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48份水稻骨干材料香味及Badh2变异类型的鉴定
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作者 张倩倩 殷春渊 +8 位作者 刘贺梅 胡秀明 孟利红 王和乐 张金霞 田芳慧 袁泽科 孙建权 王书玉 《种子》 北大核心 2024年第1期107-113,共7页
为促进香稻育种,明确水稻重要种质资源中香味基因的存在情况,本研究将传统香味鉴定方法(KOH浸泡法)与分子标记技术相结合,对48份水稻骨干材料的香味及香味基因Badh2变异类型进行鉴定。结果表明,在48份供试材料中,利用KOH浸泡法检测到具... 为促进香稻育种,明确水稻重要种质资源中香味基因的存在情况,本研究将传统香味鉴定方法(KOH浸泡法)与分子标记技术相结合,对48份水稻骨干材料的香味及香味基因Badh2变异类型进行鉴定。结果表明,在48份供试材料中,利用KOH浸泡法检测到具有香味的材料有44份;利用香味基因Badh2的7种等位基因变异类型功能标记检测到含有香味的材料有43份,其中,有41份为纯合香型,2份为杂合型,等位基因Badh2-E2的变异类型有37份,等位基因Badh2-E7的变异类型有6份,未检测到等位基因Badh2-E4-5、Badh2-E12、Badh2-E13、Badh2-UTR和Badh2-Pro的变异类型。通过比较KOH浸泡法与分子标记技术,发现仅有1份材料检测结果不同,明水香稻(X23)用KOH浸泡法检测出具有香味,但本研究所用的Badh2的7种等位基因变异类型功能标记却未检测出含有香味,说明该材料可能属于Badh2其他已报道的或新的等位基因变异类型,也可能是含有新的香味基因。 展开更多
关键词 水稻 香味 badh2 变异类型
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南方稻区主栽香稻品种香味基因Badh2基因型分析 被引量:1
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作者 梁雪雨 郭敏 +5 位作者 欧旭华 陈莹 周丹华 黄翠红 王慧 杨瑰丽 《广东农业科学》 CAS 2023年第12期104-111,共8页
【目的】香味是水稻重要的品质性状之一,直接影响消费者对稻米蒸煮食味的感官评价。香稻资源的筛选和香味基因的鉴定与利用对香稻遗传育种以及香稻产业发展具有一定的实践意义。Badh2是目前已被克隆的控制水稻香味的主效基因,明确该基... 【目的】香味是水稻重要的品质性状之一,直接影响消费者对稻米蒸煮食味的感官评价。香稻资源的筛选和香味基因的鉴定与利用对香稻遗传育种以及香稻产业发展具有一定的实践意义。Badh2是目前已被克隆的控制水稻香味的主效基因,明确该基因不同突变类型在南方地区香稻主栽品种中的分布与利用程度,可更好地服务于南方稻区的香稻育种研究。【方法】利用香味基因Badh2的KASP功能性分子标记,对30份南方香稻主栽品种Badh2进行基因分型分析,并采用咀嚼法、KOH浸泡法、HS-SPME/GC-MS联用技术对以上香稻品种进行香味表型鉴定,同时对主栽香稻品种的香源亲本进行溯源分析。【结果】KASP分子标记可准确地对香味基因Badh2进行基因分型,南方稻区种植推广的30份香稻品种Badh2等位变异基因分型结果均为Badh2-E7型突变,并且利用多种香味检测方法鉴定以上香稻均具有香味。对香稻品种的香源亲本溯源分析发现,南方稻区香稻品种香源亲本来源比较单一,主要是包括象牙香占、Basmati 370等,其中以象牙香占为香源亲本占比约30%,以Basmati 370为香源亲本占比约13%。【结论】通过KASP基因分型技术可实现对香稻进行大批量快速鉴定,本研究中所涉及的南方主栽香稻品种的Badh2等位基因型均为Badh2-E7型,香味基因基因型背景较为单一,可能与香源亲本来源单一有关。未来在南方稻区的香稻育种中,可以适当引入新的香味基因,丰富香味基因的遗传背景,培育更多香味类型的香稻品种。 展开更多
关键词 香稻 badh2 KASP分子标记 基因分型 香源亲本 南方稻区
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利用CRISPR-Cas9技术编辑Badh2基因创制优质香型籼稻三系不育系 被引量:2
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作者 韦新宇 曾跃辉 +5 位作者 杨旺兴 肖长春 候新坡 黄建鸿 邹文广 许旭明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2144-2159,共16页
