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通过负压花粉管法将耐盐基因HVA1转入小麦的研究 被引量:19
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作者 冀俊丽 盛长忠 +4 位作者 石明 安春菊 吴学锋 李德森 杜荣骞 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2002年第2期10-13,共4页
H VA1基因编码的 Hva1蛋白属于植物晚期胚胎发生富集蛋白 (late em bryogenesis abundant proteins,L EA蛋白 ) ,L EA蛋白可以保护植物免受盐渍及干旱的危害。本研究利用携带有单子叶植物启动子及 H VA1基因的质粒载体 ,用首创的负压花... H VA1基因编码的 Hva1蛋白属于植物晚期胚胎发生富集蛋白 (late em bryogenesis abundant proteins,L EA蛋白 ) ,L EA蛋白可以保护植物免受盐渍及干旱的危害。本研究利用携带有单子叶植物启动子及 H VA1基因的质粒载体 ,用首创的负压花粉管法转化单子叶植物小麦。通过对小麦 T1 代的 PCR检测和点杂交检测 ,证明目的基因已经转入 ,转化率高达 14 .1%。本实验所用的负压花粉管通道法 ,操作简单 ,转化效率较高 ,不需要体外再生 。 展开更多
关键词 耐盐基因 耐盐性 hva1 负压花粉管法 小麦
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六棱大麦HVA1基因在烟草中遗传转化的研究 被引量:15
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作者 李楠 赵琦 +2 位作者 黄静 赵玉锦 张世煌 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第3期139-144,共6页
本研究依据HVA1基因序列克隆六棱大麦HVA1基因cDNA片段,构建Ubiquitin启动子驱动下的植物表达载体pCAMBIA1300-HVA1。然后通过三亲杂交法将重组质粒PCAMBIA1300-HVA1转入农杆菌LBA4404,并采用农杆菌介导法转化烟草。经PCR,PCR-Southern ... 本研究依据HVA1基因序列克隆六棱大麦HVA1基因cDNA片段,构建Ubiquitin启动子驱动下的植物表达载体pCAMBIA1300-HVA1。然后通过三亲杂交法将重组质粒PCAMBIA1300-HVA1转入农杆菌LBA4404,并采用农杆菌介导法转化烟草。经PCR,PCR-Southern blotting和RT-PCR检测表明HVA1基因已整合进烟草基因组,并在转录水平上获得表达。功能验证的结果显示,转基因植株叶片的保水率提高了近1倍,暗示转基因烟草具有一定的抗旱潜力。 展开更多
关键词 hva1 根癌农杆菌 遗传转化 烟草 抗旱
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HVA1基因转化番茄及转基因番茄耐盐性的初步鉴定 被引量:12
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作者 陈火英 庄天明 +3 位作者 张晓宁 刘杨 张英 夏聪美 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2006年第1期1-5,12,共6页
本研究将含有HVA1基因的质粒pBY520与pCAMBIA2200构建成双元载体pH22,又在pBY520上加上MAR元件RB7后,再与pCAMBIA2200构建成双元载体pHR22。并将上述两个载体通过农杆菌介导转入番茄,获得24株转化植株,并经过PCR-Southern检测证明其中1... 本研究将含有HVA1基因的质粒pBY520与pCAMBIA2200构建成双元载体pH22,又在pBY520上加上MAR元件RB7后,再与pCAMBIA2200构建成双元载体pHR22。并将上述两个载体通过农杆菌介导转入番茄,获得24株转化植株,并经过PCR-Southern检测证明其中11株为转基因阳性,且均表现出一定的耐盐性,表明HVA1基因已被转入这些植株中。 展开更多
关键词 基因工程 番茄 hva1 耐盐
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大麦HVA1基因和LEA蛋白与植物抗旱性的研究 被引量:9
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作者 李楠 赵玉锦 +2 位作者 赵琦 黄静 张世煌 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第4期25-29,34,共6页
