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Calcein-AM和Annexin V在流式细胞术检测早期细胞凋亡的敏感性比较
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作者 王佳 冯永东 +5 位作者 陶德定 李小兰 肖薇 刘双又 余从年 龚建平 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期182-184,共3页
目的比较Calcein-AM与Annexin V用于流式细胞术检测活细胞早期凋亡时的敏感性,建立新的检测细胞早期凋亡的方法。方法将人类急性T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4)经喜树碱(CPT)、紫外线(UV)诱导后,分别采用Calcein-AM及异硫氰酸荧光素标... 目的比较Calcein-AM与Annexin V用于流式细胞术检测活细胞早期凋亡时的敏感性,建立新的检测细胞早期凋亡的方法。方法将人类急性T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4)经喜树碱(CPT)、紫外线(UV)诱导后,分别采用Calcein-AM及异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)染色,然后用流式细胞仪分析凋亡率,通过比较诱导后不同时间点的凋亡率来分析Calcein-AM和Annexin V对于检测细胞早期凋亡的敏感性。结果在喜树碱诱导模型中,加药后2 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而3 h后才能用Annexin V检测到;在紫外线诱导模型中,照射后1 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而要在2 h后才能用Annexin V检测到。结论Calcein-AM用于检测活细胞早期凋亡比Annexin V更为敏感,是一种稳定、可靠、灵敏度高并且较为经济的检测细胞早期凋亡的活细胞染料。 展开更多
关键词 流式细胞术 凋亡 线粒体膜通透性 calcein-am 膜联蛋白V
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Calcein-AM荧光扫描测定细胞毒方法的建立 被引量:1
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作者 陶嫦立 丁哲纯 +3 位作者 郭雯静 吴凤麟 邵红伟 黄树林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1364-1368,共5页
目的:建立和优化基于钙黄绿素-AM(Calcein-AM)荧光扫描的细胞毒测定方法。方法:首先使用Calcein-AM染色靶细胞,扫描检测Calcein-AM荧光值,确定Calcein-AM最佳激发波长和发射波长;然后优化Calcein-AM染色的浓度和时间;最后以效靶比... 目的:建立和优化基于钙黄绿素-AM(Calcein-AM)荧光扫描的细胞毒测定方法。方法:首先使用Calcein-AM染色靶细胞,扫描检测Calcein-AM荧光值,确定Calcein-AM最佳激发波长和发射波长;然后优化Calcein-AM染色的浓度和时间;最后以效靶比为30∶1~1∶1,共孵育时间为4 h,荧光扫描测定靶细胞裂解的百分率。结果:荧光染料Calcein-AM能有效标记靶细胞,最佳激发波长和发射波长为485 nm和515 nm;Calcein-AM对细胞毒性低,不影响细胞活性;4 h内的自发释放率低于15%;CIK(Cytokine induced killer)效应细胞与靶细胞共孵育4 h的细胞毒效应随效靶比增加而升高。结论:建立和优化了Calcein-AM荧光染料标记靶细胞检测细胞毒效应的方法,该方法可避免放射性试剂的应用,对细胞毒性低,准确性高。 展开更多
关键词 calcein-am 细胞毒 荧光释放测定
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Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞毒性的方法 被引量:3
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作者 饶秀茸 崔博婧 +2 位作者 付凡 王宇环 马飞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期620-625,共6页
目的建立和优化钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒活性的方法。方法利用Calcein-AM标记靶细胞,然后与效应细胞共孵育24 h,结束后加入PI,最后流式细胞术检测;通过BD... 目的建立和优化钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒活性的方法。方法利用Calcein-AM标记靶细胞,然后与效应细胞共孵育24 h,结束后加入PI,最后流式细胞术检测;通过BD公司绝对细胞计数管验证上述流程的稳定性和可靠性。结果 Calcein-AM能在较低浓度(0.1~0.5μmol/L)下对靶细胞在宽密度范围(0.1~10)×10^6/ml内进行很好标记,而且24 h内对细胞活率无影响,同时还能与未标记细胞进行很好的区分;整个流程具有很好的稳定性和可靠性。结论建立并优化了Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒效应的方法,本方法除操作简单、重复性好、灵敏度高外,还能更好的区分死亡细胞的来源。 展开更多
