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Tumor-associated autoantibodies are useful biomarkers in immunodiagnosis of α-fetoprotein-negative hepatocellular carcinoma 被引量:8
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作者 Ting Wang Mei Liu +11 位作者 Su-Jun Zheng Dan-Dan Bian Jin-Yan Zhang Jia Yao Qing-Fen Zheng A-Meng Shi Wen-Han Li Lu Li Yu Chen Jin-Hai Wang Zhong-Ping Duan Lei Dong 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2017年第19期3496-3504,共9页
AIM To determine the prevalence and diagnostic value of autoantibodies inα-fetoprotein(AFP)-negative hepatocellular carcinoma(HCC).METHODS Fifty-six serum samples from AFP-negative HCC cases,86 from AFP-positive HCC ... AIM To determine the prevalence and diagnostic value of autoantibodies inα-fetoprotein(AFP)-negative hepatocellular carcinoma(HCC).METHODS Fifty-six serum samples from AFP-negative HCC cases,86 from AFP-positive HCC cases,168 from chronic liver disease cases,and 59 from normal human controls were included in this study.Autoantibodies to nucleophosmin(NPM)1,14-3-3zeta and mouse double minute 2 homolog(MDM2)proteins in AFP-negative HCC serum were evaluated by enzymelinked im munosorbent assay.Partially positive sera were further evaluated by western blotting.Immunohistochemistry was used to detect the expression of three tumor-associated antigens(TAAs)in AFP-negative HCC and normal control tissues.RESULTS The frequency of autoantibodies to the three TAAs in AFP-negative HCC sera was 21.4%,19.6%and 19.6%,which was significantly higher than in the chronic liver disease cases and normal human controls(P<0.01)as well as AFP-positive HCC cases.The sensitivity of the three autoantibodies for diagnosis of AFP-negative HCC ranged from 19.6%to 21.4%,and the specificity was approximately 95%.When the three autoantibodies were combined,the sensitivity reached 30.4%and the specificity reached 91.6%.CONCLUSION Autoantibodies to NPM1,14-3-3zeta and MDM2 may be useful biomarkers for immunodiagnosis of AFP-negative HCC. 展开更多
关键词 α-fetoprotein Nucleophosmin 1 14-3-3zeta Mouse double minute 2 homolog immunodiagnosis AUTOANTIBODY Hepatocellular carcinoma
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Immunodiagnosis of human hydatid disease: Where do we stand? 被引量:2
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作者 Bahador Sarkari Zahra Rezaei 《World Journal of Methodology》 2015年第4期185-195,共11页