稻米香味是水稻的重要食味品质之一,其主要受第8染色体上编码甜菜碱脱氢酶基因Badh2控制,该基因突变可导致香味物质2-乙酰-1-吡咯啉(2-AP)的含量增加从而促进香味的产生。本研究以三明市农业科学研究院自主选育的优质籼型杂交稻保持系明... 稻米香味是水稻的重要食味品质之一,其主要受第8染色体上编码甜菜碱脱氢酶基因Badh2控制,该基因突变可导致香味物质2-乙酰-1-吡咯啉(2-AP)的含量增加从而促进香味的产生。本研究以三明市农业科学研究院自主选育的优质籼型杂交稻保持系明太B为受体,利用CRISPR-Cas9技术对其Badh2基因进行编辑和敲除。获得2个T0代转基因纯合突变体植株并对其衍生的48个T1代单株进行鉴定和分析,获得1个不含转基因载体骨架且在第2外显子插入单个碱基T的纯合突变体株系明太B-badh2。利用半定量PCR和qRT-PCR技术以及气相色谱质谱联用仪(GC-MS)检测Badh2基因相对表达量和2-AP含量;同时采用农业行业标准(NY/T1433-2014)推荐的48对水稻SSR引物进行指纹图谱分析。结果表明,该株系Badh2基因RNA表达水平显著下调;籽粒中香味物质2-AP的含量显著增加;指纹图谱分析发现,仅1对引物Rm571在野生型和突变体之间鉴定到等位变异,两组材料遗传差异较小。此外,本研究还对野生型和突变体T2代植株表型性状、稻米蒸煮食味品质和外观品质指标进行了考察和测定分析。结果表明,所有指标在两组材料间均无显著差异。进一步采用测交和回交转育方法并结合Badh2位点测序分析,成功选育获得了其对应的纯合香型三系不育系明太A-badh2。通过与恢复系明恢703、明恢3009测配,其组合产量与国家审定品种明太优703、明太优3009相近且表现出较强的超标优势。此外,通过与香型恢复系明恢1831测配后发现其组合籽粒中香味物质2-AP含量极显著高于对照组合明太A/明恢1831。因此,利用CRISPR-Cas9基因编辑技术,可对水稻香味基因Badh2进行精准定向编辑和敲除,实现对水稻香味性状的改良,为创制香型籼稻不育系提供理论指导,从而加快香型杂交稻育种进程。 展开更多
关键词 水稻 CRISPR-Cas9 基因编辑 香味 badh2 2-乙酰-1-吡咯啉(2-AP)
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Novel Deletion in Exon 7 of Betaine Aldehyde Dehydrogenase 2(BADH2)
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作者 VAN Quoc Giang HUYNH Ky +5 位作者 NGUYEN Chau Thanh Tung NGUYEN Loc Hien NGUYEN van Manh NGUYEN Nhut Thanh VO Cong Thanh SWEE Keong Yeap 《Rice science》 SCIE CSCD 2023年第2期104-112,I0020-I0030,共20页
The fragrance of rice is one of the premium characteristics that breeders want to include in rice varieties due to the higher market value. Nucleotide deletions in exons 2(7 bp) and 7(8 bp) of Betaine Aldehyde Dehydro... The fragrance of rice is one of the premium characteristics that breeders want to include in rice varieties due to the higher market value. Nucleotide deletions in exons 2(7 bp) and 7(8 bp) of Betaine Aldehyde Dehydrogenase 2(BADH2) are associated with fragrance in rice. In this study, a new 13 bp deletion in exon 7 of the BADH2 gene was discovered in the Nang Thom Cho Dao(NTCD) variety, and the mutation has been closely related to the genetic background of indica subspecies through the Bayesian phylogenetic approach and haplotype network analysis of the 3 000 Rice Genomes Project. In addition, a set of functional markers(EX07-13F, EX07-13RN, and EX07-13RM) identified the 13 bp deletion only within NTCD(no amplified band) compared with both non-aromatic and other aromatic rice