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Screening high-quality fetal bovine serum for porcine oocyte maturation in vitro 被引量:3
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作者 Xueqing Liu Qiaoli Lang +8 位作者 Meng Wu Xiaoyan You Qiling He Ling Luo Zijia Liu Puying Xiao Nan Huang Xi Yang Liangpeng Ge 《Animal Models and Experimental Medicine》 CSCD 2019年第4期334-339,共6页
Fetal bovine serum(FBS) is widely used in cell cultures due to its high stability and easy access. It was also used as a substitute for porcine follicular fluid(PFF) in previous studies. However, FBS components are un... Fetal bovine serum(FBS) is widely used in cell cultures due to its high stability and easy access. It was also used as a substitute for porcine follicular fluid(PFF) in previous studies. However, FBS components are unclear, and the presence of FBS in culture media may introduce a variation from batch to batch. This study aimed to establish an effective method to screen FBS in place of PFF in the culture media for porcine oocytes in vitro. We screened FBS from different sources by using porcine fetal fibroblast cells. The effects of six FBS samples on porcine fetal fibroblast cell growth were tested via frozen cell survival assay, cell clone formation assay, cell growth curve, and cell passage activity assay. The best serum that we called GFBS(heat-inactivated FBS, cat. no. 10500-64;Gibco) showed a similar effect on the maturation and development of porcine oocytes to that of PFF and can be used as a good substitute for PFF. These results suggested that the porcine fetal fibroblast cell culture test can be used as a valuable method to screen FBS for porcine oocyte maturation and embryonic development in vitro. 展开更多
关键词 fetal bovine serum maturation rate porcine oocytes
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Fetal bovine serum versus Chinese herbal formula Naoluoxintong serum supplementation for proliferation and differentiation of rat embryonic neural stem cells
2
作者 Wei Tang Jian Wang +6 位作者 Youwen Wang Chaomin Ni Yenong Chen Zhaoliang Tang Lihua Yu Xiaomin Li Jianpeng Hu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第14期1061-1065,共5页
BACKGROUND: How to induce endogenous neural stem cells (NSCs) to differentiate into needed neural cell types is a hot spot of current researches. OBJECTIVE: To compare differences between fetal bovine serum and Ch... BACKGROUND: How to induce endogenous neural stem cells (NSCs) to differentiate into needed neural cell types is a hot spot of current researches. OBJECTIVE: To compare differences between fetal bovine serum and Chinese herbal formula Naoluoxintong serum supplementation for inducing proliferation