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His-N2蛋白体外排除抑制大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液蛋白的研究 被引量:1
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作者 都立辉 张虹 +2 位作者 施荣华 和肖营 刘琴 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第11期95-99,共5页
以植物乳杆菌KLDS1.0320候选表面黏附蛋白NP_785232 N端前两个结构域组成的融合表达蛋白为研究对象,采用体外模拟肠道环境的方法研究其对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的排除抑制作用。对猪肠黏液进行固定,加入His-N2融合表达蛋白37℃孵育... 以植物乳杆菌KLDS1.0320候选表面黏附蛋白NP_785232 N端前两个结构域组成的融合表达蛋白为研究对象,采用体外模拟肠道环境的方法研究其对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的排除抑制作用。对猪肠黏液进行固定,加入His-N2融合表达蛋白37℃孵育1h,再加入大肠杆菌DH5α菌悬液37℃孵育1h,洗去未黏附的菌体,之后用1%Triton?X-100进行裂解,将裂解液涂布LB琼脂平板以进行菌落计数。结果表明:pH值为6.6时,相对于缓冲液阴性对照组,His-N2蛋白对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的抑制率为(50.37±3.66)%,相对于BSA蛋白对照组的抑制率为(38.33±4.55)%;pH值为7.5时,相对于缓冲液阴性对照组,His-N2蛋白对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的抑制率为(42.18±3.44)%,相对于BSA蛋白对照组的抑制率为(34.48±3.90)%。在体外模拟条件下,由植物乳杆菌KLDS1.0320的候选表面黏附蛋白NP_785232 N端前两个结构域组成的His-N2蛋白能排除抑制大肠杆菌DH5α对猪肠黏液蛋白的黏附。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 His-N2蛋白 大肠杆菌 猪肠黏液 排除抑制
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过量表达自身hemA基因的重组大肠杆菌发酵生产5-氨基乙酰丙酸的研究 被引量:4
2
作者 赵春晖 林建平 +2 位作者 刘晓侠 穆江华 岑沛霖 《生物加工过程》 CAS CSCD 2005年第4期36-39,53,共5页
研究了优化重组大肠杆菌产5-氨基乙酰丙酸(ALA)的条件,提高大肠杆菌发酵生产ALA的产量。在测定重组大肠杆菌GT48的生长曲线的基础上,确定诱导时间,优化摇瓶发酵条件。然后,进一步在5 L发酵罐上进行间歇和流加发酵研究。摇瓶实验表明,细... 研究了优化重组大肠杆菌产5-氨基乙酰丙酸(ALA)的条件,提高大肠杆菌发酵生产ALA的产量。在测定重组大肠杆菌GT48的生长曲线的基础上,确定诱导时间,优化摇瓶发酵条件。然后,进一步在5 L发酵罐上进行间歇和流加发酵研究。摇瓶实验表明,细胞培养最佳初始pH为6.5,最佳诱导时间为稳定期前期,最佳接种量为2%,过高的葡萄糖浓度对细胞生长和产物合成均有一定的抑制作用。在5 L发酵罐间歇发酵中,重组菌产ALA能力达到47.8 mg/L。采用流加发酵可以进一步将产物产量提高到63.8 mg/L。构建的过量表达自身的hemA基因的大肠杆菌具有较高的产ALA能力,通过发酵条件优化和采用流加发酵可以提高ALA产量。 展开更多
关键词 5-氨基乙酰丙酸 重组大肠杆菌 发酵 流加操作
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大肠杆菌甲基化缺陷DM1菌株与普通DH5α菌株的感受态转化率的比较 被引量:1
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作者 薛亮亮 司苏晋 +1 位作者 雷小春 刘田福 《山西医科大学学报》 CAS 2010年第4期322-324,共3页
目的观察甲基化缺陷的大肠杆菌DM1菌株与普通DH5α菌株感受态转化效率的差别。方法用常规氯化钙法制备二者的感受态细胞,质粒转化后计算转化率。结果DM1菌株感受态细胞转化率为(2.2±0.3)×106CFU/μg,DH5α菌株感受态细胞转化... 目的观察甲基化缺陷的大肠杆菌DM1菌株与普通DH5α菌株感受态转化效率的差别。方法用常规氯化钙法制备二者的感受态细胞,质粒转化后计算转化率。结果DM1菌株感受态细胞转化率为(2.2±0.3)×106CFU/μg,DH5α菌株感受态细胞转化率为(6.3±0.5)×106CFU/μg。结论成功建立一种高效制备甲基化缺陷菌株DM1感受态细胞的方法,虽然该法制备DM1感受态细胞转化效率比DH5α低2-3倍,但其能够高效满足质粒克隆实验中Dam或Dcm甲基化的限制性位点的使用要求。 展开更多
关键词 感受态细胞 甲基化 DM1 dh 转化率
