BCNU缓释微球体内外释放与分布

目的探讨自制卡氮芥（BCNU）聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）缓释微球的体内外药物释放过程以及在大鼠脑组织的分布与其生物相容性。方法应用高效液相色谱法检测BCNU在磷酸盐缓冲溶液和脑组织内自聚乳酸．羟基乙酸缓释微球释放的药物含量；应用3H标记BCNU，检测3H—BCNU缓释微球在正常大鼠脑组织及血清中的分布；BCNU缓释微球植入大鼠脑组织，常规HE染色，光镜下观察其生物相容性。结果BCNU-PLGA-MS在PBS和大鼠脑组织中均可持续释放药物2周以上；缓释剂植入侧脑组织药物浓度比对侧高6．70倍；大鼠脑组织表现为小胶质细胞反应。结论BCNU—PLGA缓释微球具有良好的缓释功能，而且安全性、生物相容性较好。

亚甲蓝对C6细胞的促凋亡作用及其与BCNU协同抗肿瘤作用的研究

目的 研究亚甲蓝对体外培养C6胶质瘤细胞的促凋亡作用及与化疗药物BCNU的协同抗肿瘤作用。方法 用荧光显微镜、透射电镜进行细胞凋亡形态观察 ;流式细胞术进行细胞周期解析 ;用RT PCR、Western blot进行凋亡相关基因bax、bcl xlmRNA和蛋白表达检测 ;观察MB和BCNU对Wistar大鼠C6胶质瘤模型的治疗效果。结果 MB(0 .1μg/ml)作用 2 4h使细胞发生典型的凋亡形态改变及明显的凋亡峰 ;baxmRNA和蛋白随MB作用时间延长而升高 ,bcl xlmRNA和蛋白随MB作用时间延长而下降。MB、BCNU联合应用与BCNU的单独应用对C6大鼠肿瘤模型的作用有明显差别 (P <0 .0 1)。结论 MB对C6细胞具有促凋亡作用 ;MB可能通过bax/bcl xl途径诱导C6细胞凋亡 ;MB与BCNU具有协同的抗胶质细胞瘤作用。

三尖杉酯碱和BCNU脑血管内化疗治疗恶性脑瘤的疗效比较

本研究的目的在于比较三尖杉酯碱和ＢＣＮＵ超选择性脑血管内灌注治疗恶性脑瘤的疗效。结果表明，三尖杉酯碱和ＢＣＮＵ对脑瘤的总有效率分别为７６．９％和７５％，化疗后肿瘤体积缩小率分别为３８．４６％和４０．０１％。各组治疗前后肿瘤体积变化均有显著差异，两组疗效对比无明显差异．然而，与ＢＣＮＵ组相比，三尖杉酯碱组脑瘤总的恶性程度较高，并发症少而轻且平均生存时间较长。作者认为三尖杉酯碱对恶性脑瘤的疗效优于ＢＣＮＵ，且前者价廉易得，值得推广应用．

BCNU缓释微球制备条件的优化

目的以溶剂挥发-萃取法制备卡氮芥-聚乳酸羟基乙酸(BCNU-PLGA)缓释微球,对微球制备过程中的工艺条件进行优化选择。方法以正交实验设计对可能的影响因素,包括不同聚合度的聚乙烯醇(PVA)、PVA浓度、PLGA浓度、搅拌速度、甲基纤维素(MC)浓度进行了探讨。结果发现影响微球质量的因素,顺序从大到小依次为:PVA浓度、PLGA浓度、搅拌时间和MC浓度(A-B-D-C)。最佳实验方案为A2B1C2D3,即分散介质PVA浓度为1.5%,有机相中PLGA浓度为2%,搅拌时间为60min,MC浓度为0.05%。结论正交实验设计方法有助于选择更合适的制备条件。

MGMT反义RNA对人脑胶质瘤细胞系U251/BCNU耐药性逆转的研究

为逆转胶质瘤的耐药性 ,模拟临床亚硝基脲类药物的用药程序 ,在体外建立由 MGMT介导的人脑胶质瘤耐药细胞系 U2 5 1/ BCNU,并进行细胞耐药性检测和细胞中 MGMTm RNA表达的分析 ;观察 MGMT反义RNA对 U2 5 1/ BCNU细胞 MGMT表达的调节作用及对 U2 5 1/ BCNU细胞 BCNU敏感性的影响。经过 5次用药过程 ,首次在体外成功地建立了对 BCNU具有稳定抗性的 U2 5 1/ BCNU,其对 BCNU的耐受程度约为 U2 5 1的17倍 ;RT- PCR结果显示 ,U 2 5 1/ BCNU细胞有 MGMTm RNA的表达。 MGMT反义 RNA表达载体 p L a MT5 SN和 p L a MTSN能够在一定程度上降低 U2 5 1/ BCNU细胞中 MGMTm RNA的表达水平 ,提高其对 BCNU的敏感性。认为 MGMT反义 RNA能够在一定程度上抑制 MGMT的表达水平 。