and differentiation in rat embryonic NSCs. DESIGN, TIME AND SETTING: An in vitro, serum pharmacology, comparative, observation study was performed from March to September in 2008 at the Laboratory of Neurodegenerative Diseases, College of Life Science in University of Science and Technology of China, the Key Laboratory Breeding Base of Acupuncture Foundation and Technology in Anhui University of Traditional Chinese Medicine, the Anhui Province Key Laboratory of R & D of Chinese Medicine, and at the Level 3 Laboratory of Molecular Biology of the State Administration of Traditional Chinese Medicine. MATERIALS: The Chinese herbal formula Naoluoxintong was produced by Radix Astragali, Radix Notoginseng, Rhizoma Chuanxiong, Scolopendra at Anhui University of Traditional Chinese Medicine. Mouse anti-rat nestin, gliat fibrillary acidic protein, and galactocerebroside monoclonal antibodies, as well as rabbit anti-neuron-specific enolase polyclonal antibody were produced by Chemicon, Billerica, MA, USA. METHODS: Wistar rats aged 3 months were intragastrically infused with Naoluoxintong. Wistar rat embryonic NSCs (passage 8) were induced to proliferate and differentiate using 10% fetal bovine serum, 10% Naoluoxintong serum, and 10% rat serum. MAIN OUTCOME MEASURES: Phenotypic changes in cultured cells were detected using phase contrast microscopy, and cell proliferation and differentiation were observed using immunofluorescence staining. RESULTS: Proliferation and differentiation of embryonic NSCs was induced by three different types of blood serum. Although the differentiation time course with Nao/uoxintongserum was later than with the other two methods, the differentiated cells were morphologically similar to mature neurons to a greater extent. CONCLUSION: Nao/uoxintong serum supplementation induced differentiation of NSCs into neuronal-like cells and stimulated neuronal maturation. 展开更多
关键词 neural stem cells DIFFERENTIATION PROLIFERATION Chinese herbal formula Nao/uoxintong drug serum fetal bovine serum neural regeneration
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EGF和FBS对牛孤雌胚胎发育的影响 被引量:12
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作者 李向臣 丛日华 +2 位作者 安志兴 王超 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第4期51-54,共4页
 在卵母细胞体外成熟液中分别添加0,10,30,50ng/mL表皮生长因子(EGF),24h检查成熟率,将成熟的卵母细胞置于5μmol/L离子霉素(Ionomycin)中激活5min后,在含有6-DMAP和CCB的培养液中培养4h,最后移入CR1培养液中培养,并在孤雌激活后第0,2,...  在卵母细胞体外成熟液中分别添加0,10,30,50ng/mL表皮生长因子(EGF),24h检查成熟率,将成熟的卵母细胞置于5μmol/L离子霉素(Ionomycin)中激活5min后,在含有6-DMAP和CCB的培养液中培养4h,最后移入CR1培养液中培养,并在孤雌激活后第0,2,4,6天添加体积分数10%的胎牛血清(FBS),7~8d后检查囊胚率,探讨牛成熟培养液中添加EGF及FBS对牛孤雌胚体外发育的影响。结果表明,添加30ng/mL的EGF能促进卵母细胞的成熟率和孤雌囊胚的发育率;在第4天添加FBS更有利于胚胎的发育。 展开更多