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重组大肠杆菌DH5α生产rhTum-5-NGR培养条件的优化 被引量:3
4
作者 魏蔚 刘萍 +3 位作者 白斌 邓楠 申烨华 张英起 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期622-626,共5页
目的提高重组大肠杆菌DH5α生产rhTum-5-NGR的能力。方法在摇瓶中研究了种子菌龄、接种量和诱导时机等因素对菌体生长及rhTum-5-NGR表达量的影响。结果最佳条件为接种量2%,初始pH为7.2,装液量30%,37℃培养至OD_(600)为2.3左右时加入0.5m... 目的提高重组大肠杆菌DH5α生产rhTum-5-NGR的能力。方法在摇瓶中研究了种子菌龄、接种量和诱导时机等因素对菌体生长及rhTum-5-NGR表达量的影响。结果最佳条件为接种量2%,初始pH为7.2,装液量30%,37℃培养至OD_(600)为2.3左右时加入0.5mmol/L IPTG,诱导表达4h。在此条件下,摇瓶中rhTum-5-NGR的表达量占菌体总蛋白的40.1%,光密度为5.94,生产能力为2.38,较优化前(0.82)提高了1.9倍。结论构建的工程菌发酵的稳定性和重复性良好,为肿瘤新药rhTum-5-NGR的工业化生产奠定基础。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌 rhTum-5-NGR 培养条件
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表达于工程菌 DH5α 中 Taq DNA 聚合酶的纯化 被引量:3
5
作者 包永明 祖国仁 《大连轻工业学院学报》 1997年第4期67-70,共4页
采用聚乙烯亚胺沉淀、BioRex70离子交换、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、PCR检测等简单方法,在30h内完成TaqDNA聚合酶的基因重组质粒在工程菌DH5α中超表达酶的提取纯化及酶活标定。2000ml发酵液可提纯3... 采用聚乙烯亚胺沉淀、BioRex70离子交换、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、PCR检测等简单方法,在30h内完成TaqDNA聚合酶的基因重组质粒在工程菌DH5α中超表达酶的提取纯化及酶活标定。2000ml发酵液可提纯3万U的TaqDNA聚合酶,与国外优质产品(promega)相比,热稳定性没有差别,扩增特异性尚需进一步探讨。 展开更多
关键词 Taq-DNA聚合酶 纯化 大肠杆菌dh dh
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增强型绿色荧光蛋白在DH5α大肠杆菌中的表达 被引量:4
6
作者 王晓辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第21期200-203,共4页
采用PCR技术从pEGFPpA-CAN克隆载体中扩增出增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP),插入到pGEM-Teasy载体中,构建pGT-EGFP重组质粒,其中的SP6启动子可用来表达EGFP蛋白。携带pGT-EGFP重组载体的DH5α大肠杆菌较普通DH5α大肠杆菌菌液略带淡绿色... 采用PCR技术从pEGFPpA-CAN克隆载体中扩增出增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP),插入到pGEM-Teasy载体中,构建pGT-EGFP重组质粒,其中的SP6启动子可用来表达EGFP蛋白。携带pGT-EGFP重组载体的DH5α大肠杆菌较普通DH5α大肠杆菌菌液略带淡绿色,在荧光显微镜下能够清晰观察该大肠杆菌的形态,带有绿色荧光。同时超声裂解携带pGT-EGFP重组载体的DH5α大肠杆菌,提取菌体总蛋白,SDS-PAGE显示EGFP蛋白是以可溶性蛋白形式存在的,分子质量大约为30kD,与其理论值大小一致。 展开更多
关键词 增强型绿色荧光蛋白 pGeM-T eASY dh大肠杆菌
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Bi_(5)O_(7)I的制备及光催化抗菌性能研究 被引量:2
7
作者 马占强 郭葳 +2 位作者 张凯悦 许雁翀 李娟 《化学研究与应用》 CAS 北大核心 2023年第2期407-413,共7页
在沉淀法制备BiOI的基础上,通过进一步固相热转化形成Bi_(5)O_(7)I。采用X射线衍射(XRD)、紫外可见漫反射光谱(UV-Vis)、扫描电镜(SEM)、光致发光光谱(PL)对BiOI和Bi_(5)O_(7)I的晶体结构、吸光性能、能带结构、形貌及光生载流子分离效... 在沉淀法制备BiOI的基础上,通过进一步固相热转化形成Bi_(5)O_(7)I。采用X射线衍射(XRD)、紫外可见漫反射光谱(UV-Vis)、扫描电镜(SEM)、光致发光光谱(PL)对BiOI和Bi_(5)O_(7)I的晶体结构、吸光性能、能带结构、形貌及光生载流子分离效率进行分析研究。基于Bi_(5)O_(7)I良好的能带结构及优异的光生载流子分离效率,可见光下Bi_(5)O_(7)I在180 min内可全部灭活大肠杆菌(E.coli),其性能明显优于BiOI,并通过细胞染色及SEM观察抗菌过程E.coli的存活状态及细胞形态变化,h+和·OH是Bi_(5)O_(7)I光催化灭活E.coli过程中的主要的活性基团。 展开更多
