分枝杆菌Mycobacterium ZLP生产雄烯二酮(4-AD)的发酵研究

从摇瓶水平上对降解植物甾醇生产雄烯二酮(4-AD)的分枝杆菌的发酵条件进行研究,确定发酵培养基的最适碳源、氮源、无机盐,然后用正交方法对发酵培养基进行优化,结果为:葡萄糖2.0%,蛋白胨2.0%,MgSO4 0.7%,K2HPO4 0.8%,在此基础上确定最佳培养条件:温度28℃,起始pH 7,转化时间96 h,此时4-AD的产率为62.15%.

雄甾-4-烯-3,17-二酮Reformasky反应的试探

利用丰富的天然甾醇资源,经微生物切除17-位边链,能以较好的收率得到雄甾-4-烯-3,17-二酮(4-AD,1)或雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD),因此应用这两个重要中间体合成各种甾体的化学工作受到普遍关注。以4-AD 或 ADD 为原料合成皮质激素的关键是研究一种有效的。

基于微生物转化法制备雄甾-4-烯-3,17-二酮羟化物的研究

微生物转化法制备雄甾-4-烯-3,17-二酮(4-AD)羟化物,具有成本低、污染小、安全、高效、专一性强等优点。本文以4-AD为底物,筛选的出发菌为泡盛曲霉MH-18菌株,底物最佳投入时间是48h,目标产物是11α-羟基-雄甾-4-烯-3,17-二酮(11α-OH-4-AD),最佳培养条件(mg/mL)是糊精33.6、玉米粉10.5、磷酸二氢钾1.2、pH4.5,最佳转化条件是温度32℃、摇床转速200r/min、装液量100mL发酵培养基/500mL摇瓶装、助溶剂甲基-β-环糊精、底物浓度1g/L、反应时间96h。转化工艺优化后,较优化前,11α-OH-4-AD产率提高35.52%,比现有的文献报道提高7.54%,具有极好的工业化应用前景。

维生素AD对变应性鼻炎大鼠IL-4、IFN-γ和IgE表达水平的影响

目的:探讨维生素AD(Vit AD)对变应性鼻炎(AR)大鼠血清IL-4、IFN-γ和IgE水平的影响。方法:将SD大鼠分为正常对照组、AR组和Vit AD干预组,以卵清蛋白为过敏原建立AR大鼠模型,Vit AD组用浓鱼肝油滴剂0.2 mL灌胃,1次/d,连续14 d。干预两周后,进行被动皮肤过敏原实验,检测模型制备效果;用ELISA法对各组大鼠血清IL-4、IFN-γ和IgE的水平进行检测。结果:AR组IL-4水平显著高于正常对照组(P<0.05),IgE水平非常显著高于正常对照组(P<0.01);IFN-γ水平显著低于正常对照组(P<0.05);Vit AD干预后,大鼠血清IL-4水平显著低于AR组(P<0.05),IgE水平低于AR组,但无统计学意义(P>0.05),IFN-γ水平与AR组无显著性差异(P>0.05)。结论:Vit AD可以显著影响AR大鼠的IL-4水平,对IFN-γ和IgE的影响不显著。补充Vit AD可能成为AR预防和治疗的辅助疗法。

MST4表达对MHCC97H肝癌细胞细胞因子、ERK蛋白、p-ERK蛋白表达的影响及其意义

目的:探讨MHCC97H肝癌细胞中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4/(MST4)的表达与细胞因子、ERK蛋白、p-ERK蛋白表达的关系及其意义。方法:将MHCC97H肝癌细胞培养至对数生长期后,接种于96孔板上培养,分为空白组、高表达组(MST4转染高表达)、低表达组(MST4转染siRNA),采用Western-blot法检测各组共培养24 h后的MST4蛋白表达水平,采用ELISA法检测各组培养24 h后上清液中白细胞介素-2(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、趋化因子-2(CCL2),采用Western-blot法检测各组的细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白的表达,采用MTT实验检测3组肿瘤细胞的增殖能力,采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭迁移能力。结果:高表达组的MST4蛋白表达显著高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的MST4蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);高表达组的上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL2水平均显著高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL2水平差异无统计学意义(P>0.05);空白组、高表达组和低表达组的ERK蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);高表达组的pERK蛋白显著高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的p-ERK蛋白差异无统计学意义(P>0.05);高表达组的MTT实验吸光度值、Transwell实验MHCC97H肝癌细胞迁移数目高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的MTT实验吸光度值、Transwell实验MHCC97H肝癌细胞迁移数目差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MHCC97H肝癌细胞中MST4高表达,将会激活p-ERK蛋白表达,从而提高细胞因子的表达,提高MHCC97H肝癌细胞的增殖、侵袭能力。

