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Cecropin B抗菌肽基因的定向诱变与表达 被引量:21
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作者 胡云龙 胡泰山 +5 位作者 林世康 苏剑 施国民 李伟 赵学忠 屈贤铭 《药物生物技术》 CAS CSCD 1999年第4期193-197,共5页
采用寡核苷酸介导的定向点突变法,对天蚕抗菌肽Cecropin B基因13 位甲硫氨酸( Met) 诱变为亮氨酸(Leu) 或缬氨酸(Val) ,保留1 位上的Met,诱变后的Cecropin BDNA序列分析证明产生了预期的... 采用寡核苷酸介导的定向点突变法,对天蚕抗菌肽Cecropin B基因13 位甲硫氨酸( Met) 诱变为亮氨酸(Leu) 或缬氨酸(Val) ,保留1 位上的Met,诱变后的Cecropin BDNA序列分析证明产生了预期的点突变。将Cecropin B 突变体基因与pGEX4T2 融合表达载体中的谷胱甘肽转移酶(GST) 基因融合,在E.coli 中表达,当IPTG 诱导30min 后,工程菌的数量开始减少,然后逐渐恢复正常。说明Cecropin B 突变体与GST 基因融合表达后仍然具有很强杀伤原核细胞的作用。 展开更多
关键词 抗菌肽 定向诱变 基因表达 cecropin b
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抗菌肽Cecropin B—肿瘤血管生长抑制因子Kringle5融合蛋白表达载体的构建及其表达 被引量:4
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作者 樊钰虎 冯瑄 +1 位作者 杨晓燕 边六交 《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第5期281-284,290,共5页
通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽Cecropin B(CB)基因,从ThioA/L15-7上卸下肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)基因,将两者按正确的阅读框架融合并定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a上,构建成pET32a/CB-K5重组载体。重组载体转化BL21(... 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽Cecropin B(CB)基因,从ThioA/L15-7上卸下肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)基因,将两者按正确的阅读框架融合并定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a上,构建成pET32a/CB-K5重组载体。重组载体转化BL21(DE3)细胞后,提取质粒进行PCR鉴定和序列分析,证明重组质粒pET32a/CB-K5阅读框架和融合基因序列均与预期相符。实验结果显示,成功地构建了抗菌肽CecropinB(CB)和肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)融合蛋白的表达载体pET32a/CB-K5。转化E.coliBL21(DE3),SDS-PAGE分析显示,在IPTG诱导下,融合蛋白以包涵体的形式在重组转化菌株中获得高效表达,表达量达到菌体总蛋白的50%。 展开更多
关键词 抗菌肽cecropin b 肿瘤血管生长抑制因子Kringle5 重叠区扩增法 融合表达载体
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家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析 被引量:3
3
作者 杨莹 王成林 +3 位作者 徐家萍 尤征英 凌琳 周敬波 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期246-253,共8页
动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogast... 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。 展开更多
关键词 家蚕 果蝇 抗菌肽 cecropin b 原核表达 抗菌活性 基因结构
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抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶融合蛋白表达载体的构建 被引量:7
4
作者 冯瑄 杨晓燕 边六交 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期3-5,共3页
目的是构建抗菌肽B (CecropinB)和人溶菌酶 (hLyso)的融合蛋白表达载体。从pUC118-hLyso上卸下人溶菌酶基因后 ,通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽B基因 ,并将其融合到人溶菌酶基因的 5’端。将抗菌肽B基因和人溶菌酶基因按正确的阅读框... 目的是构建抗菌肽B (CecropinB)和人溶菌酶 (hLyso)的融合蛋白表达载体。从pUC118-hLyso上卸下人溶菌酶基因后 ,通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽B基因 ,并将其融合到人溶菌酶基因的 5’端。将抗菌肽B基因和人溶菌酶基因按正确的阅读框架定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a,终止子位于人溶菌酶基因的 3’端。PCR鉴定及序列分析表明 ,所转化的BL2 1(DE3)菌落中含有插入CecropinB -hLyso基因的重组质粒pET32a -CB -hLyso。 展开更多
关键词 抗菌肽cecropinb 人溶菌酶 融合蛋白 融合表达载体
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抗菌肽Cecropin B基因导入番茄提高青枯病抗性 被引量:2
5
作者 高媛媛 余文贵 +4 位作者 赵统敏 张保龙 倪万潮 何晓兰 姚姝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第6期652-653,共2页