关键词 Bi_(5)O_(7)I 光催化 抗菌 e.coli
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大肠杆菌DH5α生长状态的研究
8
作者 郭晓丽 《衡水学院学报》 2010年第1期52-53,88,共3页
以大肠杆菌菌株DH5α为材料,测定其生长曲线及在不同浓度NaHCO3、NaCl处理下的生长状态,结果表明,大肠杆菌DH5α具有较强的生长特性,对低浓度的NaCl有一定的耐受能力,并对低浓度的NaHCO3较为敏感.
关键词 大肠杆菌 dh 生长状态
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Urinary Tract Infection Escherichia coli Is Related to the Environmental Escherichia coli in Their DNA Barcoding and Antibiotic Resistance Patterns in Grenada 被引量:1
9
作者 Karla Farmer Abi James +4 位作者 Ravindra Naraine Grace Dolphin Wayne Sylvester Victor Amadi Svetlana V. Kotelnikova 《Advances in Microbiology》 2016年第1期33-46,共14页
Urinary Tract Infections (UTIs) are among one of the most common infections in women, with uropathogenic E. coli (UPEC) being involved in 80% of cases. In addition, E. coli exhibits an increasing resistance to broad s... Urinary Tract Infections (UTIs) are among one of the most common infections in women, with uropathogenic E. coli (UPEC) being involved in 80% of cases. In addition, E. coli exhibits an increasing resistance to broad spectrum antimicrobial agents as well as the subsequent generations of these drugs. The genetic diversity and antibiotic resistance patterns of both clinical and environmental E. coli isolates were studied to predict the potential of transmission of organisms and genes for antibiotic resistance from three different major eco-habitats including the gut of iguanas’ fresh and marine waters and the human urinary tract. (GTG)<sub>5 </sub>and BOX-PCR extragenic DNA fingerprinting allowed for the tracking of the relatedness of four different ecotype groups. Both DNA fingerprinting methods targeted non-protein coding or exogenous palindromic DNA and demonstrated shared origin and intraspecies level of genomic diversity within the population of the studied bacteria. DNA fingerprinting based on BOX-PCR was less discriminating than the (GTG)<sub>5</sub>-PCR, and produced five major clades. BOX-PCR analysis indicated that 44% of the UTI E. coli isolates was comprised within a single clade, therefore it correlated better with ecotype distribution. The (GTG)<sub>5</sub> PCR based co-clustering analysis showed that the clinical isolates appeared to have a closer relationship to iguana E. coli isolates than to the fresh and marine water isolates. However, in accordance with the BOX PCR co-clustering analysis, the clinical isolates were most similar to the marine water isolates, followed by the freshwater and iguana E. coli isolates. Seventy two percent of antibiotic resistance patterns were shared by the UTI strains with E. coli isolated from freshwater, followed by iguana. 展开更多