varieties(110 bp band). The deletion of 13 bases instead of 8 bases in exon 7 of BADH2 caused a premature stop codon, which down-regulated the expression of the BADH2 transcript while associated with up-regulation of OsP5CS and the high amount of 2-acetyl-1-pyrroline. It is potential to use the deletion in exon 7 of the BADH2 gene as a novel marker for adulteration and breeding of fragrant rice varieties, particularly for NTCD. 展开更多
关键词 novel deletion badh2 fragrant rice functional marker
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水稻香味基因Badh2的功能和效应分析
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作者 刘之熙 闵军 +3 位作者 刘三雄 刘利成 胡敏 李咏谊 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2023年第4期1-8,共8页
香稻是一种具有芳香气味的特种稻资源,具有较高的营养价值和经济价值。通过克隆香味基因Badh2启动子区插入序列badh2-p,构建启动子区插入突变表达载体pCAMBIA 1300-badh2-pi,转化水稻品种C5。采用qRT-PCR分析Badh2基因的表达量,同时利用... 香稻是一种具有芳香气味的特种稻资源,具有较高的营养价值和经济价值。通过克隆香味基因Badh2启动子区插入序列badh2-p,构建启动子区插入突变表达载体pCAMBIA 1300-badh2-pi,转化水稻品种C5。采用qRT-PCR分析Badh2基因的表达量,同时利用GC-IMS联用技术测定香味物质2-AP和其他挥发性有机物的含量。结果表明:转基因株系叶片中Badh2基因的表达水平都升高了,其中有2株的Badh2基因表达水平极显著升高;转基因株系叶片中大部分挥发性化合物的含量高于野生型C5,2-AP浓度与Badh2基因的相对表达量水平成正相关。 展开更多
关键词 水稻 badh2基因 启动子区插入突变 香味 分子机制
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水稻香味基因Badh2的功能和效应分析
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作者 刘之熙 闵军 +3 位作者 刘三雄 刘利成 胡敏 李咏谊 《湖南农业科学》 2023年第10期1-6,共6页
香稻是一种具有芳香气味的特种稻资源,具有较高的营养价值和经济价值。通过克隆香味基因Badh2启动子区插入序列badh2-p,构建启动子区插入突变表达载体p CAMBIA 1300-badh2-pi,转化水稻品种C5。采用q RT-PCR分析Badh2基因的表达量,同时利... 香稻是一种具有芳香气味的特种稻资源,具有较高的营养价值和经济价值。通过克隆香味基因Badh2启动子区插入序列badh2-p,构建启动子区插入突变表达载体p CAMBIA 1300-badh2-pi,转化水稻品种C5。采用q RT-PCR分析Badh2基因的表达量,同时利用GC-IMS联用技术测定香味物质2-AP和其他挥发性有机物的含量。结果表明:转基因株系叶片中Badh2基因的表达水平都升高了,其中有2株的Badh2基因表达水平极显著升高;转基因株系叶片中大部分挥发性化合物的含量高于野生型C5,2-AP浓度与Badh2基因的相对表达量水平成正相关。 展开更多
关键词 水稻 badh2基因 启动子区插入突变 香味 分子机制
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转BADH基因玉米的获得及其耐盐性 被引量:26
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作者 付光明 苏乔 +2 位作者 吴畏 赵洪梅 安利佳 《辽宁师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期344-347,共4页