O^6-苄基鸟嘌呤增强BCNU体外和体内抗肿瘤作用的研究

探讨Ｏ６－苄基鸟嘌呤（Ｏ６－ＢＧ）对Ｏ６－烷基鸟嘌呤－ＤＮＡ烷基转移酶（Ｏ６－ＡＧＴ）阳性（或ｍｅｒ＋）的人胃癌细胞ＢＧＣ－８２３和人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１对ＢＣＮＵ细胞毒作用敏感性的影响及其与ＢＣＮＵ合用治疗移植瘤的协同效果。方法：应用ＭＴＴ试验检测Ｏ６－ＢＧ与ＢＣＮＵ合用的细胞毒作用，转移酶活性用从３Ｈ－甲基ＤＮＡ底物转移的Ｏ６－［３Ｈ］甲基鸟嘌呤数表示。结果：１．５～６．０ｍｇ·Ｌ－１的Ｏ６－ＢＧ预先作用２ｈ后，ＢＧＣ－８２３和ＳＭＭＣ－７７２１细胞对ＢＣＮＵ的敏感性明显增加；０．７５～６．０ｍｇ·Ｌ－１的Ｏ６－ＢＧ可完全快速地抑制两种肿瘤细胞的转移酶活性并持续１２ｈ；腹腔注射９０ｍｇ·ｋｇ－１的Ｏ６－ＢＧ预处理２ｈ后给予２５ｍｇ·ｋｇ－１的ＢＣＮＵ治疗，可使动物皮下接种的人胃癌移植瘤生长延迟３８．６ｄ以及人肝癌移植瘤生长延迟３８．７ｄ，并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性。结论为Ｏ６－ＢＧ与ＢＣＮＵ合用于ｍｅｒ＋的肿瘤具有明显的治疗效果。

超选脑动脉灌注VM26并静滴BCNU治疗恶性脑瘤的疗效分析

目的：观察ＶＭ２６并ＢＣＮＵ静滴治疗恶性脑瘤的临床疗效。方法：对５６例脑瘤于手术切除后，采用超选脑动脉灌注ＶＭ２６并静滴ＢＣＮＵ，在治疗前后分别比较肿瘤体积变化及临床症状。结果：化疗前肿瘤平均体积为１５．１±７．３３ｃｍ３，化疗后平均体积为８．１１±８．９２ｃｍ３（Ｐ＜０．０１），总的有效率为６７．８％（３８／５６），完全缓解率为２１．４％（１２／５６）。本组病例１年存活率达７３．２％，２年存活率为４１．１％，全部患者均无眼部症状及严重的药物神经毒性反应。结论：超选脑动脉灌注和静滴联合化疗法，较单纯颈内动脉灌注及外周静脉化疗存活率高，而且并发症少，全身反应轻。

BCNU缓释微球稳定性的影响因素

目的探讨用于脑胶质瘤间质内化疗的BCNU-PLGA缓释微球稳定性的影响因素。方法以溶剂挥发萃取法制备BCNU-PLGA缓释微球,HPLC测定微球内成分,并与空白PLGA微球比较。结果微球冷藏贮存6个月后,外观形态无明显变化,以高效液相色谱方法测定微球溶解后BCNU色谱峰,发现与新鲜配制的BCNU标准品出峰时间和形态一致,微球溶解后BCNU色谱峰表现为单一尖锐峰形,表明药物在微球内部保持结构和成分的稳定。结论BCNU-PLGA缓释微球具有良好的稳定性,可以满足间质内缓释化疗的需要。

黄连素及其与BCNU联合应用治疗恶性脑肿瘤的实验研究

本文对黄连素的抗脑肿瘤作用,以及与1,3-bis(2-chloroethyl)-l-nitrosourea(BC-NU)联合应用进行了实验研究。用集落生成率测定(CFE)对6个人类脑胶质瘤细胞株和大白鼠9L脑肿瘤细胞(胶质肉瘤)进行了离体研究。用姐妹染色体交换法(SCE),对9L脑肿瘤细胞进行了评价。同时,在活体实验中用集落生成率测定对脑内固体9L脑肿瘤的治疗进行了分析。在BCNU的浓度为23μm单独使用时,对6个人类脑胶质瘤细胞株可获得平均为43％的细胞杀灭作用(0.24Log Kill)。而在黄连素与23μmBCNV联合应用治疗中,则可见到平均为97％的细胞杀灭相加作用(1.55Log Kill)。在采用150μg/ml黄连素离体治疗中,9L细胞姐妹染色体相对数的增高超过底数的2.7倍。在活体实验中,黄连素与BCNU联合应用也显示出细胞毒性相加作用。