干旱胁迫下,植物体内会积累多种蛋白以保护细胞免受脱水伤害,其中包括Lea蛋白。LEA蛋白在植物耐寒、耐盐碱、耐干旱性方面起重要作用。大麦HVA1基因编码的蛋白即属于第三组LEA蛋白,国内外学者对该基因的结构与功能进行了深入的研究。根... 干旱胁迫下,植物体内会积累多种蛋白以保护细胞免受脱水伤害,其中包括Lea蛋白。LEA蛋白在植物耐寒、耐盐碱、耐干旱性方面起重要作用。大麦HVA1基因编码的蛋白即属于第三组LEA蛋白,国内外学者对该基因的结构与功能进行了深入的研究。根据近年研究结果,本文对LEA蛋白的结构与功能,大麦HVA1基因的表达与调控,大麦HVA1基因高同源性序列的克隆以及转基因植物对HVA1基因抗旱性功能验证等方面进行综述。 展开更多
关键词 干旱胁迫 LEA蛋白 大麦hva1基因 转基因
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青稞“昆仑12号”HVA1基因的克隆与蛋白质结构预测 被引量:4
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作者 姚晓华 邓晓青 +1 位作者 吴昆仑 张志斌 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期855-860,共6页
抗旱性是青稞重要的耐逆性状。根据已报道的大麦抗旱相关基因HVA1的DNA序列,设计引物,以青稞品种昆仑12号经干旱处理8 h处理后的幼苗为材料,进行PCR扩增,得到约700 bp的HVA1基因编码框的全序列,将其克隆到pMD20-T上,重组子和酶切鉴定正... 抗旱性是青稞重要的耐逆性状。根据已报道的大麦抗旱相关基因HVA1的DNA序列,设计引物,以青稞品种昆仑12号经干旱处理8 h处理后的幼苗为材料,进行PCR扩增,得到约700 bp的HVA1基因编码框的全序列,将其克隆到pMD20-T上,重组子和酶切鉴定正确后,进行序列测定和分析。结果表明,与西藏强旱性青稞中HVA1基因相比较,昆仑12号与其核苷酸的同源性均达到99.5%,氨基酸的同源性达99.1%,其编码区全长642 bp,编码含213个氨基酸残基的蛋白质,富含Ala、Thr、Lys。该基因编码的蛋白质,包括9个重复的保守基元序列,属于第三组Lea蛋白。通过对HVA1基因编码蛋白的二级结构的分析表明,富含具有高度亲水性的α-螺旋结构,在植物细胞脱水时能够提供疏水区的亲水表面,可见青稞品种昆仑12号具有较强的抗旱性。抗旱相关基因的克隆为我国青藏高原青稞耐逆品种的选育奠定了基础。 展开更多
关键词 青稞 hva1基因 基因克隆 序列分析
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青稞Hva1基因的表达模式及表达载体的构建 被引量:6
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作者 姚晓华 吴昆仑 +1 位作者 任又成 蒋礼玲 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1459-1464,共6页
为了解青稞种子胚胎成熟晚期丰富蛋白(LEA)基因Hva1与青稞抗旱性的关系,以抗旱性强的旱地紫青稞和抗旱性弱的大麻青稞为材料,研究了不同浓度PEG胁迫下Hva1基因在两个青稞品种中的表达模式。结果表明,Hva1基因在抗旱性不同的两个青稞品... 为了解青稞种子胚胎成熟晚期丰富蛋白(LEA)基因Hva1与青稞抗旱性的关系,以抗旱性强的旱地紫青稞和抗旱性弱的大麻青稞为材料,研究了不同浓度PEG胁迫下Hva1基因在两个青稞品种中的表达模式。结果表明,Hva1基因在抗旱性不同的两个青稞品种中的表达均呈单峰模式,且抗旱性强的旱地紫青稞表达峰值和对应的PEG胁迫浓度均高于抗旱性弱的大麻青稞;PEG胁迫浓度大于13.18%时,旱地紫青稞的Hva1基因表达量高于大麻青稞。可见,Hva1基因的表达在青稞的抗旱中起到重要的作用,为此我们成功构建了青稞Hva1基因的过量表达载体,期望为抗逆性基因在青稞中的应用和抗旱新品种的选育奠定基础。 展开更多
关键词 青稞 hva1基因 表达模式 半定量PCR 实时荧光定量PCR 表达载体
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HVA1基因的同源克隆及其转基因植物耐逆性研究进展 被引量:6
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作者 姚晓华 张志斌 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期129-131,137,共4页
