甲基对硫磷降解菌Alcaligenes.sp.YcX-20的分离鉴定及降解性能研究

采用室内培养方法,对分离到的一株具有降解甲基对硫磷活性的细菌进行了鉴定,并对其降解性能进行了研究。通过形态观察、生理生化特征及16SrDNA同源性分析将其初步鉴定到属,并确定为产碱菌属的一个新种,命名为Alcaligenes.sp.YcX-20,16SrDNA序列在GenBank中注册号为AY628412。其酯酶活性随菌液浓度和培养时间的增加呈上升趋势;在基础培养基中可耐受700mg·L-1的甲基对硫磷,在普通培养基中耐受浓度达2500mg·L-1;X-20可降解甲基对硫磷形成对硝基苯酚;以甲基对硫磷为惟一碳源时,30℃培养30h降解率达60%。

Alcaligenes sp．NX-3产威兰胶的补料分批发酵工艺研究

在7.5L发酵罐上考察了Alcaligenes sp.NX-3产威兰胶的发酵工艺。选用葡萄糖为碳源,通过分析比较不同初糖浓度下的细胞比生长速率和产物比合成速率,进一步研究了不同补料方式对产胶的影响。结果表明,采用分批补糖发酵工艺,威兰胶产量较分批发酵提高了13.6%,而且有效地缩短了发酵周期。在50L发酵罐上进行补料分批发酵放大实验,威兰胶产量高达27.0g/L,葡萄糖转化率由初始的44%提高到54%。

溶氧调控策略对Alcaligenes sp．NX-3产威兰胶发酵过程的影响

主要研究了发酵过程中溶氧调控策略对Alcaligenes sp.NX-3产威兰胶的影响。在7.5 L发酵罐中,首先考察了不同通气量对菌体生长、威兰胶浓度、葡萄糖消耗、威兰胶黏度等的影响。结果表明,通气量为1 vvm时,有利于威兰胶浓度的提高。通过研究不同供氧水平对威兰胶发酵的影响,发现较高的溶氧水平有利于威兰胶的合成,但是不利于威兰胶黏度的提高。因此提出了低供氧-中供氧-高供氧、高供氧-中供氧-低供氧2种不同溶氧调控策略。实验结果表明:采用高供氧-中供氧-低供氧策略,能够使威兰胶浓度达到25.4 g/L,葡萄糖对威兰胶的转化率提高到0.51 g/g,威兰胶黏度达到2.700 Pa.s。

一株广谱性农药降解菌(Alcaligenes sp.)的分离与鉴定

从杭州农药厂废水排放口污泥中分离到１株能降解部分拟除虫菊酯和一硫代磷酸酯类杀虫剂的广谱性降解菌ＹＦ１１．该菌球杆状，大小（１．５～１．７）μｍ×（２．５～２．８）μｍ，革兰氏阴性，４根周生鞭毛．菌落圆形，边缘整齐，表面光滑，凸状隆起．生长最适温度３０℃，最适ｐＨ７．０～７．５．好氧，氧化酶阳性．能利用蔗糖、阿拉伯糖、山梨糖、乳糖、七叶灵、果糖等，但不能利用淀粉和核糖、ＤＮＡ中Ｇ＋Ｃ含量为６１．７ｍｏｌ％（Ｔｍ）．根据上述特征，分离株被鉴定为产碱菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）的一个未知种．该分离株可降解氰戊菊酯、溴氰菊酯、三氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、氯菊酯、对硫磷、甲基对硫磷。

响应面法优化Alcaligenes sp.产脂肽生物破乳剂培养基的研究

生物破乳剂是应用于石油开采业中的新型破乳剂之一,本研究对筛选得到的一株破乳剂产生菌(鉴定为Alcaligenessp.)产生的脂肽类生物破乳剂进行了发酵培养基的优化,采用SAS软件的响应面回归方法对培养基中主要因素进行了研究,试验结果表明,在碳源石蜡为4.76%、氮源牛肉膏为0.12%、磷源K2HPO4/KH2PO4为0.53/0.8%时,破乳剂的产生量为最大,比优化前提高了近一倍。