关键词 钙黄绿素-am ΓΔT细胞 细胞毒活性 流式细胞术
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痕量氟的Al^(3+)-Calcein配合物荧光熄灭测定法
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作者 李华斌 姚延伸 +2 位作者 张继伦 张洪仪 谭舒敏 《四川师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第6期96-99,共4页
本文建立了痕量氟的Al3+-Calcein配合物荧光熄灭测定法.该法激发波长480um,发射波长503um,线性范围2~150μg/F-,灵敏度为2μg/LF-,100μg/LF-时标准偏差为1.3μg/LF-,是现... 本文建立了痕量氟的Al3+-Calcein配合物荧光熄灭测定法.该法激发波长480um,发射波长503um,线性范围2~150μg/F-,灵敏度为2μg/LF-,100μg/LF-时标准偏差为1.3μg/LF-,是现有的最灵敏方法之一.用茜素络合剂分光光度法进行对照实验,二者获得的结果一致. 展开更多
关键词 测定 配合物 荧光熄灭法 calcein
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Use of calcein and alizarin red S for immersion marking of black rockfish Sebastes schlegelii juveniles 被引量:8
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作者 Lü Hongjian ZHANG Xiumei +1 位作者 XI Dan GAO Tianxiang 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期88-98,共11页
Black rockfish Sebastes schlegelii juveniles (30-40 mm total length) were immersed in a range of calcein (CAL) solutions at concentrations ranging from 50 to 250 mg/L and alizarin red S (ARS) solutions at concen... Black rockfish Sebastes schlegelii juveniles (30-40 mm total length) were immersed in a range of calcein (CAL) solutions at concentrations ranging from 50 to 250 mg/L and alizarin red S (ARS) solutions at concentrations ranging from 100 to 500 mg/L in filtered seawater (salinity 30) for 24 h. Fluorescent marks were detected in otoliths (sagittae, asteriscus), scales, fin rays (dorsal, pectoral, ventral, anal, and caudal fin rays), and fin spines (dorsal, ventral, and anal fin spines) after a 60-d growth experiment. With the exception of 50-100 rng/L CAL, acceptable marks were produced in the otoliths and fin spines by all concentrations of CAL and ARS. In particular, marks were clearly visible under normal light in the sagittae, asteriscus, and fin spines offish immersed in 200 500 mg/L, 300-500 rag/L, and 200-500 mg/LARS, respectively. Scales and fin rays had acceptable marks at much higher concentrations (≥50 mg/L CAL, ≥300 mg/L ARS for scales and ≥50 mg/L CAL,≥200 mg/L ARS for fin rays). The mark quality was highest (i.e., acceptable marks were observed in all sampled structures after immersion marking) in fish immersed in 150-250 mg/L CAL or 300-500 mg/LARS. In addition, there was no significant difference in survival and growth of marked fish compared with controls 60 d post-marking (P〉0.05). 展开更多
关键词 Sebastes schlegelii calcein (CAL) alizarin red S (ARS) otoliths fin rays fin spines