利用花粉管通道技术将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米,以提高玉米的耐盐性.对1 286株转化玉米进行PCR检测,共有16株呈阳性,转化率为1.2%.Southern Blot进一步证明BADH基因已经整合到玉米基因组.将阳性植株的后代(T3)用含1.2%NaCl的Ho... 利用花粉管通道技术将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米,以提高玉米的耐盐性.对1 286株转化玉米进行PCR检测,共有16株呈阳性,转化率为1.2%.Southern Blot进一步证明BADH基因已经整合到玉米基因组.将阳性植株的后代(T3)用含1.2%NaCl的Hogland营养液每日1次浇灌,14 d后对玉米叶片的相对电导率和叶绿素含量进行测定.结果表明在同样的盐胁迫条件下,转基因植株所受到的盐伤害明显较对照植株轻,说明转入的BADH基因可以提高玉米的耐盐能力. 展开更多
关键词 花粉管通道 耐盐性 玉米 遗传转化 badh
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甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化小麦及其表达 被引量:106
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作者 郭北海 张艳敏 +5 位作者 李洪杰 杜立群 李银心 张劲松 陈受宜 朱至清 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第3期279-283,共5页
采用基因枪法将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因导入小麦 (TriticumaestivumL .)品种 ,并且得以表达。该基因由玉米Ubi1启动子控制。在盐胁迫条件下 ,多数转基因植株叶片的BADH活性比受体亲本提高 1~ 3倍 ,部分植株相对电导率比亲本... 采用基因枪法将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因导入小麦 (TriticumaestivumL .)品种 ,并且得以表达。该基因由玉米Ubi1启动子控制。在盐胁迫条件下 ,多数转基因植株叶片的BADH活性比受体亲本提高 1~ 3倍 ,部分植株相对电导率比亲本明显低 ,表明转基因植株的细胞膜在胁迫时有受损较轻倾向。PCR和Southern杂交分析证实外源BADH基因已插入小麦基因组 ,平均转化频率为 4.1%。 展开更多
关键词 badh基因 转基因 基因枪 小麦
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大豆BADH基因的生物信息学、多样性及功能分析 被引量:3
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作者 张永芳 李富恒 +1 位作者 吕怡杰 邱丽娟 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期11-20,共10页
为研究大豆中甜菜碱醛脱氢酶(BADH)在大豆中的分子机理及生物多样性,通过基因序列同源比对搜索到两个与水稻同源的大豆BADH基因,利用Phytozome、Netphosk 3.0 Server等网站及数据库对其进行生物信息学分析,结合已有的重测序数据分析1 59... 为研究大豆中甜菜碱醛脱氢酶(BADH)在大豆中的分子机理及生物多样性,通过基因序列同源比对搜索到两个与水稻同源的大豆BADH基因,利用Phytozome、Netphosk 3.0 Server等网站及数据库对其进行生物信息学分析,结合已有的重测序数据分析1 598份大豆种质中BADH基因序列的多态性,并测定突变体的2AP含量。结果表明:大豆中有两个与水稻BADH基因同源性较高的基因序列Gm06g186300和Gm 05g0330550,基因全长分别为3 959和6 008 bp,编码蛋白均属于稳定蛋白质,二者同源性高达90%。两个蛋白的氨基酸数目、分子量和等电点等非常相似;亲水性和磷酸化位点分布较一致,均无跨膜结构域,在细胞核出现的可能性最大,且二者进化关系极其相近;α螺旋和无规则卷曲是两者的主要成分,BADH1和BADH2有1个共同的结构域Pfam-Aldedh,且分布大致相同。对1 598份大豆种质BADH基因序列突变位点进行分析,有29份材料BADH2基因发生6个碱基序列突变导致了移码突变,这种突变可能与大豆的芳香性表型有关。对BADH1及BADH2在大豆不同部位的基因表达量分析发现各部位的表达量相差很大,均以根部表达量最高,可能与根部较高的抗旱能力有关。 展开更多
关键词 大豆 badh1 badh2 单倍型特性分析 结构 突变位点 芳香性
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利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2 被引量:66
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作者 邵高能 谢黎虹 +4 位作者 焦桂爱 魏祥进 圣忠华 唐绍清 胡培松 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期216-222,共7页
