善血管重构，为预防临床PTCA术后再狭窄提供了有力的实验依据。

叶酸修饰PAMAM树状大分子的合成及^188Re标记

叶酸受体在多种肿瘤细胞中过表达是癌症治疗中一种可能的靶向药物结合位点。我们将五代PAMAM树状大分子用叶酸和1B4M-DTPA修饰,然后用^(188)Re进行放射性标记。化合物的标记产率为67.5%,分离后的放射化学纯度大于95%,并表现出良好的体外稳定性,为该化合物在叶酸受体靶向肿瘤治疗应用中奠定了基础。

铼[^188Re]标记人血清白蛋白的新方法研究

以含吡啶环的化合物[二(2-吡啶甲基)-氨基]-乙酸(H2L)为双功能螯合剂,使用fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+间接标记人血清白蛋白(IgG),为fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+标记蛋白或单抗寻找新方法。Fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+标记条件研究表明,以活泼酯188Re(CO)3-L2H-TFP(TFP,2,3,5,6-四氟酚)间接标记IgG时,标记率大于82%。在生理盐水和小牛血清中,48h后产物的放化纯度均大于90%;以fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+直接标记IgG作对比,标记率仅60%。在生理盐水和小牛血清中,48h后产物的放化纯度<60%。总的说来,使用fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+间接标记生物分子时,具有对称结构的含吡啶环的化合物H2L是潜在的双功能螯合剂。

肿瘤靶向治疗用白蛋白磁性纳米粒子的188铼(188Re)标记

目的 188铼 ( 188Re)标记用于肿瘤靶向治疗的白蛋白磁纳米体的实验室条件。方法 188Re标记白蛋白磁性纳米体的最佳实验室条件是 :SnCl2 ·H2 O 8mg/ml,柠檬酸 2 0mg/ml,维生素C 8mg/ml,反应容积为 5 0 0 μl ,反应时间为 3h。结果 188Re总的标记率大于 90 % ,标记稳定性 7h为 98%、2 4h为 95 %。结论 188Re-白蛋白磁性纳米体的标记率及标记稳定性适于用于肿瘤靶向治疗的体内研究。

188Re放射性锡胶体对恶性腹水模型小鼠的治疗作用

目的：探讨和评价188Re（铼）标记的锡胶体对恶性腹水动物模型的治疗效果。方法：制备188Re-锡胶体按试剂盒说明书操作，标记率通过色谱法利用放射性薄层扫描仪检测。在体外培养小鼠肉瘤180细胞5×10^6/0.3 mL注射到ICR小鼠腹腔内建立恶性腹水动物模型。培养3 d后实验组分3个剂量组，分别为188Re-锡胶体37组、18.5组和9.25 MBq/mL组。对照组为恶性腹水小鼠腹腔内注射生理盐水组、正常ICR小鼠腹腔内注射37 MBq/mL 188Re-锡胶体组和正常ICR小鼠组，每组均12只。注射锡胶体3、24 h和48 h后用γ相机分不同时间采集小鼠腹腔内放射性分布图像，然后收集腹腔积液通过免疫印迹法检测Bax蛋白的表达情况，同时取腹腔主要脏器评价腹腔脏器的组织病理学变化。注射锡胶体后每隔2d进行体重和生存时间的监测，共观察80 d。统计学处理采用SPSS 10.7版软件进行统计学分析，生存时间分析采用kaplan meir统计学方法，组间比较采用log Rank方法。结果：188Re-锡胶体的标记效率均为99%以上。注射锡胶体3、24 h和48 h后用γ相机采集的小鼠腹腔内放射性分布图像显示，放射性胶体均匀分布在小鼠腹腔内无腹腔外漏出。188Re-锡胶体处理的实验组与生理盐水处理的对照组相比肿瘤细胞Bax蛋白的表达明显增加；腹腔脏器的组织病理学检测结果也显示，188Re-锡胶体处理的小鼠与生理盐水处理的小鼠相比，出现肝细胞变性，脾白髓萎缩，中性粒细胞浸润，肠细胞粘连，胃腺体退化等改变。注射37 MBq/mL 188Re-锡胶体的两组小鼠初期与其他各组相比具有体重下降趋势，但随后8~10 d开始体重逐渐增加，各组间未见明显差异（P〉0.05）。188Re-锡胶体注射后80 d生存率分析结果显示，37、18.5和9.25 MBq实验组生存时间分别为（59.0±8.5）d、（63.6±7.1）d、（54.8±7.0）d，与生理盐水组（20.0±1.9）d相比，均明显延长（P〈0.001）。结论：188Re标记的放射性锡胶体不仅物理性能好，而且对恶性腹水疗效佳，副反应小，为临床治疗恶性胸、腹水提供了更多的选择。