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薯蓣皂苷对人肾癌786-0细胞缝隙连接功能的影响 被引量:13
6
作者 张广献 肖建勇 +5 位作者 邵红伟 赖炫城 丘鹏翔 吴映雅 谭宇蕙 杜标炎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期778-782,共5页
目的探讨薯蓣皂苷(Dioscin,Dio)对人肾癌786-0细胞缝隙连接(Gap junction,GJ)功能的影响及其作用机制。方法 MTT法测Dio对786-0细胞生长的影响,荧光显微镜观察及流式细胞术结合荧光示踪法分析GJ功能变化,RT-PCR和Western blot分析连接... 目的探讨薯蓣皂苷(Dioscin,Dio)对人肾癌786-0细胞缝隙连接(Gap junction,GJ)功能的影响及其作用机制。方法 MTT法测Dio对786-0细胞生长的影响,荧光显微镜观察及流式细胞术结合荧光示踪法分析GJ功能变化,RT-PCR和Western blot分析连接蛋白基因表达。结果 0~2.5μmol.L-1 Dio处理786-0细胞48h不影响其存活率;用0、0.1、0.5、1和2μmol.L-1 Dio处理细胞48 h后,荧光显微镜下观察,Dio能明显提高786-0细胞Calcein传递,流式细胞术分析对照组和实验组的绿色荧光细胞(G4)与双阴性受体细胞(G3)比值(G4/G3)分别是0.13±0.01、0.23±0.01、0.30±0.01、0.56±0.02和1.15±0.02,各实验组G4/G3值明显高于对照组(P<0.01);RT-PCR和Western blot分析结果显示,用0、0.1、0.5、1和2μmol.L-1 Dio处理细胞48 h对其Cx43、Cx32和Cx26表达无明显影响。结论体外较低浓度Dio能够有效促进786-0细胞GJ功能,且具有明显的剂量效应关系。但Dio促进GJ机制并不是通过上调Cx43、Cx32和Cx26蛋白表达途径。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷 荧光示踪 786-0细胞 缝隙连接 连接蛋白 calcein-am 流式细胞术
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瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系(英文) 被引量:16
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作者 牟凌云 王琴美 倪奕昌 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期83-85,共3页
目的 研究瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系。 方法 在恶性疟原虫FCC1株常规方法体外培养中检测瑞香素和去铁胺杀裂殖体活性。利用荧光探针calcein测定瑞香素和去铁胺的铁螯合能力。 结果 与强铁螯合剂去铁胺相比 ,瑞香素... 目的 研究瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系。 方法 在恶性疟原虫FCC1株常规方法体外培养中检测瑞香素和去铁胺杀裂殖体活性。利用荧光探针calcein测定瑞香素和去铁胺的铁螯合能力。 结果 与强铁螯合剂去铁胺相比 ,瑞香素具有中度的铁螯合能力。体外实验中瑞香素在 0~ 12 μmol/L剂量范围内有剂量依赖性的杀裂殖体活性。瑞香素与Fe2 + 按 2∶1混合后 ,抗疟作用明显下降。 结论 瑞香素的抗疟作用与它的铁螯合能力有关。 展开更多
关键词 铁螯合能力 恶性疟原虫 瑞香素 去铁胺 calcein 体外抗疟作用
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荧光素标记检测乙型肝炎病毒表面抗原特异性杀伤性T淋巴细胞方法的探讨 被引量:2
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作者 吴婷 陈敏 +4 位作者 欧山海 何水珍 程通 张军 夏宁邵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期113-117,共5页
用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度... 用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度、不同洗涤次数、不同裂解液配方,确定CalceinAM荧光素标记法的最佳条件。用该方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的DNA疫苗免疫Balb/c小鼠对P815S细胞的CTL效应,E/T比为10时,杀伤效率接近饱和,达到65%。通过荧光显微镜直接观察杀伤后的P815S细胞,细胞破裂程度与计算出的杀伤效率有一定相关性。 展开更多
关键词 CTL 乙型肝炎病毒表面抗原 T淋巴细胞 特异性杀伤 靶细胞 荧光素标记 培养上清 浓度 孵育 洗涤次数
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不同冻融条件对同种异体面神经许旺细胞活性的影响 被引量:3
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作者 高志强 程勇泉 +5 位作者 冯国栋 查洋 亓放 姜鸿 吕威 沈鹏 《中华耳科学杂志》 CSCD 2008年第3期253-259,共7页