【目的】香稻作为一类特殊的水稻群体,以其清香可口的品质特性备受消费者的欢迎。到目前为止,水稻中的香味主要受第8染色体上编码甜菜碱醛脱氢酶基因Badh2控制。【方法】通过CRISPR/CAS9技术对中花11的香味基因Badh2进行编辑。【结果】... 【目的】香稻作为一类特殊的水稻群体,以其清香可口的品质特性备受消费者的欢迎。到目前为止,水稻中的香味主要受第8染色体上编码甜菜碱醛脱氢酶基因Badh2控制。【方法】通过CRISPR/CAS9技术对中花11的香味基因Badh2进行编辑。【结果】获得转基因T_0代植株并对其所衍生的T_1代20个单株进行了鉴定分析,获得了一个剔除了载体骨架且第1外显子上插入一个碱基T的突变体材料。该材料中Badh2 RNA水平显著下调;利用GC-MS技术测定野生型及突变体材料籽粒2-乙酰-1-吡咯啉含量,结果表明突变体材料中的香味物质显著增加;此外,我们还对野生型及T_2代香型植株水稻产量及稻米蒸煮食味品质进行了考查及测定分析,发现除分蘖数及结实率呈现出显著差异外(P<0.05),其余各项指标在两组材料间都无显著差异。【结论】通过CRISPR/CAS9技术成功地对水稻香味基因进行了编辑,可为香稻育种提供丰富的理论指导,加快香稻的育种进程。 展开更多
关键词 水稻 badh2 CRISPR/CAS9 香味
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转BADH基因苜蓿T1代遗传稳定性和抗盐性研究 被引量:26
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作者 燕丽萍 夏阳 +4 位作者 梁慧敏 王珍珍 李双云 刘翠兰 庞彩红 《草业学报》 CSCD 北大核心 2009年第6期65-71,共7页
采用分子生物学检测和不同浓度的NaCl对转BADH基因苜蓿T1代2个株系进行遗传稳定性和抗盐性研究。结果表明,2个株系的T1代PCR阳性植株和阴性植株分离比例都符合孟德尔遗传规律;在0.8%NaCl胁迫下,转基因植株Northern杂交表达量明显增加,B... 采用分子生物学检测和不同浓度的NaCl对转BADH基因苜蓿T1代2个株系进行遗传稳定性和抗盐性研究。结果表明,2个株系的T1代PCR阳性植株和阴性植株分离比例都符合孟德尔遗传规律;在0.8%NaCl胁迫下,转基因植株Northern杂交表达量明显增加,BADH酶活性和甜菜碱含量分别比对照植株增加2-4和4-5倍;不同浓度NaCl胁迫下转基因株系脯氨酸和可溶性糖含量、抗氧化酶活性都显著高于对照植株,而电导率和丙二醛含量显著低于对照植株。表明转入的BADH基因可以稳定遗传,转基因苜蓿植株耐盐性明显高于对照。 展开更多
关键词 苜蓿 badh基因 盐胁迫
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BADH/pepB双价基因无选择标记表达载体转化苜蓿的初步研究 被引量:16
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作者 杨金慧 王丕武 +2 位作者 曲静 王巍 王俊玲 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期20-23,共4页
选用公农1号紫花苜蓿,以5~7d苗龄的无菌子叶为外植体,通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶(BADH)和酸性蛋白酶(pepB)双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中,并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选,得到抗... 选用公农1号紫花苜蓿,以5~7d苗龄的无菌子叶为外植体,通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶(BADH)和酸性蛋白酶(pepB)双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中,并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选,得到抗盐碱转化植株。碱性盐浓度48mmol/L宜于子叶愈伤诱导,有利于转化植株的获得。对转化植株进行PCR检测,初步证明目的基因序列已经整合到苜蓿基因组中。移栽成活的13棵碱性盐抗性植株经PCR检测有3棵植株呈阳性。 展开更多
关键词 无选择标记表达载体 badh pepB 转化 苜蓿
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转BADH基因玉米植株的获得及其耐盐性分析 被引量:13