Cystic echinococcosis(CE) is a zoonotic parasitic infection caused by the larval stage of Echinococcus granulosus. Diagnosis of CE mainly relies on a combination of serological testing along with imaging approaches. A... Cystic echinococcosis(CE) is a zoonotic parasitic infection caused by the larval stage of Echinococcus granulosus. Diagnosis of CE mainly relies on a combination of serological testing along with imaging approaches. A variety of serological methods, mainly based on hydatid cyst fluid, antigen B(Ag B) and antigen 5, have been developed and used for immunodiagnosis of CE, yet their performances are not satisfactory. Although utilizing of recombinant or synthetic antigens, improved the performance of serological tests, it has not applicably overcome the problem of low sensitivity and cross reactivity, seen in the diagnosis of CE. Performances of immunodiagnostic tests based on Ag B subunits are promising. The 8 k Da subunit of Ag B is the most studied antigen in native, synthetic or recombinant form for diagnosis of CE. From the 5 subunits of Ag B, antigen B8/1 and B8/2 provided the highest diagnostic sensitivity and specificity. Moreover, detecting of specific antibodies of Ig G subclasses has improved the efficacy of immunodiagnostic tests. Among the Ig G subclasses, both Ig G2 and Ig G4 are considered as good markers for diagnosis and Ig G4 as a suitable marker for follow up of the patients. In this review an overview of immunodiagnostic methods, related antigens and their performances in the diagnosis of CE are given. The paper highlights pitfall and challenges in the serological diagnosis of CE. Moreover, limitation of currently available immunodiagnostic tests and the most recent development in the designing and application of serological assays for diagnosis of CE in human are addressed. 展开更多
关键词 immunodiagnosis CYSTIC ECHINOCOCCOSIS HYDATID CYST
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Effective Aeromonas specific monoclonal antibody for immunodiagnosis
3
作者 Yuvadee Mahakunkijcharoen Chakrit Hirunpetcharat +2 位作者 Sunisa Malijunbua Watcharamat Muangkaew Suporn Paksanont 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2018年第1期7-13,共7页
Objective: To identify the monoclonal antibody specific to Aeromonas spp., a Gram negative bacteria causing gastroenteritis and wound infection. Methods: The monoclone, namely 88 F2-3 F4, was produced from hybridoma t... Objective: To identify the monoclonal antibody specific to Aeromonas spp., a Gram negative bacteria causing gastroenteritis and wound infection. Methods: The monoclone, namely 88 F2-3 F4, was produced from hybridoma technology. The specificity of antibody secreted from 88 F2-3 F4 was tested against