目的探索一种可简单准确地调控离体面神经许旺细胞(SchwannCells,SC)活性的方法并观察含不同活性SC的面神经在同种异体移植中的效果。方法(1)将动物分为新鲜神经组(F组)、冻融一次组(FTⅠ组)和冻融五次组(FTⅤ组),定量测定冻融法对面神... 目的探索一种可简单准确地调控离体面神经许旺细胞(SchwannCells,SC)活性的方法并观察含不同活性SC的面神经在同种异体移植中的效果。方法(1)将动物分为新鲜神经组(F组)、冻融一次组(FTⅠ组)和冻融五次组(FTⅤ组),定量测定冻融法对面神经SC活性的影响,每组3条面神经用钙黄绿素-乙酰羟甲基酯(Calcein-AM)染色,以共聚焦显微镜测定荧光强度,反映SC活性。(2)每组9只大鼠接受单侧同种异体面神经移植,术后2、4、8周各取3只大鼠的面神经移植物中段行髓鞘锇酸染色,观察轴突再生情况。结果平均荧光强度:F组为140.93±17.55/μm2,FTⅠ组56.99±7.10/μm2,FTⅤ组28.46±4.11/μm2;术后第8周F组、FTⅠ组和FTⅤ组中段的轴突计数分别为225±41、357±76和303±51;术后第8周,FTⅠ组神经新生轴突分布较FTⅤ组和F组更为均匀,髓鞘厚度和轴突横截面积更大,髓鞘更为成熟。结论快速冻融法可以有效和准确地调控面神经SC的活性,冻融一次可以将神经SC活性降低到新鲜面神经的40%,而反复冻融五次可降低到20%;调控SC的数目可能影响同种异体面神经移植的效果。 展开更多
关键词 面神经 许旺细胞 活性 钙黄绿素-乙酰羟甲基酯 同种异体神经移植
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微囊化间充质干细胞活力检测方法比较 被引量:1
10
作者 李保国 刘荣 +1 位作者 佀国宁 汤亭亭 《上海理工大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期594-597,共4页
对微囊化间充质干细胞(MSCs)采用EB/Calcein-AM和MTS/PMS细胞检测新方法,并与传统的台盼兰及MTT染色检测法进行比较,探索适合于微囊化细胞活力检测的方法.研究表明:分别采用EB/Calcein-AM,台盼兰,MTT,MTS这4种方法,检测海藻酸钠-聚赖氨... 对微囊化间充质干细胞(MSCs)采用EB/Calcein-AM和MTS/PMS细胞检测新方法,并与传统的台盼兰及MTT染色检测法进行比较,探索适合于微囊化细胞活力检测的方法.研究表明:分别采用EB/Calcein-AM,台盼兰,MTT,MTS这4种方法,检测海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊内MSCs细胞活力,传统的台盼兰与MTT检测法不适用APA微囊化MSCs细胞活力检测,EB/Calcein-AM与MTS是检测APA微囊化MSCs细胞活力的有效方法. 展开更多
关键词 微囊 间充质干细胞 活力检测 台盼兰 EB/calcein-am MTT法 MTS法
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整合素CD11/CD18在人单核细胞和肿瘤细胞粘附中的作用 被引量:2
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作者 许佐良 I.J.Fidler 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第1期5-9,共5页
本文报道用无毒性的活体荧光染料—钙黄绿素 AM标记的肿瘤细胞与人单核细胞共培养4小时,用Cyto Fluo 2300测定细胞粘附能力的荧光检测技术.结果表明IFN-γ和LPS激活的人单核细胞能迅速地与悬浮生长的人肿瘤细胞、B淋巴母细胞及淋巴细胞... 本文报道用无毒性的活体荧光染料—钙黄绿素 AM标记的肿瘤细胞与人单核细胞共培养4小时,用Cyto Fluo 2300测定细胞粘附能力的荧光检测技术.结果表明IFN-γ和LPS激活的人单核细胞能迅速地与悬浮生长的人肿瘤细胞、B淋巴母细胞及淋巴细胞粘附.激活的人单核细胞表达更多的CD11a、CD11b、CD11c和CD18,对肿瘤细胞有更多的粘附性.抗体封闭及蛋白激酶抑制物处理细胞,粘附能力均受到明显的抑制.IFN-γ和LPS处理肿瘤细胞也能明显增加两种细胞间的粘附能力.上述结果提示人单核细胞粘附能力的增加与整合素及肿瘤细胞所表达的相关配体增加有关. 展开更多
关键词 粘附分子 整合素 单核细胞 肿瘤细胞
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Humanin对缺氧诱导的大鼠皮层神经元损伤的保护作用
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作者 赵珅婷 赵丽 +1 位作者 乔健天 张策 《中西医结合心脑血管病杂志》 2010年第2期197-199,共3页
目的观察Humanin(HN)对缺氧诱导皮层神经细胞损伤的保护作用。方法培养10d的原代皮层神经元在缺氧环境下(氧含量<2%)放置4h诱导神经细胞损伤。实验组在缺氧之前24h分别加入终浓度为10μmol/L和20μmol/L的HN。通过测定MTT和Calcein-A... 目的观察Humanin(HN)对缺氧诱导皮层神经细胞损伤的保护作用。方法培养10d的原代皮层神经元在缺氧环境下(氧含量<2%)放置4h诱导神经细胞损伤。实验组在缺氧之前24h分别加入终浓度为10μmol/L和20μmol/L的HN。通过测定MTT和Calcein-AM染色检测细胞活力。通过测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化检测细胞损伤的程度。结果HN可以提高缺氧4h后细胞的存活率,同时可以降低由细胞损伤所引起的MDA、SOD、LDH的升高。20μmol/L的HN具有比10μmol/L更显著的保护作用。结论HN对缺氧诱导的神经元细胞损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 HUMANIN 缺氧 MTT calceinam 丙二醛 超氧化物歧化酶 乳酸脱氢酶