关键词 EGF fbs 孤雌胚胎 体外发育 表皮生长因子 胎牛血清 囊胚率 成熟率 胚胎移植
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微量动态显色法定量检测胎牛血清中细菌内毒素含量
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作者 方韵 屠哲玮 +1 位作者 黄依雯 季文君 《中南药学》 CAS 2024年第5期1350-1353,共4页
目的 探讨微量动态显色法定量检测胎牛血清中的细菌内毒素的可行性,并与凝胶法结果比较。方法 采用微量动态显色法鲎试剂,建立标准曲线,通过预干扰试验确定稀释倍数,测定供试品外加内毒素回收率进行干扰试验,对供试品进行定量检测,并与... 目的 探讨微量动态显色法定量检测胎牛血清中的细菌内毒素的可行性,并与凝胶法结果比较。方法 采用微量动态显色法鲎试剂,建立标准曲线,通过预干扰试验确定稀释倍数,测定供试品外加内毒素回收率进行干扰试验,对供试品进行定量检测,并与凝胶法试验结果进行比较。结果 标准曲线的线性范围为0.02~20 EU·mL^(-1),回归方程为lgT=2.9334-0.2883 lgC,相关系数| r |=0.9992,供试品在稀释200倍时无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%内,其中3批供试品的内毒素定量检测结果小于规定限值,1批高于限值,检测结果与凝胶法一致。结论 本品可采用微量动态显色法定量检测细菌内毒素含量,进行质量控制。 展开更多
关键词 微量动态显色法 胎牛血清 细菌内毒素 定量检测
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基于细胞体外培养筛选最适胎牛血清
5
作者 游小燕 何琦琳 +1 位作者 范骁玲 葛良鹏 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期64-69,共6页
为了探索小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/0)与猪胎儿成纤维细胞(PFF)对胎牛血清(FBS)的需求差异,以期筛选出最适血清,首先采用两种不同来源的FBS培养Sp2/0和PFF,观察细胞形态、克隆形成,分析细胞活率与数量.结果显示:无论采用国产FBS1还是进口的FBS... 为了探索小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/0)与猪胎儿成纤维细胞(PFF)对胎牛血清(FBS)的需求差异,以期筛选出最适血清,首先采用两种不同来源的FBS培养Sp2/0和PFF,观察细胞形态、克隆形成,分析细胞活率与数量.结果显示:无论采用国产FBS1还是进口的FBS2培养Sp2/0,其细胞克隆数、细胞数量和活率差异均无统计学意义(p>0.05),但进口FBS2培养的PFF,其细胞克隆数、细胞数量和活率均显著高于国产FBS1(p<0.05).随后用进口FBS2的3个不同批号培养PFF,结果显示:3个批号的FBS2均能促进细胞生长,细胞结构清晰,呈梭形;培养7 d,3个批次的FBS2均有细胞克隆形成,但FBS2-1形成的克隆小,且细胞克隆数极显著低于FBS2-2和FBS2-3(p<0.01);培养10 d,FBS2-1的细胞数量和细胞活率极显著低于FBS2-2和FBS2-3(p<0.01).虽然FBS2-2的细胞克隆数极显著低于FBS2-3(p<0.01),但是FBS2-2的细胞克隆大,且细胞数量极显著高于FBS2-3(p<0.01).结果表明:Sp2/0与PFF对FBS的需求有差异,无论是国产FBS1还是进口FBS2,均能满足Sp2/0体外培养的需要,但PFF在进口FBS2中的生长性能极显著优于国产FBS1,FBS2-2是PFF体外培养的最适血清. 展开更多
关键词 胎牛血清 Sp2/0 猪胎儿成纤维细胞 细胞克隆 细胞活率
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胎牛血清在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用研究 被引量:2
6
作者 相德才 李水英 +6 位作者 张斌 张彦 梁家充 吕春荣 洪琼花 权国波 吴国权 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期606-615,共10页
【目的】研究胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料,将新鲜和冷冻囊胚分别在含10%FBS(V/V)的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组(Fre... 【目的】研究胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料,将新鲜和冷冻囊胚分别在含10%FBS(V/V)的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组(Fresh)、新鲜+FBS组(Fresh+FBS)、冷冻组(Vitrified)、冷冻+FBS组(Vitrified+FBS)。观察各组囊胚的扩张和孵化能力,检测胚胎的细胞膜损伤、凋亡细胞数目、总细胞数目、胞内活性氧(ROS)水平、线粒体活性以及发育相关基因的表达水平。【结果】与Fresh和Vitrified组相比,Fresh+FBS和Vitrified+FBS组的完全扩张率、孵化率和囊胚细胞总数均显著提高(P<0.05),细胞膜损伤率和细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。与Fresh组相比,Vitrified组ROS水平显著升高(P<0.05),Fresh+FBS和Vitrified+FBS组ROS水平均显著降低(P<0.05)。Vitrified+FBS组的线粒体活性显著高于Vitrified组(P<0.05)、显著低于Fresh+FBS组(P<0.05),与Fresh组无显著差异(P>0.05)。相比于Fresh组,Vitrified组POU结构域与类转录因子1(POU5F1)表达水平显著上升(P<0.05)、过氧化氢酶(CAT)表达水平显著下降(P<0.05)。增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、BCL2相关X蛋白(BAX)/BCL2L1的表达水平在Fresh和Vitrified组之间均无显著性差异(P>0.05)。Fresh+FBS和Vitrified+FBS组中PCNA、SOD 1和CAT的表达水平显著高于Fresh和Vitrified组(P<0.05)。【结论】体外培养第5天的新鲜和冷冻猪孤雌囊胚在10%FBS中继续培养,其发育能力及胚胎质量均得到明显改善。 展开更多