other Gram negative bacteria frequently found in gastrointestinal tract. Then the antibody was used for searching Aeromonas antigens in artificial seeded rectal swab cultures by dot-blot enzyme linked immunosorbent assay. Results: 88 F2-3 F4 produced an antibody that recognized an antigen with a molecular mass of 8.5 k Da in all 123 isolates of the seven Aeromonas species tested, but recognized no epitope of any other Gram-negative bacterium typically found in the gastrointestinal tract. A dot-blot enzyme linked immunosorbent assay based on this antibody showed 86.49% sensitivity and 92.13% specificity. Conclusions: 88 F2-3 F4 monoclonal antibody could react with all Aeromonas isolates, but not other Gram negative bacteria, therefore it should be a useful tool for the detection of Aeromonas antigen in clinical and environmental samples. 展开更多
关键词 AEROMONAS Monoclonal antibody immunodiagnosis Gastrointestinal tract
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基于哺乳动物细胞表达S1蛋白的猪流行性腹泻病毒单克隆抗体
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作者 李虎林 颜仁和 +7 位作者 陈泽典 仇珍珍 李堪贺 马曼欣 毛莹莹 李建军 吕宗吉 李红卫 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第4期694-698,共5页
目的 制备抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体。方法 本研究以哺乳动物细胞293T表达的PEDV S1重组蛋白免疫BALB/c小鼠;利用细胞融合技术,经间接ELISA方法筛选和细胞克隆,得到5株能稳定分泌抗PEDV S1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。筛选效价最... 目的 制备抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体。方法 本研究以哺乳动物细胞293T表达的PEDV S1重组蛋白免疫BALB/c小鼠;利用细胞融合技术,经间接ELISA方法筛选和细胞克隆,得到5株能稳定分泌抗PEDV S1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。筛选效价最高的杂交次瘤细胞株制备单克隆抗体并进行特性鉴定。结果 免疫小鼠的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合后,经多次克隆及亚克隆筛选,共得到5株能与PEDV S1蛋白产生特异性反应的单抗表达细胞株。分别命名为:12D14H4、13F5B9、10D2B10、11A7C9和14E6F5,其分泌的抗体效价分别为:1∶51 200、1∶25 600、1∶12800、1∶12 800、1∶3 200。5株单抗与PEDV S1蛋白反应后,均在130 KDa附近出现清晰条带。所得单克隆抗体为IgGⅠ亚型,轻链为κ链;杂交瘤细胞用无血清培养基培养,上清中抗体效价最高可达到1∶1 024 000,且经连续传代20代效价没有显著降低。Western blot及间接免疫染色检测结果显示,单克隆抗体能识别PEDV S1蛋白,并与Vero细胞、PPRV、PRRSV、PCV2、PP和CSFV等均无交叉反应,具有良好的特异性,可用于PEDV感染检测。结论 PEDV单克隆抗体的成功研制,为PEDV免疫诊断、表位识别及蛋白研究奠定了良好基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S1蛋白 单克隆抗体 免疫染色 免疫诊断
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不同发育阶段广州管圆线虫的抗原分析 被引量:20
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作者 李华 陈晓光 +2 位作者 沈浩贤 彭鸿娟 赵醒村 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期36-39,共4页
