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白曲霉Aspergillus Kawachii工程菌转化酒精废液的研究 被引量:8
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作者 胡承 张文学 +1 位作者 李萍 胡永松 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期269-273,共5页
将白曲霉Aspergillus Kawachii基因工程菌株TR12,用于添加了少量的NH4NO3以补充氮源酒精废液的转化,经过3d的分批好氧发酵,得到糖化酶活较高的发酵液.
关键词 白曲霉 酒精废液 转化 工程菌 分批好氧发酵 糖化酶 发酵液 酶制剂
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Gene Expression and Fungal Morphology in Submerged Culture Using Whole Barley of Aspergillus kawachii
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作者 Tadahiro Sunagawa Susumu Masuda Hiroshi Shoji 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2014年第1期13-26,共14页
The authors described a novel submerged batch culture system that produced high levels of amylase by Aspergillus kawachii using whole barley (WB), the surface of which is covered by its husk. In this study, detailed... The authors described a novel submerged batch culture system that produced high levels of amylase by Aspergillus kawachii using whole barley (WB), the surface of which is covered by its husk. In this study, detailed analyses determining the amylase activities, residual sugars, fungal morphology and expression levels of genes were performed in a submerged culture using WB to address the mechanism underlying high amylase productivity in A. kawachii. High levels of glucoamylase and acid-stable u-amylase were produced in this culture, and expression levels of amylases, as well as glucose-repressive genes including high-affinity glucose transporter and peroxidase/catalase were also high. On the other hand, the morphology of mycelia was altered, with swollen, bulbous, multi-septum hyphae and conidiophores that normally form in a solid culture being partially generated. Furthermore, cell cycle and post-translational modification-related gene expression levels were altered, and were similar to those in the solid culture. These findings suggest that high amylase productivity in the submerged culture using WB is accompanied by both the up-regulation of amylase genes and activation of post-translational modifications due to fungal morphological changes being brought closer to those in the solid culture. 展开更多