大麦HVA1基因编码的蛋白属于第3组LEA蛋白,其在植物的抗旱和耐盐性方面有重要作用。国内外学者对该基因的结构、功能以及转基因植物的抗旱、耐盐性进行了深入的研究。根据近年的研究结果,对HVA1基因同源性序列的克隆、表达特性以及转HVA... 大麦HVA1基因编码的蛋白属于第3组LEA蛋白,其在植物的抗旱和耐盐性方面有重要作用。国内外学者对该基因的结构、功能以及转基因植物的抗旱、耐盐性进行了深入的研究。根据近年的研究结果,对HVA1基因同源性序列的克隆、表达特性以及转HVA1基因植物的抗旱、耐盐性检验等方面进行了综述。 展开更多
关键词 hva1基因 转基因植物 干旱胁迫 盐胁迫
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青稞HVA1和blt4.9基因对模拟水分胁迫的响应差异及其在抗旱育种中的应用 被引量:5
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作者 王越 姚晓华 +2 位作者 吴昆仑 白羿雄 魏晓星 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期666-674,共9页
为了解青稞HVA1和blt4.9基因在抗旱方面的作用及其差异,以青稞品种昆仑12号为材料,利用RT-PCR从8个候选内参基因(DHN1、GAPDH、Actin-1、Actin-2、18SrRNA-1、18SrRNA-2、TC139057和PKABA)中筛选出在15%PEG模拟水分胁迫下表达稳定的基因... 为了解青稞HVA1和blt4.9基因在抗旱方面的作用及其差异,以青稞品种昆仑12号为材料,利用RT-PCR从8个候选内参基因(DHN1、GAPDH、Actin-1、Actin-2、18SrRNA-1、18SrRNA-2、TC139057和PKABA)中筛选出在15%PEG模拟水分胁迫下表达稳定的基因,同时以筛选到的稳定表达的基因为参照,采用qRT-PCR技术研究青稞HVA1基因和blt4.9基因在模拟水分胁迫条件下的表达差异及在不同抗旱性青稞品种鉴定中的应用。结果表明:(1)筛选到1个在干旱胁迫下青稞叶片中能稳定表达的内参基因TC139057;(2)在1%~30%PEG模拟干旱胁迫下,随着胁迫时间的延长,青稞HVA1和blt4.9基因表达量呈先增后降趋势,25%PEG处理下表达量最高,且在较低浓度PEG处理下基因表达量为HVA1>blt4.9,而在较高浓度PEG处理下反之;(3)15%PEG处理1~144h,两基因表达量也呈先增后降趋势,胁迫48h后HVA1基因表达量最高,胁迫96h后blt4.9基因表达量最高,且处理前期基因表达量为HVA1>blt4.9,后期反之;(4)1~500μmol·L^-1 ABA处理下,两基因表达量仍呈先增后降趋势,HVA1基因比blt4.9基因敏感,且在较低ABA浓度下基因表达量为HVA1>blt4.9,在较高浓度下反之;(5)获得转青稞HVA1和blt4.9基因拟南芥植株,其主要抗旱性生理指标优于野生型;且在较轻胁迫下,转HVA1植株的生理指标优于转blt4.9植株,而在较重胁迫处理下情况相反;(6)在模拟水分胁迫下,青稞叶片中两基因的表达量,抗旱性强的显著高于抗旱性弱的材料(P<0.01),且较轻胁迫下HVA1基因较敏感,反之blt4.9基因敏感。本研究结果为HVA1和blt4.9基因在青稞抗旱育种中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 青稞 hva1基因 blt4.9基因 内参基因 实时荧光定量PCR
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碱茅Put-HVA1基因的克隆及在酵母和拟南芥中的表达 被引量:5
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作者 刘小立 柳参奎 高野哲夫 《分子植物育种》 CAS CSCD 2010年第5期846-852,共7页
本研究从碱茅(Puccinellia tenuiflora)cDNA文库中分离得到Put-HVA1基因,其开放读码框(ORF)长534bp,共编码177个氨基酸,其预测分子量约为18.167kD,理论等电点约为7.80。氨基酸序列比较结果表明,Put-HVA1氨基酸序列与水稻、玉米的HVA1蛋... 本研究从碱茅(Puccinellia tenuiflora)cDNA文库中分离得到Put-HVA1基因,其开放读码框(ORF)长534bp,共编码177个氨基酸,其预测分子量约为18.167kD,理论等电点约为7.80。氨基酸序列比较结果表明,Put-HVA1氨基酸序列与水稻、玉米的HVA1蛋白氨基酸序列的同源性分别为69%和56%。另外,将Put-HVA1基因构建到酵母表达载体pYES2和植物双元表达载体pBI121上,并分别转化至酵母(INVSc1)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)。对pYES2-Put-HVA1转化酵母进行盐碱、氧化胁迫、渗透胁迫及干旱处理,结果表明:重组酵母提高了对盐碱、氧化、渗透胁迫及干旱等逆境的适应能力。对部分转基因株系进行了抗盐性试验,表明转Put-HVA1基因拟南芥在150mmol/L NaCl和5mmol/L NaHCO3胁迫下长势优于野生型拟南芥,表现出一定的耐受性。 展开更多
