RP-HPLC法同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β，β-二甲基丙烯酰紫草素的含量

目的:建立同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法。方法:采用 RP-HPLC法,Zorbax Eclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的乙腈溶液(A)和含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的水溶液(B),梯度洗脱,洗脱程序为:0 min(67%A),5 min(70%A),15 min(75%A),30 min(75%A);流速1.0 mL·min^(-1);检测波长516 nm,柱温30 ℃。结果:紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素浓度分别在1.2～12.2μg·mL^(-1)(r=0.9999)、2.5～24.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)、11.3～112.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好线性关系(n=5)。方法回收率(n=9)分别为100.3%,98.6%,98.4%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定。

小鼠灌胃3H—β，β-二甲基丙烯酰紫草素的组织分布与排泄研究

采用氧化燃烧炉技术处理小鼠给予3H-β，β-二甲基丙烯酰紫草素灌胃后的组织样品和粪样（尿样直接加闪烁液测定），用液闪计数仪测定其放射性水平，并采用HPLC法分析生物样品，以研究放射性药物在小鼠体内的组织分布与排泄情况。研究结果显示：小鼠的胃肠道放射性浓度最高，肝脏、肺脏、肾脏、心脏等组织内放射性浓度次之，骨骼肌、脊髓、脑中分布较少；小鼠灌服3H-β，β-二甲基丙烯酰紫草素（84．0mg／kg，22．3MBq／kg）后，336h从粪中收集到给药总放射剂量的（72．87±9．92）％，尿液中回收到（8．43±0．26）％，粪尿回收合计（81．30±9．79）％；小鼠粪便中以原形药物为主，血浆、尿样中均未检测到原形药物。以上结果提示，3H-β，β-二甲基丙烯酰紫草素在小鼠体内分布广，排泄较完全，经粪便排泄为主，经肾排泄为辅。

RP-HPLC法同时测定新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素的含量

目的:建立同时测定新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil 100-5 C18,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(80∶20,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为516 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素检测质量浓度线性范围分别为0.404~10.100μg/m L(r=0.999 8)、5.350~107.000μg/m L(r=0.999 6)、2.035~40.700μg/m L(r=0.999 8);定量限分别为0.40、2.91、1.34μg/m L,检测限分别为0.12、0.87、0.40μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%(n=6);加样回收率分别为99.12%~104.18%(RSD=1.85%,n=6)、96.51%~100.21%(RSD=1.43%,n=6)、98.11%~102.51%(RSD=1.42%,n=6)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定。

HPLC同时测定紫朱软膏中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量

目的 建立同时测定紫朱软膏中紫草的左旋紫草素和β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的高效液相色谱方法.方法 采用Welch Materials XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,18.5 μm）,流动相乙腈-水-甲酸（75∶25∶0.05）,检测波长516 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min,进样量20 μL,对紫朱软膏中紫草的有效成分左旋紫草素和β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁进行定量测定.结果 左旋紫草素在0.025 6～0.256 μg 范围内线性关系良好（r^2=0.999 5）,平均回收率为98.12%（RSD=1.92%）;β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁在0.174 4～2.616 μg范围内线性关系良好（r^2=0.999 2）,平均回收率为100.46%（RSD=1.17%）.结论 本试验建立的方法简便,测定结果准确,可用于紫朱软膏的质量控制和评价.

紫草抗氧化成分的提取及其活性研究

分别用石油醚、三氯甲烷和乙醇依次提取紫草成分 ,用OSI仪测定了三种提取物对猪油氧化稳定性的影响 ,发现石油醚提取成分 (LE - pet)和三氯甲烷提取成分 (LE -chl)有明显的抗氧化活性 ,添加到猪油中后 ,w =0 0 2 %时 ,猪油的氧化稳定性比空白样品提高了约 1倍。对LE -pet和LE -chl进行薄层层析分离鉴定 ,得到三种化合物 :β ,β 二甲基丙烯酰紫草醌 (Ⅰ)、乙酰紫草醌 (Ⅱ)和紫草醌 (Ⅲ)。对它们的抗氧化活性进行测试 ,化合物Ⅱ和Ⅲ表现出明显的抗氧化活性 ,当w(Ⅱ)=0 .0 6 %、w(Ⅲ) =0 0 6 %时 ,猪油的氧化稳定性分别提高了 6 0 4和 3 94倍。化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与VE均有较强的协同作用 ,化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的质量分数为 0 .0 2 %与VE 的质量分数为 0 0 2 %共同使用时 ,其抗氧化协同系数 (SE)分别为 81 4(Ⅰ)、5 2 7(Ⅱ)和 132 6 (Ⅲ )

