抑癌基因p15对人胆管癌细胞增殖的影响

目的 通过构建稳定高表达抑癌基因p15的人胆管癌细胞模型 ,探讨 p15对胆管癌细胞增殖的影响。方法 将抑癌基因 p15的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pcDNA -neo中的EcoRⅠ /XbaⅠ位点 ,构建成 p15真核表达质粒pcDNA3 p15 ;通过脂质体法将 pcDNA3p15质粒传染人胆管癌细胞系QBC93 9,经G418筛选 ,获得稳定高表达p15的人胆管癌细胞模型及相应的表达空载体的对照细胞模型 ,并经Wistern分子杂交分析证实。结果 与对照组相比 ,p15高表达的人胆管癌细胞生长速率明显下降 ,第 4天细胞增殖结果被抑制了 3 8.6% ;克隆形成能力降低 ,克隆抑制率达 5 5 % ;S期的细胞明显减少 ,G1期、G2 期的细胞均有增加 ;癌基因c myc蛋白水平低。结论 在人胆管癌细胞中高表达抑癌基因p15抑制了细胞增殖 ;p15同时阻遏细胞由G1期向S期及G2 期向M期转换 ;癌基因c myc蛋白水平降低可能是p15抑制作用的分子机理之一。