Alcaligenes sp.碱性脂肪酶产生条件及酶学性质的研究

对Alcaligenessp .产碱性脂肪酶的工艺条件进行了研究。结果表明 ,适宜产酶培养基为 :3 %黄豆粉 ,1%果糖 ,0 .2 %K3 PO4,1%NaNO3 ,0 .6%柠檬酸钠 ,0 .0 3 %FeSO4,0 .5 %聚乙烯十八烷基醚 ;最佳培养条件为 2 5℃ ,初始pH9.0。脂肪酶活力可高达 12 0IU/mL。该酶在5 5℃以下 ,pH6.0～ 10 .5范围内稳定 ;酶反应适宜温度为 40℃ ,适宜pH9.0。该酶制剂在洗涤和制革工业中有良好的应用前景。

Alcaligenes sp. CGMCC2428产威兰胶的分批发酵动力学模型

利用分批发酵研究Alcaligenes sp. CGMCC2428产微生物多糖威兰胶的合成特性,结果表明威兰胶的合成和菌体生长模型为部分偶联型.菌体和威兰胶质量浓度分别达到3.30和26.50 g/L,威兰胶对细胞干质量得率系数(YP/X)为8.20.根据分批发酵实验结果采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程和Luedeking-Piret相似方程,得到了描述Alcaligenes sp. CGMCC2428生长、威兰胶以及葡萄糖底物消耗分批发酵动力学模型.同时改变初始葡萄糖质量浓度,实验数据与模型预测值进行了比较拟合,平均相对误差小于10%,表现出很好的适用性.

生物破乳菌Alcaligenes sp. S-XJ-1氮源利用特性

以六种氨基酸及硝酸铵为氮源培养胞壁结合型生物破乳剂产生菌Alcaligenes sp.S-XJ-1,进而分析菌体对谷氨酸和硝酸铵的利用过程,并建立菌体的生长及氮源利用模型.结果表明:氮源种类和投量是影响菌体产量和性能的重要因素;菌体对氮源的利用顺序依次为有机氮、氨态氮、硝态氮;谷氨酸为氮源时对生物破乳菌产量的促进效果最佳,相比于硝酸铵为氮源时,菌体最大比增长速率和产率系数更高,用于菌体代谢供能的氮源消耗量更低.

CBL+PBL联合SP教学法在神经外科研究生培养中的探索

目的探索案例教学法(case-based learning,CBL)及基于问题的教学法(problem-based learning,PBL)联合标准化病人(standardized patient,SP)教学法在神经外科研究生培养中的应用效果。方法 选取2020年8月—2022年8月昆明医科大学第一附属医院神经外科专业3个年级研究生共60名,按入科顺序分为传统教学组、CBL+PBL组及CBL+PBL+SP组,每组20名。进行3个月的入科培训后对学生的综合考核成绩、临床技能、病历质量、SP评价及自我感知能力进行评价。结果 CBL+PBL组、CBL+PBL+SP组课后的基本理论、病例分析成绩均优于传统教学组,差异有统计学意义(P <0.05)。CBL+PBL+SP组的查体、腰穿及影像资料判读均优于其他2组,差异有统计学意义(P<0.05)。CBL+PBL组与CBL+PBL+SP组的病历书写成绩均优于传统教学组,差异有统计学意义(P <0.05)。CBL+PBL组与CBL+PBL+SP组的SP综合评价成绩、学生满意度、技能和知识吸收能力、医患沟通技巧、学习动机、理解力、师生互动、课程所花时间、课后考试、临床思维能力、自学能力、团队合作能力及完成课题能力均优于传统教学组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CBL+PBL联合SP教学法在提高研究生临床操作技能、医患沟通技巧、知识理解及吸收能力等方面具有一定优势,是一种更有效的研究生培养方法。