关键词 exogenous DNA e. coli Urinary Tract Infection UPeC (GTG)5
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内源性血管生成抑制因子Arresten原核表达载体的构建及表达 被引量:2
10
作者 唐海英 郑金平 +1 位作者 陈显久 解军 《山西医科大学学报》 CAS 2006年第4期346-349,共4页
目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达载体,并在E.coliDH5α进行表达。方法从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA,经逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出Arresten基因,构建重组质粒pBV220-Arr转化E.coliDH5α进行原核表... 目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达载体,并在E.coliDH5α进行表达。方法从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA,经逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出Arresten基因,构建重组质粒pBV220-Arr转化E.coliDH5α进行原核表达。结果成功筛选出Arresten基因并构建了重组质粒pBV220-Arr,重组质粒在菌株中获得表达。结论构建的原核表达重组体pBV220-Arr能高效表达重组Arresten蛋白。 展开更多
关键词 Arresten基因 原核表达载体 e.coli dh 基因克隆表达
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大肠杆菌DH12S菌株高效电击转化条件的探讨(英文)
11
作者 陈立 齐香君 《陕西科技大学学报(自然科学版)》 2010年第1期30-32,36,共4页
探讨了电击转化法介导质粒DNA转化到大肠杆菌DH12S的最佳条件,以提高其转化效率.将pUC19质粒转化大肠杆菌DH12S菌株,观察不同的电击转化条件对转化效率的影响.结果表明,电击缓冲液的离子强度、细菌生长状态、感受态细胞保存时间及质粒DN... 探讨了电击转化法介导质粒DNA转化到大肠杆菌DH12S的最佳条件,以提高其转化效率.将pUC19质粒转化大肠杆菌DH12S菌株,观察不同的电击转化条件对转化效率的影响.结果表明,电击缓冲液的离子强度、细菌生长状态、感受态细胞保存时间及质粒DNA浓度对转化效率均有不同程度的影响;在电压2.5 kV,电阻200Ω,电容25μF,脉冲时间4.3ms和低离子强度电击缓冲液的条件下能获得较高的电击转化率,证明该优化电击转化条件能提高转化效率. 展开更多
关键词 电击转化 质粒pUC19 大肠杆菌dh12S
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猪TLR5基因表达水平与F18大肠杆菌侵染关系分析 被引量:2
12
作者 赵呈祥 戴开宇 +2 位作者 杜雨露 包文斌 吴圣龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第5期1163-1169,共7页
为了探究猪Toll样受体(Toll-like receptor 5,TLR5)基因表达水平与F18大肠杆菌抗性的关系,试验通过不同血清型产肠毒素大肠杆菌(F18ab和F18ac)侵染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),同时通过脂多糖(LPS)分别诱导IPEC-J2细胞4和8h,利用实时荧光定... 为了探究猪Toll样受体(Toll-like receptor 5,TLR5)基因表达水平与F18大肠杆菌抗性的关系,试验通过不同血清型产肠毒素大肠杆菌(F18ab和F18ac)侵染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),同时通过脂多糖(LPS)分别诱导IPEC-J2细胞4和8h,利用实时荧光定量PCR检测TLR5基因表达水平变化,并利用Western blotting进行蛋白表达分析。结果显示,不同血清型大肠杆菌(F18ab和F18ac)菌体侵染IPEC-J2细胞后,TLR5基因表达水平均极显著上调(P<0.01);LPS诱导IPEC-J2细胞4和8h后,TLR5基因表达水平均极显著上调(P<0.01),且在LPS诱导IPEC-J2细胞8h后,TLR5基因表达水平明显高于诱导4h。与对照组相比,细胞中TLR5蛋白的表达水平极显著上调(P<0.01),与LPS诱导及F18大肠杆菌菌体刺激IPEC-J2细胞后mRNA表达水平结果相一致。本研究在细胞水平上分析了TLR5表达水平和F18大肠杆菌侵染的相关性,进一步证实猪TLR5基因的表达水平在细胞抵抗F18大肠杆菌的侵染过程中发挥了重要的调控作用,为今后关于TLR5基因功能及其在大肠杆菌腹泻遗传育种应用的研究奠定基础。 展开更多