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移植物体外净化白血病细胞模型的建立
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作者 孙飞 汤永民 +5 位作者 沈红强 钱柏芹 宋华 杨世隆 石淑文 徐卫群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期433-437,共5页
本实验采用荧光素Calcein AM标记白血病细胞后分别接种入细胞株或骨髓细胞中以建立 3个白血病移植物细胞模型 ,采用免疫磁珠法对细胞模型进行选择 ,并用流式细胞术 (FCM)评价移植物模型中白血病细胞的净化效果。结果表明 :所建立的移植... 本实验采用荧光素Calcein AM标记白血病细胞后分别接种入细胞株或骨髓细胞中以建立 3个白血病移植物细胞模型 ,采用免疫磁珠法对细胞模型进行选择 ,并用流式细胞术 (FCM)评价移植物模型中白血病细胞的净化效果。结果表明 :所建立的移植物细胞模型既可以用荧光显微镜分析 ,又可以用FCM进行精确评价。模型Ⅱ经免疫磁珠法体外净化后髓系白血病KG1a细胞的清除率为 (0 98± 0 0 9)log,模型Ⅲ中淋巴系白血病NALM 6细胞的清除率为 (1 82± 0 51 )log。结论 :建立的模型直观、稳定、重复性好 。 展开更多
关键词 白血病 免疫磁珠选择法 移植物净化模型 荧光素 calceinam 流式细胞术
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流式细胞术检测NK细胞的细胞毒作用的两种方法比较 被引量:5
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作者 蔡思齐 邓志辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期325-330,共6页
目的:比较并优化流式细胞术检测人NK细胞体外细胞毒功能的方法。方法:采用Calcein-AM释放法或CFSE/7-AAD法分别对靶细胞进行标记,按10∶1和20∶1效靶比与7例NK细胞在37℃5%CO2培养箱共培养4 h,流式细胞术测定两种不同标记方法的靶细胞... 目的:比较并优化流式细胞术检测人NK细胞体外细胞毒功能的方法。方法:采用Calcein-AM释放法或CFSE/7-AAD法分别对靶细胞进行标记,按10∶1和20∶1效靶比与7例NK细胞在37℃5%CO2培养箱共培养4 h,流式细胞术测定两种不同标记方法的靶细胞死亡率。结果:各实验组中CFSE/7-AAD法检出的靶细胞死亡率均高于Calcein-AM释放法,在低效靶比、弱细胞毒作用条件下,差异具有统计学意义。细胞毒作用较弱时,Calcein-AM释放法平均荧强度变化不显著、结果误差较大;而CFSE/7-AAD法则能更加敏感地检出靶细胞的死亡率。结论:CFSE/7-AAD法能够特异、灵敏地检出NK细胞的细胞毒活性,所获得的结果更为可靠。 展开更多
关键词 流式细胞术 细胞毒作用 NK细胞 钙黄绿素乙酰甲酯 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯 7-氨基-放线菌素D
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Effects of different types of palatal lateral excisions on growth and development of maxilla and dental arch 被引量:1
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作者 Jun WU Qian ZHENG +4 位作者 Bing SHI Tian MENG Yan WANG Sheng LI Li-shu LIAO 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2008年第8期638-648,共11页
Objective:This study aimed to explore the effects of different types of palatal lateral excisions on the growth and development of the maxilla and dental arch, and to investigate the underlying mechanisms. Methods: A ... Objective:This study aimed to explore the effects of different types of palatal lateral excisions on the growth and development of the maxilla and dental arch, and to investigate the underlying mechanisms. Methods: A total of 112 3-week-old Sprague-Dawley (SD) male rats were randomly divided into a control and 3 experimental groups: the