关键词 碱茅 hva1 酵母 拟南芥 逆境
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青稞Hva1-hv基因对小麦的遗传转化研究 被引量:1
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作者 李景良 易玲 +4 位作者 李林 龙海 邓光兵 潘志芬 余懋群 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期1558-1562,共5页
本研究通过根癌农杆菌介导,将克隆自强抗旱青稞品种的LEA3蛋白编码基因Hva1-hv转化到小麦品种Bobwhite中。经除草剂草丁膦筛选和分子检测,鉴定出4个稳定遗传的转基因小麦株系。结果表明,在干旱胁迫条件下,经T2代植株的RT-PCR分析表明,... 本研究通过根癌农杆菌介导,将克隆自强抗旱青稞品种的LEA3蛋白编码基因Hva1-hv转化到小麦品种Bobwhite中。经除草剂草丁膦筛选和分子检测,鉴定出4个稳定遗传的转基因小麦株系。结果表明,在干旱胁迫条件下,经T2代植株的RT-PCR分析表明,目的基因能在转基因植物中正常表达。采用离体叶片失水率作为衡量植物抗旱能力的指标,发现干旱胁迫条件下,4个T2代转基因小麦株系的离体叶片失水率较受体材料显著降低,证明转基因植株的抗干旱胁迫能力强于受体材料。本研究结果初步显示,Hva1-hv基因在抗旱小麦品种培育方面具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 hva1-hv 干旱 青稞 小麦 转基因
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草地早熟禾不同品种干旱胁迫下HVA1抗旱基因表达分析 被引量:7
11
作者 陈雅君 王洪宝 +1 位作者 冯淑华 李炜 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第2期166-169,共4页
根据大麦(Hordeum valgare)HVA1抗旱基因(X78205)的mRNA序列设计引物,提取干旱胁迫下草地早熟禾叶片中的RNA,以反转录后的cDNA为模板,进行PCR反应,扩增产物经回收、连接、转化和酶切鉴定为阳性重组子,其序列长度为324bp。经比较,与大麦H... 根据大麦(Hordeum valgare)HVA1抗旱基因(X78205)的mRNA序列设计引物,提取干旱胁迫下草地早熟禾叶片中的RNA,以反转录后的cDNA为模板,进行PCR反应,扩增产物经回收、连接、转化和酶切鉴定为阳性重组子,其序列长度为324bp。经比较,与大麦HVA1基因序列的同源性达到79.27%,表明所克隆的基因序列为草地早熟禾HVA1基因部分序列。 展开更多
关键词 草地早熟禾 干旱胁迫 HVA 1抗旱基因
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Analysis of drought resistance HVA1 gene under drought stress in different Poa pratensis cultivars 被引量:1
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作者 WU Yanhua CHEN Yajun SHEN Fengjuan SUN Xiaoyan 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2007年第1期1-4,共4页
Total RNA from leaves of Poapratensis cultivars under drought stress was extracted for reversing transcription to cDNA and then cDNA as template for PCR reaction by designing primer of cds of Hordeum valgare HVA1 drou... Total RNA from leaves of Poapratensis cultivars under drought stress was extracted for reversing transcription to cDNA and then cDNA as template for PCR reaction by designing primer of cds of Hordeum valgare HVA1 drought resistance gene from GenBank. The amplified products were positive recon identified by using procedures of recovery, connection, transformation and enzyme separation. The length of cloned gene sequence was 324 bp, identity reached 79.27% with Barley HVA1 gene that meaned the cloned gene sequence was the partial HVA1 gene of Poapratensis. 展开更多