关键词 囊胚 玻璃化冷冻 胎牛血清 胚胎质量
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Effects of proteins on magnesium degradation-static vs.dynamic conditions
7
作者 Ruiqing Hou Frank Feyerabend +2 位作者 Heike Helmholz Vasil M.Garamus Regine Willumeit-Römer 《Journal of Magnesium and Alloys》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第4期1332-1342,共11页
The interaction between organic molecules and biomaterial surfaces determines the fate of biomaterials during their service life,which is also the research hotspots in the field of biomaterials.To understand the mecha... The interaction between organic molecules and biomaterial surfaces determines the fate of biomaterials during their service life,which is also the research hotspots in the field of biomaterials.To understand the mechanism of protein interaction with magnesium(Mg)degradation,alloying elements,immersion time,protein concentration and surface conditions have been previously considered for the effect of proteins on Mg degradation.However,fluid flow,as one of the critical factors,drew little attention in this case.In the present study,the effect of bovine serum albumin(BSA)and fetal bovine serum(FBS)on Mg degradation was compared under static and dynamic conditions.The results revealed that both BSA and FBS slightly decreased the degradation rate of Mg in Hanks’balanced salt solution(HBSS)under static immersion due to the protein adsorption and the formation of a Ca/P-rich top layer on Mg surface,whereas under dynamic flow condition the degradation of Mg was significantly accelerated in the presence of BSA or FBS.The reasons seemed to stem from the weakened protein adsorption on Mg surface in this case and the dynamically enhanced interaction between proteins and ions/products in solutions,which largely weaken the combination of the top Ca/P-rich layer with the inner corrosion product layer.These results highlight the importance of testing conditions for Mg characterization in vitro and the synergistic effect between different parameters on Mg degradation. 展开更多
关键词 FLOW bovine serum albumin fetal bovine serum Protein adsorption
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Evaluation of the major royal jelly proteins as an alternative to fetal bovine serum in culturing human cell lines