目的 分析不同发育阶段广州管圆线虫抗原差异 ,筛选优势诊断抗原分子。 方法 对不同发育阶段的广州管圆线虫的虫体蛋白进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和免疫印迹分析。 结果 不同发育阶段的虫体蛋白质谱大致相... 目的 分析不同发育阶段广州管圆线虫抗原差异 ,筛选优势诊断抗原分子。 方法 对不同发育阶段的广州管圆线虫的虫体蛋白进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和免疫印迹分析。 结果 不同发育阶段的虫体蛋白质谱大致相同 ,SDS PAGE中出现的少数差异带在免疫印迹试验 (Westernblotting)中无明显差异。各期虫体抗原相对分子质量为Mr 40 0 0 0、 5 0 0 0 0、 660 0 0和 80 0 0 0的 ,与感染大鼠和正常大鼠血清均出现反应条带。 2~ 3周幼虫Mr 10 40 0 0与 2周感染血清出现明显反应条带。雌虫Mr 3 3 0 0 0及所有虫体的Mr 3 2 0 0 0抗原与感染后 2周血清出现反应条带 ,与感染 3周~ 5月的大鼠血清均出现明显反应 ,与正常大鼠血清均无明显反应。 结论 Mr 40 0 0 0、 5 0 0 0 0、 660 0 0和 80 0 0 0抗原可能在以虫体粗抗原作探针的免疫诊断中引起非特异性反应。幼虫Mr 10 40 0 0、雌虫Mr 3 3 0 0 0和所有虫体的Mr 3 2 0 0 0可作为广州管圆线虫病早期诊断和流行病学调查的候选抗原分子。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 粗抗原 血清 正常大鼠 感染 性反应 非特异性 虫体 发育阶段 幼虫
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粪检与免疫诊断方法检测日本血吸虫感染效果比较 被引量:31
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作者 何伟 朱荫昌 +7 位作者 梁幼生 戴建荣 徐明 唐建霞 曹国群 华万全 李远林 杨忠 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2007年第2期107-109,共3页
目的比较粪检与免疫诊断方法检测血吸虫感染的效果。方法在云南省大山区峡谷型血吸虫病流行区选择508例村民作为检查对象,收集病史个案,以尼龙绢集卵孵化法和改良Kato-Katz法进行病原学检查,再同时以胶体染料试纸条法(DDIA)、酶联免疫... 目的比较粪检与免疫诊断方法检测血吸虫感染的效果。方法在云南省大山区峡谷型血吸虫病流行区选择508例村民作为检查对象,收集病史个案,以尼龙绢集卵孵化法和改良Kato-Katz法进行病原学检查,再同时以胶体染料试纸条法(DDIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和环卵沉淀试验(COPT)进行抗血吸虫抗体检测,将检测结果进行比较分析。结果Kato-Katz法查出阳性病人120例,其中25例孵化法为阴性;孵化法查出阳性病人163例,其中68例Kato-Katz法为阴性。DDIA、ELISA和COPT与孵化法的阳性符合率分别为95.1%、98.2%和82.8%,与Kato-Katz法的阳性符合率分别为92.5%、96.0%和84.0%。结论粪检方法尤其是Kato-Katz法漏检率较高,以其作为评价免疫诊断方法的标准似不合适。DDIA和ELISA与孵化法和Kato-Katz法的阳性符合率均较高,敏感性明显高于粪检法,而且操作方便,适用于现场筛查化疗目标人群。 展开更多
关键词 血吸虫病 粪检 免疫诊断
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日本血吸虫Sjp50重组蛋白用于免疫诊断的研究 被引量:9
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作者 胡薇 王兆军 +4 位作者 武小文 王聚君 韩泽广 沈大康 冯正 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2003年第1期7-11,共5页
目的 克隆和表达日本血吸虫免疫素 Sjp5 0的编码基因 ,初步研究其免疫反应性。方法 根据 EST测序的结果设计引物 ,从含有免疫素基因片段的克隆中扩增得到该编码基因 ,亚克隆入原核表达载体 p GEX4 T- 1中表达 ,然后用 EL ISA方法初步... 目的 克隆和表达日本血吸虫免疫素 Sjp5 0的编码基因 ,初步研究其免疫反应性。方法 根据 EST测序的结果设计引物 ,从含有免疫素基因片段的克隆中扩增得到该编码基因 ,亚克隆入原核表达载体 p GEX4 T- 1中表达 ,然后用 EL ISA方法初步检测重组蛋白的免疫反应性。结果 成功克隆和表达了日本血吸虫 Sjp5 0基因。该重组蛋白用于血吸虫抗体的 EL ISA检测 ,在动物实验中检测特异性和敏感性分别为 94 .12 %和 76 .6 7% ,非治疗组兔体内的抗体在感染后 9- 11周上升到高水平 ,并在感染后 2 1周仍维持在高水平 ,而治疗组兔血清中抗 Sj Fp5 0抗体水平在治疗后 11周迅速下降至感染前抗体水平。用于血吸虫病人血清中的抗体检测的特异性为 98.30 % ,急性病人和慢性病人检测的敏感性分别为 95 .2 0 %和 6 3.2 0 %。结论 获得了 Sjp5 0的重组蛋白 ,该蛋白能被日本血吸虫病人的血清所识别 ,且在动物实验中其抗体水平在药物治疗后 11周降至感染前的水平 ,具有诊断现症感染病人和疗效考核的潜能。 展开更多
关键词 日本血吸虫 Sjp50 重组蛋白 免疫诊断 免疫素 克隆
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胶体染料试纸条试剂盒在血吸虫病大规模筛查中的应用 被引量:14
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作者 朱荫昌 何伟 +7 位作者 戴建荣 徐明 梁幼生 唐建霞 华万全 曹国群 陈红根 娄培安 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第4期246-249,共4页
