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DDPH抑制HECCM促PASMC增殖时第二信使变化的研究 被引量:4
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作者 段秋红 廖国宁 +1 位作者 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第5期388-390,共3页
采用 MTT比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)和 1- (2 ,6 -二甲基苯氧基 ) - 2 - (3,4-二甲氧基苯乙胺基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖、第二信使 ([Ca2 +]i 和 c AMP)的... 采用 MTT比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)和 1- (2 ,6 -二甲基苯氧基 ) - 2 - (3,4-二甲氧基苯乙胺基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖、第二信使 ([Ca2 +]i 和 c AMP)的影响。结果显示 :1HECCM促进 PASMC增殖 ,而 DDPH可抑制之 ,抑制率为 77.46 %。 2HECCM升高 PASMCs内 [Ca2 +]i,而 DDPH可对抗此作用。 3HECCM组 PASMCs内 c AMP含量明显低于对照组(NECCM组 ) ,而 HECCM+DDPH组 PASMCs内 c AMP与 展开更多
关键词 慢性低氧性肺动脉高压 丙烷盐酸盐 DDPH heccm
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DDPH对HECCM促PAS MC增殖后的逆转及时间相关性的研究
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作者 王西明 陈蓓蓓 +2 位作者 张红胜 雷景迈 何善述 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期275-278,356,共5页
目的 研究DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。方法采用细胞培养、四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT)、免疫细胞化学染色测定α SM actin等方法观察低氧内皮细胞条件培养基(HECCM )促猪肺动脉平滑肌细... 目的 研究DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。方法采用细胞培养、四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT)、免疫细胞化学染色测定α SM actin等方法观察低氧内皮细胞条件培养基(HECCM )促猪肺动脉平滑肌细胞的增殖作用 ,以及DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。结果  (1)在HECCM促使PASMC增殖后 ,PASMC的表型发生转化 ,由收缩型转化为合成型 ,而DDPH能使HECCM促PASMC增殖后的表型 ,由合成型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩型 ;(2 )在HECCM促PASMC增殖 2 4h ,36h ,4 8h后 ,各加入DDPH2 4h ,36h ,4 8h后 ,MTT法测定OD值下降 ;免疫组织化学测定α SM actin的吸光度上升 ,并具有时间依赖性。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 肺动脉高压 降压药 DDPH heccm 促PASMC增殖 逆转 时间相关性
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DDPH对HECCM促PASMC增殖后的逆转效应研究 被引量:2
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作者 张红胜 王西明 +2 位作者 陈蓓蓓 雷景迈 何善述 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期234-237,共4页
利用低氧内皮细胞条件培养基 (HECCM)建立猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的增殖模型 ;以四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法、α平滑肌肌动蛋白 (α- SM- actin)为指标 ,用免疫细胞化学染色及透射电镜等方法观察不同浓度DDPH[1- (2 ,6 - dim ethyl... 利用低氧内皮细胞条件培养基 (HECCM)建立猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的增殖模型 ;以四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法、α平滑肌肌动蛋白 (α- SM- actin)为指标 ,用免疫细胞化学染色及透射电镜等方法观察不同浓度DDPH[1- (2 ,6 - dim ethylphenoxy) - 2 - (3,4 - dimethoxy phenylethylamino) propane hydrochloride]对 HECCM促 PASMC增殖后的逆转效应。结果表明 :HECCM促 PASMC增殖后 ,PASMC的表型发生转化 ,由收缩表型转化为合成表型 ,PASMC胞质内的 α- SM- actin含量下降 ;而 DDPH能使 HECCM促 PASMC增殖后的表型逆转 ,即由合成表型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩表型 ,PASMC胞质内的 α- SM- actin含量回升 ;且 DDPH的这种作用具有浓度相关性。透射电镜结果从形态学上也证明 PASMC由合成表型逆转为收缩表型 ,由此推测 ,DDPH对 HECCM促 展开更多
关键词 DDPH heccm PASMC增殖 逆转效应 丙烷盐酸盐 Α-平滑肌肌动蛋白 降压药
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蛋白激酶及DDPH对HECCM促PASMC增殖的影响 被引量:1
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作者 何声秀 段秋红 +3 位作者 陈蓓蓓 雷景迈 何善述 陈娟 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期601-604,共4页
应用猪肺血管的内皮细胞进行常氧 /低氧培养 ,制备常氧 /低氧内皮细胞条件培养基 (Norm oxic/ Hypoxial en-dothelia cell conditional m edium,NECCM/ HECCM) ,分别观察蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)、蛋白激酶 C(proteinkinase C,... 应用猪肺血管的内皮细胞进行常氧 /低氧培养 ,制备常氧 /低氧内皮细胞条件培养基 (Norm oxic/ Hypoxial en-dothelia cell conditional m edium,NECCM/ HECCM) ,分别观察蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)、蛋白激酶 C(proteinkinase C,PKC)和受体酪氨酸蛋白激酶 /胞浆酪氨酸蛋白激酶 (recepror tyrosine protein kinase/ plasma tyrosine protein ki-nase,RTK/ PTK)及 DDPH对 HECCM促肺动脉平滑肌细胞 (pulmonary arterial smooth m uscle cell,PASMC)增殖的影响。探讨这些蛋白激酶在促 PASMC增殖中的作用 ,以及 DDPH抑制这种促增殖的机理。结果提示 :PKC是 HECCM促 PASMC增殖的关键性效应分子 ,但其被激活的上游信号转导分子除了 RTK/ PTK外 ,还有其它非 RTK/ PTK介导的信号转导方式 ;DDPH对 HECCM促 PASMC增殖的抑制点在 PKC上游 ,可能直接作用于 RTK/ PTK,或者阻断 Ca2 展开更多