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作者 Di CHEN Xiao-xuan XIN +2 位作者 Hao-cheng QIAN Zhang-yin YU Li-rong SHEN 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期476-483,共8页
Royal jelly (R J) is a well-known bioactive substance. It contains large amounts of major royal jelly proteins (MRJPs), which express growth-factor-like activity in several animal and human cell lines. However, th... Royal jelly (R J) is a well-known bioactive substance. It contains large amounts of major royal jelly proteins (MRJPs), which express growth-factor-like activity in several animal and human cell lines. However, the question on whether MRJPs possess growth-factor-like activity on all types of cell cultures remains. In order to determine whether MRJPs can be used as an alternative to fetal bovine serum (FBS) in different types of human cell culture, the prolif- eration of the complex serum with different ratios of MRJPs/FBS (M/F) was evaluated on five cell lines: 293T, HFL-I, 231, HCT116, and Changliver using MTT (3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) assay. The proliferation activity of the combination of the complex M/F serum with cytokines on the test cell lines was also measured. The results demonstrated that the complex serum with M/F 6/4 possessed the highest proliferation activity similar to or in excess of FBS. However, no activity of complex medium with M/F 6/4 was observed in 231 cells, indicating a selectivity of MRJPs on cell types. Compared with the complex medium with M/F 6/4, the complex medium with M/F 6/4 together with two cytokines, epidermal growth factor (EGF) and insulin-transferrin-selenium (ITS), pro- moted proliferations of Changliver, 293T, HCT116, and H FL-I by 18.73%-56.19% (P〈0.01). Our findings demonstrate that MRJPs could partially replace FBS in culturing many human cell lines. 展开更多
关键词 Major royal jelly proteins (MRJPs) Cell culture ALTERNATIVE fetal bovine serum fbs CYTOKINE
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胎牛血清对人胚胎神经干细胞分化的影响 被引量:21
9
作者 李巍 李成仁 +1 位作者 蔡文琴 姚忠祥 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期4-6,共3页
目的 探索胎牛血清对人神经干细胞 (NSCs)的影响。方法 采用细胞培养、免疫组化、流式细胞仪检测的方法 ,观察了不同浓度胎牛血清对人NSC分化的影响。结果 胎牛血清促进人NSC分化为神经系统的主要的 3种细胞 (神经元、星形胶质细胞... 目的 探索胎牛血清对人神经干细胞 (NSCs)的影响。方法 采用细胞培养、免疫组化、流式细胞仪检测的方法 ,观察了不同浓度胎牛血清对人NSC分化的影响。结果 胎牛血清促进人NSC分化为神经系统的主要的 3种细胞 (神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞 ) ,且培养基中胎牛血清浓度为 15 %时 ,人NSC分化为星形胶质细胞的数量占 80 %~90 %。结论 胎牛血清影响人NSC分化为神经元和神经胶质细胞的比例 ,并与胎牛血清的浓度有一定的关系。 展开更多
关键词 神经干细胞 胎牛血清 细胞培养 免疫组织化学 流式细胞仪 细胞分化
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自体血清与胎牛血清培养口腔黏膜角质细胞及上皮组织的实验研究 被引量:10
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作者 刘立强 李森恺 +6 位作者 范金财 李养群 刘元波 王永前 徐家杰 曹蕊 周传德 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期467-470,共4页