加味小青龙汤及其拆方对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理形态和IL-4含量的影响

目的观察加味小青龙汤及其拆方对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理形态和血浆白细胞介素4(IL-4)含量的影响,探讨该方益气温阳化饮的作用机制及其组方配伍规律。方法将90只大鼠随机分成正常对照组、模型组、益气组、温阳组、化饮组、益气温阳组、益气化饮组、温阳化饮组和加味小青龙汤组,每组10只。采用抗原佐剂全身致敏与局部攻击方法,制备大鼠变应性鼻炎模型,正常对照组和模型组灌服生理盐水,其它各治疗组给予相应的药物,每天一次灌胃给药,连续4周。检测加味小青龙汤及其拆方对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理形态和血浆IL-4含量的影响。结果模型组可见鼻黏膜水肿、充血,上皮不完整,重度炎细胞浸润,嗜酸粒细胞浸润明显,黏膜上皮坏死。各治疗组炎症浸润程度均有改善,以加味小青龙汤组效果最好。模型组血浆IL-4含量明显升高,加味小青龙汤治疗组及其拆方组血浆IL-4含量明显降低,与模型组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中以加味小青龙汤组与各拆方组比较有统计学意义(P<0.05)。结论加味小青龙汤及其拆方各组药物,均具有不同程度的改善鼻黏膜病理炎症浸润程度、降低血浆IL-4含量的作用,加味小青龙汤组的疗效最好,体现了温阳、益气、化饮的合理配伍表现出协同增效的整体调节作用,揭示了加味小青龙汤配伍的高度科学内涵。

AP1000中ADS-4液体夹带实验研究

以AP1000核电厂中自动泄压管线(ADS-4)与热管段形成的T型结构为研究对象,开展缩小比例的T型管夹带实验。实验结果表明:大尺寸支管的夹带与小尺寸支管的夹带有明显差别。分层流情况下的夹带研究中发现两种夹带机理;在较低气相Froude数及较低气腔高度时,容易产生间歇流夹带;在较高气相Froude数情况下,往往出现环状流夹带。此外,实验研究发现,大尺寸支管中回流现象显著。支管形状对起始夹带有重要影响,而液体横流似乎并不影响起始夹带。

磷酸二酯酶4及其抑制剂在学习记忆中的作用

环核苷酸磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)是环核苷酸的唯一细胞内水解酶,因而PDE抑制剂可以通过阻碍环核苷酸的分解,参与生物功能的调节。磷酸二酯酶4(PDE4)是PDE大家族的成员之一,PDE4抑制剂在临床上主要用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、自身免疫性疾病(如银屑病)、过敏性疾病及抑郁症。近年来,越来越多的研究表明PDE4可以通过多种途径影响学习记忆的过程,相应的抑制剂能够通过调控细胞内cAMP水平来改善中枢神经系统退行性疾病所致的学习记忆障碍。本文综述了PDE4在学习记忆调节中的作用及其抑制剂在治疗学习记忆障碍疾病中的应用。

AP1000 ADS-4空气-水夹带试验研究

为研究核电厂中ADS-4卸压夹带过程,以AP1000核电厂为原型设计建造了ADS-4喷放卸压试验回路ADETEL。用高速摄像仪拍摄夹带起始和夹带率的试验过程,将试验数据与现有试验数据和模型进行对比。结果表明:ADETEL试验数据和其他试验数据及理论模型之间存在较大差异;RELAP5和ATLATS的夹带率模型不能准确估算AP1000核电厂中的ADS-4夹带量;当热管段内液位较低时,夹带量会随热管段内液位降低而迅速减小;夹带起始在小支管-主管直径比(d/D)工况下更容易发生;在相同的热管段相对液位下,AP1000中ADS-4支管内液体的夹带率较AP600的低。