关键词 抗菌肽cecropin b基因 番茄 青枯病 抗性
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抗菌肽Cecropin B基因的克隆及体内活性检测方法的构建 被引量:3
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作者 翁宏飚 牛宝龙 +1 位作者 孟智启 徐孟奎 《浙江农业学报》 CSCD 2003年第5期273-279,共7页
根据家蚕抗菌肽基因的序列设计引物,从家蚕蛹脂肪体中扩增家蚕CecropinB基因,并利用GST融合表达系统进行表达。融合蛋白的表达量受表达诱导剂IPTG浓度控制,利用融合蛋白对宿主菌的部分抑菌作用,建立灵敏、简便的家蚕CecropinB体内抗菌... 根据家蚕抗菌肽基因的序列设计引物,从家蚕蛹脂肪体中扩增家蚕CecropinB基因,并利用GST融合表达系统进行表达。融合蛋白的表达量受表达诱导剂IPTG浓度控制,利用融合蛋白对宿主菌的部分抑菌作用,建立灵敏、简便的家蚕CecropinB体内抗菌活性检测方法。 展开更多
关键词 抗菌肽 融合表达 E.COLI 体内测活
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柞蚕抗菌肽cecropin B的结构和抑菌活性及基因表达分析
7
作者 叶博 赵振军 +5 位作者 李佩佩 岳冬梅 张波 王林美 李树英 范琦 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期660-668,共9页
抗菌肽对昆虫抵御病原微生物的侵染具有重要作用。使用在线软件分析成熟的柞蚕抗菌肽cecropin B高级结构,并与鳞翅目其他昆虫抗菌肽进行聚类分析。利用巴斯德毕赤酵母体外表达柞蚕cecropin B,并测试重组柞蚕cecropin B的抑菌活性。采用q... 抗菌肽对昆虫抵御病原微生物的侵染具有重要作用。使用在线软件分析成熟的柞蚕抗菌肽cecropin B高级结构,并与鳞翅目其他昆虫抗菌肽进行聚类分析。利用巴斯德毕赤酵母体外表达柞蚕cecropin B,并测试重组柞蚕cecropin B的抑菌活性。采用qRT-PCR方法检测3个不同品种柞蚕蛹在柞蚕肠球菌、柞蚕核型多角体病毒和柞蚕微孢子虫感染情况下,体内cecropinB基因的转录表达情况。结果显示,柞蚕cecropin B成熟肽的N端和C端分别有1个α螺旋结构,聚类分析将柞蚕cecropin B归为昆虫抗菌肽cecropin B亚型;柞蚕cecropin B在巴斯德毕赤酵母工程菌中得到体外表达,重组柞蚕cecropin B具有体外抑菌活性;柞蚕肠球菌感染的不同品种柞蚕蛹的cecropinB基因转录表达水平均上调,柞蚕核型多角体病毒或柞蚕微孢子虫感染的不同品种柞蚕蛹的cecropinB基因转录表达水平有明显差异,提示柞蚕cecropin B在柞蚕抵抗不同病原微生物的感染过程中可能具有不同的作用。 展开更多
关键词 柞蚕 抗菌肽cecropin b 巴斯德毕赤酵母表达系统 病原微生物 实时荧光定量PCR
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Hybrid Antimicrobial Peptide Buforin Ⅱ-Cecropin B Exhibits Antimicrobial Activity 被引量:2
8
作者 Xin NIE Li ZHANG +2 位作者 Shanshan WANG Jie DING Zhiping ZHAO 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2015年第1期55-58,共4页
[ Objective ] This study aimed to investigate the antimicrobial activity of hybrid antimicrobial peptide buforin II-cecropin B. [ Method ] Gene fragment BC encoding the hybrid antimicrobial peptide Buforin II-Cecropin... [ Objective ] This study aimed to investigate the antimicrobial activity of hybrid antimicrobial peptide buforin II-cecropin B. [ Method ] Gene fragment BC encoding the hybrid antimicrobial peptide Buforin II-Cecropin B was synthesized by SOE-PCR with six primers designed according to the published amino acid sequences. Then, the BC gene fragment was ligated into pET32a vector and expressed in BI21. Antimierobial ability of the crude hybrid antimicrobial peptide was detected with the Oxford cup method. [ Result] The BC gene fragment was correctly amplified by SOE-PCR and ligated into pET32a vector, to construct the expression vector pET32-BC. The hybrid antimicrobial peptide buforin II-cecropin B was expressed in BI21 after induction by IPTG. The optimal induction time was 2 h. Antimicrobial activity assay suggested that the hybrid antimicrobial peptide possessed antimicrobial activity to Escherichia coli and Bacillus subtilis. [ Conclusion] The hybrid antimicrobial peptide buforin II-cecropin B exhibited antimicrobial activity to Gram-negative E. coli and Gram-positive B. subtilis strains. 展开更多