目的探讨自体血清培养人口腔黏膜角质细胞的可行性,为组织工程口腔黏膜用于临床提供理论和技术依据。方法应用自行制备的含10%、20%和30%自体血清的培养液及10%胎牛血清培养液,对人口腔黏膜角质细胞进行培养。对比观察不同浓度自体血清... 目的探讨自体血清培养人口腔黏膜角质细胞的可行性,为组织工程口腔黏膜用于临床提供理论和技术依据。方法应用自行制备的含10%、20%和30%自体血清的培养液及10%胎牛血清培养液,对人口腔黏膜角质细胞进行培养。对比观察不同浓度自体血清和胎牛血清培养的口腔黏膜角质细胞及上皮组织生长情况,绘制10%自体血清组及10%胎牛血清组细胞生长曲线及计算其倍增时间。并行抗-HLA免疫荧光检测培养上皮。结果各浓度自体血清组和10%胎牛血清组细胞生长及形态无明显差别,10%自体血清组细胞倍增时间为24.02±1.80h,与10%胎牛血清组20.90±0.79h比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞24h克隆形成率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);随自体血清浓度升高获得黏膜上皮面积增大,厚度增加,以20%自体血清组最为明显,与10%胎牛血清组培养黏膜上皮比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各组培养上皮经抗-HLA免疫荧光检测为阳性。结论制备的自体血清能完全替代胎牛血清对口腔黏膜角质细胞进行培养,且培养的口腔黏膜上皮组织分化优于胎牛血清。 展开更多
关键词 白体血清 胎牛血清 口腔黏膜角质细胞 口腔黏膜上皮组织 培养
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IL-1β和胎牛血清对大鼠神经干细胞分化的影响 被引量:12
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作者 刘仕勇 张可成 +1 位作者 杨辉 吕胜青 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期432-435,共4页
在成年大鼠纹状体区分离神经干细胞 ,使用白介素 - 1β、神经生长因子、全反维甲酸和不同含量的胎牛血清作为诱导因子 ,通过免疫荧光化学方法和流式细胞仪检测细胞分化。结果表明胎牛血清有助于神经干细胞向星形胶质细胞和少突胶质细胞... 在成年大鼠纹状体区分离神经干细胞 ,使用白介素 - 1β、神经生长因子、全反维甲酸和不同含量的胎牛血清作为诱导因子 ,通过免疫荧光化学方法和流式细胞仪检测细胞分化。结果表明胎牛血清有助于神经干细胞向星形胶质细胞和少突胶质细胞分化 ,IL - 1β虽然对神经元数目没有明显影响 ,但对神经干细胞向多巴胺能神经元的分化却有明显促进作用。神经生长因子和全反维甲酸对神经干细胞向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和多巴胺能神经元的分化数量无明显影响。 展开更多
关键词 神经干细胞 胎牛血清 白介素-1Β 细胞分化 大鼠
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臭氧对胎牛血清氧化损伤的表面增强拉曼光谱 被引量:5
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作者 邹祖全 刘燕楠 +4 位作者 吴瑛 李奇楠 陈梅宗 孙海英 李任植 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1140-1142,共3页
对实验室细胞培养用的国产胎牛血清在臭氧作用前后进行了表面增强拉曼光谱测试,范围200~1800cm-1。发现臭氧作用1h后拉曼谱线强度大大减弱,作用3h后谱线强度进一步减弱,但减弱的程度明显减慢,说明臭氧氧化作用具有快速的特点。臭氧作... 对实验室细胞培养用的国产胎牛血清在臭氧作用前后进行了表面增强拉曼光谱测试,范围200~1800cm-1。发现臭氧作用1h后拉曼谱线强度大大减弱,作用3h后谱线强度进一步减弱,但减弱的程度明显减慢,说明臭氧氧化作用具有快速的特点。臭氧作用下蛋白质主链的有序构象(α-螺旋,β折叠)明显减少,对β折叠的损伤更为严重,β回折几乎消失。芳香族氨基酸和半胱氨酸侧链在臭氧作用下氧化损伤非常明显。这些特征谱线的变化,反映了臭氧的氧化作用使蛋白质变性,构象变化以及降解。 展开更多
关键词 表面增强拉曼光谱 胎牛血清 臭氧
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不同血清浓度对bFGF联合EGF诱导BMSCs向神经细胞分化的影响 被引量:4
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作者 何丁文 殷嫦嫦 +3 位作者 殷明 罗元一 刘玉亮 梁广胜 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期18-24,共7页
目的:探讨不同血清浓度条件下碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞分化方向的影响。方法:全... 目的:探讨不同血清浓度条件下碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞分化方向的影响。方法:全骨髓贴壁法体外分离培养BMSCs,流式细胞法检测BMSCs表面骨髓基质标志CD90和造血细胞标志CD45,MTT法绘制第3(P3)代BMSCs生长曲线。取P4代细胞分为3组给予不同诱导条件,分别给予含20 ng/ml的bFGF和20 ng/ml EGF的无胎牛血清(A组)、10 ml/L胎牛血清(B组)及100 ml/L胎牛血清(C组)的DMEM/F-12培养液进行诱导,倒置显微镜观察细胞的形态变化,诱导6 d时免疫组织化学法检测细胞内神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,台盼蓝染色检测各组细胞的活力。