产碱杆菌Alcaligenes sp.P156中龙胆酸1,2-双加氧酶GdoP的研究

龙胆酸是芳香族化合物微生物降解的核心代谢产物,龙胆酸降解研究对于芳香族化合物的降解研究具有重要意义。龙胆酸1,2-双加氧酶是催化龙胆酸降解的关键酶。本研究利用双加氧酶催化保守结构域在产碱杆菌P156的基因组上通过多序列比对找到一个龙胆酸双加氧酶基因gdoP;利用分子生物学技术对该基因进行异源表达;并利用重组蛋白对酶学性质和动力学参数进行测定。酶学性质研究表明,GdoP催化反应的最适pH为7.5,最适温度为40℃。GdoP是一个Fe2+依赖型双加氧酶,含有Fe2+离子结合结构域。Fe2+离子能够明显促进GdoP酶活,Cu2+、Cd2+离子对GdoP的酶活有明显抑制。以龙胆酸为底物,GdoP的Km值和Vmax值分别为641μmol/L和23.9U/mg。GdoP具有较强的底物特异性,能够催化龙胆酸开环生成3-马来酰丙酮酸,不能催化5-氨基水杨酸、水杨酸和1-羟基-2-萘酸的转化。本研究系统的研究了龙胆酸1,2-双加氧酶GdoP的酶学性质,有助于更好的研究芳香族化合物的微生物降解过程。

PTED治疗LDH后IL-10、IL-8及SP水平变化及其与神经功能恢复的关系

目的探讨经皮椎间孔镜椎间盘切除术(PTED)治疗腰椎间盘突出症(LDH)后白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-8(IL-8)及P物质(SP)水平的变化及其与神经功能恢复的关系。方法选取2022年1月至2024年1月保定市第一中心医院收治的131例LDH患者,按照不同治疗术式分为对照组[传统开窗减压髓核摘除术(ODD),n=65)]、试验组(PTED,n=66),比较两组围手术期指标、术前、术后3个月腰椎活动功能(腰椎前屈、后伸、左侧屈、右侧屈活动度)、疼痛程度[视觉模拟评分法评分(VAS)]、脊柱功能[腰椎Oswestry功能障碍指数(ODI)]、腰背肌生物力学性能[腰背屈伸比(F/E)、伸展平均功率(AP)、峰力矩(PT)]、实验室指标(IL-10、IL-8及SP水平)及并发症发生率。结果试验组手术、住院、下床时间、切口长度短于对照组,术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3个月腰椎前屈、后伸、左侧屈、右侧屈活动度均升高,且试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3个月VAS、ODI评分均下降,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3个月的AP、PT均升高,且试验组高于对照组,两组术后3个月的F/E均降低,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3 d的IL-10、IL-8及SP水平均降低,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组并发症总发生率(7.57%)明显比对照组并发症总发生率(20.00%)低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:PTED治疗腰椎间盘突出症后IL-8及SP水平与ODI评分呈正相关关系,IL-10水平与ODI评分呈负相关关系(P<0.05)。结论相较于ODD,PTED治疗LDH疗效更佳,可有效促进患者神经功能恢复,降低血清IL-10、IL-8、SP水平。

双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗效果分析

目的:探讨双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗的效果。方法:选择2020年1月—2023年6月收治的104例磨牙根管治疗患者,按照随机数字表法分为对照组与试验组,每组52例。对照组采用iRoot SP糊剂进行根管充填,试验组以双波长激光(Nd:YAG和Er:YAG)联合iRoot SP糊剂进行治疗。比较2组总有效率、疼痛程度及并发症,观察治疗前、治疗后6周及12周的血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、出血指数(bleeding index,BI)、牙周探诊深度(depth of periodontal probing,PD)和临床附着水平(clinical attachment level,CAL)。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:试验组总有效率显著高于对照组,根管填充后疼痛程度显著低于对照组(P<0.05);试验组治疗后6、12周的IL-6、IL-17、TNF-α、BI、PD和CAL显著低于对照组(P<0.05)。结论:双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗效果较为理想,有利于减轻牙周炎症和疼痛程度。