关键词 Hybrid antimicrobial peptide buforin II cecropin b EXPRESSION Antimicrobial activity
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串联抗菌肽Cecropin B基因在莱茵衣藻中的表达及其抗菌活性分析(英文) 被引量:8
9
作者 穆菲芸 李辉 胡章立 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第4期344-351,共8页
为了应对各种抗生素在水产养殖业所带来的副作用,我们在本文中尝试利用微藻对一种抗菌肽进行表达的可行性研究.根据莱茵衣藻核基因组偏爱密码子对抗菌肽Cecropin B基因进行改造,并将4个经改造的Cecropin B基因依次串联起来,中间加上莱... 为了应对各种抗生素在水产养殖业所带来的副作用,我们在本文中尝试利用微藻对一种抗菌肽进行表达的可行性研究.根据莱茵衣藻核基因组偏爱密码子对抗菌肽Cecropin B基因进行改造,并将4个经改造的Cecropin B基因依次串联起来,中间加上莱茵衣藻的自剪切连接肽序列LWMRFA,人工合成总长度为522 bp的串联Cecropin B基因.将串联Cecropin B基因克隆到含hsp70-RBCS2启动子和RBCS2终止子的pH105载体上,再与携带ble筛选基因的表达框架连接,构建重组表达载体pCB124.采用玻璃珠转化法将载体pCB124导入莱茵衣藻cc-849中,筛选得到能表达抗菌肽Cecropin B的转基因衣藻.经过6个月的保持培养后,进一步对转基因藻细胞提取液进行抗菌活性分析,发现转基因藻具有明显的抑制革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和溶壁微球菌)生长的特征.这一结果为具有抗菌活性的饵料藻的生产和应用提供了新的途径. 展开更多
关键词 抗菌肽 莱茵衣藻 饵料藻 串联cecropin b
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抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶重组蛋白的表达及纯化 被引量:2
10
作者 翁婷 贾信贵 +2 位作者 顾章鸿 沈晓东 边六交 《化学与生物工程》 CAS 2007年第2期41-43,59,共4页
对抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶(CB-hLy)的重组大肠杆菌进行了诱导表达,并对影响该重组蛋白表达的培养条件进行了优化,最后对表达出的重组蛋白进行了分离纯化。由上述方法得到的重组CB-hLy蛋白经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)... 对抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶(CB-hLy)的重组大肠杆菌进行了诱导表达,并对影响该重组蛋白表达的培养条件进行了优化,最后对表达出的重组蛋白进行了分离纯化。由上述方法得到的重组CB-hLy蛋白经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)分析表明,其纯度可达90%,且具有良好的抑制真菌生长的生物活性。 展开更多
关键词 抗菌肽 人溶菌酶 重组蛋白 表达 纯化
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一种新型抗菌肽Cecropin B真核表达载体的构建 被引量:1
11
作者 胡仲秋 樊钰虎 +2 位作者 冯瑄 杨晓燕 边六交 《生物技术通讯》 CAS 2005年第3期268-270,共3页
通过重叠区扩增法人工设计和合成一种新型抗菌肽CecropinB基因,按正确的阅读框架定向克隆至巴斯德毕赤酵母的高效表达载体pPIC9K上。经PCR鉴定及序列分析,所转化的大肠杆菌DH5α菌落中含有插入CecropinB基因的重组质粒pPIC9K-CB,表明成... 通过重叠区扩增法人工设计和合成一种新型抗菌肽CecropinB基因,按正确的阅读框架定向克隆至巴斯德毕赤酵母的高效表达载体pPIC9K上。经PCR鉴定及序列分析,所转化的大肠杆菌DH5α菌落中含有插入CecropinB基因的重组质粒pPIC9K-CB,表明成功构建了新型抗菌肽CecropinB表达载体pPIC9K-CB。 展开更多
关键词 cecropin 抗菌肽 真核表达载体 构建 巴斯德毕赤酵母 高效表达载体 PCR鉴定 人工设计 定向克隆 序列分析 大肠杆菌 重组质粒 b基因 重叠区 Cb 菌落
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Primary study on the resistance to bacterial blight(X. oryzae)in Cecropin B gene transgenic rices
12
作者 HUA Zhihua HUANG Danian XUE Rui WANG Xiaoling GAO Zhenyu CNRRI,Hangzhou 310006,China. 《Chinese Rice Research Newsletter》 1998年第3期3-4,共2页
Bacterial blight (BB) is one of the major dis-eases to rice. Antibacterial Cecropin B genehas been cloned and transformed into rice. Westudied the resistance to bacterial blight inCecropin B gene transgenic rices.Rice... Bacterial blight (BB) is one of the major dis-eases to rice. Antibacterial Cecropin B genehas been cloned and transformed into rice. Westudied the resistance to bacterial blight inCecropin B gene transgenic rices.Rice variety JYll9 transformed withCecropin B gene by particle bombardment andprogenies were randomly planted in the field in 展开更多