关键词 TLR5基因 大肠杆菌 MRNA表达 WeSTeRN BLOTTING
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大肠杆菌J_5免疫血清防治感染性休克及感染性多脏衰的实验观察
13
作者 李志军 徐新女 +3 位作者 袁曾麟 高恩明 苏长海 王今达 《中国危重病急救医学》 CSCD 1991年第3期22-24,65,共4页
本文采用大肠杆菌 J_5免疫血清对家兔内毒素休克模型进行了实验观察。结果表明:大肠杆菌 J_5免疫血清具有明显减轻感染性休克及其所导致的多系统脏器衰竭的病理性损伤,显著降低其发生率及病死率。
关键词 大肠杆菌 J5(e.coli.J5) 多系统脏器衰竭(MSOF) 平均动脉压(MAP)
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Synthesis of Niobium Doped ZnO Nanoparticles by Electrochemical Method: Characterization, Photodegradation of Indigo Carmine Dye and Antibacterial Study 被引量:1
14
作者 Rakesh   Sannaiah Ananda +1 位作者 Netkal M. Made Gowda Kithanakere Ramesh Raksha 《Advances in Nanoparticles》 2014年第4期133-147,共15页
Niobium doped Zincoxide nanoparticles has been synthesized through electrochemical method and characterized by UV-Visible spectroscopy, IR Spectroscopy, SEM, XRD, ICPMS and EDAX data. The UV-Visible spectroscopy resul... Niobium doped Zincoxide nanoparticles has been synthesized through electrochemical method and characterized by UV-Visible spectroscopy, IR Spectroscopy, SEM, XRD, ICPMS and EDAX data. The UV-Visible spectroscopy result reveals that the band gap energy of ZnO/Nb2O5 nanoparticles to be 3.8 eV. The XRD results show that the crystallite size is to be 31.9 nm. The ICPMS data indicate the presence of 3,3461,328 counts of 93 Nb and 577,906,390 counts of 66 Zn. An improvement in the photocatalytic degradation of Indigocarmine dye (IC) in comparison to commercially available pure ZnO was observed. The photodegradation efficiency for ZnO/Nb2O5 and ZnO were found to be 97.4% and 52.1% respectively. The enhancement in photocatalytic activity of ZnO/ Nb2O5 was ascribed to the extended light absorption range and suppression of electron hole pair recombination upon Nb loading. The antibacterial activity of ZnO/Nb2O5 nanoparticles was investigated. These particles were shown to have an effective bactericide. 展开更多
关键词 ZnO/Nb2O5 NANOPARTICLeS electrochemical Method NIOBIUM Coated Platinum electrode (Pt/Nb) Indigo CARMINe DYe (IC) e. coli
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运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:6
15