目的进一步验证血吸虫病胶体染料试纸条试剂盒在现场应用的效能.方法选择江西鄱阳湖沿岸湖沼地区的一个血吸虫病流行村15~70岁的自然人群404人,采用尼龙绢集卵孵化法、胶体染料试纸条法(DDIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环卵沉淀试验(... 目的进一步验证血吸虫病胶体染料试纸条试剂盒在现场应用的效能.方法选择江西鄱阳湖沿岸湖沼地区的一个血吸虫病流行村15~70岁的自然人群404人,采用尼龙绢集卵孵化法、胶体染料试纸条法(DDIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环卵沉淀试验(COPT)等方法同时进行检测.另选一非血吸虫病流行区中未曾去过血吸虫病流行区的健康体检者418人,也同样应用DDIA、ELISA和COPT进行检测.结果DDIA、ELSIA和COPT的敏感性分别为96.59%、92.05%和85.23%,对流行区非血吸虫病人的特异性分别为96.32%、90.37%和95.59%.与非血吸虫病流行区健康者的阴性符合率分别为98.09%、97.37%和98.80%.结论DDIA试剂盒快速、简便,具有较高的敏感性和特异性,适用于血吸虫病流行区现场对目标人群的大规模筛查. 展开更多
关键词 胶体染料试纸条试剂盒 免疫诊断 日本血吸虫病 现场应用
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日本血吸虫未成熟虫卵67kDa分子抗原诊断血吸虫病的研究 被引量:14
9
作者 李华 汪世平 +1 位作者 曾宪芳 刘国章 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1998年第5期271-274,共4页
本文通过SDS-PAGE和电渗方法,从日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)中分离纯化出67kDa蛋白分子,以该分子包被微板进行ELISA,检测了急、慢性日本血吸虫病人血清,其阳性检出率达100%和94.6%,与60例正常人血清、30例肝吸虫... 本文通过SDS-PAGE和电渗方法,从日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)中分离纯化出67kDa蛋白分子,以该分子包被微板进行ELISA,检测了急、慢性日本血吸虫病人血清,其阳性检出率达100%和94.6%,与60例正常人血清、30例肝吸虫和31例肺吸虫病人血清均未出现明显交叉反应,慢性血吸虫病人治疗后3个月、半年和1年的阴转率分别为58.1%,75.4%和84.6%。提示SIEA67kDa分子抗原具有较好的疗效考核价值和现场应用前景。 展开更多
关键词 日本血吸虫 未成熟虫卵 抗原 免疫诊断 血吸虫病
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应用斑点免疫金渗滤法检测旋毛虫病患者血清IgG 被引量:19
10
作者 刘英杰 刘云 +4 位作者 曲耀华 郑勇 刘艳红 张永利 陈娟 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期342-344,共3页
目的 研究应用斑点免疫金渗滤法 (DIGFA)快速检测旋毛虫病患者血清抗旋毛虫IgG抗体。 方法 采用旋毛虫肌肉期幼虫膜抗原 ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体 ,以颜色深浅为判断阳性标准。 结果 纯化的旋毛虫肌肉期幼虫膜抗原... 目的 研究应用斑点免疫金渗滤法 (DIGFA)快速检测旋毛虫病患者血清抗旋毛虫IgG抗体。 方法 采用旋毛虫肌肉期幼虫膜抗原 ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体 ,以颜色深浅为判断阳性标准。 结果 纯化的旋毛虫肌肉期幼虫膜抗原与患者血清中特异性抗旋毛虫IgG抗体通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应 ,1 0min内即可直接观察结果。在 76份患者血清的检测中 ,阳性率为 94 .74 % ,与ELISA法的检出阳性率 86 .84 %相比差异无显著性 ( χ2 =2 .83,P >0 .0 5)。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。 展开更多
关键词 斑点免疫金渗滤法 检测 旋毛虫病 血清 IGG 抗体
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日本血吸虫信号蛋白14-3-3在虫卵的定位及其免疫诊断价值初探 被引量:19
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作者 王志成 徐元宏 +4 位作者 罗飞 李敏 郑美娟 罗庆礼 沈继龙 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第2期128-131,共4页
目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织... 目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织石蜡切片免疫组化染色,观察内源性Sj14-3-3在虫卵内的分布和表达丰度。利用纯化的rSj14-3-3和可溶性虫卵抗原(SEA),采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从日本血吸虫成熟虫卵中检出760 bp左右的基因片断;免疫组化显示Sj14-3-3主要分布在虫卵内毛蚴的体壁和两边的侧腺。检测急性、慢性患者和正常人血清抗rSj14-3-3抗原的抗体阳性率分别为91.0%、78.9%、0.0%;上述标本中抗SEA抗体的阳性率分别为97.4%、88.9%和2.5%。结论用ELISA检测抗SEA抗体和rSj14-3-3抗体诊断血吸虫病具有高度的特异性和敏感性,而Sj14-3-3在成熟虫卵阶段高表达,可能是SEA的主要组分,具有实用价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 虫卵 14-3-3 定位 免疫诊断