3-甾酮-9α-羟基化酶基因的表达及其催化合成9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮

研究应用于甾体9α-羟基化的高效催化剂和催化体系是实现甾体药物9α位羟基高效合成的关键。本文中,笔者对来源于分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis) H37Rv和红平红球菌(Rhodococcus erythropolis) SQ1的3-甾酮-9α-羟基化酶基因(reksh A,mtksh A)进行优化,并对2个基因的催化活性进行检测。通过构建工程表达菌株,以雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)为底物,对制备9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮(9α-OH-AD)的催化反应进行了探索。结果表明:基因序列优化显著提升了Re Ksh A和MtKshA蛋白的可溶性表达,其中Re Ksh A具有较好的雄甾-4-烯-3,17-二酮9α位羟基化活性。用TB培养基培养Re Ksh A的工程表达菌株BL21(DE3)-p ET28a-reksh A-yh,在30℃、500μmol/L底物浓度、0. 8%(体积分数)乙醇为助溶剂、0. 1 mmol/L IPTG诱导浓度、底物与诱导剂同时加入到工程菌液中的条件下,9α-OH-AD得率达到97. 09%。

基于ADS7846的四线电阻式触屏接口设计

针对触摸屏AD采样在实际应用中采样易受干扰、测量值偏差较大等常见问题,给出一种基于ADS784的四线电阻式触摸屏接口电路设计。该接口电路由ADS7846实现对触屏数据的采样;由C8051F320的SPI串口产生对ADS7846的测量命令发送和测量数据读取。并以该接口电路在触摸屏系统中的一个实际应用为例,分析接口电路的常见问题并提出相应的解决方案。实际应用结果表明,该设计合理可行。

AP1000中ADS-4液体夹带模型研究

研究了由AP1000核电厂一回路热管段和ADS-4管道组成的大尺寸支管T型管液体夹带的实验和理论模型,主要包括起始夹带和稳态夹带模型的研究。通过实验和理论分析,建立了与实验数据符合良好的起始夹带模型和稳态夹带模型。通过分析实验段入口长度对夹带的影响,确定了合适的入口段长度。不同液体流量下的研究表明,ADS-4管道中,液体流量对起始夹带和稳态夹带的影响可忽略。

以Aβ4-11为免疫原制备Aβ1-42多克隆抗体

β淀粉样蛋白1-42(βamyloid 1-42,Aβ1-42)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的主要致病蛋白,其抗体一直处于研发当中。现以Aβ4-11耦联KLH免疫2月龄雌兔,ELISA检测雌兔免疫血清中所产生的抗Aβ4-11 IgG滴度,Protein G-琼脂糖亲和层析纯化IgG,Bradford方法进行IgG蛋白含量测定,SDS-PAGE进行IgG纯度测定,最后运用所制备的多克隆抗体采用免疫组化的方法分别对正常小鼠和9月龄APP转基因小鼠进行老年斑的检测,以鉴定此抗体对Aβ1-42的特异性及亲和力。结果显示Aβ4-11具有良好的体液免疫原性,而且以其为免疫原制备的抗体对Aβ1-42表现出良好的特异性及亲和力。结果表明,以Aβ4-11亚单位片段为免疫原制备的Aβ1-42多克隆抗体,可以作为AD的一种有效研究工具,同时也为AD的诊断和治疗提供了一种新的可能。

ADS-4空气-硼酸夹带试验研究

为研究真实工况下的ADS-4夹带现象,以CAP1400为原型按1∶1的比例设计搭建了FATE试验台架。硼酸溶液用来模拟反应堆堆芯中真实工况的流体。利用数据采集系统和高速摄像仪记录夹带过程,将所得的试验数据与纯水工况和已有的模型进行比较。结果表明:对于夹带起始和稳态夹带率,硼酸工况和纯水工况的试验结果与之前的模型均不同。硼酸工况和纯水工况的现象基本相似,弗劳德数随夹带起始液位的增加而减小。两者的夹带起始均有回滞效应,且自上而下的夹带起始更易发生。硼酸工况和纯水工况之间也存在着差异,这主要是由于两者的物理特性参数不同而造成的,尤其是密度和黏度的影响。