关键词 Poa pratensis drought stress hva1 drought resistance gene
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转基因燕麦R3代中控制耐盐性的大麦HVA1基因
13
作者 向平(摘译) 《作物育种信息》 2006年第11期12-12,共1页
干旱和盐碱环境胁迫是世界上农业生产的主要限制因子。它们不仅影响了农作物的产量潜力,而且还限制了农业生产的地域。干旱和盐碱渗透性胁迫是影响燕麦产量的主要因子之一。本研究旨在弄清连锁bar和HVA1基因的分离及其表达和在世代间... 干旱和盐碱环境胁迫是世界上农业生产的主要限制因子。它们不仅影响了农作物的产量潜力,而且还限制了农业生产的地域。干旱和盐碱渗透性胁迫是影响燕麦产量的主要因子之一。本研究旨在弄清连锁bar和HVA1基因的分离及其表达和在世代间的传递情况;评价转基因对植株生长的影响;在胁迫环境条件下比较转基因品系和非转基因对照的普通农艺性状表现。 展开更多
关键词 转基因燕麦 hva1 耐盐性 大麦 控制 农艺性状表现 农业生产 环境胁迫
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LEA基因及Lea蛋白的研究进展 被引量:11
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作者 卢萍 卢青 杜荣骞 《内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)》 CAS 1999年第2期138-142,共5页
综述了有关LEA基因及Lea蛋白的研究进展:LEA基因与Lea蛋白的结构和功能;LEA基因表达和Lea蛋白积累与环境胁迫的关系;
关键词 LEA基因 LEA蛋白 hva1基因 环境胁迫 植物
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诱导大麦LEA蛋白的抗旱基因及Eibi1基因研究进展
15
作者 周元成 董双全 《大麦与谷类科学》 2012年第3期1-4,共4页
植物抗旱基因是植物在干旱胁迫下减少或免受胁迫损伤的保护机制。本文综述了大麦抗旱基因的种类、功能、结构以及基因的诱导和表达。同时总结了大麦抗旱基因在育种工程中的应用,以期为大麦的抗旱性遗传改良提供理论依据。
关键词 脱水素(DHNs) hva1基因 角质层基因Eibi1 抗旱基因HDCS1 LEA蛋白
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利用花粉管通道技术培育番茄耐盐新种质 被引量:19
16
作者 陈火英 张建华 +1 位作者 庄天明 张晓宁 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第1期12-16,共5页
利用自花授粉后形成的花粉管通道分别将番茄耐盐野生近缘种LycopersiconperuvianumLA111、Lycoper-siconcheesmaniiLA166、LycopersiconpennelliiLA716、LycopersiconpimpinellifoliumLA2184的总DNA及含来源于大麦LEA基因家族的HVA1基因... 利用自花授粉后形成的花粉管通道分别将番茄耐盐野生近缘种LycopersiconperuvianumLA111、Lycoper-siconcheesmaniiLA166、LycopersiconpennelliiLA716、LycopersiconpimpinellifoliumLA2184的总DNA及含来源于大麦LEA基因家族的HVA1基因的pBY520质粒DNA导入栽培番茄 鲜丰 及 矮黄 ,获得了较为广泛的变异,经过对后代的选择培育获得了一批农艺性状优良的耐盐新种质,并已培育耐盐新品系1个;传统的叶色遗传与现代的PCR检测表明番茄通过花粉管通道导入外源DNA是可行的. 展开更多
关键词 番茄 花粉管通道 野生耐盐近缘种总DNA 耐盐基因HVAl PCR检测
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