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作者 王小丽 杜建中 +4 位作者 郝曜山 张丽君 赵欣梅 王亦学 孙毅 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1973-1979,共7页
采用超声波辅助花粉介导植物转基因方法,将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米自交系郑58,获得了耐盐性强的转基因玉米植株。经卡那霉素抗性初筛、PCR扩增、Southern blot分析,证明BADH基因已导入转化植株并整合到其基因组中。用不同... 采用超声波辅助花粉介导植物转基因方法,将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米自交系郑58,获得了耐盐性强的转基因玉米植株。经卡那霉素抗性初筛、PCR扩增、Southern blot分析,证明BADH基因已导入转化植株并整合到其基因组中。用不同浓度的NaCl溶液对T2代转基因玉米植株与对照进行盐胁迫处理,结果表明,转BADH基因玉米植株表现出一定的抗逆性,生长状况明显优于对照;根据非转化苗对 NaCl 的反应以及生长状况,确定250 mmol L^–1 NaCl溶液为玉米幼苗耐盐性筛选的适宜浓度;依据此临界浓度下形态指标和生理生化指标的测定结果,与对照相比,转基因植株的株高提高10.94%-25.70%,鲜重增加8.62%-18.20%,干重增加9.00%-18.18%,相对电导率降低37.21%-58.14%,叶绿素含量增加15.89%-90.65%,超氧化物歧化酶(SOD)活性提高64.92%-148.29%,丙二醛(MDA)含量减少26.97%-48.05%。综上所述,转入甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因提高了玉米的耐盐性。这是首例将BADH基因导入优良玉米自交系郑58的报道。超声波辅助花粉介导法是一种经济、高效、实用和无基因型依赖性的植物基因转化方法。 展开更多
关键词 玉米 badh基因 转基因 耐盐性 形态指标 生理指标
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逆境下转BADH基因小麦甜菜碱醛脱氢酶活性表达与甜菜碱积累 被引量:11
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作者 张艳敏 丁占生 +6 位作者 温之雨 蒋春志 李辉 霍云谦 朱至清 陈受宜 郭北海 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第F09期36-39,共4页
对盐、旱逆境下转BADH基因小麦品系99T6的生长发育、甜菜碱醛脱氢酶活性及甜菜碱积累等进行了研究分析,结果表明,转BADH基因株系在盐逆境下具有明显的生长优势,耐盐能力达到100mmol/L;电导率和质膜相对透性表明转基因株系抗膜损伤能力增... 对盐、旱逆境下转BADH基因小麦品系99T6的生长发育、甜菜碱醛脱氢酶活性及甜菜碱积累等进行了研究分析,结果表明,转BADH基因株系在盐逆境下具有明显的生长优势,耐盐能力达到100mmol/L;电导率和质膜相对透性表明转基因株系抗膜损伤能力增强;甜菜碱醛脱氢酶活性的增强和甜菜碱积累的增加,说明转基因株系的盐旱逆境抗性是通过甜菜碱积累这一长期、持久的方式解除渗透胁迫,而不是通过脯氨酸积累这种临时的应急反应;以甜菜碱作为靶标性状采用基因工程方法提高植物盐旱耐性是可行的。 展开更多
关键词 badh基因 小麦 甜菜碱 抗盐旱耐性 醛脱氢酶 活性表达 胁迫条件
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干旱胁迫下不同抗旱性小麦BADH表达及甜菜碱含量的变化 被引量:12
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作者 李永华 王玮 +1 位作者 杨兴洪 邹琦 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期425-430,共6页
根据已发表的几种植物的甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的AA同源保守区设计了1对简并引物,通过RT PCR方法从小麦叶片中扩增出BADHcDNA的中间序列,共72 3bp ,编码2 4 0个氨基酸。Northern杂交表明,扬花期遭受轻度水分胁迫时,抗旱性较强(旱丰97... 根据已发表的几种植物的甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的AA同源保守区设计了1对简并引物,通过RT PCR方法从小麦叶片中扩增出BADHcDNA的中间序列,共72 3bp ,编码2 4 0个氨基酸。Northern杂交表明,扬花期遭受轻度水分胁迫时,抗旱性较强(旱丰970 3)与抗旱性较弱(山农2 15 95 3)的2小麦品种叶片中BADH基因的表达没有明显差异;灌浆期中度水分胁迫时,其表达水平明显增加,且旱丰970 3的表达量略高于山农2 15 95 3;乳熟期较严重土壤水分胁迫条件下,抗旱性强的品种BADH的表达量明显高于抗旱性弱的品种。3个生育期中,BADH活性和甜菜碱含量的变化与BADH表达呈现相同的趋势,均是先增加后降低,旱丰970 3的BADH活性与甜菜碱含量均高于山农2 15 95 3。这可能是旱丰970 3对干旱胁迫具有较强抗性的主要原因之一。 展开更多