关键词 oryzae)in cecropin b gene transgenic rices Primary study on the resistance to bacterial blight GENE
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The Cytotoxic Effect of Cecropin A and Cecropin B on the MDA-MB-231 and M14K Tumour Cell Lines 被引量:1
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作者 Radu Anghel Daniela Jitaru +2 位作者 Laurentiu Badescu Manuela Ciocoiu Magda Badescu 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2014年第8期504-515,共12页
The aim of the present in vitro study was to assess the tumoricidal potential of the following natural peptides belonging to the Cecropin family, namely Cecropin A and B, on a series of tumour cell lines: MDA-MB-231 (... The aim of the present in vitro study was to assess the tumoricidal potential of the following natural peptides belonging to the Cecropin family, namely Cecropin A and B, on a series of tumour cell lines: MDA-MB-231 (breast adenocarcinoma) and M14K (human mesothelioma). The experimental results reveal that the cytotoxic effects of the two peptides depend on their concentration. Their efficiency is significant at 120 μM concentrations and it persists even at 60 μM concentrations. The effects were insignificant at 30 μM concentrations. On the other hand, the cytotoxic potential was not significantly dependant on the type of peptide but more on the type of tumour cell line used. The MDA MB 231 line cells were much more sensitive to the action of Cecropins A and B than the M14K line cells. The prospects brought about by this experimental research consist of the collection of in vitro experimental data on the tumoricidal potential of these natural cytotoxic peptides on tumour cells. This will enable specialists to develop future in vivo experimental models in order to test the antitumor effect of these cytotoxic peptides. The ultimate goal would be the discovery of agents with efficient antitumor properties, i.e. with maximum tumoricidal effects and minimum toxic side effects. 展开更多
关键词 breast ADENOCARCINOMA cecropin A cecropin b Human MESOTHELIOMA Tumoricidal Potential
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转CecropinB基因柑桔对溃疡病的离体抗性评价 被引量:1
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作者 刘琦琦 邹修平 +3 位作者 彭爱红 许兰珍 何永睿 陈善春 《中国南方果树》 北大核心 2014年第2期1-4,21,共5页
为评价转抗菌肽基因Cecropin B的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性,分别用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验,并用Real-time PCR和Southern blot进一步分析了Cecropin B在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示,与喷雾法相比... 为评价转抗菌肽基因Cecropin B的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性,分别用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验,并用Real-time PCR和Southern blot进一步分析了Cecropin B在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示,与喷雾法相比,针刺接种处理的离体叶片显症时间短,发病率高,便于统计分析。针刺接种6天,大部分转基因植株发病率与非转基因植株无显著差异;其中,PR8、PR11、AAT8和AAT14单株的发病率分别为67.0%、62.9%、68.1%和54.2%,显著低于非转基因植株(96.7%)。对柑桔溃疡病具有抗性的转基因植株(PR8、PR11、AAT8和AAT14)的Cecropin B基因表达量明显高于对照(非转基因植株)。PR8和AAT14植株中的Cecropin B为单拷贝,PR11和AAT8植株中的Cecropin B分别为2个拷贝和3个拷贝。转入Cecropin B可提高锦橙对柑桔溃疡病的抗性。 展开更多