BCNU缓释制剂的研究进展

恶性脑胶质瘤的治疗仍然存在困难,经典的治疗方案包括手术切除加化疗、放疗,但病人生存期的延长仍非常有限。传统的化疗方式由于血脑屏障的阻碍和药物的毒副作用,不能充分发挥作用。间质内缓释化疗使药物长时效、高浓度作用于肿瘤细胞,成为胶质瘤化疗的新方向。本文就化疗药物卡氮芥(BCNU)缓释剂在脑胶质瘤的临床应用情况进行综述。

间质内缓释BCNU治疗恶性脑胶质瘤进展

脑胶质瘤是颅内发生率最高的恶性肿瘤，约占45％左右。胶质母细胞瘤常常在手术切除边缘2cm范围内复发，并且在肿瘤边缘4cm内出现侵袭性病灶，手术后的治疗就集中到杀灭瘤腔周围残存的肿瘤细胞上。

缓释BCNU对GL261胶质瘤治疗作用分析

目的研究卡氮芥(BCNU)聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)缓释微球(BCNU-PLGA)对GL261胶质瘤模型的治疗作用及化疗耐药机制。方法利用溶剂挥发萃取法制备BCNU-PLGA缓释微球。将36只C57BL/6小鼠随机等分为假手术组、治疗组与非治疗组,借助动物立体定向仪,将体外培养小鼠GL261胶质瘤细胞接种于小鼠颅内,治疗组于术后第2 w立体定位植入BCNU-PLGA缓释片剂,观察小鼠生存期,MRI了解瘤体变化。获取标本行HE染色,并行胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)免疫组化检查检测其表达情况,相关数据采用统计学方法进行分析。结果治疗组与对照组生存期有明显差异(P<0.05),治疗组与对照组凋亡MGMT无明显差异(P>0.05)。GFAP表达为阳性。结论 BCNU-PLGA局部缓释制剂可延长荷瘤小鼠生存期,且不改变其MGMT表达。

三尖杉酯碱和BCNU脑血管内化疗恶性脑瘤的疗效比较

三尖杉酯碱和ＢＣＮＵ脑血管内化疗恶性脑瘤的疗效比较福建医学院协和医院杨卫忠，张国良，倪天瑞，陈建屏，梁日生，刘才兴，石松生１９９０年以来，我院对２１例经手术和病理证实的恶性脑瘤，采用微导管技术进行超选择性颅内动脉灌注三尖杉酯碱和ＢＣＮＵ治疗，现将两组...

动脉内注入BCNU治疗恶性胶质瘤的初步报告

1986年6月至1987年6月,我们对手术后及术后复发的8例胶质母细胞瘤病人,经颈内动脉插管注入 BCNU 进行治疗。经临床和 CT 观察,效果满意,现报告如下。临床资料和方法一、病人:本组8例,男性6例,女性2例,年龄29～60岁,平均50.2岁。8例中原发肿瘤2例,复发肿瘤6例。8例中实体肿瘤6例,瘤内有囊性变的2例。

微导管脑动脉超选灌注BCNU与ACNU治疗脑恶性肿瘤临床研究

目的：本文报告了28例脑恶性肿瘤应用不同化学药物和方法．延长病人生存期．改善生存质量以及并发症防治。材料与方法：将28例脑恶性肿瘤病人随机分二组，施行微导管脑动脉超选灌注化学药物BCNU与ACNU．每次剂量分别为100～200mg／m2和2～3mg／kg。结果：近期疗效，应用BCNU组有效率85．1％；应用ACNU组有效率100％。三年生存率：BCNU组42．8％；ACNU组64．3％，并发症；ACNU组明显低于BCNU组。结论；采用微导管脑动脉超选灌注化学药物治疗脑恶性肿瘤方法，疗效优于静脉及其它给药方法。药物ACNU疗效高于BCNU，并且药物ACNU的毒副作用小并发症少。