牙体牙髓病根管治疗应用iRoot SP冷侧法的效果

目的探讨牙体牙髓病根管治疗应用iRoot SP冷侧法的效果。方法筛选2018-06至2020-06在解放军总医院京南医疗区就诊的牙体牙髓病患者100例,随机分为对照组和试验组,每组50例,均进行根管治疗,其中对照组充填根管采用热牙胶垂直加压法,试验组采用iRoot SP冷侧法。比较两组根管充填效果、临床总有效率、疼痛视觉模拟评分(VAS)及咀嚼功能。结果两组治疗后根管充填效果和临床总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05);试验组治疗后1周[(4.13±0.79)vs.(5.11±0.98)]及1个月[(2.45±0.37)vs.(3.11±0.67)]VAS评分低于对照组,治疗后咬合力[(131.25±11.21)lbs vs.(120.34±14.09)lbs]及咀嚼效率[(90.12±4.13)%vs.(78.98±7.45)%]均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论根管治疗牙体牙髓病中应用iRoot SP冷侧法的充填效果和疗效与热牙胶垂直加压法基本相同,但iRoot SP冷侧法在减轻患者疼痛,改善咀嚼功能方面更具优势。

产碱菌Alcaligenes sp. qz-1对铬污染土壤中玉米生长和铬累积的影响研究

通过盆栽试验研究了铬(Cr_2O_7^(2-))污染土壤中接种铬耐受细菌Alcaligenes sp. qz-1对玉米株高、茎粗、叶绿素含量、地上部分和地下部分干重以及铬含量的影响。结果表明,在重金属铬(Cr_2O_7^(2-))胁迫(50 mg·kg^(–1),100 mg·kg^(–1))下,玉米生长显著受到抑制(P<0.05)。与对照相比,株高分别减少9.92%和18.97%,茎粗分别降低了13.36%和14.24%,叶绿素含量分别降低了10.46%和13.25%。接种Alcaligenes sp. qz-1,可以显著缓解重金属胁迫对玉米生长的不利影响(P<0.05)。铬(Cr_2O_7^(2-))胁迫(50 mg·kg^(–1),100 mg·kg^(–1))下,接种Alcaligenes sp. qz-1的植株与未接种的玉米植株相比,株高分别增加了6.36%和10.91%,茎粗分别增加了10.17%和8.01%,叶绿素含量分别提高了9.16%和2.64%。同时,接种Alcaligenes sp. qz-1,可显著提高玉米(尤其是根系部分)对土壤铬的吸收量,吸收总量较未接种的增加13.9%—36.9%。综上所述,接种Alcaligenes sp. qz-1改善了铬(Cr_2O_7^(2-))胁迫下玉米生长特性,增加了玉米根部对铬(Cr_2O_7^(2-))的吸收,降低了铬(Cr_2O_7^(2-))对玉米的毒害,为该菌株进一步应用农田重金属污染进行治理提供一定理论依据和实践指导。

基于针灸推拿专升本专业教学特点探讨PBL联合SP教学法在针灸临床学的应用

随着我国中医学的迅速发展,对高等医学的教育要求越来越高,各大高校也逐步认识到教学方法改革创新的必要性,我国的医学教育已经逐步将重点放到对学生职业素质和职业能力的培养之上。针灸推拿专升本专业学生学情分析有别于其他全日制本科生,生源的特殊性决定了其教学过程应有别于其他专业学生。针对针灸推拿专升本专业学生开设针灸临床学这门综合性和临床实践性较强的专业课程,用问题式学习(PBL)教学法提出问题,培养学生自主学习能力,并结合相关的学情分析,提高学生的学习主观能动性、培养学生的临床综合应用能力,以期培养真正的实用型人才;同时联合标准化病人(SP)教学法模拟问题,培养学生实际临证思辨能力,进而加强学生理论与临床的衔接能力,增强学生的针灸综合临证思辨能力及医患沟通能力等。

技术性贸易壁垒对我国农产品的出口影响分析——以SPS措施为例

入世23年以来,我国农产品出口规模持续扩大、出口品类日益丰富、出口结构日益完善。SPS措施因其设置和实施的隐蔽性及灵活性,被许多国家用来降低风险和防止其他国家农产品流入本国市场。我国对SPS措施认知尚浅,在农产品的检验检疫标准和品质上与发达国家存在差距,使得我国农产品在全球贸易竞争中处于不利地位。本研究采用2002—2022年我国向主要贸易伙伴国的农产品出口数据,实证评估SPS措施对我国农产品出口的影响。结果表明,虽然SPS措施在短期内会抑制我国农产品出口,但从长远看,SPS措施能倒逼农产品企业提高质量标准,有利于推动我国农产品出口贸易,并且这种正向作用是逐步深化的。基于此,为更好地推动我国农产品出口,政府需建立完善的SPS措施风险警示制度和严密的农产品质量安全规范体系,协助企业开拓新兴市场;行业协会需发挥监督指导作用,参与国际标准制定;农业企业应开展技术创新和品牌建设,获取国际认证。