关键词 DDPH heccm PASMC 增殖 肺动脉平滑肌细胞 蛋白激酶
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Effects of DDPH on HECCM-induced Proliferation and Immunophenotypes of the Pulmonary Vascular Pericytes 被引量:1
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作者 袁永辉 车东媛 熊密 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2001年第3期184-187,共4页
In order to study the effects of 1-(2,6-dimethylphenoxy)-2-(3,4-dimethoxyphenylethylamino) propane hydrochloride (DDPH) on proliferation and immunophenotypes of newborn rat pulmonary vascular pericytes induced by hypo... In order to study the effects of 1-(2,6-dimethylphenoxy)-2-(3,4-dimethoxyphenylethylamino) propane hydrochloride (DDPH) on proliferation and immunophenotypes of newborn rat pulmonary vascular pericytes induced by hypoxic endothelial cell conditioned medium (HECCM) from porcine pulmonary arteries, the cultured pericytes were divided into 4 groups according to the endothelial cell conditioned medium (ECCM) used: normoxic ECCM (NECCM) group, NECCM+DDPH group, HECCM group and HECCM+DDPH group. Cell culture, immunocytochemical staining, image analysis and flow cytometric method were used to investigate the effects of HECCM and DDPH on the expression of α-smooth muscle actin (α-SM-Actin) antigen, CD34 antigen, S-100 antigen and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and cell cycle in pericytes. The results showed that the α-SM-Actin antigen in the pericytes in HECCM group was stronger positively expressed than in the other three groups, but CD34 antigen and S-100 antigen were negatively expressed. The expression of α-SM-Actin antigen, CD34 antigen and S-100 antigen was positive in the groups of NECCM, NECCM+DDPH and HECCM+DDPH; The expression of α-SM-Actin and PCNA in HECCM group was 1.32 times (P<0.01) and 1.24 times (P<0.05) that in NECCM group, 1.30 times (P<0.01) and 1.21 times (P<0.05) that in HECCM+DDPH group, respectively. The percentage of the cells in the GO-G1 phase in the HECCM group was lower by 11.7 % and 9.1 %, in S phase higher by 5.6 % and 4.2 %, in G2-M phase higher by 6.1 % and 4.9 % than in the groups of NECCM,HECCM+DDPH, respectively. The inhibitory rate of DDPH on the increased α-SM-Actin and PCNA syntheses in pericytes induced by HECCM were 23.4 % and 17.1 % respectively. The inhibitory rate on the increased pericytes from GO-G1 phase to S phase was 8.3 %. These results suggest that DDPH can directly inhibit pericytes from proliferation and immunophenotypical transformation of smooth muscle-like cells induced by HECCM. 展开更多
关键词 DDPH PERICYTE immunophenotypes heccm hypertension pulmonary
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DDPH在低氧内皮细胞条件培养液促肺动脉平滑肌细胞增殖中对C-fos和c-myc表达的影响
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作者 陈娟 周洁 +4 位作者 谢秋红 段秋红 从容 王西明 冯友梅 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期250-253,共4页
目的在细胞水平研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐(DDPH)在低氧内皮细胞条件培养基(HECCM)促肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖过程中对c-fos和c-myc表达的影响。方法采用MTT比色法作为HECCM促PASMC的增殖指标... 目的在细胞水平研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐(DDPH)在低氧内皮细胞条件培养基(HECCM)促肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖过程中对c-fos和c-myc表达的影响。方法采用MTT比色法作为HECCM促PASMC的增殖指标,采用核酸斑点杂交法检测c-fos与c-myc mRNA的相对表达量,同时观察DDPH对它们的影响。结果低氧可刺激内皮细胞产生某些因子,经旁分泌作用促进PASMC的c-fos和c-myc基因转录以及促使PASMC增殖。DDPH能显著抑制HECCM促PASMC的增殖作用以及下调c-fos和c-myc mRNA的表达量。结论 DDPH能显著抑制HECCM促PASMC的增殖作用,其作用机制可能是通过下调C-fos和C-myc mRNA的表达量来实现的。 展开更多
关键词 C-MYC表达 C-FOS 肺动脉平滑肌细胞增殖 DDPH 内皮细胞 条件培养液 低氧 PASMC增殖 heccm 细胞水平研究 二甲基苯氧基 MTT比色法 mRNA 增殖作用 条件培养基 丙烷盐酸盐 斑点杂交法 表达量 增殖过程 二甲氧基 基因转录 分泌作用
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