结果:BM-SCs经3-4次传代培养后形态大致呈单一的长梭形或扁平形,流式细胞鉴定显示CD90阳性,CD45阴性;细胞生长曲线近似呈"S"形;诱导后可见细胞胞体收缩,呈双极、多极并伸出突起;诱导6 d时3组活细胞率分别为:86.57%、95.29%、97.32%;免疫组化各组均见NSE、GFAP表达,3组NSE阳性率高于GFAP,A组NSE阳性率高于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.01),C组NSE阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.01),A组GFAP阳性率低于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.01),C组GFAP阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:bFGF联合EGF可诱导BMSCs向神经细胞分化,在无血清条件下趋向于向神经元分化,在高浓度血清条件下趋向胶质细胞分化。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子 表皮生长因子 胎牛血清 BMSCS 神经细胞分化
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二甲基亚砜和胎牛血清对293T细胞冷冻效果的影响 被引量:4
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作者 李佳佳 程腾 +4 位作者 贺小英 梁波 陈秀莉 籍凤宇 马利兵 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第2期217-220,共4页
使用含不同体积分数二甲基亚砜(DMSO)(5%、10%、15%、20%)和不同体积分数胎牛血清(FBS)(5%、10%、20%、40%)的细胞冷冻液以三步冷冻法冻存293T细胞.台盼蓝染色法进行活细胞计数后计算出解冻后细胞存活率.结果表明:FBS对293T细胞冷冻效... 使用含不同体积分数二甲基亚砜(DMSO)(5%、10%、15%、20%)和不同体积分数胎牛血清(FBS)(5%、10%、20%、40%)的细胞冷冻液以三步冷冻法冻存293T细胞.台盼蓝染色法进行活细胞计数后计算出解冻后细胞存活率.结果表明:FBS对293T细胞冷冻效果的影响是显著的(P<0.05),但添加20%和40%FBS的效果无显著差异(P>0.05);DMSO对293T细胞冷冻效果的影响则是极显著的(P<0.01),添加10%DMSO时,细胞的冷冻效果最好;冷冻液中含10%DMSO、40%FBS时的冷冻效果最佳,细胞存活率可达到82.00%.而实际应用中,含10%FBS、10%DMSO或20%FBS、5%~10%DMSO的细胞冷冻液也可达到较理想的冷冻效果,足以达到一般实验的要求. 展开更多
关键词 293T细胞 二甲基亚砜 胎牛血清 冷冻效果
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表皮生长因子和胎牛血清对猪体细胞克隆胚胎发育的影响 被引量:3
15
作者 付博 任亮 +4 位作者 赵金凤 马红 郭镇华 李忠秋 刘娣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期7-9,共3页
为了研究胚胎培养液中添加表皮生长因子(EGF)和胎牛血清(FBS)对猪体细胞克隆胚胎发育的影响,试验将卵母细胞成熟培养42h后构建克隆胚,进行电融合激活,再使用6-DMAP(2mmol/L)进行化学辅助激活,然后移入NCSU-23培养基培养,激活后第2天添加... 为了研究胚胎培养液中添加表皮生长因子(EGF)和胎牛血清(FBS)对猪体细胞克隆胚胎发育的影响,试验将卵母细胞成熟培养42h后构建克隆胚,进行电融合激活,再使用6-DMAP(2mmol/L)进行化学辅助激活,然后移入NCSU-23培养基培养,激活后第2天添加0,10,20,30ng/mLEGF,7d后检查囊胚率、囊胚细胞数;激活后第0,2,4,6天添加10%FBS,7d后检查囊胚率、囊胚细胞数。结果表明:2~4细胞阶段添加EGF,添加20ng/mLEGF组的囊胚率显著高于对照组(P<0.05)及其他处理,而囊胚细胞数与对照组无显著差异(P>0.05);在第4天添加FBS组的囊胚率显著高于对照组(P<0.05)和其他处理组,而囊胚细胞数与对照组无显著差异(P>0.05)。结果说明添加20ng/mL的EGF能促进猪体细胞克隆胚胎的发育率,在第4天添加FBS更有利于胚胎的发育。 展开更多
关键词 表皮生长因子(EGF) 胎牛血清(fbs) 克隆胚胎
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含胎牛血清胶原酶消化法培养兔成骨细胞 被引量:7
16
作者 陈超 李光辉 陈安民 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第9期683-685,共3页
目的 :用含胎牛血清的胶原酶消化胎兔颅盖骨骨组织 ,进行体外成骨细胞培养。方法 :妊娠 2 8d的孕兔 ,无菌条件下剖腹取出胎兔 ,然后取胎兔的颅盖骨 ,剔净、漂洗、剪碎。用含胎牛血清的胶原酶消化 ,培养成骨细胞。台盼蓝染色测定细胞的... 目的 :用含胎牛血清的胶原酶消化胎兔颅盖骨骨组织 ,进行体外成骨细胞培养。方法 :妊娠 2 8d的孕兔 ,无菌条件下剖腹取出胎兔 ,然后取胎兔的颅盖骨 ,剔净、漂洗、剪碎。用含胎牛血清的胶原酶消化 ,培养成骨细胞。台盼蓝染色测定细胞的存活率 ,细胞内碱性磷酸酶 (ALP)染色鉴定和测定成骨细胞的纯度。结果 :用含胎牛血清的胶原酶消化并培养出成骨细胞 ,台盼蓝染色拒染率高达 98% ,ALP染色阳性区域不少于 95 %。结论 :用含胎牛血清胶原酶消化胎兔颅盖骨骨组织 ,培养出的成骨细胞具有典型的成骨细胞特征 ,且成分单一 。 展开更多
关键词 成骨细胞 细胞培养 含胎牛血清胶原酶