SPS烧结双主相Sm_(2)Co_(17)-Ce_(2)Co_(17)复合永磁体的微观组织

研究了放电等离子烧结(SPS)工艺和退火温度对双主相Sm_(2)Co_(17)-Ce_(2)Co_(17)复合永磁体微观组织的影响。结果表明:制备双主相Sm_(2)Co_(17)-Ce_(2)Co_(17)复合永磁体的最佳SPS工艺为:烧结温度750℃、压强64 MPa、烧结时间10 min,这样有利于减少稀土元素之间的扩散。退火可使烧结后磁体中存在的非晶相晶化。退火温度越高,双主相磁体中的稀土元素之间越容易相互扩散,Ce原子易扩散到Sm_(2)Co_(17)相中取代Sm原子,而Sm原子扩散到Ce_(2)Co_(17)相中取代Ce原子的机会就相对较少些,且在Sm_(2)Co_(17)相与Ce_(2)Co_(17)相的边界处形成一个过渡的富稀土区。

Alcaligenes sp. YBY降解吲哚的特性研究

该研究从近海泥沙样品中,分离纯化得到1株能以吲哚为唯一碳源生长的菌株,经16S rRNA基因序列分析鉴定为产碱杆菌(Alcaligenes),命名为YBY。考察影响菌株生长和降解吲哚的环境因素,并对菌株降解吲哚的机理进行推测。结果表明,菌株YBY生长和降解吲哚的最佳条件为pH 6.77,转速150 r/min。菌株具有较好的底物广谱性,能以柠檬酸钠、2-吲哚酮、苯酚、苯甲酸、邻氨基苯甲酸等物质为唯一碳源生长。利用液相色谱、飞行时间、质谱联用对菌株代谢吲哚的产物进行分析,发现中间产物主要为靛红、靛蓝和龙胆酸,由此推测的代谢途径为:吲哚首先被羟化成吲哚酚,吲哚酚二聚成靛蓝或者氧化成靛红,靛红进一步转化成龙胆酸。

iRoot SP单尖法根管充填对牙体牙髓病患者的疗效及对疼痛、炎症反应的影响

目的 探讨iRoot SP单尖法根管充填对牙体牙髓病患者的疗效及对疼痛、炎症反应的影响。方法 选取106例牙体牙髓病患者,随机均分为常规组和观察组。常规组采用AHplus根充糊剂填充治疗,观察组采用iRoot SP单尖法根管充填治疗,两组均治疗3个月。比较两组患者根管填充时间、恢复时间、临床疗效、疼痛、炎症反应白细胞介素-6(IL-6)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平、并发症发生率。结果 观察组患者根管填充时间、恢复时间短于常规组(P<0.05)。观察组总有效率高于常规组(P<0.05)。术后,两组患者IL-6与hs-CRP水平较术前均上升,且观察组低于常规组(P<0.05),观察组疼痛感低于常规组(P<0.05)。观察组并发症发生率低于常规组(P<0.05)。结论 iRoot SP单尖法根管充填治疗牙体牙髓病,能够缩短患者填充时间、恢复时间,提高疗效,降低炎症反应,缓解患者的疼痛感,降低并发症发生率,具有一定的推广价值。

Biocatalytic synthesis of (R)-(-)-mandelic acid from racemic mandelonitrile by a newly isolated nitrilase-producer Alcaligenes sp. ECU0401

By using acetonitrile as the sole nitrogen source, a microbial strain with high nitrilase activity, named as Alcaligenes sp. ECU0401, was newly isolated from soil, which could enantioselectively transform racemic mandelonitrile into (R)-(?)-mandelic acid, with an enantiomeric excess of >99.9%.