4^(th)UI与尿素配施方式对结球白菜生长和部分品质指标的影响

为研究第四类脲酶抑制剂(4^(th) UI)与尿素不同配施方式对结球白菜生长及其部分品质指标的影响,利用室外盆栽方法,以结球白菜的鲜重、株高、叶长、叶宽、叶绿素含量、可溶性糖、根系活力为检测对象,在施肥量相同的情况下,4^(th) UI掺入尿素的3种不同配施方式均能显著提高结球白菜产量、品质指标和养分指标。其中,在B组方式中,1%的抑制剂用量效果最佳,能增产32.82%;在C组方式中,0.2%的抑制剂用量效果最佳,能增产80.49%,株高提高17.34%,结球白菜的总氮和总磷含量分别提高61.36%和78.85%,根系活力提高26.61%;在D组方式中,0.2%的抑制剂用量效果最佳,能增产50.01%。在同一配施方式下,中低浓度的脲酶抑制剂掺量对作物增产效果最佳;在抑制剂浓度相同的3种不同配施方式下,以C组方式及其在此种配施方式下掺入尿素含量0.2%的4^(th) UI分别为最佳抑制剂配施方式和最佳抑制剂用量。

Zr-4铸锭中C元素均匀性控制的研究

针对Zr-4铸锭中添加C元素后化学成分均匀性难以控制的技术难点,研究了合金元素添加方式和熔炼工艺参数对铸锭成分均匀性的影响。结果表明:以中间合金的形式加入C元素,采用常规Zr-4铸锭生产的熔炼工艺,即可将C元素在铸锭中的分布控制在理想状态。

大型先进压水堆ADS-4夹带试验研究

针对大型先进压水堆的ADS-4夹带现象,按照实际比例1∶1搭建了全尺寸ADS-4试验台架(FATE),在不同工况下进行了多组夹带试验。将试验数据与不同模型的结果进行对比,并将试验数据进行拟合,得到夹带起始的模型关系式。试验结果显示:拟真实工况与纯水工况的现象较相似,支管弗劳德数随夹带起始气腔高度的增加而增加;在不同工况的组合中均出现了回滞现象;由于黏性和表面张力的作用,拟真实工况的夹带起始相比纯水工况更难发生。无论是纯水工况、硼酸工况还是杂质工况,除少部分试验数据外,大部分稳态夹带率的试验数据与Welter模型存在较大差异,相对误差均大于20%。

基于ADS的4 G飞地系统的IDPA仿真与优化设计

基站通信中,功率放大器常用的平衡式结构线性度高但效率低,在保证高线性度的前提下为提高效率,设计了一款反向Doherty结构的功率放大器,工作于TD-LTE频段(1880~1920 MHz),可以用于4 G飞地系统中远端机的末级功率放大,有效地提高基站的信号传输。仿真结果显示,在中心频点1900 MHz附近,峰值输出功率(53 dBm)处和回退点(44.5 d Bm)处的功率附加效率分别为62.8%和38.5%,相比于平衡式结构效率提高了13.5%,二次谐波和三次谐波均大于37 dBc。最后通过实物调试及测试验证了仿真的有效性,且额定输出功率44.5 dBm时开环ACPR±20 M大于32 dBc,该设计满足基站应用。

激光数据采集在主管道ADS-4接管打磨中的应用研究

基于AP1000依托项目热试期间发生的主管道热段振动超标问题及现场打磨反馈,利用相贯线原理,通过优化主管道打磨的数据采集方式,采用激光跟踪仪采集主管道热段管身及ADS-4接管的数据并拟合分析,确定打磨进给量,分步实施粗打磨和精打磨,从而实现了接管材料打磨去除量的精确控制,有效保证了管道的打磨作业质量。另外,通过采用仿形尺取形与激光数据采集打磨后ADS-4接管内圆角曲线对比,进一步验证了激光数据采集方式的优越性和可靠性,为后续管道打磨作业提供参考。

Synthesis and Crystal Structure of 4-(Dichloroacetyl)-1-oxa-4-azaspiro[4.5]decane

The title compound 4-(dichloroacetyl)-1-oxa-4-azaspiro[4. 5] decane (CAS number 71526-07-3, C10H15Cl2NO2, Mr= 252.13) was obtained by the reaction of dichloroacetic acid with 1-oxa-4-azaspiro[4. 5] decane. The crystal is of monoclinic, space group P21ln with the unit cell constants: a = 5.9619(4),b= 10.0066(8), c = 20.0986(4) A,β = 90.194(3)°, V= 1199(4) A3,Z = 4, Dc= 1.397 g/cm3, F(000) = 528, μ(MoKα) = 0.522 mm-1, R = 0.0611 and wR = 0.1656 for 1276 observed reflections (I > 2σ(I)). X-ray analysis reveals that the cyclohexyl adopts a chair conformation and the compound is a chiral one.