玉红膏稳定性试验及其有效期统计学分析

目的考察玉红膏在加速试验与长期试验条件下制剂随时间变化的规律,为生产及新药申报提供必要的试验数据,同时通过试验建立制剂有效期。方法参照我国现行中药稳定性试验指导原则,选择影响因素试验与长期试验条件,以β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量为定量指标,结合稳定性重点考察项目评价其稳定性,用统计学方法推断其有效期预测值。结果本品在高温[(30±2)℃,RH 45%±5%]、高湿[(25±2)℃,RH 75%±5%]、强光[(4500±500)Lx,(25±2)℃,RH 45%±5%]条件下放置10 d,其性状、外观、含量均符合规定,25℃条件下玉红膏有效期为41.216个月。结论目前生产条件下,玉红膏稳定性良好。

紫草炭制前后萘醌类化合物含量变化及止血作用研究

目的采用传统的蒙药炮制方法,对紫草进行炭制,通过紫外可见分光光度法和高效液相色谱法对紫草炭制前后萘醌类化合物进行含量测定,比较原药材和炭制紫草中的含量变化。初步评价紫草炭制品的止血活性。方法UV法测定原药材和炭制紫草的羟基萘醌总色素的含量,HPLC法测定β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量。采用毛细管法测定小鼠全血凝血时间和出血时间。结果UV和HPLC的结果表明,炭制紫草的羟基萘醌总色素和β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量均不同程度的下降。云南白药阳性对照组及给药三组均与空白对照组比较具有显著差异(P<0.01),延长全血凝血时间效果明显,且160101C炮制组的凝血时间最短,但是给药组之间均没有太明显的差异。结论本研究可为今后的蒙医药中炭制紫草的质量标准及药理实验提供科学依据。

HPLC法同时测定解毒生肌膏中6种成分

目的建立HPLC法同时测定解毒生肌膏（紫草、白芷、当归等）中6种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;乙腈-0.5%冰醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温30℃;检测波长300 nm（欧前胡素、异欧前胡素）和516 nm（紫草素、乙酰紫草素、异丁酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素）;进样量20μL。结果欧前胡素、异欧前胡素、紫草素、乙酰紫草素、异丁酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素分别在2.74-54.80μg/m L（r=0.999 1）、1.90-38.00μg/m L（r=0.999 5）、2.12-42.40μg/m L（r=0.999 2）、8.48-169.60μg/m L（r=0.999 8）、4.92-98.40μg/m L（r=0.999 7）、4.66-93.20μg/m L（r=0.999 1）范围内线性关系良好,平均加样回收率（RSD）分别为99.72%（1.15%）、97.39%（1.49%）、98.29%（1.87%）、99.29%（1.94%）、98.51%（1.42%）、97.21%（1.55%）。结论该方法简便准确,专属性强,重复性好,可用于解毒生肌膏的质量控制。

固相萃取-高效液相色谱法同时测定伤疡愈软膏中两种成分含量

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法,同时测定伤疡愈软膏中紫草的主要成分β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁和丹参中丹酚酸B的含量。方法:采用固相萃取法和高效液相色谱法联用,选用C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-水-甲醇-甲酸(700∶300∶30∶15)为流动相;流速:1.0 ml·min^-1;β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁检测波长:275 nm,丹酚酸B检测波长为286 nm的相同系统下同时测定伤疡愈软膏中紫草的主要成分β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁和丹参中丹酚酸B的含量。结果:β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁浓度在23.780~118.900μg·ml-1范围内线性关系良好(r=0.999 5),回收率为99.5%,RSD=1.07%;丹酚酸B在19.840~99.200μg·ml-1范围内线性关系良好r=0.999 3,丹酚酸B的平均回收率为98.2%,RSD=2.1%(n=9)。结论:该方法操作简单,快速,分离度好,建立的定量方法可用于伤疡愈软膏的质量控制。