mucoperiosteal denudation group, the mucosal flap excision group, and the periosteum excision group. In the experimental groups, bilateral mucoperiosteal, mucosal flap and periosteum were excised respectively in the lateral one half of the palate. Four rats in each group were randomly chosen for sacrifice every two weeks. The maxilla was dissected following the excision. The widths of the maxilla and dental arch were measured and the histological phenomena were investigated at different phases. At the same time, 12 animals in each group were sequentially injected with calcein every two weeks. Three animals in each group, whose fluorescent labeling was used, were sacrificed for investigating bone formation at Week 8 following injection. Results: (1) Each experimental group presented the constriction of the maxilla and dental arch. The upper first molars in the experimental groups inclined medially. The mucoperio-steal denudation group showed the largest degree of effect followed by the periosteum excision group. The indices of the mucosal flap excision group, which retained the structures of the periosteum layer, had the most approximate values to the control group; (2) Different histological changes among the experimental groups were detected. The fibers penetrated into the palatal bone as Sharpey's fibers in the mucoperiosteal denudation group. The pattern of bone deposition was the bundle type. Sharpey's fibers were not found in the mucosal flap and periosteum excision groups and the depositions of palatal bone were the lamellar type as those in the control group; (3) The rates of bone deposition in the experimental groups decreased compared with the control group. The rates in different phases were the most approximate values to those of the control group in the mucosal flap excision group, which has the same structure of periosteum as the control group. Conclusion: There were different effects on the growth and development of the maxilla and dental arch in different types of palatal lateral excisions. Periosteum is important for bone for-mation and deposition pattern. The prevention of Sharpey's fibers forming and attaching to the palatine can effectively avert the following malformation. 展开更多
关键词 Lateral excision Maxilla growth Dental arch growth PERIOSTEUM calcein Sharpey's fibers
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Inhibition of P-glycoprotein by two artemisinin derivatives
