台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒作用研究

为研究叶下珠属植物台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒的作用 ,应用 2 115细胞株及雏鸭乙型肝炎模型 ,对台湾细叶油柑水提取物和醇提取物进行了体内外抗乙肝活性实验。结果 :台湾细叶油柑水提取物和醇提取物对HBsAg分泌均有一定抑制作用 ,但其醇提物对HBeAg的分泌无抑制作用。在体内抗鸭乙肝病毒实验中 ,台湾细叶油柑水提物 10g·kg- 1·d- 1和 5g·kg- 1·d- 1剂量组于给药 5d、给药 10d和停药 3d时有显著体内抑制DHBV -DNA作用 ,而其醇提物则无抑制DHBV -DNA作用。

三种叶下珠属植物在体外细胞培养中抗HBV作用的初步研究

对３种叶下珠属植物的水提物在２２１５细胞培养中抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用进行了初步观察。结果显示：３种药物在６．２５ｇ／Ｌ加药后第５天，苦味叶下珠对２２１５细胞ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ分泌的抑制率分别为５７．７９％和５５．００％，黄珠子草为６４．６２％和６１．５１％，新发现的珠子草延益亚种为４４．３２％和２．９８％。提示苦味叶下珠和黄珠子草在体外细胞培养第５天中对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的分泌均有较好的抑制作用。

木犀草素抗肿瘤细胞增殖及增敏抗肿瘤药物作用研究

目的:研究黄酮类化合物木犀草素(Luteolin)对体外抗肿瘤细胞增殖,以及其与抗肿瘤药联用的增敏作用。方法:选用5μmol/L或10μmol/L木犀草素与不同浓度抗肿瘤药联合作用肿瘤细胞24 h后,用MTS法检测其体外抗增殖作用。结果:5μmol/L木犀草素对人非小细胞肺癌细胞(A549)、人子宫颈癌细胞(Hela)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃腺癌细胞(AGS)、人胃癌细胞(MGC-803)的抗增殖作用均<20%,对人结肠癌细胞(Caco2)和人肝癌细胞(HepG2)的抗增殖作用约20%。Bexarotene单一用药时对Hela细胞抑制率达50%(IC50)的浓度约为2μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约0.2μmol/L,5μmol/L木犀草素与0.1μmol/L Bexarotene联用对Hela细胞的抗增殖作用达44%,Bexarotene与木犀草素联用在MGC-803、HepG2、A549细胞中增敏较小,在Caco2和MCF-7细胞中无增敏作用;顺铂单一用药时对Hela细胞的IC50>30μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约3μmol/L,联用后在MGC-803、HepG2和A549中增敏较小;博来霉素单一用药时对Hela细胞的IC50>100μmol/L,对A549细胞的IC50约为100μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后Hela细胞的IC50约为1μmol/L,与10μmol/L木犀草素联用后A549细胞的IC50约为10μmol/L。木犀草素与格列卫联用在MGC-803、HepG2、A549和AGS中增敏较小。结论:木犀草素在低于10μmol/L浓度时,对肿瘤细胞体外抗增殖作用较小。低浓度(5μmol/L^10μmol/L)的木犀草素在不同的肿瘤细胞中对抗肿瘤药的增敏作用强度不同,在Hela细胞中增敏作用最显著。

三氧化二砷对肝癌细胞系HLE的影响

目的 观察不同浓度的三氧化二砷 (AT)在不同时间对肝癌细胞的影响 ,并探讨其作用机制。方法 应用不同浓度的AT作用后观察肝癌细胞HLE的存活、形态学改变及细胞凋亡的情况。结果 不同浓度的AT作用于肝癌细胞有明显的时间和剂量依赖性 ,发生作用后细胞生长有明显的凋亡特征性改变 :细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成 ;琼脂糖凝胶电泳显示肝癌细胞存在G2 /M期阻滞 ,在G1峰前出现明显的凋亡峰 ;且出现明显的凋亡特征性梯状条带。结论 AT可明显抑制肝癌细胞的生长 ,其机制主要是诱导肝癌细胞凋亡。