关键词 aspergillus kawachii aMYLaSE submerged culture whole barley fungal morphology post-translational modification.
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耐酸性木聚糖酶在清酒酿造中的作用 被引量:10
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作者 陆健 曹钰 +1 位作者 陈坚 顾国贤 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期27-30,共4页
从华根霉 (RhizopuschinensisY92 )发酵液中通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱分离纯化获得一种耐酸性木聚糖酶R ,将它和另外 2种耐酸性木聚糖酶 :米曲霉 (AspergillusoryzaeRIB12 8)木聚糖酶B和白曲菌 (AspergilluskawachiiIFO43 0 8)木... 从华根霉 (RhizopuschinensisY92 )发酵液中通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱分离纯化获得一种耐酸性木聚糖酶R ,将它和另外 2种耐酸性木聚糖酶 :米曲霉 (AspergillusoryzaeRIB12 8)木聚糖酶B和白曲菌 (AspergilluskawachiiIFO43 0 8)木聚糖酶C分别应用于清酒酿造中 ,结果表明 ,木聚糖酶B可以促进米细胞的溶解 ,对于原料米的利用率有明显的提高 。 展开更多
关键词 木聚糖酶 华根霉 米曲霉 白曲菌 清酒 酿造
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白曲耐酸性α-淀粉酶的分离和纯化 被引量:10
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作者 张文学 杨瑞 +1 位作者 胡承 木田建次 《四川大学学报(工程科学版)》 EI CAS CSCD 2002年第2期51-56,共6页
从白曲霉菌A .Kawachii的米曲粗抽出液中 ,通过乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方式 ,获得了两个耐酸性α -淀粉酶比活性极高的组分 ,经SDS -PAGE分析 ,推断其组分A分子量为 85 ,0 0 0 ,组分B分子量为10 4 ,0 0 0。两组分均为... 从白曲霉菌A .Kawachii的米曲粗抽出液中 ,通过乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方式 ,获得了两个耐酸性α -淀粉酶比活性极高的组分 ,经SDS -PAGE分析 ,推断其组分A分子量为 85 ,0 0 0 ,组分B分子量为10 4 ,0 0 0。两组分均为糖蛋白 ,且能被枯草杆菌蛋白酶 (Subtilisin)适度降解。其N -末端 10 - 12残基的氨基酸序列与黑曲霉A .niger的耐酸性α -淀粉酶N -末端氨基酸序列极为相似。借此推断 ,A .Kawachii的白曲中至少有两种以上的耐酸性α 展开更多
关键词 酸性Α-淀粉酶 米曲 白曲霉菌 氨基酸序列分析 分离 纯化 发酵制备
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新型耐酸性液化糖化酶的分离提取及其特性 被引量:5
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作者 刘春莉 张文学 +1 位作者 江孝明 杨瑞 《酿酒》 CAS 北大核心 2003年第3期73-76,共4页
白曲霉基因工程菌TR12在液体培养基中32℃摇瓶培养96h,粗提酶液经进一步分离提取,得到同时具有液化和糖化两种酶活力的新型酸制剂,最适pH值为4.6。耐酸性α-淀粉酶活性的最适温度为60℃,糖化酶活性的最适温度为50℃。在pH4.6酸性条件下... 白曲霉基因工程菌TR12在液体培养基中32℃摇瓶培养96h,粗提酶液经进一步分离提取,得到同时具有液化和糖化两种酶活力的新型酸制剂,最适pH值为4.6。耐酸性α-淀粉酶活性的最适温度为60℃,糖化酶活性的最适温度为50℃。在pH4.6酸性条件下,该液化糖化酶在50℃保温1h,仍具有原酶活性。Ca^(2+)对该耐酸性液化糖化酶有激活作用,Fe^(3+)、Al^(3+)等金属离子对该酶活力有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 耐酸性液化糖化酶 分离提取 白曲霉基因工程菌TR12 Α-淀粉酶 酶学性质
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新型耐酸性α-淀粉酶液态发酵条件的研究 被引量:2
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作者 刘春莉 张文学 杨瑞 《四川大学学报(工程科学版)》 EI CAS CSCD 2003年第1期63-65,共3页