关键词 转基因柑桔 cecropinb基因 柑桔溃疡病 抗病性 针刺法
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Construction of Antibacterial Peptide CecropinB Eukaryotic Recombinant Vector and Its Expression in Dairy Goat Mammary Gland Epithelial Cells
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作者 GAO Xuejun TONG Huili YIN Deyun ZHANG Li 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2008年第4期15-19,共5页
To investigate the expression of antibacterial peptide CecropinB cDNA in dairy goat mammary gland epithelial cells,the CecropinB gene was cloned and was inserted into a eukaryotic vector pECFP-C1 to construct the reco... To investigate the expression of antibacterial peptide CecropinB cDNA in dairy goat mammary gland epithelial cells,the CecropinB gene was cloned and was inserted into a eukaryotic vector pECFP-C1 to construct the recombinant plasmid pECFP-B by genetic engineering technique.Recombinant plasmid pECFP-B was transfected into dairy goat mammary gland epithelial to detect the bactericidal activity of CecropinB.The expression of CecropinB was also detected.The result of RT-PCR demonstrated CecropinB gene was expressed in transfected cells.CecropinB recombinant plasmid DNA was injected into udders and CecropinB was expressed in mammary gland,exhibiting bactericidal activity to Staphylococcus aureus in vivo experiments. 展开更多
关键词 cecropin b goat mammary epithelial gland cell TRANSFECTION bactericidal activity
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Introduction of cecropin B gene into rice (Oryza sativa L.) by particle bombardment and analysis of transgenic plants 被引量:7
16
作者 黄大年 朱冰 +5 位作者 杨炜 薛锐 肖晗 田文忠 李良材 戴顺洪 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第6期652-661,共10页
An expression vector pCBl suitable for rice transformation, harboring a synthesized cecropin B gene and a selectable marker gene (bar), was constructed. It was introduced into immature embryos of two japonica varietie... An expression vector pCBl suitable for rice transformation, harboring a synthesized cecropin B gene and a selectable marker gene (bar), was constructed. It was introduced into immature embryos of two japonica varieties by particle bombardment, and several transgenic plants were obtained. The results from Basta treatment, PCR analysis, dot and Southern blot analysis of cecropin B gene in transgenic plants indicated that both bar and cecropin B gene were integrated into the genome of transformed plants. Northern blot analysis of transgenic plants showed the expression of cecropin B gene at transcriptional level. Some of transgenic plants revealed improved resistances to two types of bacterial diseases, rice bacterial blight and rice bacterial streak to different extent. 展开更多
关键词 cecropin b GENE particle bOMbARDMENT bar GENE RICE (Oryza SATIVA L..).