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作者 Babette STEGLICH Anne MAHRINGER +3 位作者 Ying LI Gary H.POSNER Gert FRICKER Thomas EFFERTH 《Natural Products and Bioprospecting》 CAS 2012年第2期59-64,共6页
P-Glycoprotein/MDR1 represents an important component of the blood brain barrier and contributes to multidrug resistance.We investigated two derivatives of the anti-malarial artemisinin,SM616 and GHP-AJM-3/23,concerni... P-Glycoprotein/MDR1 represents an important component of the blood brain barrier and contributes to multidrug resistance.We investigated two derivatives of the anti-malarial artemisinin,SM616 and GHP-AJM-3/23,concerning their ability to interact with P-glycoprotein.The ability of the two compounds to inhibit P-glycoprotein(P-gp)activity was examined in sensitive CCRF-CEM and P-gp over-expressing and multidrug-resistant CEM/ADR5000 cells as well as in porcine brain capillary endothelial cells(PBCEC)by means of calcein-AM assays.Verapamil as well-known P-gp inhibitor was used as control drug.CEM/ADR5000 cells exhibited cross-resistance to GHP-AJM-3/23,but slight collateral sensitivity to SM616.Furthermore,SM616 inhibited calcein efflux both in CEM/ADR5000 and PBCEC,whereas GHP-AJM-3/23 did only increase calcein fluorescence in PBCEC,but not CEM/ADR5000.This may be explained by the fact that CEM/ADR5000 only express P-gp but not other ATP-binding cassette transporters,whereas PBCEC are known to express several ABC transporters and calcein is transported by more than one ABC transporter.Hence,SM616 may be the more specific P-gp inhibitor.In conclusion,the collateral sensitivity of SM616 as well as the inhibition of calcein efflux in both CEM/ADR5000 cells and PBCEC indicate that this compound may be a promising P-gp inhibitor to treat cancer therapy and to overcome the blood brain barrier. 展开更多
关键词 blood brain barrier calcein multidrug resistance P-GLYCOPROTEIN
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用Calcein释放实验检测HBs DNA疫苗诱生的特异性CTL活性
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作者 周晓辉 郑玲洁 袁正宏 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期234-234,共1页
关键词 calcein释放实验 检测 HBS DNA疫苗 特异性CTL活性
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氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系对乳腺癌4T1细胞的影响和生物安全性初步评价
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作者 谢黎崖 卓素联 +2 位作者 张真 侯振清 田海娜 《药物生物技术》 CAS 2024年第5期479-483,共5页