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抗日本血吸虫SEA鸡卵黄抗体的制备与鉴定 被引量:12
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作者 王成祖 莫红梅 +4 位作者 程喻力 王磊 蒋自卫 刘文琪 李雍龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期193-197,共5页
目的制备特异性抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)并检测其特异性、敏感性。方法用日本血吸虫SEA经翅膀下静脉和皮下免疫25周龄海兰母鸡4次(首次剂量为60μg/只,加强剂量为30μg/只),每次间隔10d。取免疫前和首... 目的制备特异性抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)并检测其特异性、敏感性。方法用日本血吸虫SEA经翅膀下静脉和皮下免疫25周龄海兰母鸡4次(首次剂量为60μg/只,加强剂量为30μg/只),每次间隔10d。取免疫前和首次免疫后35d的鸡蛋卵黄,分别用水稀释法提取IgY,BCA法测定蛋白含量,并进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Westernblotting)分析,ELISA检测纯化后IgY特异性和敏感性。分别提取免疫后不同时间的卵黄抗体,观察抗体效价的变化。结果海兰母鸡经SEA首次免疫后35d,每枚蛋经提纯后可得到约61mg抗体,经SDS-PAGE和Westernblotting分析,纯化的IgY有1条主要蛋白带,相对分子质量(Mr)为130000,并可被SEA识别。母鸡初次免疫后第10天,经SDS-PAGE和ELISA分析,鸡蛋卵黄内即有抗体产生,初次免疫后31d效价可达1∶1600。双抗体夹心ELISA结果显示纯化后的IgY有较高的敏感性,可检测到的SEA达2.4ng/ml。结论制备的抗SEA鸡卵黄抗体的特异性和敏感性均较高。 展开更多
关键词 卵黄免疫球蛋白 日本血吸虫 免疫诊断 循环抗原
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日本血吸虫31/32kDa分子抗原快速诊断试剂盒的研制与现场应用 被引量:16
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作者 汪世平 曾宪芳 +4 位作者 甘定祥 李争鸣 冯毅坚 易新元 言敢威 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1999年第6期333-335,共3页
目的基于纯化的日本血吸虫31/32kDa分子抗原,建立一种敏感、特异、简便、快速诊断血吸虫病的试剂盒。方法采用Chappell方法分离纯化Sj31/32kDa抗原并建立快速ELISA,检测急、慢性血吸虫病人,并以肺吸虫病人、肝吸虫病人及正常人血... 目的基于纯化的日本血吸虫31/32kDa分子抗原,建立一种敏感、特异、简便、快速诊断血吸虫病的试剂盒。方法采用Chappell方法分离纯化Sj31/32kDa抗原并建立快速ELISA,检测急、慢性血吸虫病人,并以肺吸虫病人、肝吸虫病人及正常人血清作为平行对照。结果血吸虫病人457例,阳性检出率为94.3%,67例肺吸虫病人及76例肝吸虫病人血清均未出现明显交叉反应,正常人群假阳性率为1%。结论提示采用纯化的优势诊断抗原分子建立的快速诊断试剂盒有较好的现场应用潜能,且具有简便、快速、无需特殊设备等优点,值得推广应用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 分子抗原 免疫诊断 ELISA
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重组CE18蛋白在绵羊绦虫蚴病诊断上的应用 被引量:6
14
作者 刘红霞 才学鹏 +5 位作者 张少华 郭爱疆 闫鸿斌 苟惠天 付宝权 贾万忠 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期2997-3002,共6页
【目的】探讨细粒棘球蚴CE18重组蛋白作为绦虫蚴病免疫诊断抗原的应用价值,为筛选绦虫蚴病血清学诊断抗原提供依据。【方法】应用棘球蚴CE18重组抗原建立间接ELISA方法,分别对18份脑多头蚴、15份细颈囊尾蚴、19份棘球蚴感染绵羊血清及19... 【目的】探讨细粒棘球蚴CE18重组蛋白作为绦虫蚴病免疫诊断抗原的应用价值,为筛选绦虫蚴病血清学诊断抗原提供依据。【方法】应用棘球蚴CE18重组抗原建立间接ELISA方法,分别对18份脑多头蚴、15份细颈囊尾蚴、19份棘球蚴感染绵羊血清及194份棘球蚴病疫区绵羊血清和13份健康羊血清进行检测,通过显著性差异分析评价CE18蛋白作为诊断抗原的意义。同时,应用生物学软件对CE18抗原蛋白同源序列进行分析,进一步从分子水平上提示CE18蛋白作为绦虫蚴病诊断抗原的依据。【结果】序列分析表明棘球蚴CE18蛋白基因为多种绦虫如泡状带绦虫、多头带绦虫、猪带绦虫等的共有序列,其蛋白质氨基酸序列相似性很高,不同种属之间高达99%,从分子水平上表明CE18蛋白为带绦虫蚴共同抗原成分之一。重组抗原CE18-ELISA方法检测绵羊血清抗体水平显示:脑多头蚴病、细颈囊尾蚴病、棘球蚴病和棘球蚴病疫区血清的阳性率分别为38.89%、73.33%、100%和76.14%,而对照组血清为阴性反应。【结论】CE18重组蛋白可作为绵羊棘球蚴病和细颈囊尾蚴病血清学诊断抗原,用于畜群活体检疫初筛试验。 展开更多