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抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达 被引量:20
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作者 王秀青 张素芳 +2 位作者 曹瑞兵 周斌 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期120-123,共4页
通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点。亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用SacⅠ酶切使之线性化,采用电... 通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点。亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用SacⅠ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵。经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性。 展开更多
关键词 天蚕素b 抗菌肽 毕赤酵母 表达 抑菌活性 重叠区扩增基因拼接法(SOE)
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转抗菌肽B基因和bar基因籼稻植株的再生 被引量:12
18
作者 王慧中 华志华 +3 位作者 高振宇 颜美仙 钱前 黄大年 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期129-132,共4页
运用基因枪法将含有 bar基因和 cecropin B基因的质粒 p CB1导入籼稻品种特青的幼胚细胞 ,筛选后得到 3株转基因植株。PCR检测和 Southern杂交结果表明 ,外源基因已整合到水稻基因组中。转化当代植株表现出对 Basta很强的抗性 。
关键词 水稻 bAR基因 抗菌肽b基因 转基因 抗病性
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天蚕抗菌肽B在毕赤酵母中的表达 被引量:9
19
作者 扈进冬 郭勇 +2 位作者 吴远征 张广志 杨合同 《山东科学》 CAS 2006年第6期19-23,共5页
Cecropins B是一种昆虫抗菌肽,具有分子量小,热稳定性、水溶性好、抗菌谱广等优点,更为重要的是抗菌肽对真核细胞几乎没有作用,仅仅作用于原核细胞和发生病变的真核细胞,是目前已知天然抗菌肽中活力最强的一种。根据毕赤氏巴斯德酵母(Pi... Cecropins B是一种昆虫抗菌肽,具有分子量小,热稳定性、水溶性好、抗菌谱广等优点,更为重要的是抗菌肽对真核细胞几乎没有作用,仅仅作用于原核细胞和发生病变的真核细胞,是目前已知天然抗菌肽中活力最强的一种。根据毕赤氏巴斯德酵母(Pichia pastoris)偏好密码子,改造并化学合成天蚕素基因B,克隆到pPIC9K载体中,构建分泌型重组酵母表达载体CB-pPIC9K,转化Pichia pastoris受体菌KM71,在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,Cecropin B获得表达,分子量约3.8KD,摇瓶发酵产率可达到200μg/mL,并对其抗菌活性进行了初步测定。结果表明我们表达的重组Cecropins B对G-菌有较好的抑菌活性,且具有较好的热稳定性。这些特点使得重组抗菌肽Cecropins B在食品防腐、疾病防治和动物饲料添加剂等方面显露出很好的应用前景。 展开更多
关键词 天蚕素b PICHIA PASTORIS 分泌表达 抑菌活性
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转抗菌肽B基因水稻植株的获得与鉴定 被引量:8
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作者 黄大年 朱冰 +4 位作者 杨炜 薛锐 肖晗 田文忠 李良才 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第5期4-6,共3页
构建了一个适合在水稻中表达含有抗菌肽B基因的转化载体(pCB1),应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚,获得了一些转基因水稻植株。根据对选择标记基因和目的基因的分子检测和抗病性测定,证明抗菌肽B基因已整合入转化水稻基... 构建了一个适合在水稻中表达含有抗菌肽B基因的转化载体(pCB1),应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚,获得了一些转基因水稻植株。根据对选择标记基因和目的基因的分子检测和抗病性测定,证明抗菌肽B基因已整合入转化水稻基因组并在转基因水稻中表达了抗病性。 展开更多
关键词 抗菌肽b基因 水稻 水稻植株
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