关键词 小麦 干旱胁迫 badh NORTHERN杂交 甜菜碱
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转BADH基因水稻幼苗抗盐性研究 被引量:11
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作者 杨晓玲 东方阳 +2 位作者 孙耀中 刘永军 郭学民 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1627-1632,共6页
以转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因水稻品系52-7的受体亲本中花8号、旱作品种开系7和陆稻白珍珠为对照,分别用含0、5、7 g?L-1NaCl的水稻专用营养液培养水稻幼苗,对转BADH基因水稻品系52-7的抗盐性及其机理进行研究.结果表明:在正常培养条件... 以转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因水稻品系52-7的受体亲本中花8号、旱作品种开系7和陆稻白珍珠为对照,分别用含0、5、7 g?L-1NaCl的水稻专用营养液培养水稻幼苗,对转BADH基因水稻品系52-7的抗盐性及其机理进行研究.结果表明:在正常培养条件下,转基因水稻幼苗比对照品种长势旺,根系活力强,可溶性糖和叶绿素含量高,抗氧化酶SOD和POD活性高.在盐胁迫条件下,水稻幼苗生长减慢,根冠比值减小,根系活力增强;膜透性和丙二醛(MDA)含量增加,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性提高;脯氨酸和可溶性糖含量升高,叶绿素含量下降,蛋白质分解加强;且随着盐浓度的升高各指标变化幅度增加.与对照品种比较,转基因水稻幼苗在盐胁迫下的生长量和根冠比较大,电解质相对渗出率和MDA含量较低,蛋白质和叶绿素分解较少,表现出较强的抗盐性.盐胁迫下转基因水稻幼苗比对照品种具有更高的脯氨酸和可溶性糖含量以及SOD和POD活性,使其抗盐性强. 展开更多
关键词 水稻 badh基因 抗盐性
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CMO与BADH双基因表达载体构建及在烟草中的表达 被引量:10
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作者 刘君 韩烈保 +3 位作者 陈其军 信金娜 何宇锋 李雪 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期5-9,共5页
目的将甜菜碱合成关键酶CMO与BADH基因构建到同一表达载体中。方法用转基因方法将该表达载体导入植物体内,完善植物体内的甜菜碱合成途径,提高植物的抗旱性和耐盐性。以pC1303质粒为基础,构建了均由35S启动子驱动的CMO基因和BADH基因的... 目的将甜菜碱合成关键酶CMO与BADH基因构建到同一表达载体中。方法用转基因方法将该表达载体导入植物体内,完善植物体内的甜菜碱合成途径,提高植物的抗旱性和耐盐性。以pC1303质粒为基础,构建了均由35S启动子驱动的CMO基因和BADH基因的植物双基因表达载体pC35SC35SB1303。利用冻融法将其导入农杆菌LBA4404中,通过农杆菌介导法分别将CMO基因、BADH基因以及该双基因表达载体导入烟草中。结果PCR检测和Northern杂交分析表明,外源基因已整合到受体植物基因组中并正常表达。结论对转基因植株及对照植株甜菜碱含量的检测结果表明,转双基因植株的甜菜碱含量明显高于转BADH基因植株、转CMO基因植株及对照植株。 展开更多
关键词 双基因表达载体 CMO badh 甜菜碱含量
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利用CRISPR/Cas9技术编辑水稻香味基因Badh2 被引量:15
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作者 祁永斌 张礼霞 +2 位作者 王林友 宋建 王建军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1501-1509,共9页