关键词 CE18重组蛋白 绵羊 绦虫蚴病 抗体 免疫诊断
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广州管圆线虫病疗效考核抗原的筛选与鉴定 被引量:5
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作者 赵醒村 顾金保 +3 位作者 李华 刘敏 沈浩贤 陈晓光 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期284-286,289,共4页
目的从广州管圆线虫抗原中筛选广州管圆线虫病疗效考核抗原。方法用治疗前后广州管圆线虫感染的大鼠血清与广州管圆线虫可溶性抗原进行免疫印迹试验,用ELISA检测治疗前及治疗后不同时期感染大鼠血清中的AC-IgG和AC32-IgG抗体。结果Mr 38... 目的从广州管圆线虫抗原中筛选广州管圆线虫病疗效考核抗原。方法用治疗前后广州管圆线虫感染的大鼠血清与广州管圆线虫可溶性抗原进行免疫印迹试验,用ELISA检测治疗前及治疗后不同时期感染大鼠血清中的AC-IgG和AC32-IgG抗体。结果Mr 38 000 ̄78 000区间的抗原分子与治疗前后的感染大鼠血清的反应带无明显差别,Mr 190 000和Mr 17 000抗原与治疗前大鼠血清出现较强的反应,与治疗后血清未出现反应带,Mr 32 000和Mr 24 000抗原与治疗前大鼠血清出现较强的反应,与治疗后大鼠血清的反应带明显变弱;AC32-IgG抗体出现的高峰期较早,而且在治疗后消失较快,治疗后17周的阴转率为60%(6/10)。结论广州管圆线虫Mr 190 000,17 000,32 000,24 000,16 000抗原具有潜在的疗效考核价值,ELISA检测AC32-IgG抗体可以用于感染大鼠的疗效考核。 展开更多
关键词 管圆线虫病/治疗 抗原 免疫诊断
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三种重组蛋白混合抗原的间接ELISA法检测人血清弓形虫IgM和IgG抗体 被引量:6
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作者 丁邦胜 李霞 +2 位作者 罗庆礼 余莉 沈继龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期358-363,共6页
目的比较弓形虫rSAG1、rHXGPRT和rAK三种重组蛋白作为混合抗原在弓形虫病血清免疫诊断中检测结果与进口试剂盒检测结果的差异,评价三种重组蛋白混合抗原检测在弓形虫病免疫诊断中的应用价值。方法收集经美国产Zeus Toxo-ELISA试剂盒筛... 目的比较弓形虫rSAG1、rHXGPRT和rAK三种重组蛋白作为混合抗原在弓形虫病血清免疫诊断中检测结果与进口试剂盒检测结果的差异,评价三种重组蛋白混合抗原检测在弓形虫病免疫诊断中的应用价值。方法收集经美国产Zeus Toxo-ELISA试剂盒筛选的阳性血清136例,阴性血清30例。复苏、诱导、表达含有弓形虫pET-28a/SAG1,pET-28a/HXGPRT和pET-28a/AK表达载体的3个菌株,纯化3种重组蛋白。以3种混合蛋白作为诊断抗原,采用间接ELISA法,以正交叉方法优化检测条件,检测66例弓形虫IgM阳性、70例IgG例阳性血清和30阴性血清,比较混合抗原检测和Zeus Toxo-ELISA试剂盒检测结果的差异;以Zeus Toxo-ELISA弓形虫试剂盒检测结果为标准,评价重组蛋白混合抗原检测的敏感性、特异性、总符合率以及约登指数。结果 IgM:混合抗原与Zeus Toxo-ELISA试剂检测结果经χ2检验,χ2值为3.12,P>0.05,差异无显著性。混合重组抗原的敏感性为89.4%,特异性为96.7%,总符合率为91.7%,约登指数为0.861。IgG:混合抗原与Zeus Toxo-ELISA试剂检测结果经χ2检验,χ2值为0.25,差异无显著意义(P>0.05)。采用混合重组抗原的敏感性为97.1%,特异性为93.3%,总符合率为96.0%,约登指数为0.904。结论本研究3种重组抗原(rSAG1+rHXGPRT+rAK)混合的间接ELISA法检测弓形虫IgM和IgG,与进口ELISA试剂检测的总符合率高,具有较高的敏感性、特异性;更经济。 展开更多
关键词 弓形虫 重组抗原 免疫诊断 间接ELISA
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金标渗滤法快速检测曼氏裂头蚴病患者血清IgG 被引量:13
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作者 王越 汤益 干小仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期319-321,共3页