HPLC法测定大鼠血浆及粪便中新疆紫草3种萘醌类色素的含量

目的 建立测定大鼠血浆及粪便中新疆紫草3种萘醌类成分含量的高效液相色谱法（HPLC法）。方法 采用COSMOIL C_（18）-AR-Ⅱ（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,流动相A乙腈（A）-0.15%甲酸（B）（v/v）溶液,进行洗脱,流速1.0mL/min,检测波长275nm,柱温25℃,检测时间35min。结果 血浆中左旋紫草素在0.40-6.40μg、乙酰紫草素在25.0-600.0μg、β,β′-二甲基丙烯酰紫草素在25.0-600.0μg范围内均与峰面积呈线性关系,左旋紫草素回收率为97.78%-100.1%、乙酰紫草素为100.1%-100.2%、β-β′-二甲基丙烯酰紫草素为97.78%-100.1%,日间、日内RSD均〈1.5%。粪便中各组分在10-400μg/mL范围内与峰面积呈线性关系,平均回收率分别为（78.2±2.5）%、（82.0±2.9）%和（79.5±3.5）%。0-12、12-24、24-48h粪便中左旋紫草素绝对回收量分别为23.61、38.28、4.13mg;乙酰紫草素分别为7.20、70.78、11.53mg;β-β′二甲基丙烯酰紫草素分别为46.32、60.15、16.88mg。结论 HPLC法准确可靠,重复性好,适用于测定血浆及粪便中新疆紫草萘醌类成分含量。

HPLC测定新疆紫草不同部位中8种羟基萘醌的含量

建立同时测定新疆紫草Arnebia euchroma不同部位中左旋紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素等8种羟基萘醌含量的高效液相色谱法。采用Waters Xbridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.05%甲酸水溶液(70∶30),检测波长275 nm,流速1mL·min^(-1),柱温30℃。定量结果显示,新疆紫草各部位中主要成分含量差异较大,根皮含量最高,其次是根,再次是茎残基,根木质部和地上部分含量较低。本研究为确定紫草药用部位提供科学依据。

新疆紫草HPLC特征图谱和紫草类药材6种萘醌类成分含量测定

目的:采用高效液相色谱法建立新疆紫草药材的特征图谱,并同时测定5种紫草类药材(软紫草属新疆紫草、内蒙紫草、滇紫草属长花滇紫草、滇紫草属滇紫草、硬紫草属硬紫草)6个主要羟基萘醌色素类成分的含量,比较不同基原紫草的化学成分差异。方法:以紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素为对照品,采用YMC Pack ODS-A色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%甲酸水溶液(70∶30)为流动相,流速1 m L·min^(-1),检测波长275 nm,柱温30℃;采用CHEMPATTERN化学计量学软件对结果进行处理分析。结果:建立新疆紫草特征图谱,标定10个特征峰,30 min内紫草的主要色谱峰能够达到完全分离,对5种紫草类药材6个特征峰成分进行含量测定。紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素质量浓度分别在2.13~1 065μg·m L^(-1)(r=0.999 3,n=6)、2.01~1 004μg·m L^(-1)(r=0.999 8,n=6)、2.05~1 026μg·m L^(-1)(r=0.999 7,n=6)、1.92~960μg·m L^(-1)(r=0.999 9,n=6)、2.00~1 001μg·m L^(-1)(r=0.999 8,n=6)和1.87~937μg·m L^(-1)(r=0.999 9,n=6)范围内线性关系良好,方法的平均回收率(n=6)分别为97.6%(RSD=1.9%)、96.6%(RSD=2.2%)、97.9%(RSD=1.1%)、98.4%(RSD=1.2%)、96.2%(RSD=1.1%)和97.3%(RSD=1.7%);19批新疆紫草中上述6个羟基萘醌类成分含量分别为0.01%~0.37%、0.02%~2.42%、0.02%~1.42%、0.02%~0.98%、0.05%~1.66%和0.09%~3.15%,2批内蒙紫草中均未检出β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁。结论:所建立新疆紫草特征图谱专属性强,结合6个主要羟基萘醌类成分含量测定能够区分各基原紫草,有助于全面评价紫草的质量,为规范紫草药材的使用提供科学依据。