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鳗鲡外周血淋巴细胞转化试验培养条件的初步研究 被引量:5
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作者 郭松林 关瑞章 冯建军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期416-420,共5页
探讨鳗鲡外周血淋巴细胞转化试验的最优条件,为鳗鲡的细胞免疫研究提供方法。通过对培养时间、培养温度、小牛血清和刀豆蛋白A(ConA)浓度4个参数的测定,初步确定了鳗鲡外周血淋巴细胞转化试验四甲基偶氮唑(MTT)法的培养条件。结果表明,... 探讨鳗鲡外周血淋巴细胞转化试验的最优条件,为鳗鲡的细胞免疫研究提供方法。通过对培养时间、培养温度、小牛血清和刀豆蛋白A(ConA)浓度4个参数的测定,初步确定了鳗鲡外周血淋巴细胞转化试验四甲基偶氮唑(MTT)法的培养条件。结果表明,在培养时间60 h和68 h,培养温度为18.0℃、24.0℃、30.0℃,RPMI细胞培养液中小牛血清浓度为5%、10%和15%,ConA浓度为0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL和10μg/mL的范围内,淋巴细胞于18.0℃、含10μg/mL ConA和15%小牛血清的营养液中培养68 h后可获得相对最好的淋巴细胞转化效果。 展开更多
关键词 欧洲鳗鲡 淋巴细胞转化试验 MTT法 小牛血清 CONA 温度
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培养方法及胎牛血清浓度对人胎儿成纤维细胞体外生长的影响 被引量:3
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作者 程腾 李佳佳 +2 位作者 贺小英 刘娟 马利兵 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第4期523-526,共4页
采用单细胞培养法和组织块培养法从原代培养人胎儿成纤维细胞,并在不同体积分数胎牛血清(FBS)(0%、4%、8%、10%、12%)的条件下观察人胎儿成纤维细胞培养的状况并采用台盼蓝染色法进行活细胞计数.结果表明,早期由组织块培养法原代培养获... 采用单细胞培养法和组织块培养法从原代培养人胎儿成纤维细胞,并在不同体积分数胎牛血清(FBS)(0%、4%、8%、10%、12%)的条件下观察人胎儿成纤维细胞培养的状况并采用台盼蓝染色法进行活细胞计数.结果表明,早期由组织块培养法原代培养获取的细胞形态要比单细胞培养法原代培养获取的细胞稍好些,且在细胞传代后极少出现无法贴壁的死细胞.FBS对hFFs生长影响比较明显.在实际应用中,在体积分数8%FBS下,采用组织块培养法进行人胎儿成纤维细胞体外培养,效果良好. 展开更多
关键词 人胎儿成纤维细胞 单细胞培养法 组织块培养法 胎牛血清
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HLA新基因B"非汉字符号"610携带者家系B淋巴细胞系的建立 被引量:2
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作者 李桢 邹红岩 +3 位作者 吴国光 程良红 王大明 唐斯 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2004年第5期308-310,共3页
目的 建立HLA新基因B 5 6 10携带者家系的B淋巴细胞系 ,用于该基因的研究和确证。方法 采集外周血分离淋巴细胞 ,用EBV感染淋巴细胞后 ,加入含 2 0 %FBS、2 μg/mlCsA的RPMI16 4 0进行培养。 结果  5位家庭成员的无限增殖化B淋巴细... 目的 建立HLA新基因B 5 6 10携带者家系的B淋巴细胞系 ,用于该基因的研究和确证。方法 采集外周血分离淋巴细胞 ,用EBV感染淋巴细胞后 ,加入含 2 0 %FBS、2 μg/mlCsA的RPMI16 4 0进行培养。 结果  5位家庭成员的无限增殖化B淋巴细胞系新基因稳定遗传。结论 建立的无限增殖化B淋巴细胞系的HLA新基因B 5 6 10遗传稳定 ,为大量保存和繁殖珍贵的生物医学材料奠定了基础。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 EB病毒 胎牛血清 环孢菌素A B淋巴细胞系
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脑络欣通药物血清与胎牛血清诱导大鼠胚胎神经干细胞分化的比较 被引量:5
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作者 唐巍 王键 +4 位作者 胡建鹏 陈业农 韩小祥 程红 俞丽华 《安徽中医学院学报》 CAS 2006年第2期24-27,F0004,共5页
目的:比较脑络欣通药物血清与胎牛血清诱导大鼠胚胎神经干细胞分化的差异。方法:分别采用脑络欣通药物血清和胎牛血清诱导大鼠胚胎神经干细胞分化,应用相差显微镜和免疫荧光染色对其进行比较观察。结果:脑络欣通药物血清和胎牛血清均可... 目的:比较脑络欣通药物血清与胎牛血清诱导大鼠胚胎神经干细胞分化的差异。方法:分别采用脑络欣通药物血清和胎牛血清诱导大鼠胚胎神经干细胞分化,应用相差显微镜和免疫荧光染色对其进行比较观察。结果:脑络欣通药物血清和胎牛血清均可诱导绝大多数神经干细胞分化成神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞。此外,脑络欣通药物血清还能在一定程度上促进培养的神经干细胞的增殖。前者诱导干细胞分化的进程比后者要慢,但其分化的神经细胞在细胞形态学上与发育成熟的神经细胞更为接近。结论:脑络欣通药物血清能够诱导神经干细胞分化,并使其分化更加成熟,且在一定程度上促进培养的神经干细胞的增殖。 展开更多
关键词 神经干细胞 分化 增殖 脑络欣通 药物血清 胎牛血清
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