通过基因工程技术导入了产生耐酸性α-淀粉酶和糖化酶的多考贝融合基因而获得的白曲霉基因工程菌株TR12作为试验菌株,分别在摇瓶条件下和2L通气发酵罐上进行耐酸性α-淀粉酶的液态发酵工艺条件的试验研究。正交试验结果表明,优化摇瓶发... 通过基因工程技术导入了产生耐酸性α-淀粉酶和糖化酶的多考贝融合基因而获得的白曲霉基因工程菌株TR12作为试验菌株,分别在摇瓶条件下和2L通气发酵罐上进行耐酸性α-淀粉酶的液态发酵工艺条件的试验研究。正交试验结果表明,优化摇瓶发酵培养基配方A3B3C2D1,即玉米粉4%,玉米浆1.5%,黄豆粉2%,麸皮4%,摇瓶产酶活力81.69u/mL,2L发酵罐的产酶活力达到了83.6u/mL的水平。 展开更多
关键词 白曲霉TR12 基因工程 液态发酵 耐酸性Α-淀粉酶 工艺条件
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新型耐酸性α-淀粉酶液态深层发酵条件的研究 被引量:1
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作者 刘春莉 张文学 杨瑞 《四川食品与发酵》 CAS 2003年第1期27-29,共3页
本文采用白曲霉基因工程茵株TR12,该菌株是通过基因工程技术导入了产生耐酸性α-淀粉酶和糖化酶的多拷贝融合基因而获得的。通过正交试验的方法对TR12的液态深层发酵条件进行研究,获得了一最佳摇瓶发酵培养基配方A_38_3C_2D_1。为了验... 本文采用白曲霉基因工程茵株TR12,该菌株是通过基因工程技术导入了产生耐酸性α-淀粉酶和糖化酶的多拷贝融合基因而获得的。通过正交试验的方法对TR12的液态深层发酵条件进行研究,获得了一最佳摇瓶发酵培养基配方A_38_3C_2D_1。为了验证该理论结果,又利用摇瓶和2L的通气发酵罐进行了放大试验。 展开更多
关键词 耐酸性Α-淀粉酶 发酵条件 白曲霉TR12 基因工程 液态深层发酵
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白曲霉用于食醋糖化过程的研究 被引量:1
8
作者 谭檑 薛建华 梁建明 《中国酿造》 CAS 2013年第12期112-115,共4页
通过正交试验确定了白曲霉SICC3.917三角瓶与糖化曲的最佳培养基成分及最佳培养条件、糖化醪液的最佳制备工艺。结果表明白曲霉的三角瓶最佳培养条件为:麸皮添加量8.5g,玉米粉添加量1.5g,水添加量10.5g,培养温度30℃。白曲霉SICC3.917... 通过正交试验确定了白曲霉SICC3.917三角瓶与糖化曲的最佳培养基成分及最佳培养条件、糖化醪液的最佳制备工艺。结果表明白曲霉的三角瓶最佳培养条件为:麸皮添加量8.5g,玉米粉添加量1.5g,水添加量10.5g,培养温度30℃。白曲霉SICC3.917糖化曲的最佳培养条件为种曲接种量0.5%,熟料含水量52%,培养温度32℃,空气湿度90%。糖化醪液的最佳制备工艺为白曲霉糖化曲的添加量1.3%,大米粉浓度20.7%,糖化温度65℃,糖化时间3h。 展开更多
关键词 白曲霉 正交试验 食醋 糖化效率
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白曲酸性蛋白酶在无孢黑曲SH-2中的克隆表达及酶学性质分析 被引量:3
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作者 董文超 王斌 潘力 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2018年第6期80-87,共8页
白曲霉酸性蛋白酶在白酒酿造发酵过程中具有溶解发酵原料的颗粒,促进微生物繁殖,分解蛋白质生成香味物质,降解酵母菌体蛋白等多种功能,可以提高白酒风味,因此被广泛应用于白酒生产中。本研究利用经基因工程改造的低内源蛋白背景的黑曲... 白曲霉酸性蛋白酶在白酒酿造发酵过程中具有溶解发酵原料的颗粒,促进微生物繁殖,分解蛋白质生成香味物质,降解酵母菌体蛋白等多种功能,可以提高白酒风味,因此被广泛应用于白酒生产中。本研究利用经基因工程改造的低内源蛋白背景的黑曲霉宿主SH-2,表达白曲霉酸性蛋白酶基因pepB。通过PCR技术获得pepB以及表达元件糖化酶启动子PglaA、糖化酶终止子TglaA、乳清酸核苷-5-磷酸脱羧酶标记基因pyrG,在pMD18-T载体基础上,构建了pepB表达载体,通过PEG介导转化法转化无孢黑曲酶SH-2。重组菌株经发酵罐发酵240 h,发酵粗酶液酶活达9722 U/mL,是报道的白曲原始菌株酶活的8.5倍,SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为47 ku。酶学性质分析结果表明,该酸性蛋白酶最适反应温度为35℃,最适pH为4.0,Mn^(2+)、Cu^(2+)对酶活有显著地激活作用。最后,探究了在不同发酵初始pH下重组菌株酶活的变化,结果显示,在pH 4.5~6.5范围内,适当提高发酵初始pH,酸性蛋白酶酶活会提高。以上结果表明,本研究成功构建了一株能胞内高效表达白曲酸性蛋白酶的菌株。 展开更多
关键词 白曲酸性蛋白酶 无孢黑曲SH-2 重组表达
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