γ-干扰素对肝癌细胞株Hep-G2 Fas,Bcl-2表达的影响

目的 观察γ 干扰素 (γ IFN)对肝癌细胞株Hep G2细胞 (Hep G2 )表达Fas ,Bcl 2的影响。方法 应用γ IFN预处理Hep G2 ,用阿霉素诱导凋亡 ,MTT法分析细胞死亡率 ,电镜观察凋亡 ,免疫组织化学法研究γ IFN作用于Hepp G2细胞过程中Fas ,Bcl 2的表达情况。结果 γ IFN预处理的Hep G2表达Fas增强 ,表达Bcl 2减弱 (P <0 .0 5 ) ;γ IFN预处理后Hep G2细胞对阿霉素的敏感性提高 (P <0 .0 5 )。结论 γ IFN对肝癌细胞株Hep G2Fas ,Bcl 2表达有影响 ,并可提高肝癌细胞对阿霉素的敏感性。

重组胶质细胞源性神经营养因子腺病毒保护培养的原代脊髓运动神经元

目的 :观察胶质细胞源性神经营养因子 (gliacellline derivedneurotrophicfactor ,GDNF)重组腺病毒 (Ad CMVgdnf)对培养的原代脊髓运动神经元的保护作用。 方法 :原代培养的脊髓运动神经元转染不同滴度Ad CMVgdnf不同时间后计数 ,并计算凋亡的运动神经元的百分率。 结果 :1 0 4 ～ 1 0 7pfu·ml 1 (pfu ,plaqueformunit)AdCMVgdnf的保护作用中 ,以 1 0 7pfu·ml 1 作用最显著 ,腺病毒的滴度过大或过小 ,保护作用都减弱 ;观察 1～ 9d不同转染时间的效果时 ,在第 3～ 9天均可观察到保护作用 ,以第 9天最明显 ,存活的运动神经元数比对照组增多2 80 % ,同时凋亡神经元的百分比较对照组减少 1 2 .9%。结论 :在一定的时间 (9天 )和合适的腺病毒滴度 (1 0 7pfu·ml 1 )条件下 ,腺病毒介导的GDNF对体外培养的脊髓运动神经元起到了保护作用。

新型4,8-二取代-8,9-二氢吡嗪[2,3-g]喹唑啉-7(6H)-酮化合物合成及抗肿瘤细胞增殖构效关系研究

目的:评价新型4,8-二取代-8,9-二氢吡嗪[2,3-g]喹唑啉-7(6H)-酮系列化合物体外抗肿瘤活性,获得高效抗肿瘤小分子化合物用于后续药物研发。方法:固相合成17个设计作用于表皮细胞生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR),结构为4,8-二取代-8,9-二氢吡嗪[2,3-g]喹唑啉-7(6H)-酮的新型系列化合物。采用MTT法对人肺癌细胞株A549、人慢性髓细胞性白血病细胞株K562及人胃癌细胞株SGC7901加药96 h后进行抗肿瘤活性筛选。结果:对于人肺癌细胞株A549,化合物7-13和7-14抑制效果最佳,其IC50值分别为8.10和8.12μmol/L。共有8个化合物对人慢性髓细胞性白血病细胞株K562有抑制作用,其中化合物7-2、7-13和7-17抑制效果最佳,其IC50值分别为2.22、0.57和7.20μmol/L。而对于人胃癌细胞株SGC7901,化合物7-3和7-13具有抑制效果,其IC50值分别为4.20和9.71μmol/L。结论:17个化合物对3种肿瘤细胞株呈现不同抑制效果,为结构修饰以提高化合物抗肿瘤活性提供了很好的依据。其中化合物7-13对所测瘤株均具增殖抑制活性,可作为潜在药物用于后续抗肿瘤药物研发。