N-去甲万古霉素的亲和吸附

通过交联聚丙烯酸甲酯与乙醇胺反应 ,形成聚 (N -羟乙基丙烯酰胺 )树脂 ,在酸催化作用下与环氧氯丙烷反应 ,形成含有 α-羟基氯乙基的树脂 .含 α-羟基氯乙基的树脂与 D-丙氨酸、L-丙氨酸或甘氨酸反应 ,分别得到含有这 3种氨基酸的吸附剂 .这 3种吸附剂吸附 N-去甲万古霉素的结果表明 ,含 D-丙氨酸的吸附剂的吸附量最大 ,含甘氨酸的吸附剂的吸附量次之 ,而含 L-丙氨酸的吸附剂不吸附 N-去万古霉素 .说明前两种吸附剂对 N -去甲万古霉素存在亲和吸附作用 .含 D-丙氨酸吸附剂的最佳吸附 p H值为 5 .8,当吸附液中的盐 (Na Cl)浓度增加时 ,吸附量降低 .用 0 .4mol/ L Na2 CO3/ CH3CN(摩尔比 7∶ 3 ,p H=9.5 )作为洗脱剂可完全脱附被吸附的

N-去甲万古霉素亲和吸附剂的合成及性能

将N ,N 二甲基丙烯酰胺 N ,N′ 乙撑双丙烯酰胺共聚物部分水解 ,在共聚物中引入适量的羧基 .含羧基的聚合物与氨基酸甲酯缩合 ,然后使酯基皂化 ,将氨基酸引入聚合物 .将革兰氏阳性菌细胞壁粘肽的三种类似物 (—Gly ,—Gly—D Ala ,—Gly—D Ala—D Ala)分别引入上述聚合物 ,合成了 3种万古霉素系列抗菌素的亲和吸附剂 (Ⅰ ,Ⅱ和Ⅲ ) .结果表明 ,吸附剂Ⅱ和吸附剂Ⅲ对N 去甲万古霉素的吸附量分别为 0 .80和 0 .86mmol/ g;最佳吸附pH值为 6左右 ;吸附剂Ⅰ的吸附量随着吸附液中盐浓度的增加而显著降低 ,而吸附液中盐浓度对吸附剂Ⅱ的吸附量影响较小 .说明亲和作用在吸附剂Ⅱ的吸附中贡献较大 .用 0 .4mol/LNa2 CO3(pH 9.5 ) /CH3CN(体积比为 7/ 3)作为洗脱剂可完全脱附被吸附的N 去甲万古霉素 .

N-去甲基万古霉素的分离分析与鉴定

在制备万古霉素国家标准品时,发现国产万古霉素(以下简称Ⅰ)的效价比万古霉素国际标准品高,超出理论值约10%。为此对其组分进行了分离,分析,并对其主要组分的化学结构进行了测定,证明其分子结构为N-去甲基万古霉素。

去甲基万古霉素高产菌株的诱变选育

去甲基万古霉素产生菌东方拟无枝菌酸菌320,经紫外线诱变、激光照射复合处理后分离,在含有去甲基万古霉素的平板上筛选去甲基万古霉素抗性突变株。得到的抗性变株05-8-85,效价比出发株高32.1%,且遗传稳定性良好、发酵周期缩短24h。

微量元素和前体对去甲基万古霉素合成的影响

在去甲基万古霉素的发酵培养基中添加几种不同的微量元素,得出一组较优的微量元素组合,即当各微量元素质量浓度分别为Co2+0.6 mg/L,Ca2+0.2 mg/L,Mo2+0.15 mg/L,Cu2+0.2 mg/L,Mn2+0.2 mg/L时对发酵单位有明显的促进作用,发酵水平与对照比提高了20%.另外,对发酵过程中补加前体进行了考察,实验结果表明:发酵48 h,补入0.3 g/L的亮氨酸,发酵单位提高了15%.