一测多评法结合特征图谱的新疆紫草质量控制研究

目的:采用一测多评(QAMS)与特征图谱结合的方法测定紫草中8个羟基萘醌(紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素)的含量,并验证方法的准确性。方法:采用HPLC特征图谱进行色谱峰定位,并以乙酰紫草素为参照物,建立其对紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素的相对校正因子,用该校正因子进行相应成分的含量计算,实现一测多评;同时采用外标法测定新疆紫草中8个羟基萘醌的含量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。色谱条件:采用Agilent ZOBAX XDB-Eclipse色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液(70∶30),流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长275 nm,进样量10μL。结果:建立新疆紫草的特征图谱,标定了8个特征峰;12批样品色谱图的相似度均大于0.90。紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素进样量分别在1.032~412.8μg·mL^-1(r=0.9999)、1.002~400.8μg·mL^-1(r=0.9998)、1.032~412.8μg·mL^-1(r=0.9999)、1.053~421.2μg·mL^-1(r=0.9999)、1.016~406.4μg·mL^-1(r=0.9998)、1.045~418.0μg·mL^-1(r=0.9999)、1.030~412.0μg·mL^-1(r=0.9999)和1.007~402.8μg·mL^-1(r=0.9999)范围内呈现良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.4%(RSD=1.8%)、97.9%(RSD=1.9%)、98.6%(RSD=1.2%)、99.3%(RSD=1.6%)、101.1%(RSD=1.9%)、98.6%(RSD=1.3%)、99.0%(RSD=1.2%)和100.4%(RSD=1.4%)。紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素相对于乙酰紫草素的相对校正因子分别为1.263、1.161、0.938、1.840、1.039、1.138和0.932;且在不同实验条件下重现性良好(RSD<3.0%);一测多评法的计算结果与外标法实测值之间无显著差异。12批新疆紫草中紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素的含量范围分别为0.063%~0.222%、0.011%~0.053%、0.571%~1.621%、0.105%~0.364%、0.011%~0.059%、0.349%~0.727%、0.578%~1.353%和0.720%~1.761%。结论:建立的一测多评法结合特征图谱可用于新疆紫草中8个羟基萘醌类化学成分的含量测定,有效控制新疆紫草质量。

高效液相色谱法同时测定复方当归栓中5种活性组分的含量

目的:建立一种高效液相色谱分析方法,用于同时测定复方当归栓中5种活性成分苦参碱、氧化苦参碱、阿魏酸、左旋紫草素和β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量。方法:采用HPLC法,Kromasil ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-0.1%三乙胺水溶液(用磷酸调节pH3)梯度洗脱,分别在检测波长220,316,516 nm,测定了苦参碱和氧化苦参碱、阿魏酸、左旋紫草素和β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量。结果:通过1次进样,同时测定了复方当归栓中理化性质差异较大的5种活性成分的含量,且线性关系良好(r>0.999 6),平均回收率为96.92%～102.22%,RSD<3.1%。结论:该法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于同时测定该制剂中5种活性成分的含量,并为该制剂质量控制提供了方法学基础。

紫草提取物有效成分测定及对骨骼肌自由基代谢和抗疲劳能力影响的实验研究

目的:通过建立小鼠游泳和大鼠跑台2个训练实验模型,研究紫草提取物对骨骼肌自由基代谢的影响以及抗疲劳作用;并测定紫草提取物中的有效成分。方法:选取雄性小鼠和大鼠各24只,将小鼠随机分为游泳训练组(a组)、游泳力竭组(b组)和游泳加药组(c组),每组各8只;将大鼠随机分为跑台训练组(A组)、跑台力竭组(B组)、跑台加药组(C组),每组各8只。小鼠和大鼠按照不同的训练模型分别进行游泳和跑台训练,在训练方案的最后1天,a、A组动物不进行训练,在安静状态下处死制备待测样本,并通过试剂盒测定骨骼肌超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、巯基(-SH)、丙二醛(MDA)指标;b、B、c、C组动物进行一次力竭运动,力竭后即刻处死并进行样本处理和上述指标测定。结果:训练对照组(b、B组)动物在游泳和跑台力竭运动后,骨骼肌组织抗氧化酶活性显著下降(P<0.05),自由基代谢产物MDA含量显著升高(P<0.05);补充紫草提取物组(c、C组)动物在力竭运动后,与训练对照组动物(b、B)相比,骨骼肌组织抗氧化酶活性显著升高(P<0.05),自由基代谢产物MDA含量显著降低(P<0.05),运动至力竭的时间明显延长(P<0.05)。结论:外源性补充紫草提取物可以改善骨骼肌组织自由基清除和代谢水平,延缓运动疲劳的产生。