188Re直接标记单克隆抗体

研究了用无载体的１８８Ｒｅ直接标记单克隆抗体的方法，以摩尔比为１∶３的柠檬酸－酒石酸作中间螯合剂，在ｐＨ＝５．２的条件下，用ＳｎＣｌ２将Ｎａ１８８ＲｅＯ４快速还原，再与已被ＮａＨＳＯ３还原的抗体交换配位。研究结果表明，反应２ｈ的标记率大于９５％，标记物的体内、体外稳定性良好并保持了抗体的免疫活性。

抗-CEA单抗的188Re标记

采用转移能力更强的葡萄糖酸钠和ＳｎＣｌ２的混合液及Ｎａ１８８ＲｅＯ４，用直接标记法标记了抗－ＣＥＡ单抗。研究了影响标记率的若干因素，如抗体和抗坏血酸的用量、亚锡的浓度、反应液ｐＨ值以及反应时间等，探索出标记率可达８０％以上的标记条件。

^188ReN-NEMPTDD的合成和初步性质

近年来，研究人员一直致力于开发新型的可能成为治疗核药物的^188Re标记化合物。在Re的同族元素Tc的研究中，TcN核配合物的研究是一个热点。这两个同族元素具有相似的化学行为，因此可以借鉴^99mTc放射性药物的制备方法来制备^188Re放射性药物。考虑到^188ReO4-比^99mTcO4^-还原困难，以及^188Re的低价配合物稳定性差，拟在通用的制备TeN配合物两步法的基础上，改变促进剂和氮给予体，

CD45单抗及188Re-亲和素二步法预定位对淋巴瘤Raji细胞的放射免疫效应研究

目的 探讨CD45单抗及188Re-亲和素（Avidin）二步法预定位对人淋巴瘤Raji细胞的放射免疫效应.方法 188Re对CD45单抗及Avidin的标记采用直接标记法,采用纸层析法测定标记率及放化纯度.分析188Re-CD45单抗与Raji细胞的体外结合能力,并进行体外竞争结合实验,采用CCK-8法测定二步法预定位组、188Re-CD45单抗组、188Re-Avidin组和188ReO4-组对Raji细胞的增殖抑制效应,计算Raji细胞存活率和抑制率.结果 188Re-CD45单抗与Raji细胞的特异性结合率为（70.92±1.91）％,同时加入188Re-CD45单抗和过量的CD45单抗,则细胞结合率平均为（7.96±0.87）％.二步法预定位组、188 Re-CD45单抗组、1888Re-Avidin组和1888ReO4-组对Raji细胞的增殖均有抑制作用,抑制率与放射性活度呈正相关（r=0.907 ～0.992,P＜0.05）;在相同放射性活度下,二步法预定位组在各时间点的抑制作用均高于188 Re-CD45单抗组、188Re-Avidin组和188 ReO4-组（t=124.76 ～ 607.98,P＜0.05）.结论 188 Re-CD45单抗可特异性地与Raji细胞结合,CD45单抗及188 Re-Avidin二步法预定位对人淋巴瘤Raji细胞具有明显的抑制作用.