作者 陆坚 韦宇拓 +2 位作者 黄鲲 汪嵘 黄日波 《广西大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2003年第1期32-35,共4页
以总DNA为模板,采用PCR技术克隆得到运动发酵单胞菌(Zymomonasmobilis)丙酮酸脱羧酶(pyruvatedecarboxylase)基因pdc,将该基因连接到表达载体pSE380上,得到重组质粒pSE-pdc.将此重组质粒转化到受体菌E.coliDH5α中,挑取重组菌株.经IPTG... 以总DNA为模板,采用PCR技术克隆得到运动发酵单胞菌(Zymomonasmobilis)丙酮酸脱羧酶(pyruvatedecarboxylase)基因pdc,将该基因连接到表达载体pSE380上,得到重组质粒pSE-pdc.将此重组质粒转化到受体菌E.coliDH5α中,挑取重组菌株.经IPTG诱导后,在乙醛指示平板检测到丙酮酸脱羧酶活性.SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异性蛋白质条带:其分子量约为60KD. 展开更多
关键词 运动发酵单胞菌 丙酮酸脱羧酶基因 基因克隆 大肠杆菌 诱导表达 基因表达
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海藻酸钠/壳聚糖微胶囊固定化大肠杆菌的研究 被引量:3
16
作者 付颖丽 雄鹰 +4 位作者 刘袖洞 于炜婷 王一力 虞星炬 马小军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期239-241,共3页
Objective proteins synthesized from genetically recombined Escherichia coli strain (E. coli) have been successfully produced by microbe fermentation, but complicated separation and purification steps always make again... Objective proteins synthesized from genetically recombined Escherichia coli strain (E. coli) have been successfully produced by microbe fermentation, but complicated separation and purification steps always make against the maintenance of activities as well as increase the cost. Aiming at simplifying the process, an idea of administrating directly the microencapsulated genetically recombined E. coli is proposed. In this paper, study on culture of E. coli DH5α immobilized in alginate/chitosan (ACA) microcapsule is presented. It was found that E. coli DH5α grew well in the microcapsule with stable growth period longer than that of suspension culture, and cell aggregation phenomenon was observed. In vivo experiments showed that ACA microcapsules with E. coli DH5α stayed over 48 h in mouse intestine, and the morphology of microcapsules was kept intact. These preliminary results have demonstrated that administration of microencapsulated E. coli DH5α is safe, which layed the foundation for microencapsulated genetically recombined E. coli as carriers of gene engineering drugs. 展开更多
关键词 微胶囊 壳聚糖 大肠杆菌 海藻酸钠 固定化 基因工程药物
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大肠埃希菌表达苏云金杆菌cryIVD基因杀蚊幼活性观察 被引量:3
17
作者 刘相萍 张昕 +4 位作者 阎歌 甄天民 孙传红 王新国 黄炳成 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2002年第5期343-344,共2页