紫草软膏质量标准研究

目的 建立紫草软膏的质量标准。方法 采用HPLC法同时测定制剂中左旋紫草素及β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量，色谱柱为Inertsil ODS-3 C18柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）；流动相为0.05%甲酸水溶液-乙腈（30∶70），流速为1.0 ml/min，检测波长275 nm，柱温25 ℃。结果 左旋紫草素、β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁分别在0.04～0.81 μg （r＝0.999 5）、0.41～10.36 μg （r＝0.999 2）范围内线性良好，两者的平均回收率分别为103.32%、101.80%，RSD分别为1.96%、2.11%。结论 质量标准方法简便、准确，专属性强，可用于紫草软膏的质量控制。

LC-MS/MS测定紫草中醇溶性成分和水溶性成分的含量

目的:建立液相色谱串联质谱法测定紫草中醇溶性成分和水溶性成分(左旋紫草素,β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁,β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁,紫草酸,咖啡酸,迷迭香酸)的含量,用于紫草的质量控制。方法:采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~3 min,5%~95%A;3~7 min,95%A;7~7.01 min,95%~5%A;7.01~8.50 min,5%A);流速0.2 mL·min^-1,柱温35℃,进样量5μL;采用负离子电离模式,MRM扫描模式进行定量。结果:左旋紫草素,β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁,β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁,紫草酸,咖啡酸,迷迭香酸分别在10.12~1012μg·L^-1(r=0.9981),10.88~1088μg·L^-1(r=0.9912),10.08~806.4μg·L^-1(r=0.9976),20.32~1016μg·L^-1(r=0.9966),10.37~1037μg·L^-1(r=0.9996),10.26~1026μg·L^-1(r=0.9978)均有良好线性关系(r≥0.9912);平均加样回收率分别为95.8%(RSD 3.2%),103.5%(RSD 2.3%),105.3%(RSD 2.1%),96.1%(RSD 3.3%),98.9%(RSD 2.7%),100.8%(RSD 3.4%)。13批次紫草样品中6个种成分含量存在较大差异。结论:所建立的方法合理可行,为综合评价紫草质量提供一定依据。

紫草中活性成分的非极性溶剂动态微波提取及高效液相色谱法测定

用非极性溶剂动态微波辅助提取,高效液相色谱法测定紫草中的紫草素和β,β′-二甲基丙烯酰紫草素.考察了微波吸收介质类型、提取溶剂种类、提取溶剂流速、微波功率和样品粒度对提取产率的影响,优化提取参数.在优化条件下,将所建立的方法与超声提取和索氏提取相比,所得紫草素和β,β′-二甲基丙烯酰紫草素的产率相差不大,但本文所建立的方法所需提取时间短(5min)、溶剂消耗少(10mL).与极性溶剂动态微波辅助提取相比,提取产率大幅度提高.结果说明,所建立的方法是一种有效的提取中草药中一些活性成分的方法,特别是对于一些在非极性溶剂中有更高溶解度的化合物,此方法更具优势.

基于SPR技术的表皮生长因子受体与新疆紫草中4种活性成分的相互作用

目的：以人表皮生长因子受体（EGFR）为靶标,从左旋紫草素,乙酰紫草素,β,β-二甲基丙烯酰紫草素,β-乙酰氧基异戊酰紫草素等新疆紫草所含的4种柰醌类活性成分中筛选潜在的EGFR抑制剂。方法：利用表面等离子体共振（SPR）技术,首先通过预吸附实验,优化固定的p H和浓度,选择最佳条件,构筑EGFR生物芯片。在此基础上,以p H 7.4,浓度10 mmol·L-1的磷酸缓冲溶液（含0.005%聚山梨酯-20）作为相互作用时的缓冲溶液,实时动态研究EGFR与4种单体的相互作用。通过软件计算动力学参数,基于结合动力学常数大小,筛选抑制剂。结果：选择p H 4.5,10 mmol·L-1的乙酸缓冲液、质量分数为10 mg·L-1的EGFR为其最佳的固定条件,最终固定量为250 RU。相互作用结果显示4种单体中,β,β-二甲基丙烯酰紫草素与EGFR有明显的结合作用,其他3种单体无明确响应。动力学参数计算结果显示,EGFR与β,β-二甲基丙烯酰紫草素相互作用的结合速率常数ka为1.27×104L·mol（-1）·s（-1）,解离速率常数kd为2.92×10-2s-1,解离平衡常数KD为2.31×10-6mol·L-1,卡方值（Chi2）为3.25。KD〈1×10-5mol·L-1,表明他们有较强的亲和力。结论：β,β-二甲基丙烯酰紫草素可能为EGFR的一种抑制剂。