^188Re血管内照射抑制犬颈总动脉成形术后再狭窄

颈动脉支架成形术（CAS）后1年的颈动脉再狭窄率达到3．46％～7．4％。近年来，有研究表明血管内照射治疗能有效降低再狭窄的发生率。笔者采用血管内介入方法，用球囊过度扩张犬颈动脉以获得稳定的颈动脉再狭窄动物模型，探讨^188Re血管内照射抑制犬颈总动脉内皮损伤后再狭窄的价值，现报道如下。

鲜食玉米万糯188特征特性及高效栽培技术

鲜食玉米作为一种绿色、健康的食品受到广大消费者的青睐。随着鲜食玉米需求量的不断增加,鲜食玉米种植面积也在逐年扩大。引进新的品种和高产栽培技术是保证鲜食玉米品质、提高经济效益的重要途径。本文介绍了鲜食玉米万糯188特征特性,并从选地整地、播前准备、适期播种、田间管理、水肥管理、病虫害绿色防控等方面总结万糯188高效栽培技术,以期为种植者提供技术支持。

^188Re-HEDP治疗对操作者的辐射安全性评价

铼-羟基亚乙基二膦酸盐（^188Re-1-hydroxy-1，1-ethylidene disodium phosphonate，^188Re—HEDP）治疗肿瘤骨转移痛已进入Ⅰ期临床应用。^188Re除发射β射线外还有15％155keV的γ射线。β射线能量较高可产生韧致辐射，所以临床应用时应对γ射线及韧致辐射采取防护措施。笔者在对^188Re-HEDP进行Ⅰ期临床研究时，评价了其辐射安全性，现报道如下。

不同稳定剂对槲皮素纳米晶稳定性的影响研究

目的制备槲皮素纳米晶提高其溶出速率,并考察不同稳定剂种类和比例对纳米晶稳定性的影响。方法采用溶剂超声法制备槲皮素纳米晶,分别比较3种不同稳定剂(聚维酮K30、泊洛沙姆F188、十二烷基硫酸钠),以粒径为筛选指标考察放置的稳定性,并结合扫描电镜、红外光谱和X射线衍射的方法,表征纳米晶的微观形态,以及探讨稳定剂与纳米晶的作用机制。结果通过试验筛选,结果显示聚维酮K30的稳定性能最好,纳米晶同样为棒状结晶形态,纳米晶的溶出速率较原料药有了明显的提高。结论稳定剂的种类和用量会影响纳米晶的稳定性。

经皮瘤内注射188Re-锡硫胶体对兔VX2肝癌的疗效与细胞凋亡

目的 研究经皮瘤内注射88Re-锡硫胶体对兔VX2肝癌模型的疗效及细胞凋亡情况.方法 建立45只兔VX2肝癌模型,随机分为三组,每组15只.分别瘤内注射生理盐水0.1 ml（A组,对照组）、无水乙醇1 ml（B组）、37MBq 188Re-锡硫胶体0.1 ml（C组）.各组分别于术后1、4、7天处死5只动物,测量肿瘤体积,并行病理学检查及观察细胞凋亡情况.所有荷瘤兔均在术前及术后1、4、7天检测ALT、血清尿素值.结果 术后1天各组肿瘤体积差异无统计学意义（P＞0.05）;术后4天B、C组肿瘤体积[分别为（905.7±113.3）mm3和（860.2±59.6） mm3]与对照组[（1 873.1 ±77.3）mm3]比较差异有统计学意义（P＜0.01）,但B、C组间无明显差异（P =0.421）;术后7天C组[（2 169.6±141.9） mm3]与对照组[（4 093.1±126.5）mm3]比较、B组[（2 569.5±64.6）mm3]与C组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）.B、C组肿瘤细胞凋亡指数在各时间点均明显高于对照组,差异有统计学意义（P=0）.C组在治疗4天后凋亡指数仍处于较高水平,与B组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.术后7天C组凋亡指数逐渐下降,与B组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 瘤内注射188Re-锡硫胶体内照射治疗VX2兔肝癌模型是一种安全有效的方法.