目的探索简易、快速的人曼氏裂头蚴病血清学免疫诊断方法。方法将曼氏裂头蚴可溶性抗原点样于硝酸纤维素膜上,以胶体金-SPA为检测标记物,采用垂直流渗滤装置检测病人血清中曼氏裂头蚴特异性IgG抗体。结果曼氏裂头蚴病病人血清阳性检出率... 目的探索简易、快速的人曼氏裂头蚴病血清学免疫诊断方法。方法将曼氏裂头蚴可溶性抗原点样于硝酸纤维素膜上,以胶体金-SPA为检测标记物,采用垂直流渗滤装置检测病人血清中曼氏裂头蚴特异性IgG抗体。结果曼氏裂头蚴病病人血清阳性检出率为92.0%(23/25),健康人群血清假阳性率为2.0%(2/100);与囊虫病、肺吸虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、旋毛虫病病人血清的交叉反应率分别为40.0%(16/40)、52.0%(13/25)、13.3%(4/30)、8.0%(2/25)、6.7%(2/30),未发现与广州管圆线虫病、结核病病人血清有交叉反应;与ELISA平行检测74人份血清,两种方法检测结果的一致性有极显著性意义(К=0.871,P<0.001)。结论金标渗滤法检测曼氏裂头蚴病病人血清中特异性IgG,不仅简易、快速而且检出率高,但与肺吸虫病、囊虫病病人血清存在较高的交叉反应,需根据病人饮食史等流行病学资料进行鉴别诊断。 展开更多
关键词 曼氏裂头蚴病 抗体 金标免疫渗滤法 免疫诊断
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日本血吸虫病循环抗原检测的合作研究(英文) 被引量:16
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作者 易新元 何永康 李岳生 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期277-283,共7页
1993年5月,在湖南省寄生虫病防治研究所(湖南岳阳)举行了一次有关日本血吸虫循环抗原检测的联合测试研讨会,来自全国流行省(市)的8个单位派员及携带自己在过去几年中研制的检测系列(包括试剂和技术方法)参加了此项研究,... 1993年5月,在湖南省寄生虫病防治研究所(湖南岳阳)举行了一次有关日本血吸虫循环抗原检测的联合测试研讨会,来自全国流行省(市)的8个单位派员及携带自己在过去几年中研制的检测系列(包括试剂和技术方法)参加了此项研究,在同一时间和地点,对同一批570份血清样本(包括正常人、现症病人、治后不同时期及其他常见寄生虫病人血清)进行了双盲法检测。结果表明:假阳性率除检测系统B为2%以外,其余7个系统的假阳性率在14%—46%之间;敏感性在急性病例为95%—100%,慢性病例的检出率在检测系统A及F分别为73.3%及72.7%,其余在70%以下;各系统测试治后1年内血清的转阴率未超过1/3,2年内转阴率除系统E为60%以外,其余未超过50%(系统H因敏感性太低除外)。以上说明,参加合作研究的8个测试系统尚需从提高特异性和/或敏感性两个方面进行改进。至于疗效考核不满意的原因,除与试验的特异性不高和治疗效果差有关外,需作进一步分析。 展开更多
关键词 循环抗原 免疫诊断 日本血吸虫
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葡萄球菌蛋白A活性机制与现代应用 被引量:11
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作者 逄少堃 梁浩 +2 位作者 宋淑亮 王伟莉 吉爱国 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期748-751,共4页
葡萄球菌蛋白A(staphylococcus protein A,SPA)是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)细胞壁上的一种黏连蛋白。经过几十年的研究,由于其对免疫球蛋白IgG的亲和特性,SPA已作为一种工具在抗体的检测、纯化以及疾病诊断中得到了广泛应... 葡萄球菌蛋白A(staphylococcus protein A,SPA)是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)细胞壁上的一种黏连蛋白。经过几十年的研究,由于其对免疫球蛋白IgG的亲和特性,SPA已作为一种工具在抗体的检测、纯化以及疾病诊断中得到了广泛应用。SPA衍生物的构建适应了现代生产的需要,改造后的SPA可以与多种报告分子相偶联,使得免疫诊断更加快速准确。本文综述了SPA基于其免疫学特性,在抗体纯化和现代免疫分析应用中的发展状况及前景。 展开更多
关键词 葡萄球菌蛋白A 免疸球蛋白 免疫诊断 蛋白质工程
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广州管圆线虫M_r32000抗原的免疫诊断效果评价 被引量:15
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作者 李华 陈晓光 +3 位作者 沈浩贤 陈代雄 裘玉蓉 胡小佳 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期380-383,共4页
目的评价广州管圆线虫Mr32000抗原(AC32)的诊断价值。方法利用切胶纯化法从广州管圆线虫成虫抗原中获取AC32,用Westernblotting和ELISA方法检测61例广州管圆线虫感染大鼠血清、5例正常鼠血清、1例广州管圆线虫病人血清、50例其他寄生虫... 目的评价广州管圆线虫Mr32000抗原(AC32)的诊断价值。方法利用切胶纯化法从广州管圆线虫成虫抗原中获取AC32,用Westernblotting和ELISA方法检测61例广州管圆线虫感染大鼠血清、5例正常鼠血清、1例广州管圆线虫病人血清、50例其他寄生虫体阳性患者血清和50例献血员血清。结果AC32和成虫粗抗原包被的ELISA检测61份感染大鼠血清和1例临床诊断为广州管圆线虫病人血清均为阳性;AC32-ELISA检测的50例献血员、20例急性血吸虫病人、11例弓形虫病人和所检测的其他寄生虫抗体阳性患者血清均为阴性。结论AC32在广州管圆线虫病的血清学诊断中具有较高的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 抗原/纯化 免疫诊断
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