目的 :观察表达B .t.icryIVD基因的大肠埃希菌对蚊幼虫的毒效。 方法 :细菌的诱导表达及蚊虫毒效测试。结果 :加入工程菌 48h对淡色库蚊和白纹伊蚊均具有明显的杀灭作用 ,LC50 分别为 2 .3 8× 10 6 、1.6× 10 7个 ml细胞 ,... 目的 :观察表达B .t.icryIVD基因的大肠埃希菌对蚊幼虫的毒效。 方法 :细菌的诱导表达及蚊虫毒效测试。结果 :加入工程菌 48h对淡色库蚊和白纹伊蚊均具有明显的杀灭作用 ,LC50 分别为 2 .3 8× 10 6 、1.6× 10 7个 ml细胞 ,其中对淡色库蚊的杀灭作用要好于对白纹伊蚊幼虫的杀灭效果。结论 :单独表达B .t . 展开更多
关键词 大肠埃希菌 表达 苏云金杆菌 cryIVD基因 杀蚊幼活性 杀蚊活性
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影响人α-突触核蛋白基因在原核细胞中表达因素的研究 被引量:2
18
作者 李淑婷 陈彪 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期492-495,共4页
目的 研究影响人α 突触核蛋白 (α synuclein)基因在原核细胞中表达的常见因素 ,以提高其在原核细胞中的表达量。 方法 将重组质粒ProEXNACP转化进入到DH5α 大肠杆菌体内 ,观察诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度、诱导培养基、... 目的 研究影响人α 突触核蛋白 (α synuclein)基因在原核细胞中表达的常见因素 ,以提高其在原核细胞中的表达量。 方法 将重组质粒ProEXNACP转化进入到DH5α 大肠杆菌体内 ,观察诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度、诱导培养基、诱导初始菌浓度及诱导中pH值变化等因素对蛋白表达产量的影响 ,用SDS PAGE梯度胶电泳分析 ,考马斯亮蓝染色进行比较研究 ,同时检测pH值 ,观察其变化。 结果 诱导剂IPTG浓度对诱导蛋白产生的影响不大 ,诱导过程中pH值变化较小 ,而诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类对诱导产生α 突触核蛋白有较大影响。其中 ,以LB培养基 ,37℃ ,180r min诱导 1~ 2h产生α 突触核蛋白的量最大。 结论 诱导剂IPTG诱导ProEXNACP/DH5α大肠杆菌产生α 突触核蛋白的量与诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类有明显的关系。初始菌A590 =0 5~ 0 8,LB培养基 ,37℃ ,大通氧量 (180r min以上 ) ,1~ 2h诱导可作为大量提取、纯化α 突触核蛋白的首选条件。 展开更多
关键词 原核细胞 Α突触核蛋白 dh5a大肠杆菌 蛋白表达 影响因素
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新型聚乙烯醇微囊的制备及其结构性能研究 被引量:5
19
作者 王满燕 俞耀庭 T.M.SChang 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期865-869,F006,共6页
采用低温物理交联法制备新型聚乙烯醇微囊,所得微囊机械强度好,克服了目前普遍采用的海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊易碎的缺点,在APA微囊已完全破碎的机械强度下,聚乙烯醇微囊的破碎率仅为3%.在体外模拟肠胃生理极限条件下可保... 采用低温物理交联法制备新型聚乙烯醇微囊,所得微囊机械强度好,克服了目前普遍采用的海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊易碎的缺点,在APA微囊已完全破碎的机械强度下,聚乙烯醇微囊的破碎率仅为3%.在体外模拟肠胃生理极限条件下可保持稳定的物理化学性质,对尿素、尿酸和肌酐等小分子具有良好的通透性,能在10min内完全通透.将高效分解尿素的脲酶基因工程菌E.coliDH5包埋于聚乙烯醇微囊之中,其工程菌仍具有很高的分解尿素能力,其活力约为自由菌的80%. 展开更多
关键词 聚乙烯醇 微囊 低温物理交联 脲酶基因工程菌
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抗高血压肽在大肠杆菌中表达的研究 被引量:3
20
作者 吕桂善 付晓艳 霍贵成 《广州食品工业科技》 2004年第3期1-4,共4页
本研究根据已经公开发表的具有降血压作用的来源于酪蛋白的一段多肽氨基酸序列CEI12,人工合成了一段双链DNA分子,经酶切后与表达载体pQE16连接,转化进入到大肠杆菌E.ColiJM109和E.ColiDH5嶂校又猩秆〕鲅粜灾刈榭寺。⒔杏盏急泶铮... 本研究根据已经公开发表的具有降血压作用的来源于酪蛋白的一段多肽氨基酸序列CEI12,人工合成了一段双链DNA分子,经酶切后与表达载体pQE16连接,转化进入到大肠杆菌E.ColiJM109和E.ColiDH5嶂校又猩秆〕鲅粜灾刈榭寺。⒔杏盏急泶铮璖DS-PAGE电泳分析和westernblotting蛋白质印迹检测表明,该抗高血压小肽CEI12(与DHFR融合后)在E.ColiJM109中得到了成功表达。 展开更多
关键词 抗高血压 诱导表达 e.coli 大肠杆菌 降血压作用 dh dhFR 表达载体 氨基酸序列 双链DNA
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