鼠胶质瘤BCNU耐药细胞系的建立和特征

本文通过对鼠胶质瘤G—422传代模型从半数抑制量0.5mg/kg BCNU(卡氮芥,Carmustine)开始诱导,经过七代传代,BCNU量增加100倍以上后,诱导组与对照组小鼠皮下瘤结节大小和荷瘤鼠寿命无显著差异,并且诱导组能稳定传代,保持对BCNU的耐受性,从而建成耐药细胞系。用非毒剂量利血平治疗后,耐药组肿瘤显著缩小,为进一步研究胶质瘤细胞耐药特性和治疗对策奠定了基础。

siRNA-Gli-1联合BCNU抑制胶质瘤细胞U251增殖

目的探讨siRNA-Gli-1联合卡莫司汀(BCNU)对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响和作用机制。方法 U251细胞按处理方式不同分为5组:BCNU组(BCNU)、siRNA-Gli-1组(siRNA-Gli-1)、联合组(siRNA-Gli-1+BCNU)、空转组(转染试剂LipofectamineTM2000,lipo)和空白组(细胞培养液RPMI1640)。U251细胞转染siRNA-Gli-1,半定量PCR和Western blot方法检测Gli-1表达及siRNA-Gli-1联合BCNU对BCL-2、CyclinD1和BAX表达的影响;MTT法检测细胞生长抑制率、流式细胞仪检测细胞周期、Annexin V法检测细胞凋亡,观察siRNA-Gli-1联合BCNU对U251细胞增殖能力的改变。结果 siRNA-Gli-1组和联合组中Gli-1 mRNA表达较其他3组明显下降(分别为40.35±0.17、45.20±0.23、93.30±0.43、98.60±0.06和95.93±0.21,P<0.05);BCL-2、CyclinD1表达显著下降,BAX蛋白表达增加或无变化,联合组较siRNA-Gli-1组更明显(P<0.05);与空白组和空转组相比,BCNU组、siRNA-Gli-1组和联合组细胞凋亡率增加(分别为0.76%±0.70%、0.53%±0.82%、12.87%±0.57%、22.23%±0.39%和28.76%±1.55%,P<0.01),细胞分裂明显阻滞于G0/G1期,S期减少;siRNA-Gli-1组、BCNU组和联合组细胞生长抑制率均随时间的延长而升高(P<0.05)。结论 siRNA-Gli-1联合BCNU抑制胶质瘤U251细胞的增殖机制可能与阻滞细胞周期、增强BAX和抑制BCL-2表达有关。

BCNU/PLGA microspheres:a promising strategy for the treatment of gliomas in mice

Objective：To investigate the effects of BCNU/PLGA microspheres on tumor growth,apoptosis and chemotherapy resistance in a C57BL/6 mice orthotopic brain glioma model using GL261 cell line.Methods：BCNU/PLGA sustained-release microspheres were prepared by the water-in-oil-in-water emulsion technique.GL261 cells were intracranially injected into C57BL/6 mouse by using the stereotactic technology.A total of 60 tumor-bearing mice were randomly and equally divided into three groups：untreated control,PLGA treated,BCNU/PLGA treated.Magnetic resonance imaging （MRI） was taken to evaluate tumor volume.BCNU/PLGA sustained-release wafers were implanted in the treatment group two weeks after inoculation.Survival time and quality were observed.Specimens were harvested,and immunohistochemical staining was used to check the expression of Bax,Bcl-2,and O6-methylguanine-DNA methyltransferase （MGMT）.Statistical methods was used for analysis of relevant data.Results：BCNU/PLGA sustained-release wafers were fabricated and implanted successfully.There is statistical difference of survival time between the BCNU/PLGA treated group and control groups （P＜0.05）.MRIscan showed inhibitory effect of BCNU/PLGA on tumor growth.Compared to the group A and B,BCNU/PLGA decreased the expression of apoptosis related gene Bcl-2 （P＜0.05）,but did not elevate the expression level of Bax （P＞0.05）,with the ratio of Bax/Bcl-2 increased.For MGMT protein expression,no statistically significant change was found in treated group （P＞0.05）.Conclusions：Local implantation of BCNU/PLGA microspheres improved the survival quality and time of GL261 glioma-bearing mice significandy,inhibited the tumor proliferation,induced more cell apoptosis,and did not increase the chemotherapy resistance.

颈内动脉和超选择颅内动脉灌注BCNU对恶性脑胶质瘤疗效探讨

恶性脑胶质瘤是中枢神经系统常见的严重的疾患,单纯手术平均生存期6个月,手术加放疗其生存期高于单纯手术,亦未逾一年。60年代发现代脂溶性亚硝脲类衍生物、BCNU(卡氮芥)、CCNU(环已亚硝脲)、ACNU 等药后,恶性脑胶质瘤的预后有所改善。