【目的】稻米香味是水稻品质改良的一个重要内容,其性状主要受1个隐性基因Badh2的控制。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将常规品种中的Badh2进行编辑,从而获得Badh2发生突变的基因编辑株系,使香味性状得到改良。【方法】利用CRISPR/Cas9... 【目的】稻米香味是水稻品质改良的一个重要内容,其性状主要受1个隐性基因Badh2的控制。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将常规品种中的Badh2进行编辑,从而获得Badh2发生突变的基因编辑株系,使香味性状得到改良。【方法】利用CRISPR/Cas9基因编辑的原理,在水稻Badh2的第2和第7外显子处设计靶点,通过BLAST分析确定其特异性并构建到CRISPR/Cas9表达载体。以浙江省主要推广的水稻品种嘉58和秀水134的愈伤组织为受体,利用农杆菌介导的遗传转化法,通过潮霉素抗性筛选获得阳性转基因植株。转基因株系经测序明确其在Badh2的突变类型,经PCR分析与鉴定获得Badh2发生突变并无转基因标记成分的稳定株系。利用气相色谱质谱联用仪(GC-MS)检测基因编辑株系糙米米粉中2-AP的含量,明确其香味成分与非转基因对照之间的差异。【结果】在水稻第2和第7外显子处设计靶点构建表达载体,通过遗传转化转基因株系的Badh2完成了定向突变。共获得T0代嘉58基因编辑的株系15株,在第2外显子处发生突变的有8株5种不同的突变类型,均为不同单碱基插入不同位点;在第7外显子处发生突变的有7株5种不同的突变方式,均为碱基或片段缺失。获得秀水134基因编辑的株系11株,在第2外显子处共有5株,均为单碱基插入;在第7外显子处有6株,均为片段缺失。48株T1代秀水134基因编辑株系中,共获得16株无转基因标记的基因编辑株系,其中5株在第2外显子发生突变,11株在第7外显子处发生突变。4个T2代基因编辑株系的米粉中2-AP平均含量分别为0.309、0.347、0.332和0.295μg·g-1,极显著(P<0.01)高于非转基因对照(0.046μg·g-1)。【结论】利用CRISPR-Cas9技术可对水稻香味基因Badh2进行定向编辑,并且可获得无转基因成分的基因编辑株系,其香味性状得到明显改良。 展开更多
关键词 水稻 CRISPR/Cas9 基因编辑 badh2 香味
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转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因小麦的耐盐耐旱性 被引量:33
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作者 张艳敏 郭北海 +7 位作者 蒋春志 温之雨 丁占生 李辉 李洪杰 何锶洁 陈受宜 朱至清 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期29-32,共4页
采用室内模拟盐、旱胁迫,结合田间实际测定的方法,对基因枪法获得的转BADH基因小麦多个株系的不同世代材料进行了耐盐、耐旱性鉴定。结果表明,在旱、盐胁迫条件下,转BADH基因小麦在种子萌发、幼苗生长、根系发育以及质膜保护等方面均比... 采用室内模拟盐、旱胁迫,结合田间实际测定的方法,对基因枪法获得的转BADH基因小麦多个株系的不同世代材料进行了耐盐、耐旱性鉴定。结果表明,在旱、盐胁迫条件下,转BADH基因小麦在种子萌发、幼苗生长、根系发育以及质膜保护等方面均比受体品种(对照)具有明显的优势;在田间生长条件下的转基因株系,其叶片蒸腾强度比对照明显降低,而离体叶片失水速率与对照没有明显差别。 展开更多
关键词 甜菜碱 醛脱氢酶 badhA 小麦 转基因 耐盐性 耐旱性
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转BADH基因水稻叶片气孔特征的扫描电镜观察研究 被引量:10
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作者 郭学民 刘永军 +2 位作者 东方阳 孙耀中 杨晓玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第7期1195-1199,共5页
用扫描电镜研究了3个转BADH基因水稻品系52-7、51-15和51-22叶片的气孔特征,观察发现52-7具有少气孔性和小气孔性,气孔不具明显的边缘优势效应;而51-15和51-22不具这些特性。52-7叶片的气孔特征能增强其保水能力,加强代谢和运输,促进植... 用扫描电镜研究了3个转BADH基因水稻品系52-7、51-15和51-22叶片的气孔特征,观察发现52-7具有少气孔性和小气孔性,气孔不具明显的边缘优势效应;而51-15和51-22不具这些特性。52-7叶片的气孔特征能增强其保水能力,加强代谢和运输,促进植株的生长发育,提高单株籽粒产量;BADH基因的表达能提高52-7、51-15和51-22的耐旱性,达到高产。 展开更多
关键词 badh基因水稻 气孔 扫描电镜观察
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