文章主要研究氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系(GO-Arg-SL)对乳腺癌4T1细胞的影响,并对其进行生物安全性的初步评价。选择乳腺癌4T1细胞为研究对象,采用激光共聚焦荧光显微镜和流式细胞术观察GO-Arg-SL对4T1细胞产生NO的影响;采用MTT法和活... 文章主要研究氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系(GO-Arg-SL)对乳腺癌4T1细胞的影响,并对其进行生物安全性的初步评价。选择乳腺癌4T1细胞为研究对象,采用激光共聚焦荧光显微镜和流式细胞术观察GO-Arg-SL对4T1细胞产生NO的影响;采用MTT法和活/死细胞染色法,观察4T1细胞的抑制和杀伤情况,评价GO-Arg-SL对4T1细胞的毒性;采用BALB/c小鼠进行生物安全性实验,观察溶血情况,检测血生化和血常规。结果表明,GO-Arg-SL能使4T1细胞内产生大量的NO;GO-Arg-SL能抑制4T1细胞的生长,加激光照射组的抑制和杀伤能力更强;溶血结果符合规定,血生化和血常规维持在正常范围内。说明GO-Arg-SL光热协同NO气体具有优异的细胞杀伤能力,并且具有良好的生物安全性。 展开更多
关键词 氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系 4T1细胞 BALB/C小鼠 细胞毒性 活/死细胞染色法 生物安全性
原文传递
荧光法快速检测活菌数的方法研究及应用 被引量:4
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作者 张宇婷 聂麦茜 +4 位作者 尹秋月 第五振军 阴丹丹 李连城 刘洋 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2652-2664,共13页
【背景】Calcein UltraGreenTMAM是一种新型荧光染料,用于标记和监测活细胞。【目的】基于该荧光染料的荧光特性及其在活细胞内的稳定特性,建立一种荧光定量快速检测活细菌总数的方法,并在实际样品中应用校正。【方法】通过应用荧光染... 【背景】Calcein UltraGreenTMAM是一种新型荧光染料,用于标记和监测活细胞。【目的】基于该荧光染料的荧光特性及其在活细胞内的稳定特性,建立一种荧光定量快速检测活细菌总数的方法,并在实际样品中应用校正。【方法】通过应用荧光染料对细菌进行染色,再进行荧光强度检测,同时以平板计数法作平行对照,建立荧光强度值-活菌数标准曲线。【结果】确定了染色细菌的最佳pH值为8.0。该检测方法仅需固定染色温度,染色时间在20-30min范围即可快速检测。建立了革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌NY3、大肠杆菌和革兰氏阳性菌芽孢杆菌、红平红球菌FF、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的细菌总数与相对荧光强度值标准曲线。当菌悬液OD600值在0.01-0.30范围内时,上述6种细菌与荧光信号强度呈良好的线性关系(R2>0.99)。【结论】当样品菌悬液浓度范围控制在105-109CFU/mL时,建立的荧光检测方法快速便捷,精密度、重复性、稳定性、回收率和准确度均较好,可应用于微生物实验、固体菌剂发酵、食品卫生与安全、环境检测等领域的活细菌总数现场快速检测。 展开更多
关键词 荧光检测法 活细菌总数 calcein UltraGreen^TMam荧光染料 快速检测
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水动力吸脂系统中水流喷射强度对自体脂肪成活率的影响 被引量:3
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作者 王荣荣 孙家明 +2 位作者 杨杰 郭科 童婧 《中华医学美学美容杂志》 2019年第5期384-387,共4页
目的探讨水动力吸脂系统中不同喷射水流强度作用对脂肪细胞活性的影响。方法选取水动力辅助腹部脂肪抽吸12例女性患者。水动力组,将水流喷射强度分别设定为1级(30 bar)、2级(50 bar)、3级(70 bar)、4级(90 bar),分别记为R1、R2、R3、R4... 目的探讨水动力吸脂系统中不同喷射水流强度作用对脂肪细胞活性的影响。方法选取水动力辅助腹部脂肪抽吸12例女性患者。水动力组,将水流喷射强度分别设定为1级(30 bar)、2级(50 bar)、3级(70 bar)、4级(90 bar),分别记为R1、R2、R3、R4组。对照组为注射器组。将所采集的脂肪组织经棉纱过滤后低速离心,观察各组水脂构成比。用Calcein-AM/Hoechst 33342染色对经酶消化法处理的脂肪细胞进行荧光染色,于倒置荧光显微镜下观察并计算各组活脂肪细胞比例。结果棉纱过滤低速离心后的脂肪组织分为油脂层、纯化脂肪组织层、液体层、底层沉淀4层。R1、R2、R3、R4及注射器组油脂比例分别为(8.9±2.3)%、(9.6±2.1)%、(10.3±1.3)%、(14.2±1.6)%、(9.5±1.8)%。R1、R2、R3与注射器组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。R4组与其余各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。R1、R2、R3、R4及注射器组活脂肪细胞比例分别为(88.1±2.8)%、(89.9±1.9)%、(84.8±2.3)%、(78.0±1.7)%、(91.1±2.9)%。R1、R2与注射器组测得活脂肪细胞比例差异无统计学意义(P>0.05),与R3、R4组测得活脂肪细胞比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低喷射水流强度作用下(1级、2级),采集的脂肪细胞活性比喷射水流强度组(3级、4级)高。 展开更多
关键词 乳房美容 移植 腹部脂肪 水动力系统 calcein-am/Hoechst 33342染色 水流喷射强度
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